专利名称：五氟硫烷基苯基取代的苯甲酰基胍、其制备方法、其作为药物或诊断试剂的用途以及包含 ...的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及式I的五氟硫烷基苯基取代的苯甲酰基胍及其可药用盐 其中各基团的含义如下R1和R1’各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基，F，Cl，Br，I，-CN，NR6R7，-O-(CH2)b-(CF2)c-CF3或-(SOd)e-(CH2)f-(CF2)g-CF3；R6和R7各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基或-CH2-CF3；d是0、1或2；b、c、e、f和g各自独立地是0或1；R2和R2’各自独立地是氢，F，Cl，Br，I，-CN，-SO2CH3，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基，NR6R7，-O-(CH2)b-(CF2)c-CF3，-(SOh)k-(CH2)l-(CF2)m-CF3，具有1、2、3、4、5或6个碳原子的烷基，具有3、4、5、6、7或8个碳原子的环烷基，其中1、2、3或4个氢原子可以被氟原子代替，未取代的或被1、2或3个选自下列基团的基团取代的-(CH2)n-苯基F，Cl，Br，I，-Oo-(CH2)p-CF3，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3，或未取代的或被1、2或3个选自下列基团的基团取代的-(CH2)q-杂芳基F，Cl，Br，I，-Or-(CH2)s-CF3，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3；R6和R7各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基或-CH2-CF3；b和c各自独立地是0或1；h是0、1或2；k是0或1；l是0、1、2、3或4；m和o各自独立地是0或1；p是0、1、2或3；n是0、1、2、3或4；r是0或1；s是0、1、2或3；q是0、1、2、3或4；R3是氢，F，Cl，Br，I，-CN，-SO2CH3，具有1、2、3、4、5或6个碳原子的烷基，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基或-Ot-(CH2)u-CF3；t是0或1；u是0、1、2或3；R4是氢，F，Cl，Br，I，-CN，-SO2CH3，NR6R7，-(SOv)w-(CH2)x-(CF2)y-CF3，-O-(CH2)aa-(CF2)bb-CF3，具有1、2、3、4、5或6个碳原子的烷基，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基或具有3、4、5、6、7或8个碳原子的环烷基，其中1、2、3或4个氢原子可以被氟原子代替；R6和R7各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基或-CH2-CF3；v是0、1或2；x是0、1、2、3或4；w、y、aa和bb各自独立地是0或1；
或R4是-(CH2)cc-苯基，其为未取代的或被1、2或3个选自下列基团的基团取代F，Cl，Br，I，-Odd-(CH2)ee-CF3，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3；dd是0或1；ee是0、1、2或3；c是0、1、2、3或4；或R4是-(CH2)ff-杂芳基，其为未取代的或被1、2或3个选自下列基团的基团取代F，Cl，Br，I，-Ogg-(CH2)hh-CF3，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3；gg是0或1；hh是0、1、2或3；ff是0、1、2、3或4；R5是F、Cl、Br、I、CF3、-SO2CH3或-S(O)OCH3；X是直接的键、O、NR8、S(O)kk；R8是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，-(CH2)mm-CF3或-SO2CH3kk是0、1或2；mm是0、1、2或3；其中在R1和R1’以及R2和R2’的定义中，-O-(CH2)b-(CF2)c-CF3可以各自独立地选择，其中在R1和R1’、R2和R2’以及R4的定义中，NR6R7可以独立地选择。
优选的式I化合物及其可药用盐，其中各基团的含义如下R1和R1’各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，甲氧基，乙氧基，F，Cl，NR6R7，-O-CH2-CF3或-(SOd)e-(CH2)f-CF3；R6和R7各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基或-CH2-CF3；d是0、1或2；
e和f各自独立地是0或1；R2和R2’各自独立地是氢，F，Cl，-SO2CH3，-(SOh)k-(CH2)l-CF3，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，具有3、4、5、6或7个碳原子的环烷基，其中1、2、3或4个氢原子可以被氟原子代替，未取代的或被1-2个选自下列基团的基团取代的苯基F，Cl，-Oo-(CH2)p-CF3，甲氧基，乙氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3，或未取代的或被1-2个选自下列基团的基团取代的杂芳基F，Cl，-Or-(CH2)s-CF3，甲氧基，乙氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3；h是0、1或2；k是0或1；l是0、1、2、3或4；o是0或1；p是0、1、2或3；r是0或1；s是0、1、2或3；R3是氢，F，Cl，-SO2CH3，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，甲氧基，乙氧基或-Ot-(CH2)u-CF3；t是0或1；u是0、1、2或3；R4是氢，F，Cl，-SO2CH3，-(SOv)w-(CH2)x-CF3，-O-(CH2)aa-CF3，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，甲氧基，乙氧基或具有3、4、5、6或7个碳原子的环烷基，其中1、2、3或4个氢原子可以被氟原子代替；v是0、1或2；w、x和aa各自独立地是0或1；或R4是苯基，其为未取代的或被1-2个选自下列基团的基团取代F，Cl，-Odd-(CH2)ee-CF3，甲氧基，乙氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3；dd和ee各自独立地是0或1；
或R4是杂芳基，其为未取代的或被1-2个选自下列基团的基团取代F，Cl，-Ogg-(CH2)hh-CF3，甲氧基，乙氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3；gg和hh各自独立地是0或1；R5是F、Cl、CF3、-SO2CH3或-S(O)OCH3；X是直接的键、O、NR8或S(O)kk；R8是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，-CH2-CF3或-SO2CH3；kk是0、1或2。
特别优选的式I化合物及其可药用盐，其中各基团的含义如下R1和R1’各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，甲氧基，乙氧基，F，Cl，NR6R7，-O-CH2-CF3或-(SOd)e-(CH2)f-CF3；R6和R7各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基或-CH2-CF3；d是0、1或2；e和f各自独立地是0或1；R2和R2’各自独立地是氢，F，Cl，-SO2CH3，-(SOh)k-(CH2)l-CF3，甲基，具有3、4、5、6或7个碳原子的环烷基，其中1、2、3或4个氢原子可以被氟原子代替，未取代的或被选自下列基团的基团取代的苯基F，Cl，-Oo-(CH2)p-CF3，甲氧基，乙氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3，或未取代的或被选自下列基团的基团取代的杂芳基F，Cl，-Or-(CH2)s-CF3，甲氧基，乙氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3；h是0、1或2；k、l、o、p、r和s各自独立地是0或1；R3是氢、F、Cl、-SO2CH3、甲基、甲氧基、乙氧基或-Ot-(CH2)u-CF3；t和u各自独立地是0或1；R4是氢，F，Cl，-SO2CH3，-(SOv)w-(CH2)x-CF3，-Oz-(CH2)aa-CF3，甲基，甲氧基，乙氧基或具有3、4、5、6或7个碳原子的环烷基，其中1、2、3或4个氢原子可以被氟原子代替；v是0、1或2；w、x、z和aa各自独立地是0或1；R5是F、Cl或-SO2CH3；X是直接的键、O、NR8或S(O)kk；R8是氢、甲基、乙基、-CH2-CF3或-SO2CH3；kk是0、1或2。
更特别优选的式I化合物及其可药用盐，其中各基团的含义如下R1和R1’各自独立地是氢、甲基、F、Cl、-CF3或-O-CH2-CF3；R2和R2’各自独立地是氢、F、Cl、-SO2CH3、-SO2-CF3、-CF3或甲基；R3是氢、F、Cl或甲基；R4是氢、F、Cl或甲基；R5是-SO2CH3；X是O。
另外，在一个实施方案中，优选的式I化合物为其中R1和R1’被定义为各自独立地是氢、甲基、F、Cl、-CF3或-O-CH2-CF3的式I化合物，并且特别优选的化合物为其中R1和R1’被定义为各自独立地是氢或甲基的化合物。
在另一个实施方案中，优选的式I化合物为其中R2和R2’被定义为各自独立地是氢、F、Cl、-SO2CH3、-SO2CF3、-CF3或甲基的化合物，并且特别优选的化合物为其中R2和R2’被定义为各自独立地是氢或-SO2CH3的化合物。
在另一个实施方案中，优选的式I化合物为其中R3被定义为氢、F、Cl、-SO2CH3、甲基、-CF3或-O-CH2-CF3的化合物，并且特别优选的化合物为其中R3被定义为氢的化合物。
在另一个实施方案中，优选的式I化合物为其中R4被定义为氢、F、Cl、-SO2CH3、-O-CH2-CF3或甲基的化合物，并且特别优选的化合物为其中R4被定义为氢的化合物。
在另一个实施方案中，优选的式I化合物为其中R5被定义为F、Cl、CF3、-SO2CH3或-S(O)OCH3的化合物，特别为-SO2CH3的化合物。
在另一个实施方案中，优选的式I化合物为其中X为直接的键或被定义为O、NR8或S(O)kk，其中R8是氢、甲基、乙基、-CH2-CF3或-SO2CH3，优选为氢或甲基，并且其中kk是0、1或2，优选为0或2的化合物；并且特别优选的式I化合物为其中X被定义为O的化合物。
出现一次以上的基团可以是相同的或不同的并且各自独立地具有特定的含义。
特别优选的是N-[5-甲磺酰基-4-(4-甲磺酰基-3-五氟硫烷基苯氧基)-2-甲基-苯甲酰基]胍及其可药用盐。
如果取代基R1、R1’、R2、R2’、R3、R4或R5含有一个或多个不对称中心，那么它们可以各自独立地具有S和R构型。化合物可以是旋光异构体、非对映异构体、外消旋体或它们任意比例的混合物的形式。
本发明包括式I化合物的所有互变异构形式。
烷基可以是直链的或支链的。如果它们带有取代基或作为其它基团的取代基出现时，例如在氟烷基、烷氧基、氟烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基和烷基磺酰基中，也同样适用。烷基的实例为甲基、乙基、正丙基、异丙基(＝1-甲基乙基)、正丁基、异丁基(＝2-甲基丙基)、仲丁基(＝1-甲基丙基)、叔丁基(＝1，1-二甲基乙基)、戊基和己基。优选的烷基为甲基、乙基、正丙基和异丙基，特别优选为甲基和乙基。烷基中的一个或多个(例如1、2、3、4或5个)氢原子可以被氟原子代替。该氟烷基的实例为三氟甲基、2，2，2-三氟乙基和五氟乙基。取代的烷基可以在任何位点取代。
环烷基的实例为环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基或环辛基。环烷基中的一个或多个(例如1、2、3或4个)氢原子可以被氟原子代替。取代的环烷基可以在任何位点取代。
苯基可以是未取代的或被相同的或不同的基团一次或多次取代，例如一次、两次或三次。这也适用于在以下基团中的苯基例如苯基烷基或苯氧基。在单取代的苯基中的取代基可以在2位、3位或4位。二取代的苯基可以在2，3位、2，4位、2，5位、2，6位、3，4位或3，5位被取代。三取代的苯基中取代基可以在2，3，4位、2，3，5位、2，4，5位、2，4，6位、2，3，6位或3，4，5位。
杂芳基为芳环化合物，其中一个或多个环原子为氧原子、硫原子或氮原子，例如1、2或3个氮原子、1或2个氧原子、1或2个硫原子或多种杂原子的组合。杂芳基可以在所有的位点被连接，例如在1位、2位、3位、4位、5位、6位、7位或8位。杂芳基可以是未取代的或被相同的或不同的基团一次或多次(例如一次、两次或三次)取代。这也适用于在例如杂芳基烷基中的杂芳基。杂芳基的实例为呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、唑基、异唑基、二唑基、噻二唑基、噻唑基、异噻唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲哚基、苯并咪唑基、吲唑基、喹啉基、异喹啉基、酞嗪基、喹喔啉基、喹唑啉基和噌啉基。
杂芳基特别为2-或3-噻吩基，2-或3-呋喃基，1-、2-或3-吡咯基，1-、2-、4-或5-咪唑基，1-、3-、4-或5-吡唑基，1，2，3-三唑-1-、-4-或-5-基，1，2，4-三唑-1-、-3-或-5-基，1-或5-四唑基，2-、4-或5-唑基，3-、4-或5-异唑基，1，2，3-二唑-4-或-5-基，1，2，4-二唑-3-或-5-基，1，3，4-二唑-2-基或-5-基，2-、4-或5-噻唑基，3-、4-或5-异噻唑基，1，3，4-噻二唑-2-或-5-基，1，2，4-噻二唑-3-或-5-基，1，2，3-噻二唑-4-或-5-基，2-、3-或4-吡啶基，2-、4-、5-或6-嘧啶基，3-或4-哒嗪基，2-或3-吡嗪基，1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基，1-、2-、4-或5-苯并咪唑基，1-、3-、4-、5-、6-或7-吲唑基，2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基，1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基，2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基，3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基，2-、3-、5-、6-、7-或8-喹喔啉基，1-、4-、5-、6-、7-或8-酞嗪基。也包括这些化合物相应的N-氧化物，即例如1-氧基-2-、3-或4-吡啶基。特别优选的杂芳基为2-或3-噻吩基，2-或3-呋喃基，1-、2-或3-吡咯基，1-、2-、4-或5-咪唑基，2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基，1-、3-、4-或5-吡唑基，2-、3-或4-吡啶基，2-或3-吡嗪基，2-、4-、5-或6-嘧啶基和3-或4-哒嗪基。
本发明也涉及下面描述的制备式I化合物的方法。
本发明涉及制备式I化合物和/或其可药用盐的方法，其中X为氧(流程
图1)，该方法包括a)将式III的苯酚与式IV的芳族化合物反应以制得式V化合物，b)通过亲电芳族取代将R5引入并且转化为式VI化合物以及c)将式VI化合物与胍反应以制得式Ia的酰基胍，
流程图1其中R1、R1’、R2、R2’、R3、R4和R5具有以上说明的含义，并且其中各基团的含义如下Hal是F、Cl、Br或I，R9是氢或具有1、2、3或4个碳原子的烷基。
式III的苯酚在适当的溶剂中脱质子，优选为在偶极非质子溶剂(例如乙腈、DMF、NMP或DMSO)中，在无机碱(例如K2CO3或Cs2CO3)的辅助下，或在有机碱(例如三乙胺或TBTMG)的辅助下，在温度为0℃至所用溶剂的沸点之间进行，然后在亲核芳族取代中与亲电的式IV芳族化合物在温度为0℃至所用溶剂的沸点之间，优选为在室温和150℃之间反应，以制得式V化合物。
将式V化合物转化为式VI化合物是通过亲电芳族取代发生的，优选为通过硝化，例如在Houben-Weyl，Methoden der organischen Chemie 4thedition，Organo-Stickstoff-Verbindungen IV，Part 1，Georg Thieme VerlagStuttgart 1992，pp.262-341及其引用的文献中描述的。硝化优选为用90％HNO3在温度为-80℃至室温之间、特别优选为在-60℃至0℃之间进行。
可以从式VI化合物(R5＝NO2)制备相应的苯胺(R5＝NH2)，如在R.C.Larock，Comprehensive Organic TransformationsA Guide to FunctionalGroup Preparations，VCH Publishers，New York，Weinheim，1999，821-828及其引用的文献中描述的。具有另外的R5含义的式VI化合物通过技术人员熟知的方法通过重氮盐自这些苯胺合成，例如在Houben-Weyl，Methoden der organischen Chemie 4th edition，Organo-Stickstoff-Verbindungen I，Part2，Georg Thieme Verlag Stuttgart1990，pp.1060-1136及其引用的文献中描述的。
由式VI化合物制得式Ia的酰基胍的反应或者与游离胍碱发生或者优选为与氯化胍发生，该反应的反应物最初在惰性溶剂、优选为在DMF或NMP中与KOtBu一起搅拌，然后在温度为0℃和溶剂的沸点之间、优选为在室温和100℃之间与酯一起搅拌。
其中R9为烷基的式V的酯也可以先进行水解制得羧酸，然后优选为在活化剂的存在下，与胍反应以制得式Ia的酰基胍。
起始的式III和IV化合物可以通过商购获得或通过类似技术人员熟知的方法或文献中描述的方法制备获得。
对于起始化合物的官能团也可能是以保护形式存在或以前体形式存在，然后转化为通过以上描述的方法制备的式I化合物中的需要基团。适合的保护基团技术是技术人员熟知的。
产物和/或中间体的处理以及纯化(如果需要)通过常规的方法，例如萃取、色谱或结晶以及常规的干燥进行。
本发明也包括式VI的前体及其盐以及其用作例如用于制备活性药物成分(例如通过与胍反应制备的式I化合物和/或其可药用盐)的合成中间体 其中R1、R1’、R2、R2’、R3、R4、R5和X具有以上提及的含义，并且R9是氢或具有1、2、3或4个碳原子的烷基。
式I的五氟硫烷基苯基取代的苯甲酰基胍通常为弱碱并且能够与酸结合形成盐。适合的酸加成盐特别为所有可药用酸的盐，例如卤化物，特别是盐酸盐、乳酸盐、硫酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、乙酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐。
式I化合物是取代的酰基胍并且抑制细胞钠-质子反向转运蛋白(Na+/H+交换剂，NHE)，特别是NHE-1亚型。
与已知的NHE抑制剂相比，本发明的化合物的特点是在抑制Na+/H+交换中具有极高的活性并且改善ADMET的性能，例如延长S9稳定性(肝稳定性，对酶攻击的稳定性)并且提高与hERG钾通道相关的选择性。另外，它们显示很好的吸收特性和很高的生物利用度。
由于具有抑制NHE的性质，所以式I化合物和/或其可药用盐适用于预防和治疗由活化或激活的NHE引起的疾病以及由NHE相关损伤间接引起的疾病。
因为NHE抑制剂主要通过其对细胞pH调节的影响而起作用，所以它们通常可以有利地与其它调节细胞内pH的化合物组合，适合的组合成分为碳酸酐酶(carbonic anhydratase)抑制剂、系统转运碳酸氢根离子(例如碳酸氢钠协同转运蛋白(NBC)或钠依赖型氯离子-碳酸氢根交换(NCBE))抑制剂，以及对其它NHE亚型具有抑制作用的NHE抑制剂，由于其可以通过它们加强或调节本文中描述的NHE抑制剂的药理学相关的pH调节作用。
本发明的化合物的用途涉及在兽医学和人类医学中预防和治疗急性和慢性疾病。
因此，本发明的NHE抑制剂适用于治疗由局部缺血和再灌注引起的疾病。
由于其药理学性质，本文中描述的化合物适合作为抗心律失常药物。
由于它们的心脏保护性能，NHE抑制剂显著适用于梗死预防和梗死治疗并且适用于治疗心绞痛，在此种情况中它们也预防性抑制或大大简化与局部缺血诱导的损伤的发展相关的病理生理过程，特别在局部缺血诱导的心律失常的触发中。由于它们对病理学缺氧和局部缺血的情况的保护作用，根据本发明应用的式I化合物和/或其可药用`盐(由于其抑制细胞Na+/H+交换机制)可以用作治疗所有急性或慢性局部缺血诱导的损伤或由其直接或间接诱导的疾病的药物。
本发明也涉及它们用作手术介入的药物的用途。因此，该化合物可以在器官移植过程中应用，在移植前和移植期间在供体中应用该化合物保护器官，例如在处理或在生理体液中贮存期间以及在移入受体体内期间保护上述移植器官。
本发明的化合物也是例如在心脏以及在外周器官和血管上进行血管成形手术介入时具有保护作用的有价值的药物。
另外，在进行搭桥手术时，例如在冠状血管搭桥手术期间和在冠状动脉搭桥移植(CABG)中可以应用本发明的化合物。
根据它们对局部缺血诱导的损伤的作用，本发明的式I化合物也可以用于心脏停搏后的复苏。
引人关注的是本发明的化合物是用于危机生命的心律失常的药物。停止心室纤维性颤动并且恢复心脏的窦性心律。
因为人类组织或器官、特别是心脏的NHE1抑制剂不仅有效保护其免受由局部缺血和再灌注引起的损伤，而且也有效保护其免受如特别用于癌症治疗和自身免疫疾病治疗的那些药物的细胞毒性作用，这些药物与式I化合物和/或其可药用盐组合施用适用于抑制所述药物的细胞毒性，特别是心脏毒性、副作用。由于与NHE1抑制剂联合治疗引起的细胞毒性作用(特别是心脏毒性)的降低使该化合物另外可能增加细胞毒性治疗剂的剂量和/或延长用该药物的治疗。该细胞毒性治疗的治疗益处可以通过与NHE抑制剂的组合显著增加。
另外，当心脏损伤过量产生甲状腺激素、甲状腺毒症或外部提供甲状腺激素时可以应用本发明式I和/或其可药用盐的NHE1抑制剂。因此，式I化合物和/或其可药用盐适用于改善心脏毒性药物的治疗。
由于它们对局部缺血诱导的损伤的保护作用，本发明的化合物也适合用作治疗神经系统、特别是中枢神经系统的局部缺血的药物，它们适用于例如治疗中风或脑水肿。
式I化合物和/或其可药用盐也适用于治疗和预防中枢神经系统过度兴奋引起的疾病或障碍，特别是用于治疗癫痫障碍、中枢性阵挛性和强直性痉挛、心理抑郁状态、焦虑障碍以及精神病。在这些情况中，可以单独或与其它具有抗癫痫活性的物质或抗精神病活性组成分，或碳酸酐酶抑制剂(例如与乙酰唑胺)，以及与其它的NHE或钠依赖型氯离子-碳酸氢根交换(NCBE)抑制剂组合应用本文中描述的NHE抑制剂。
另外，根据本发明应用的式I化合物和/或其可药用盐也适用于治疗多种类型的休克，例如过敏性、心源性、低血容量性和细菌性休克。
式I化合物和/或其可药用盐也可以用于预防和治疗血栓形成障碍，因为它们作为NHE抑制剂本身能够抑制血小板凝集。另外，它们能够在局部缺血和再灌注后，抑制或预防炎性和凝固介质、特别是维勒布兰德因子和血栓形成选择蛋白的过量释放。因此，其可能降低和减轻显著的血栓形成因子的致病作用。因此，本发明的NHE抑制剂可以与其它的抗凝血和/或血栓溶解活性成分组合，例如与如重组或天然的组织血纤溶酶原激活物、链球菌激酶、尿激酶、乙酰水杨酸、凝血酶拮抗剂、因子Xa拮抗剂、具有溶解纤维蛋白活性的药物、血栓烷受体拮抗剂、磷酸二酯酶抑制剂、因子VIIa拮抗剂、氯吡格雷、噻氯匹定等组合。本发明的NHE抑制剂与NCBE抑制剂和/或与碳酸酐酶抑制剂，例如与乙酰唑胺的组合应用特别有益。
另外，NHE1抑制剂引人注目的特点是对细胞增殖、例如成纤维细胞增殖和平滑血管肌细胞的增殖的强抑制作用。因此，式I化合物和/或其可药用盐适合作为细胞增殖代表直接或间接原因的疾病的有价值的治疗剂，并且因此可以用作抗动脉粥样硬化、慢性肾衰竭、癌症药物。
细胞迁移可能被NHE抑制剂抑制。因此，式I化合物和/或其可药用盐适合作为细胞迁移代表直接或间接原因的疾病、例如具有明显转移倾向的癌症的有价值的治疗剂。
另外，NHE1抑制剂引人注目的特点是对纤维变性障碍的延迟或预防。因此，式I化合物和/或其可药用盐适合作为心肌纤维化和肺纤维化、肝纤维化、肾纤维化以及其它纤维变性障碍的治疗剂。因此，它们可以用于治疗器官肥大和增生，例如心脏和前列腺的肥大和增生。因此，它们适用于预防和治疗心力衰竭(充血性心力衰竭＝CHF)以及治疗和预防前列腺增生或前列腺肥大。
因为在原发性高血压中NHE显著提高，所以式I化合物和/或其可药用盐适用于预防和治疗高血压以及治疗心血管障碍。在这些情况中，它们可以单独应用或与适合的组合和制剂配伍一起应用，用于治疗高血压以及心血管障碍。因此，例如一种或多种具有噻嗪类活性的利尿剂、袢利尿剂、醛固酮和假醛固酮拮抗剂，例如氢氯噻嗪、吲达帕胺、多噻嗪、呋喃苯胺酸、吡咯他尼、托拉塞米、布美他尼、阿米洛利、氨苯蝶啶、螺内酯或依普利酮(eplerone)可以与之组合。另外，本发明的NHE抑制剂可以用于与钙通道阻断剂，例如维拉帕米、地尔硫、氨氯地平或硝苯地平组合，以及与ACE抑制剂例如雷米普利、依那普利、赖诺普利、福辛普利或卡托普利组合。其它有益的组合配伍也可以是β-阻断剂(例如美托洛尔、沙丁胺醇等)，血管紧张素受体及其受体亚型的拮抗剂(例如洛沙坦、依贝沙坦、缬沙坦、奥马曲拉、gemopatrilat)，内皮素拮抗剂，肾素抑制剂，腺苷受体激动剂，钾通道抑制剂和活化剂(例如格列本脲、格列美脲、二氮嗪、色满卡林、长压定及其衍生物)，线粒体ATP-敏感钾通道(mitoK(ATP)通道)活化剂，Kv1.5抑制剂等。
NHE1抑制剂已经表现出具有显著的抗炎作用并且因此可以用作抗炎药物。就此而言，对炎性介质释放的抑制值得关注。因此该化合物可以单独或与抗炎药物组合用于预防或治疗慢性和急性炎性障碍。有利地应用的组合配伍为类固醇和非类固醇抗炎药物。
本发明的化合物也可以用于治疗由原生动物引起的疾病，例如疟疾或家禽的球虫病。
另外，已经发现NHE1抑制剂显示了对于血清脂蛋白的有益作用。通常认为过高的血脂水平，即高脂蛋白血症，代表动脉硬化血管损害、特别是冠状心脏疾病的发展的重要危险因素。因此，高血清脂蛋白的降低对于动脉粥样硬化损害的预防和恢复非常重要。除了降低总血清胆固醇，特别重要的是降低该总胆固醇的特定致粥样化的脂类部分的比例，特别是低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)的比例，因为这些脂类部分代表致粥样化危险因素。相反，对冠状心脏疾病的保护功能归因于高密度脂蛋白。因此，低脂血症应该能够不仅降低总胆固醇而且特别可以降低VLDL和LDL血清胆固醇部分。现在已经发现NHE1抑制剂显示了关于影响血清脂类水平的有价值的治疗上可利用的性质。因此，如观察到的，它们显著降低例如由增加富含胆固醇和脂类食物的饮食摄入或在发生病理代谢改变的情况下(例如遗传相关的高脂血症)引起的LDL和VLDL的高血清浓度。因此它们可以通过消除偶然的危险因素用于预防和消退动脉硬化损害。本文中不仅包括原发性高脂血症，也包括某些发生的继发性高脂血症，例如与糖尿病相关的继发性高脂血症。另外，NHE1抑制剂引起代谢异常诱导的梗死显著降低，特别是引起诱导的梗死大小和严重程度的显著降低。
因此，式I化合物和/或其可药用盐有利地用于制备治疗高胆固醇血症的药物，用于制备预防动脉粥样化形成的药物，用于制备预防和治疗动脉粥样硬化的药物，用于制备预防和治疗由高胆固醇水平诱导的疾病的药物，用于治疗预防和治疗由内皮功能障碍诱导的疾病的药物，用于制备预防和治疗动脉粥样硬化诱导的高血压的药物，用于制备预防和治疗动脉粥样硬化诱导的血栓形成的药物，用于制备预防和治疗高胆固醇血症诱导的和内皮功能障碍诱导的局部缺血性损伤和局部缺血后再灌注损伤的药物，用于制备预防和治疗高胆固醇血症诱导的和内皮功能障碍诱导的心脏肥大和心肌病以及充血性心力衰竭(CHF)的药物，用于制备预防和治疗高胆固醇血症诱导的和内皮功能障碍诱导的冠状血管痉挛和心肌梗死的药物，用于制备与高血压药物(优选为与血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂和血管紧张素受体拮抗剂)组合治疗所述障碍的药物。式I和/或其可药用盐的NHE抑制剂与降低血脂水平的活性成分、优选为与HMG-CoA还原酶抑制剂(例如洛伐他汀或普伐他汀)的组合，后者引起低脂血作用并且因此增加式I和/或其可药用盐的NHE抑制剂的低脂血性质，证明了其为加强活性成分的作用并且降低活性成分的应用的有利组合。
因此，式I化合物和/或其可药用盐对多种起源的内皮损伤具有有效的保护作用。该对内皮功能障碍综合征的血管保护意味着式I化合物和/或其可药用盐是预防和治疗冠状血管痉挛、外周血管疾病，特别是间歇性跛行、动脉粥样化形成和动脉粥样硬化、左心室肥大和扩张型心肌病以及血栓形成障碍的有价值的药物。
另外，已经发现NHE1抑制剂适合用于治疗胰岛素抗性被抑制的非胰岛素依赖的糖尿病(NIDDM)。就此而言，其可以有利于加强抗糖尿病活性和本发明的化合物的作用效果，有利于将其与双胍(例如二甲双胍)、抗糖尿病的磺酰脲(例如格列本脲、格列美脲、甲磺丁脲等)、葡萄糖苷酶抑制剂、PPAR激动剂(例如罗格列酮、吡格列酮等)、不同施用形式的胰岛素产品、DB4抑制剂、胰岛素敏化剂或美格列奈组合。
除了急性抗糖尿病作用，式I化合物和/或其可药用盐阻碍糖尿病晚期并发症的发展并且因此可以用作预防和治疗糖尿病的晚期损伤(例如糖尿病肾病、糖尿病性精神病、糖尿病性视网膜病变、糖尿病性心肌病和其它作为糖尿病的结果而发生的障碍)的药物。就此而言，它们可以有利地与在NIDDM治疗中描述的抗糖尿病药物组合。就此而言，与胰岛素有益的剂型的组合应特别重要。
除了对急性局部缺血问题以及随后相等的急性压力再灌注问题的保护作用外，NHE1抑制剂也直接对完整的哺乳动物机体的疾病或障碍具有治疗作用，该疾病或障碍与慢性进行性老化过程的表现相关并且其独立于急性局部缺血状态并且在正常、非局部缺血条件下发生。这些病理的、年龄相关的表现(经长期老化，例如疾病、无活力以及死亡诱导的，如今可以对用NHE抑制剂的治疗作出响应)是基本上由年龄相关的改变(在重要器官及其功能方面)引起的疾病和障碍并且在老化的机体中越来越重要。
与年龄相关的功能损伤或年龄相关的器官磨损表现相关的障碍是例如血管对收缩和放松反应的不适当的应答和反应。该血管对收缩和放松刺激的反应的年龄相关的降低(其为心血管系统的重要过程并且因此是生命和健康的重要过程)可以被NHE抑制剂显著消除或降低。保持血管反应的重要功能和方法是在内皮功能障碍中阻止或延迟年龄相关进程，该进程可以极其显著地被NHE抑制剂消除。因此，式I化合物和/或其可药用盐显著适用于治疗和预防内皮功能障碍中的年龄相关的进程，特别是间歇性跛行。
另外多种表现老化过程特征的实例是心脏收缩的降低以及心脏对需要的心脏的输出量的适应性降低。该心脏效力的降低作为老化过程的结果在大多数情况下与心脏功能障碍(由在心肌组织中结缔组织的沉积引起)相关。该结缔组织的沉积的特征在于心脏重量的增加、心脏扩大以及心功能的限制。令人惊奇的是几乎可以完全抑制该心脏器官的老化。因此，式I化合物和/或其可药用盐显著适合治疗和预防心力衰竭、充血性心力衰竭(CHF)。不仅可以通过NHE抑制剂治愈癌症(已经通过抑制增殖发生)，也可以通过NHE抑制剂降低和极其显著延迟年龄相关的癌症发生。特别值得注意的发现是由于老化的结果发生的所有器官的障碍以及不仅是某些类型的癌症被抑制或显著地延迟发生。因此，式I化合物和/或其可药用盐显著适用于治疗并且特别是预防年龄相关类型的癌症。
现在发现，NHE抑制剂不仅在研究的所有器官(包括心脏、血管、肝等)的年龄相关障碍的发生中使其延迟、在时间上极其显著地推移并且超越了正常的统计学范围，而且也极其显著地延迟了老年人癌症的发生。相反，同样令人惊奇的是将生命延长至如今为止其它药物或任何天然产物不可获得的程度。NHE抑制剂的独特作用也使其除了在人类和动物中作为活性成分的单独用途外，还可以将这些NHE抑制剂与其它的活性成分、方法、物质以及天然产物组合用于老年学，其基于不同的作用机制。该种用于老年病治疗的活性成分是特别是维生素和具有抗氧化活性的物质。因为热量负荷或食物摄取与老化过程相关，与饮食方法的组合可以例如通过食欲抑制剂进行。也可以考虑与下列药物组合降血压药物(例如ACE抑制剂)、血管紧张素受体拮抗剂、利尿药、Ca2+通道阻断剂等，或使代谢正常化的药物(例如降低胆固醇的药物)。
因此，式I化合物和/或其可药用盐显著适用于预防年龄相关的组织改变并且在保持生命高质量的同时延长生命。
本发明的化合物是细胞钠-质子反向转运蛋白(Na/H交换剂)的有效抑制剂，该转运在大量的障碍(原发性高血压、动脉粥样硬化、糖尿病等)中也在对测量响应的细胞，例如红细胞、血小板或白细胞中增加。因此，根据本发明应用的化合物适合作为显著并且简单的科学工具，例如其用作诊断试剂以确定并区分不同类型的高血压，以及动脉粥样硬化、糖尿病和糖尿病晚期并发症、增殖障碍等。
本文中也要求保护用于人、兽或植物保护性用途的药物，该药物包括有效量的式I化合物和/或其可药用盐，以及可药用载体和辅料，单独或与其它的药用活性成分或药物组合。
就此而言，包含式I化合物和/或其可药用盐的药物可以例如经口服施用、非肠道施用、静脉内施用、直肠施用、经皮施用或通过吸入施用，优选的施用途径取决于障碍的具体特征。另外，式I化合物可以单独或与药物赋形剂一起用于兽用药物和人用药物中。药物通常包含式I化合物和/或其可药用盐的活性成分的剂量为每剂量单位0.01mg至1g。
适合预期的药物制剂的赋形剂是技术人员基于其专业知识所熟知的。除了溶剂、凝胶形成剂、栓剂基质、片剂赋形剂以及其它活性成分的载体，也可以应用例如抗氧化剂、分散剂、乳化剂、消泡剂、矫味剂、防腐剂、增溶剂或着色剂。
对于口服施用的形式，将活性化合物与适于该目的的添加剂(例如载体、稳定剂或惰性稀释剂)混合，并且通过常规的方法转化为适合的剂型，例如片剂，包衣片，硬明胶胶囊，水、醇或油溶液。可以应用的惰性载体的实例为阿拉伯胶、氧化镁、碳酸镁、磷酸钾、乳糖、葡萄糖或淀粉，特别是玉米淀粉。另外，可以通过干法制粒和湿法制粒进行制备。适合的油性载体或溶剂的实例为植物或动物油，例如葵花籽油或鱼肝油。
对于皮下、肌内或静脉内施用，将所应用的活性化合物(如果需要，与用于该目的的常规物质，例如增溶剂、乳化剂或其它赋形剂一起)转化为溶液剂、混悬剂或乳剂。
适合的溶液的实例为水、生理盐水或醇，例如乙醇、丙醇、丙三醇，以及糖溶液(例如葡萄糖或甘露醇溶液)，或多种上述溶剂的混合物。
适合作为以气雾剂或喷雾剂的形式施用的药物制剂是式I和/或其可药用盐的活性成分在可药用溶剂(例如特别是乙醇或水，或该溶剂的混合物)中的例如溶液剂、混悬剂或乳剂。如果需要，制剂也可以包含其它药用赋形剂例如表面活性剂、乳化剂和稳定剂，以及抛射气体。该制剂通常包含活性成分的浓度为约0.1％至10％，特别是约0.3％至3％(重量)。
待施用的式I的活性成分的剂量以及施用频率取决于所用化合物作用的药力和持续时间；另外也取决于待治疗的障碍的性质和严重程度以及待治疗的哺乳动物的性别、年龄、体重和个体响应。
对于体重约75kg的患者，式I化合物和/或其可药用盐的平均日剂量至少为0.001mg/kg(体重)，例如0.01mg/kg(体重)，至最大为10mg/kg(体重)，例如1mg/kg(体重)。对于障碍的急性发作，例如在刚刚患有心肌梗死后，也需要较高剂量，例如每天至多4个单剂量。每天可以需要至多700mg，特别是对于静脉注射施用，例如对于重症监护的梗死的患者，并且可以通过输注施用本发明的化合物。
缩略语表ADMET吸收-分布-代谢-排泄-毒理DIP 二异丙醚
DMFN，N-二甲基甲酰胺DMSO 二甲亚砜EA 乙酸乙酯HEP正庚烷hERG 人ether-a-go-go-相关基因HOAc 乙酸KOtBu 2-甲基丙-2-醇钾MeOH 甲醇mp 熔点MTB叔丁基甲基醚NMP1-甲基吡咯烷-2-酮RT 室温TBTMG N”-叔丁基-N，N，N’，N’-四甲基胍THF四氢呋喃实施例1N-[5-甲磺酰基-4-(4-甲磺酰基-3-五氟硫烷基苯氧基)-2-甲基苯甲酰基]胍 a)五氟硫烷基苯酚
将5.0g的3-五氟硫烷基苯胺混悬于50mL35％的H2SO4水溶液中。然后，在0℃下，历经10分钟滴加1.57g NaNO2的5mL水溶液。将混合物在0℃下搅拌40分钟。然后将冷却至0℃的8.56g Cu(NO3)2的50mL水溶液加至混悬液中。然后立即加入3.26g Cu2O，于是可观察到显著的气体释放。每次用100mL CH2Cl2萃取三次，有机相用100mL饱和的NaCl水溶液洗涤并且经MgSO4干燥，在真空下除去溶剂。经短硅胶柱色谱(DIP洗脱)得到3.5g苯酚，为无色油状物。
Rf(EA/HEP1∶10)＝0.15 MS(EI)220b)5-甲磺酰基-2-甲基-4-(3-五氟硫烷基苯氧基)-苯甲酸甲酯 在100℃下，将600mg4-氟-5-甲磺酰基-2-甲基苯甲酸甲酯、700mg3-五氟硫烷基苯酚和1.6g Cs2CO3在4mL无水DMF中搅拌3小时。然后，将混合物冷却至室温，用100mL EA稀释并且每次用20mL水洗涤三次。残留物经MgSO4干燥并且在真空下除去溶剂后，经硅胶色谱(DIP洗脱)得到300mg无色油状物。
Rf(DIP)＝0.27 MS(ES+)446c)5-甲磺酰基-4-(4-硝基-3-五氟硫烷基苯氧基)-2-甲基苯甲酸甲酯 在-40℃下，将3.50g5-甲磺酰基-2-甲基-4-(3-五氟硫烷基苯氧基)-苯甲酸甲酯溶于100mL90％HNO3中。将反应混合物在该温度下搅拌10分钟，然后将其倾倒至800g冰中。将该混合物搅拌10分钟，然后将产物抽滤。获得3.89g浅黄色固体，mp145-148℃(分解)。
Rf(DIP)＝0.09d)4-(4-氨基-3-五氟硫烷基苯氧基)-5-甲磺酰基-2-甲基苯甲酸甲酯 将3.80g5-甲磺酰基-4-(4-硝基-3-五氟硫烷基苯氧基)-2-甲基苯甲酸甲酯溶于30mL HOAc和30mL MeOH中，加入200mg Pd/C(10％)，并且在6bar氢气压力下进行氢化24小时。因为反应仍未完成，所以再加入300mg Pd/C(10％)、30mL HOAc和30mL MeOH，并且继续在6bar氢气压力下进行氢化24小时。然后过滤除去催化剂并且在真空下除去溶剂。得到3.4g浅灰色固体，mp175℃(分解)。
Rf(MTB)＝0.44e)4-(4-氯磺酰基-3-五氟硫烷基苯氧基)-5-甲磺酰基-2-甲基苯甲酸甲酯 将3.4g4-(4-氨基-3-五氟硫烷基苯氧基)-5-甲磺酰基-2-甲基苯甲酸甲酯溶于30mL HOAc中，加入30g冰，然后加入30mL饱和的HCl水溶液。在0℃下，历经5分钟将0.56g NaNO2的5mL水溶液滴加至该溶液中。将混合物在0℃下搅拌10分钟。然后，分批将该溶液加至冷却至0℃的12.4mg CuCl和125.6mg CuCl2(二水合物)的100mL SO2-饱和的HOAc的混悬液中。将混合物在室温下搅拌2小时，然后用300mL水稀释并且每次用200mL EA萃取三次。经MgSO4干燥后，在真空下除去溶剂。得到3.5g粘稠油状物并且无需纯化可以进一步反应。
f)4-(2-甲磺酰基-4-甲氧基羰基-5-甲基苯氧基)-2-五氟硫烷基苯亚磺酸钠 在70℃下，将3.5g4-(4-氯磺酰基-3-五氟硫烷基苯氧基)-5-甲磺酰基-2-甲基苯甲酸甲酯分批加至8.10g Na2SO3的75mL水溶液中，在此期间用10摩尔的NaOH水溶液使pH保持在约pH＝10。然后，将混合物在70℃下搅拌45分钟，使其冷却后，用盐酸水溶液将pH调节至pH＝2。每次用200mL EA萃取三次。经MgSO4干燥后，在真空下除去溶剂。将残留物混悬于100mL水中并且用2摩尔NaOH水溶液调节pH＝10，在真空下除去挥发物。然后，先用每次100mL甲苯进行两次共蒸发，再用100mL无水DMF进行共蒸发，残留物(3.0g)无需纯化可以进一步反应。
g)5-甲磺酰基-4-(4-甲磺酰基-3-五氟硫烷基苯氧基)-2-甲基苯甲酸甲酯和5-甲磺酰基-4-(4-甲氧基亚磺酰基-3-五氟硫烷基苯氧基)-2-甲基苯甲酸甲酯 将3.0g4-(2-甲磺酰基-4-甲氧基羰基-5-甲基苯氧基)-2-五氟硫烷基苯亚磺酸钠溶于100mL无水DMF中，加入4.0g CH3I，将混合物在45℃下搅拌9小时。然后，将反应混合物在室温下放置2天。在真空下除去溶剂，将残留物溶于100mL水和100mL EA中。然后，加入50mL5％NaHSO4水溶液，相分离。然后，每次用100mL EA萃取三次。经MgSO4干燥后，在真空下除去溶剂，残留物经硅胶色谱(MTB/DIP 1∶1洗脱)。得到0.59g 5-甲磺酰基-4-(4-甲磺酰基-3-五氟硫烷基苯氧基)-2-甲基苯甲酸甲酯和0.49g 5-甲磺酰基-4-(4-甲氧基亚磺酰基-3-五氟硫烷基苯氧基)-2-甲基苯甲酸甲酯Rf(MTB/DIP 1∶1)＝0.135-甲磺酰基-4-(4-甲磺酰基-3-五氟硫烷基苯氧基)-2-甲基苯甲酸甲酯Rf(MTB/DIP 1∶1)＝0.325-甲磺酰基-4-(4-甲氧基亚磺酰基-3-五氟硫烷基苯氧基)-2-甲基苯甲酸甲酯h)N-[5-甲磺酰基-4-(4-甲磺酰基-3-五氟硫烷基苯氧基)-2-甲基苯甲酰基]胍 在室温下，将546mg氯化胍和535mg KOtBu在20mL无水DMF中搅拌30分钟。然后加入500mg 5-甲磺酰基-4-(4-甲磺酰基-3-五氟硫烷基苯氧基)-2-甲基苯甲酸甲酯，将混合物在室温下放置16小时。将反应混合物倾倒至20mL水中，用HCl水溶液调节pH＝8.0并且每次用50mL EA萃取3次。然后，将合并的EA相用20mL5％NaHCO3水溶液洗涤并且经MgSO4干燥，在真空下除去溶剂。得到420mg无定形固体。
Rf(EA/MeOH 10∶1)＝0.29 MS(ES+)551k)N-[5-甲磺酰基-4-(4-甲磺酰基-3-五氟硫烷基苯氧基)-2-甲基苯甲酰基]胍，盐酸盐
将400mg N-[5-甲磺酰基-4-(4-甲磺酰基-3-五氟硫烷基苯氧基)-2-甲基苯甲酰基]胍溶于稀释的HCl水溶液中，然后在真空下除去挥发物。残留物从水中重结晶以得到200mg浅灰色固体。mp275℃。
NHE抑制的确定对NHE-1抑制的抑制浓度IC50可以通过以下方法进行测定在FLIPR试验中，通过在表达人NHE-1的转染的细胞系中的pHi恢复率的测定来确定NHE-1抑制的IC50。
该试验在具有透明底板的黑壁96孔微量滴定板的FLIPR(荧光成像读板仪)上进行。在实验的前一天，以～25000细胞/孔的密度接种表达多种NHE亚型(由于突变发生和随后的选择，亲代细胞系LAP-1不显示内源性NHE活性)的转染的细胞系。
另外，转染的细胞的生长介质(Iscove+10％胎小牛血清)含有G418作为选择抗生素以确保转染的序列的存在。
实际的试验开始于除去生长介质并且每孔加入100μL上样缓冲液(5μM BCECF-AM[2’，7’-二(羧基乙基)-5-(和-6-)羧基荧光素，乙酰氧基甲基酯]于20mM NH4Cl、115mM胆碱盐酸盐、1mM MgCl2、1mMCaCl2、5mM KCl、20mM HEPES、5mM葡萄糖；pH7.4[用KOH调节]中)。然后，将细胞在37℃下培养20分钟。该培养使细胞与荧光染料(其荧光强度取决于pHi)和NH4Cl(其使细胞为弱碱性)共同上样。非荧光染料前体BCECF-AM作为酯是可透过膜的。实际的染料BCECF是不可透过膜的，但通过酯酶在细胞内释放。
培养20分钟后，通过在细胞洗涤器(Tecan Columbus)中每次用400μL洗涤缓冲液(133.8mM胆碱盐酸盐、4.7mM KCl、1.25mM MgCl2、1.25mM CaCl2、0.97mM K2HPO4、0.23mM KH2PO4、5mM HEPES、5mM葡萄糖；pH7.4[用KOH调节])洗涤三次将含有NH4Cl和游离BCECF-AM的上样缓冲液除去。每孔中剩余的残留物体积为90μL(可能为50-125μL)。该洗涤步骤除去了游离BCECF-AM并且由于除去了外部NH4+离子，结果导致细胞内发生酸化(～pHi6.3-6.4)。
因为细胞内NH4+与NH3和H+的平衡被细胞外NH4+的除去和随后的NH3瞬间通过细胞膜所打破，所以洗涤过程引起H+在细胞内剩余，这是细胞内发生酸化的原因。如果其持续时间足够长可能最终引起细胞死亡。
确保洗涤缓冲液中不含有钠(＜1mM)是很重要的，因为细胞外钠离子将通过克隆的NHE同种型的活性引起pHi的瞬间恢复。
确保所有应用的缓冲液(上样缓冲液、洗涤缓冲液、恢复缓冲液)中不含有任何HCO3-离子也是很重要的，因为碳酸氢根的存在将引起存在于亲代LAP-1细胞系中的干扰碳酸氢根依赖型pHi调节系统发生活化。
然后，将含有酸化的细胞的微量滴定板(至多在酸化后20分钟)转移至FLIPR中。在FLIPR中，细胞内的荧光染料被波长为488nm的光(由氩激光器产生)激发，选择测定参数(FLIPR中的激光能量、照射时间以及CCD照相机孔径)以便每孔的平均荧光信号在30000和35000(相对荧光单位)之间。
在FLIPR中的实际测量开始于CCD照相机在软件的控制下每2秒钟拍摄照片。10秒钟后，通过加入90μL恢复缓冲液(133.8mM NaCl、4.7mM KCl、1.25mM MgCl2、1.25mM CaCl2、0.97mM K2HPO4、0.23mM KH2PO4、10mM HEPES、5mM葡萄糖；pH7.4[用NaOH调节])使细胞内pH开始恢复，该缓冲液通过FLIPR中的96孔移液器加入。
阳性对照孔(100％NHE活性)是那些加入纯的恢复缓冲液的孔，而阴性对照(0％NHE活性)为洗涤缓冲液。
将恢复缓冲液(浓度为试验物质的二倍)加入到其它所有孔中。FLIPR中的测量在60次测量(2分钟)后终止。
将原始数据输出至ActivityBase程序中。该程序首先计算每个试验物质浓度的NHE活性并且从中计算出该物质的IC50值。因为整个试验中pHi恢复过程不是线性的，但最终降低(由于在较高的pHi值时NHE活性的降低)，所以选择在阳性对照的荧光增加为线性的部分进行评价是很重要的。
权利要求
1.式I的五氟硫烷基苯甲酰基胍及其可药用盐 其中各基团的含义如下R1和R1’各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基，F，Cl，Br，I，-CN，NR6R7，-O-(CH2)b-(CF2)c-CF3或-(SOd)e-(CH2)f-(CF2)g-CF3；R6和R7各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基或-CH2-CF3；d是0、1或2；b、c、e、f和g各自独立地是0或1；R2和R2’各自独立地是氢，F，Cl，Br，I，-CN，-SO2CH3，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基，NR6R7，-O-(CH2)b-(CF2)c-CF3，-(SOh)k-(CH2)l-(CF2)m-CF3，具有1、2、3、4、5或6个碳原子的烷基，具有3、4、5、6、7或8个碳原子的环烷基，其中1、2、3或4个氢原子可以被氟原子代替，未取代的或被1、2或3个选自下列基团的基团取代的-(CH2)n-苯基F，Cl，Br，I，-Oo-(CH2)p-CF3，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3，或未取代的或被1、2或3个选自下列基团的基团取代的-(CH2)q-杂芳基F，Cl，Br，I，-Or-(CH2)s-CF3，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3；R6和R7各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基或-CH2-CF3；b和c各自独立地是0或1；h是0、1或2；k是0或1；l是0、1、2、3或4；m和o各自独立地是0或1；p是0、1、2或3；n是0、1、2、3或4；r是0或1；s是0、1、2或3；q是0、1、2、3或4；R3是氢，F，Cl，Br，I，-CN，-SO2CH3，具有1、2、3、4、5或6个碳原子的烷基，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基或-Ot-(CH2)u-CF3；t是0或1；u是0、1、2或3；R4 是氢，F，Cl，Br，I，-CN，-SO2CH3，NR6R7，-(SOv)w-(CH2)x-(CF2)y-CF3，-O-(CH2)aa-(CF2)bb-CF3，具有1、2、3、4、5或6个碳原子的烷基，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基或具有3、4、5、6、7或8个碳原子的环烷基，其中1、2、3或4个氢原子可以被氟原子代替；R6和R7各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基或-CH2-CF3；v是0、1或2；x是0、1、2、3或4；w、y、aa和bb各自独立地是0或1；或R4是-(CH2)cc-苯基，其为未取代的或被1、2或3个选自下列基团的基团取代F，Cl，Br，I，-Odd-(CH2)ee-CF3，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3；dd是0或1；ee是0、1、2或3；cc是0、1、2、3或4；或R4是-(CH2)ff-杂芳基，其为未取代的或被1、2或3个选自下列基团的基团取代F，Cl，Br，I，-Ogg-(CH2)hh-CF3，具有1、2、3或4个碳原子的烷氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3；gg是0或1；hh是0、1、2或3；ff是0、1、2、3或4；R5是F、Cl、Br、I、CF3、-SO2CH3或-S(O)OCH3；X是直接的键、O、NR8、S(O)kk；R8是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，-(CH2)mm-CF3或-SO2CH3kk是0、1或2；mm是0、1、2或3；其中在R1和R1’以及R2和R2’的定义中，-O-(CH2)b-(CF2)c-CF3可以各自独立地选择，其中在R1和R1’、R2和R2’以及R4的定义中，NR6R7可以独立地选择。
2.权利要求1中所述的式I化合物及其可药用盐，其中各基团的含义如下R1和R1’各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，甲氧基，乙氧基，F，Cl，NR6R7，-O-CH2-CF3或-(SOd)e-(CH2)f-CF3；R6和R7各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基或-CH2-CF3；d是0、1或2；e和f各自独立地是0或1；R2和R2’各自独立地是氢，F，Cl，-SO2CH3，-(SOh)k-(CH2)l-CF3，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，具有3、4、5、6或7个碳原子的环烷基，其中1、2、3或4个氢原子可以被氟原子代替，未取代的或被1-2个选自下列基团的基团取代的苯基F，Cl，-Oo-(CH2)p-CF3，甲氧基，乙氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3，或未取代的或被1-2个选自下列基团的基团取代的杂芳基F，Cl，-Or-(CH2)s-CF3，甲氧基，乙氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3；h是0、1或2；k是0或1；l是0、1、2、3或4；o是0或1；p是0、1、2或3；r是0或1；s是0、1、2或3；R3是氢，F，Cl，-SO2CH3，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，甲氧基，乙氧基或-Ot-(CH2)u-CF3；t是0或1；u是0、1、2或3；R4是氢，F，Cl，-SO2CH3，-(SOv)w-(CH2)x-CF3，-O-(CH2)aa-CF3，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，甲氧基，乙氧基或具有3、4、5、6或7个碳原子的环烷基，其中1、2、3或4个氢原子可以被氟原子代替；v是0、1或2；w、x和aa各自独立地是0或1；或R4是苯基，其为未取代的或被1-2个选自下列基团的基团取代F，Cl，-Odd-(CH2)ee-CF3，甲氧基，乙氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3；dd和ee各自独立地是0或1；或R4是杂芳基，其为未取代的或被1-2个选自下列基团的基团取代F，Cl，-Ogg-(CH2)hh-CF3，甲氧基，乙氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3；gg和hh各自独立地是0或1；R5是F、Cl、CF3、-SO2CH3或-S(O)OCH3；X是直接的键、O、NR8或S(O)kk；R8是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，-CH2-CF3或-SO2CH3；kk是0、1或2。
3.权利要求1或2中所述的式I化合物及其可药用盐，其中各基团的含义如下R1和R1’各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基，甲氧基， 乙氧基，F，Cl，NR6R7，-O-CH2-CF3或-(SOd)e-(CH2)f-CF3；R6和R7各自独立地是氢，具有1、2、3或4个碳原子的烷基或-CH2-CF3；d是0、1或2；e和f各自独立地是0或1；R2和R2’各自独立地是氢，F，Cl，-SO2CH3，-(SOh)k-(CH2)l-CF3，甲基，具有3、4、5、6或7个碳原子的环烷基，其中1、2、3或4个氢原子可以被氟原子代替，未取代的或被选自下列基团的基团取代的苯基F，Cl，-Oo-(CH2)p-CF3，甲氧基，乙氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3，或未取代的或被选自下列基团的基团取代的杂芳基F，Cl，-Or-(CH2)s-CF3，甲氧基，乙氧基，具有1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO2CH3；h是0、1或2；k、l、o、p、r和s各自独立地是0或1；R3是氢、F、Cl、-SO2CH3、甲基、甲氧基、乙氧基或-Ot-(CH2)u-CF3；t和u各自独立地是0或1；R4是氢，F，Cl，-SO2CH3，-(SOv)w-(CH2)x-CF3，-Oz-(CH2)aa-CF3，甲基，甲氧基，乙氧基或具有3、4、5、6或7个碳原子的环烷基，其中1、2、3或4个氢原子可以被氟原子代替；v是0、1或2；w、x、z和aa各自独立地是0或1；R5是F、Cl或-SO2CH3；X是直接的键、O、NR8或S(O)kk；R8是氢、甲基、乙基、-CH2-CF3或-SO2CH3；kk是0、1或2。
4.权利要求1、2或3中一项或多项所述的式I化合物及其可药用盐，其中各基团的含义如下R1和R1’各自独立地是氢、甲基、F、Cl、-CF3或-O-CH2-CF3；R2和R2’各自独立地是氢、F、Cl、-SO2CH3、-SO2-CF3、-CF3或甲基；R3是氢、F、Cl或甲基；R4是氢、F、Cl或甲基；R5是-SO2CH3；X是O。
5.权利要求1-4中任意一项所述的式I化合物，其选自N-[5-甲磺酰基-4-(4-甲磺酰基-3-五氟硫烷基苯氧基)-2-甲基苯甲酰基]胍及其可药用盐。
6.制备权利要求1、2、3、4或5中一项或多项所述的式I化合物和/或其可药用盐的方法，该方法包括将式VI化合物与胍反应 其中R1、R1’、R2、R2’、R3、R4、R5和X具有上述定义，并且R9是氢或具有1、2、3或4个碳原子的烷基。
7.权利要求1-5中一项或多项所述的式I化合物和/或其可药用盐，其用作药物。
8.权利要求1-5中一项或多项所述的式I化合物和/或其可药用盐在制备用于下列方面的药物中的用途治疗或预防急性或慢性损伤、局部缺血或再灌注引起的器官和组织的障碍或间接后遗症，治疗或预防心律失常、危机生命的心室纤维性颤动、心肌梗死、心绞痛，治疗或预防心脏的局部缺血状态、外周和中枢神经系统或中风的局部缺血状态或外周器官和组织的局部缺血状态，治疗或预防休克状态、细胞增殖表现为直接或间接原因的疾病、癌症、转移、前列腺肥大和前列腺增生、动脉粥样硬化或脂代谢的失衡、高血压、原发性高血压、中枢神经系统障碍、CNS过度兴奋引起的障碍、癫痫或中枢诱导的惊厥、中枢神经系统障碍、特别是焦虑状态、抑郁或精神病，治疗或预防非胰岛素依赖的糖尿病(NIDDM)或糖尿病晚期损伤、血栓形成、内皮功能障碍引起的障碍、间歇性跛行，治疗或预防内部器官的纤维化障碍、肝纤维化障碍、肾纤维化障碍、血管纤维化障碍和心脏纤维化障碍，治疗或预防心力衰竭或充血性心力衰竭、急性或慢性炎性障碍、原生动物引起的障碍、疟疾或家禽的球虫病，以及用于外科手术和器官移植，在手术过程中保护和贮存移植物，用于搭桥手术，用于心脏停搏后的复苏，预防年龄相关的组织改变，制备直接抗衰老或延长生命的药物，治疗和降低甲状腺毒症中的心脏毒性作用或制备诊断辅助剂。
9.权利要求1-5中一项或多项所述的式I化合物和/或其可药用盐与其它药物或活性成分组合在制备用于下列方面的药物中的用途治疗或预防急性或慢性损伤、局部缺血或再灌注引起的器官和组织的障碍或间接后遗症，治疗或预防心律失常、危机生命的心室纤维性颤动、心肌梗死、心绞痛，治疗或预防心脏的局部缺血状态、外周和中枢神经系统或中风的局部缺血状态或外周器官和组织的局部缺血状态，治疗或预防休克状态、细胞增殖表现为直接或间接原因的疾病、癌症、转移、前列腺肥大和前列腺增生、动脉粥样硬化或脂代谢的失衡、高血压、原发性高血压、中枢神经系统障碍、CNS过度兴奋引起的障碍、癫痫或中枢诱导的惊厥、中枢神经系统障碍、特别是焦虑状态、抑郁或精神病，治疗或预防非胰岛素依赖的糖尿病(NIDDM)或糖尿病晚期损伤、血栓形成、内皮功能障碍引起的障碍、间歇性跛行，治疗或预防内部器官的纤维化障碍、肝纤维化障碍、肾纤维化障碍、血管纤维化障碍和心脏纤维化障碍，治疗或预防心力衰竭或充血性心力衰竭、急性或慢性炎性障碍、原生动物引起的障碍、疟疾或家禽的球虫病，以及用于外科手术和器官移植，在手术过程中保护和贮存移植物，用于搭桥手术，用于心脏停搏后的复苏，预防年龄相关的组织改变，制备直接抗衰老或延长生命的药物，治疗和降低甲状腺毒症中的心脏毒性作用或制备诊断辅助剂。
10.权利要求9中所述的式I化合物和/或其可药用盐与心脏毒性和细胞毒性药物或活性成分组合在制备具有降低心脏毒性和细胞毒性性质的药物中的用途。
11.权利要求8和/或9中所述的式I化合物和/或其可药用盐单独或与其它药物或活性成分组合在制备用于治疗或预防急性或慢性损伤、局部缺血或再灌注引起的器官和组织的障碍或间接后遗症的药物中的用途。
12.权利要求8和/或9中所述的式I化合物和/或其可药用盐单独或与其它药物或活性成分组合在制备用于治疗危机生命的心室纤维性颤动的药物中的用途。
13.权利要求8和/或9中所述的式I化合物和/或其可药用盐单独或与其它药物或活性成分组合在制备用于治疗或预防转移的药物中的用途。
14.权利要求8和/或9中所述的式I化合物和/或其可药用盐单独或与其它药物或活性成分组合在制备用于治疗或预防心脏纤维性障碍、心力衰竭或充血性心力衰竭的药物中的用途。
15.用于人、兽和/或植物保护性用途的药物，该药物包括有效量的权利要求1-5中一项或多项所述的式I化合物和/或其可药用盐，以及可药用载体和辅料。
16.用于人、兽或植物保护性用途的药物，该药物包括有效量的权利要求1-5中一项或多项所述的式I化合物和/或其可药用盐，以及可药用载体和辅料，还包括其它的药用活性成分或药物。
全文摘要
本发明涉及五氟硫烷基苯基取代的苯甲酰基胍、其制备方法、其作为药物或诊断试剂的用途以及包含这些化合物的药物。这些五氟硫烷基苯基取代的苯甲酰基胍为式(I)的化合物，其中R1至R5具有权利要求中所述的含义，并且例如适合用作抗心律失常药，其具有预防梗死、治疗梗死以及治疗心绞痛的心脏保护性能。这些化合物在发生局部缺血诱导的损伤时，特别是在局部缺血诱导的心律失常的开始阶段抑制、甚至预防病理生理过程。
文档编号A61P33/06GK101014566SQ200580030299
公开日2007年8月8日 申请日期2005年8月27日 优先权日2004年9月11日
发明者H-W·克勒曼 申请人:塞诺菲-安万特德国有限公司