专利名称：治疗肠源性内毒素血症复方药物颗粒及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗肠源性内毒素血症复方药物颗粒及其制备方法。
背景技术：
现代医学认为循环血中出现可检出的内毒素，称之为内毒素血症。其中不伴有革兰氏阴性细菌(gram-negative bacteria，G-细菌)感染者，称为肠源性内毒素血症(intestinal endotoxemia，IETM)，它具有以下特点(1)、循环血中出现可检出的内毒素，并且不伴有革兰氏阴性菌感染者，属肠源性内毒素血症。
(2)、内毒素从结肠吸收后至少经肠系膜静脉——门静脉及腹腔内淋巴管——胸导管这两条通路进入血循环，炎症性或缺血性肠病时内毒素吸收增多。
肠道是人体最大的细菌库及内毒素池，各种严重感染、创伤、大手术、肝、胆、胰、肺、肾等器官疾病，病理产科等所致的炎性/应激反应过程中，均可引起肠屏障功能障碍及内毒素血症。
(3)、内毒素血症发病率高。如我们观察到多种急腹症中内毒素血症(endotoxemia，ETM)的发生率平均为70％左右。梗阻性黄疸时内毒素血症发生率更高。急性肝衰竭内毒素血症发生率达58-100％；重症肝炎及急性坏死性肝炎时内毒素血症发生率高(并且几乎均为肠源性内毒素血症)，其中并发腹水时发生率更高；肝硬化代偿期时内毒素血症发生率为23.5-36.4％，失代偿期为59.5-75.9％。
(4)、内毒素血症发病无明显季节性，可发生于任何年龄及性别，但随原发病不同而有所差异。
(5)、内毒素血症对人体危害广泛而严重。如导致介质紊乱，诱导肝细胞凋亡，引起心、脑、肾等器官组织血液灌注减少及血液分配紊乱，激活补体及凝血系统，并影响局部胃肠肽类激素的含量以及内毒素本身对肠道的影响，加重肠屏障损伤与内毒素移位，导致全身炎症反应综合症状(SIRS)、多器官功能障碍综合症(MODS)、多脏器功能衰竭综合症(MOF)等。
(6)、对内毒素血症，目前尚无有效防治措施。
(7)、对内毒素血症干预不及时，则预后更差。
目前，对内毒素血症的西医治疗方法包括选择性肠道脱污染、特异性抗内毒素制剂等。但是，上述抗内毒素制剂多数仍处于实验研究阶段，投入临床使用的药物大多价格昂贵，使其应用具有一定的局限性。
针对西医治疗的不足，我们以中医理论为基础，在对传统经方进行大量筛选，试验后，总结出本复方药物颗粒，本复方中大黄泻热通便、荡涤肠胃；芒硝助大黄泻热通便，并能润燥软坚，二药相须为用以峻下热结。积滞内阻，则腑气不通，故以枳实、厚朴行气散结，且助硝黄推荡积滞以加速热结之排泄。
现代药理实验证明，大黄中的蒽醌类衍生物成分主要有以下药理作用泻下作用、抗菌作用、止血活血、退热作用、抗炎作用、防治肠源性肺损伤等作用。厚朴酚是厚朴的主要成分之一，药理实验证明厚朴酚具有特殊而持久的肌肉松弛作用，抗溃疡，抗痉挛、抗过敏作用。对革兰氏阳性菌、耐酸性菌、类酵母菌和丝状真菌有显著的抗菌作用；厚朴酚还具有镇痛，抗炎作用。和厚朴酚也是厚朴的主要成分之一，它有杀虫、杀菌、中枢抑制和抗溃疡作用。枳实中黄酮甙类对大鼠离体肠平滑肌的收缩呈抑制作用，同时具有一定的镇痛作用和中枢抑制作用。芒硝为硫酸盐类矿物芒硝族芒硝，主要成分为硫酸钠(NaSO4·10H2O)，现代药理表明本品具有抗炎作用及泻下作用。该组方通过天津市南开医院药理和临床试验验证，表明在治疗肠源性内毒素血症方面具有较好的效果。
发明内容
本发明的目的是提供一种治疗肠源性内毒素血症的复方药物颗料及其制备方法，以及对该复方药物颗粒的质量控制方法。
本发明所述的治疗肠源性内毒素血症复方药物颗粒通过如下技术方案实现一种治疗肠源性内毒素血症复方药物颗粒，其特征是该复方主要组成为大黄0.1-10公斤、枳实0.1-8公斤、厚朴0.1-8公斤、芒硝0.01-3公斤。
上述复方药物颗粒的组分优选配比为大黄0.8-2.5公斤、枳实0.6-2.0公斤、厚朴0.6-2.0公斤、芒硝0.2-1.0公斤。
本发明所述复方药物颗粒的制备方法如下取大黄，加水煎煮，煎液离心过滤，上清液全部通过大孔吸附树脂柱，水洗，弃去水液，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇浓缩至相对密度约为1.0-1.5备用；枳实、厚朴加乙醇回流提取，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度约为1.1-1.5(60℃)；加入芒硝，并加入适量糊精或乳糖进行真空干燥，粉碎为细粉备用，以上述细粉为母核，将上述大黄浸膏及适量辅料喷雾进行制粒，干燥，混匀，即得。
根据上述制备方法，大黄可加水8-15倍量煎煮三次，每次20分钟，合并三次煎液，对煎液离心过滤，上清液全部通过大孔吸附树脂柱，水洗，弃去水液，再用50％-90％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇浓缩至相对密度约为1.0-1.5备用。枳实、厚朴每次加6-12倍量乙醇，乙醇浓度为50％-90％，回流提取三次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度约为1.1-1.5，加入芒硝，并加入适量糊精或乳糖，进行真空干燥，粉碎备用。以枳实、厚朴提取物细粉为母核，将上述大黄浸膏及适量辅料，喷雾进行制粒，干燥，混匀，即得，所述辅料包括粘合剂、矫味剂、崩解剂。
本发明所述治疗肠源性内毒素血症复方药物颗粒制剂质量控制方法中含有如下含量测定法1、总蒽醌的含量测定取本品适量，研细，精密称定，加30％硫酸溶液5.0毫升，室温下振摇5分钟，加氯仿40毫升于80℃水浴回流水解90分钟，取出，放至室温，分取氯仿液；第二次加氯仿30毫升，振摇，稍静置，分取氯仿液；第三次加氯仿20毫升，振摇，稍静置，分取氯仿液；第四次加氯仿10毫升，振摇，稍静置，分取氯仿液；合并氯仿液，加适量无水硫酸钠脱水，滤过，并用少量氯仿洗涤残渣，回收溶剂至干，残渣加甲醇定容至25毫升容量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。取大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对照品适量，精密称定，分别加乙腈溶解，摇匀，制成每1毫升含大黄素、大黄酚、大黄素甲醚0.25毫克的溶液。精密量取上述大黄素溶液2.0毫升、大黄酚溶液5.0毫升，大黄素甲醚溶液1.5毫升，置于25毫升容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得混合对照品溶液。色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇—1％高氯酸(85∶15)为流动相；检测波长254nm。本品每克含总菌醌(以大黄素C14H10O5、大黄酚C15H10O4、大黄素甲醚C15H12O5合计)不得少于5.0-15.0毫克。
2、结合蒽醌的含量测定取本品0.06克，研细，精密称定，加乙醚30毫升于40℃水浴回流提取30分钟，取出，放至室温，小心吸出乙醚液，第二次加乙醚20毫升于40℃水浴回流提取20分钟，取出，放至室温，小心吸出乙醚液，第三次加乙醚20毫升于40℃水浴回流提取15分钟，取出，放至室温，小心吸出乙醚液；残渣挥干乙醚，加30％硫酸溶液5.0毫升，室温振摇5分钟，加氯仿40毫升于80℃水浴回流水解90分钟，取出，放至室温，分取氯仿液；第二次加氯仿30毫升，振摇，稍静置，分取氯仿液；第三次加氯仿液20毫升，振摇，稍静置，分取氯仿液；第四次加氯仿10毫升，振摇，稍静置，分取氯仿液；合并氯仿液，加适量无水硫酸钠脱水，滤过，并用少量氯仿洗涤残渣，回收溶剂至干，残渣加甲醇定容至25毫升容量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。以大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的甲醇溶液为对照，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇—1％高氯酸(85∶15)为流动相；检测滤长254nm。本品每克含结合蒽醌(以大黄素C14H10O5、大黄酚C15H10O4、大黄素甲醚C15H12O5合计)不得少于3.0-9.0毫克。
本发明所述治疗肠源性内毒素血症复方药物颗粒，与传统制剂相比工艺先进，病人服用量少，疗效确切，其主要药效学及毒理学试验结果如下1、该治疗肠源性内毒素血症复方药物颗料能显著降低肠源性内毒素血症大鼠血清内毒素水平，效果明显优于对照药物—乳果糖；同时对于肝、肾功能有明显的保护作用；亦可显著降低过氧化脂质(LPO)水平、提高超氧化物歧化酶(SOD)水平；显著抑制肿瘤坏死因子—α(TNFα)，白细胞介素1(IL-1)、自细胞介素6(IL-6)水平；病理组织学检查显示该治疗肠源性内毒素血症复方药物颗粒可显著减轻肠、肺、肝、心肌、肾脏的病理损害。
2、该治疗肠源性内毒素血症复方药物颗粒的大、中、小剂量均可明显加快小鼠大肠炭末推进率；该颗粒大、中剂量可使小鼠湿粪计数明显增加；该颗粒小剂量在给药后0-3分钟内能明显增高豚鼠在体回肠收缩强度；大、中剂量在给药后不同时间内均能明显增高豚鼠在体回肠收缩强度。2×103克/升和2×102克/升的该颗粒水液可使豚鼠离体回肠收缩强度升高。
3、该颗粒中剂量作用于正常家兔，可使小肠血流呈增高趋势，大剂量则使之明显增加。该颗粒使肠块血/再灌家兔小肠微循环血流明显恢复。
结果提示，该颗粒对肠源性内毒素血症有明显的治疗作用，可显著降低血清内毒素水平，减轻由肠源性内毒素血症所造成的器官损伤。其治疗机理可能与该颗粒改善肠道血液循环，保护肠屏障，促进肠道蠕动，清除肠道内毒素，抑制由内毒素所激发的炎性细胞因子过渡分泌，清除氧自由基，降低脂质过氧化物的产生，减少对靴器官的损伤有关。
该颗粒急性毒性试验显示小鼠灌胃给药LD50(半数致死量)＞10克/公斤(转合为生药46.1克/公斤)；其中雄鼠MTD(最大耐受量)为10克/公斤，雌鼠ALD(近似致死剂量)为10克/公斤。
具体实施例方式本发明所述治疗肠源性内毒素血症复方药物颗粒的主要组成为大黄0.1-10公斤、枳实0.1-8公斤、厚朴0.1-8公斤、芒硝0.01-3公斤。上述组成优选配比为大黄0.8-2.5公斤、枳实0.6-2.0公斤、厚朴0.6-2.0公斤、芒硝0.2-1.0公斤。
制备实例1取大黄1.7公斤，加15倍量沸水，重沸煎煮三次，每次20分钟，合并煎液，离心，上清液全部通过大孔吸附树脂柱，控制流速1倍柱体积/小时，然后加1倍量柱体积水冲洗，再用1倍量柱体积的70％乙醇洗脱，控制流速0.5倍柱体积/小时，再用1倍量柱体积水冲洗，收集洗脱液，减压回收乙醇浓缩至相对密度约为1.04备用。取枳实1.3公斤，厚朴1.3公斤，每次加8倍量50％乙醇回流提取三次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度约为1.11，加入芒硝0.3公斤和适量糊精进行真空干燥、粉碎、备用。以上述细粉为母核，将上述大黄浸膏及适量羧甲基纤维素钠，甜菊甙喷雾进行制粒、干燥、混匀、制成1000克。
制备实例2取大黄1.0公斤，加10倍量沸水，重沸煎煮三次，每次20分钟，合并煎液，离心，上清液全部通过大孔吸附树脂柱，控制流速1倍柱体积/小时，然后加1倍量柱体积水冲洗，再用1.2倍量柱体积的85％乙醇洗脱，控制流速0.7倍柱体积/小时，再用1倍量柱体积水冲洗，收集洗脱液，减压回收乙醇浓缩至相对密度约为1.10备用。取枳实0.5公斤，厚朴0.5公斤，每次加10倍量70％乙醇回流提取三次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度约为1.15，加入芒硝0.15公斤和适量乳糖进行真空干燥、粉碎、备用。以上述细粉为母核，将上述大黄浸膏及适量羧丙基纤维素钠、甜菊甙喷雾进行制粒，干燥、混匀、制成1000克。
权利要求
1.一种治疗肠源性内毒素血症复方药物颗粒，其特征是该复方主要组成为大黄0.1-10公斤、枳实0.1-8公斤、厚朴0.1-8公斤、芒硝0.01-3公斤。
2.根据权利要求1所述的一种治疗肠源性内毒素血症复方药物颗粒，其特征是该颗粒制备方法为取大黄，加水煎煮，煎液离心过滤，上清液全部通过大孔吸附树脂柱，水洗，弃去水液，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇浓缩至相对密度为1.0-1.5备用；枳实、厚朴加乙醇回流提取，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.1-1.5(60℃)；加入芒硝，并加入适量糊精或乳糖进行真空干燥，粉碎为细粉备用，以上述细粉为母核，将上述大黄浸膏及适量辅料喷雾进行制粒、干燥、混匀，即得。
3.根据权利要求2所述的一种治疗肠源性内毒素血症复方药物颗粒制备方法，其特征是大黄加水8-15倍量煎煮三次，每次20分钟，合并三次煎液，对煎液离心过滤，上清液全部通过大孔吸附树脂柱，水洗，弃去水液，再用50％-90％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇浓缩至相对密度约为1.0-1.5备用。
4.根据权利要求2所述的一种治疗肠源性内毒素血症复方药物颗粒制备方法，其特征是枳实、厚朴每次加6-12倍量乙醇，乙醇浓度为50％-90％，回流提取三次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度约为1.1-1.5，加入芒硝，并加入适量糊精或乳糖进行真空干燥，粉碎，备用。
5.根据权利要求2所述的一种治疗肠源性内毒素血症复方药物颗粒制备方法，其特征是以枳实、厚朴提取物细粉为母核，将上述大黄浸膏及适量辅料，喷雾进行制粒，干燥，混匀，即得，所述辅料包括粘合剂、矫味剂、崩解剂。
全文摘要
本发明涉及一种治疗肠源性内毒素血症复方药物颗粒及其制备方法，该复方主要组成为大黄0.1－10公斤、枳实0.1－8公斤、厚朴0.1－8公斤、芒硝0.01－3公斤。其颗粒制备方法如下取大黄，加水煎煮，煎液离心过滤，上清液全部通过大孔吸附树脂柱，水洗，弃去水液，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇浓缩至相对密度约为1.0－1.5(60℃)备用；枳实、厚朴加乙醇回流提取，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.1－1.5(60℃)，加入芒硝，并加入适量糊精或乳糖进行真空干燥，粉碎，备用。以上述细粉为母核，将上述大黄浸膏及适量辅料喷雾进行制粒、干燥、混匀，即得。本发明复方药物颗粒疗效确切，制备工艺先进，质量稳定可靠。
文档编号A61P43/00GK1742853SQ200510094530
公开日2006年3月8日 申请日期2005年9月20日 优先权日2005年9月20日
发明者吴咸中, 伍孝先, 蔡伟, 金波, 李薇 申请人:扬子江药业集团有限公司, 天津市中西医结合急腹症研究所