专利名称：一种药物组合物的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及一种具有抗感染、抗病毒以及解热作用的药物组合物，具体涉及一种主要由水溶性的14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐、金果榄或其提取物组成的药物组合物及其制备方法，属于医药技术领域。
2、背景技术对于急慢性炎症的治疗，目前多以抗生素、激素为主。由于耐药菌株的不断增加，在越来越多的病例中，抗生素的治疗不能取得满意的疗效。而且，这些抗生素在杀伤病原微生物的同时，对人体有一定毒副作用，有时甚至有致命危险。因此，在中草药中寻找毒副作用小、抗菌活性强的药物正引起世界的广泛关注。
穿心莲为爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata(Burm.f.)Ness的干燥地上部分。具有清热解毒、凉血、消肿的功效。其主要活性成分为穿心莲内酯。14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐是以传统中药穿心莲提取的穿心莲内酯，经半合成后，制成了使具有高度生物活性的穿心莲的衍生物，使给药途径更直接，药理作用更强，毒副作用更小，具有解热、消炎、杀菌、抗病毒的作用。药理研究表明其钾钠盐(即炎琥宁)能抑制早期毛细血管通透性增高与炎性渗出和水肿，能特异性地兴奋垂体-肾上腺皮质功能，促进ACTH释放，增加垂体前叶中ACTH的生物合成；体外具有灭活腺病毒、流感病毒、呼吸道病毒等多种病毒的作用；动物试验有抗早、中孕作用。其钾盐(即穿琥宁)具有解热、镇静、增加机体对病原体感染的应急能力，对流感病毒、肺炎腺病毒、肠合胞病毒及呼吸道合胞病毒有灭活作用。其结构式如下。
R＝Na+K+炎琥宁R＝H+K+穿琥宁金果榄为防己科植物青牛胆Tinospora sagittata(Oliv.)Gagnep.或金果榄Tinospora capillipes Gagnep.的干燥块根。具有清热解毒，利咽，止痛的功效，用于咽喉肿痛，痈疽疔毒，泄泻，痢疾，脘腹热痛等症。金果榄提取物具有明显的抗炎作用，对小鼠二甲苯致耳肿胀，醋酸致小鼠腹腔毛细管通透性增加，鸡蛋清致大鼠足趾肿胀及棉球肉芽增生均有明显的抑制作用。金果榄有较广的抗菌谱，对多种菌敏感，如金黄色葡萄球菌、洛菲氏不动杆菌、表皮葡葡球菌、八叠球菌等。
大量的药理和临床研究表明，14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐和金果榄在抗感染、抗病毒以及解热方面有良好的疗效。目前用于治疗细菌、病毒等致病微生物引起的感染和/或具有解热作用的药物虽有不少，但它们大多作用单一，或只有抗菌作用，或只有抗病毒作用。所以需要有一种同时具有抗菌、抗病毒感染、抗炎和解热作用作用的药物，其有效成分含量高，显效快，毒副作用小。而炎琥宁和金果榄配伍正具备以上特点。而且，利用新鱼腥草素钠和金果榄的相互作用，配伍组方，制备具有抗菌、抗病毒感染、抗炎以及解热等方面的药物，尚未见报道。
3、发明内容本发明的目的是提供一种抗感染、抗病毒以及解热的新的药物组合物，它主要由是由水溶性的14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐和金果榄或其提取物制成，其重量比为水溶性的14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐10～160份、金果榄1000～9000份；优选为水溶性的14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐20～80份、金果榄2000～4000份；最优为水溶性的14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐40份、金果榄3000份。本发明的药物组合物亦可由水溶性的14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐和金果榄提取物制成，其重量份数为水溶性的14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐10～160份、金果榄提取物5～180份；优选为水溶性的14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐20～80份、金果榄提取物10～80份。
以上组成是按重量份作为配比的，在生产时可按照相应比例增大或减小，如大规模生产可以以千克为原料，或以吨为单位，小规模生产也可以以克为单位，重量可以增大或者减小，但各组成之间重量配比的比例不变。
以上组成，若以克为单位，可以制成100～10000次用量的制剂，如作为注射剂，可制成100～10000支，每次用量1～10支。如作为片剂，可制成100～10000片，每次服用1～10片。
以上重量配比的比例是经过科学筛选得到的，对于特殊病人，可以相应调整组成的比例，增加或者减少不超过100％。
上述药物组合物中，14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐为由14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯所成的药学上可接受的盐类化合物，在制药中最常用的为药学上可接受的水溶性盐类化合物，在不排除使用特殊盐类化合物的前提下一般采用其相应的钠盐、钾盐或钠钾盐等盐类化合物。且目前已有试验证明，14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯的单钾盐、单钠盐或钾钠盐等不同盐类之间的变化，对其药效作用并不会有明显的影响。
本发明还提供了一种金果榄的提取工艺，具体过程如下
取金果榄药材，粉碎成粗粉，70％醇回流提取2次，每次2小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，加水调整浓缩液总量，加入浓盐酸调pH值至1～2，搅拌，滤过，滤液通过已处理好的强酸型阳离子交换树脂，用水洗至洗脱液呈中性，将树脂晾干，加入适量的浓氨试液使润湿，加乙醇回流提取5小时，提取液回收乙醇，真空干燥，即得金果榄提取物。
通过本工艺制得的金果榄提取物，得率为0.5～1.0％，总生物碱的含量不低于60％，盐酸巴马汀含量不低于5％。
本发明的另一目的在于提供一种抗感染、抗病毒的药物，该药物可用于上呼吸道感染。
该组合物可以加一种或多种药学上可接受的载体，以口服、鼻吸入或肠胃外给药的方式施用于需要这种治疗的患者。用于口服时，可将其制成常规的固体制剂，如片剂、胶囊、软胶囊、分散片、口服液、颗粒、咀嚼片、口崩片、滴丸、缓释片、缓释胶囊、控释片、控释胶囊，制成液体制剂如水或油悬浮剂或其它液体制剂如糖浆等；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶液、水或油悬浮剂等，如水针、冻干粉针、无菌粉针、输液等。本组合物的优选的形式是注射剂或口服制剂。
本发明的药物可采用现有制药领域中的常规方法生产，需要的时候可以添加各种药学上可接受的载体。所述的载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。
本发明在制成注射剂时，为了增加其溶解度，可以加入吐温-80等增溶剂。输液中可以加入用于调节渗透压的等渗调节剂，例如，氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙、乳酸钠、葡萄糖、木糖醇、山梨醇和右旋糖苷等，优选氯化钠或葡萄糖。粉针中可加入赋形剂，例如，甘露醇、葡萄糖等。
本发明经过药理学研究和药效动物实验研究结果证明，本发明组合物可显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓炎症肿胀，显著抑制大鼠棉球肉芽肿，降低小鼠腹腔毛细血管通透性，有效抑制炎性渗出；体外抑菌试验表明本组合物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、小肠结肠炎耶氏茵、类白喉杆菌、表皮葡萄球菌、卡他球菌、福氏痢疾杆菌、鸭沙门氏菌、绿脓杆菌等10种常见致病细菌均有一定的抑制作用，体内抑菌试验表明本组合物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎双球菌有良好的抑制作用。另外，本发明组合物对流感病毒感染小鼠引起的肺炎有明显的抑制作用，显著抑制小鼠肺内流感病毒增殖量，显著抑制菌苗引起的家兔体温升高。说明本组合物具有良好的抗感染、抗病毒、解热的作用。
本发明的有益效果是(1)本发明提供了一种新的抗感染、抗病毒、解热的药用组合物，满足了临床需要，(2)本发明对已知的炎琥宁与金果榄的相互作用、配伍组方进行研究，并通过药理实验证实，两者合用药效优于单独使用炎琥宁，药效提高，两者具有协同增效作用。(3)本发明通过药理试验得出了炎琥宁与金果榄的最佳配比。(4)在本发明药物组合物各剂型的制备中，以炎琥宁与金果榄提取物为原料直接投料，制备工艺简单，避免了提取时造成的药物损失和由于原药材质量差异造成的不同产品质量差异较大的缺点，使药品纯度更高，杂质少，安全性更高，且不同批次药品间质量差异小，药品质量更均匀稳定。(5)通过特殊安全性试验和稳定性实验证实，本发明药物组合物注射剂安全稳定。(6)炎琥宁与金果榄合并用药呈协同作用，且用药剂量相对减小，具有广泛的应用前景。
本发明组合物组分的用量是经过发明人进行大量摸索总结得出的，各组分用量在下述重量份范围内都具有较好疗效。
以下通过实验例来进一步阐述本发明所述药物的有益效果，这些实验例包括本发明组合物组合物的药效学实验。
试验例1本发明组合物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响受试动物小鼠，体重18～22g，雌雄各半供试品炎琥宁，按干燥品计算，含C28H34KNaO1097.6％；金果榄提取物，自制，得率0.96％，含金果榄总碱64.3％，含盐酸巴马汀5.9％；组合物注射液，自制；炎琥宁注射液，自制；阳性对照药物地塞米松磷酸钠注射液，规格1ml:1mg，开封制药(集团)有限公司；氯化钠注射液山东长富洁晶药业有限公司。
试验方法取小鼠120只，随机分为12组，每组10只，雌雄各半，分别作为空白对照组给药生理盐水；炎琥宁组给药炎琥宁注射液；本发明组合物不同配比组(炎琥宁+金果榄提取物40mg+10mg，40mg+20mg，40mg+30mg，40mg+40mg，40mg+50mg，40mg+60mg，40mg+70mg，40mg+80mg，40mg+90mg)给药组合物注射液；阳性对照药物组给药地塞米松磷酸钠注射液。NS组、本发明组合物组、地塞米松磷酸钠组分别腹腔注射液给药，连续6天，每日一次。第6天给药30min后，立即将每只小鼠右耳涂上0.1ml二甲苯致炎，左耳作为对照。30min后脱颈椎处死小鼠，立即剪下小鼠双侧耳廓，用直径为8mm的打孔器，于两耳廓相同部位打下圆形耳片，电子天平称重。以致炎耳片(右)的重量减去未致炎耳片(左)重量的差值，作为该鼠耳廓肿胀度的指标。试验数据用x±s表示，两组之间的比较用Dunnett t检验。用下列公式计算炎症抑制率(％)＝(空白对照组平均肿胀度一给药组平均肿胀度炎症抑制率)/空白对照组平均肿胀度×100％。试验结果结果见表1。
表1本发明组合物对对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响
与空白对照组比较，*P＜0.01，**P＜0.001结论表1中的结果表明，各给药组对二甲苯所致小鼠耳廓炎症肿胀均有显著的抑制作用(P＜0.01，P＜0.001)，炎琥宁和金果榄提取物配伍的组合物注射液疗效优于炎琥宁注射液，提示两药配伍有协同增效作用；其中以炎琥宁+金果榄提取物(40mg+20mg，40mg+30mg，40mg+40mg)组疗效最为显著(P＜0.001)。
试验例2 本发明药物对大鼠棉球肉芽肿的影响受试动物SD大鼠，体重170～210g，雌雄各半。
供试品炎琥宁，按干燥品计算，含C28H34KNaO1097.6％；金果榄提取物，自制，得率0.96％，含金果榄总碱64.3％，含盐酸巴马汀5.9％；组合物注射液，自制；炎琥宁注射液，自制；阳性对照药物阿司匹林；氯化钠注射液山东长富洁晶药业有限公司。
试验方法取大鼠60只，随机分为6组，每组10只，雌雄各半，分别作为空白对照组给药生理盐水；炎琥宁组给药炎琥宁注射液；本发明组合物不同配比组(炎琥宁+金果榄提取物40mg+20mg，40mg+30mg，40mg+40mg)；给药组合物注射液；阳性对照组给药阿司匹林。术前16h禁食，自由饮水。在乙醚浅麻醉无菌条件下做腹部切口，将已称重的相同大小的无菌棉球植入大鼠两侧腋窝皮下部。手术当天灌胃给药，每天一次，第8天给药后1h将大鼠断颈处死，剥离并取出棉球肉芽肿组织，于60℃烘箱烘干后称重，减去原棉球重量，即为肉芽肿净重，计算抑制率。试验数据用x±s表示，两组之间的比较用Dunnett t检验。实验结果见表2。
表2本发明组合物对大鼠棉球肉芽肿的影响
与空白对照组比较，*P＜0.01，**P＜0.001结论表2中的结果表明，各给药组对大鼠棉球肉芽肿均有显著的抑制作用(P＜0.01，P＜0.001)；炎琥宁和金果榄提取物配伍的组合物注射液疗效优于单用炎琥宁注射液，与阳性对照组相近，提示两药配伍有协同增效作用；其中以炎琥宁+金果榄提取物(40mg+30mg)组疗效最为显著(P＜0.001)。
试验例3本发明组合物对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响受试动物小鼠，昆明种，一级，体重18～21g，雌雄各半。
供试品炎琥宁，按干燥品计算，含C28H34KNaO1097.6％；金果榄提取物，自制，得率0.96％，含金果榄总碱64.3％，含盐酸巴马汀5.9％；组合物注射液，自制，炎琥宁+金果榄提取物40mg+30mg；炎琥宁注射液，自制；阳性对照药物氢化泼尼松注射液，2ml:10mg，西安利君制药股份有限公司；氯化钠注射液山东长富洁晶药业有限公司。
试验方法取小鼠60只，随机分为6组，每组10只，雌雄各半，分别作为空白对照组给药生理盐水；炎琥宁组给药炎琥宁注射液；本发明组合物组高、中、低三种剂量组给药组合物注射液；阳性对照药物组给药氢化泼尼松注射液。各组灌胃给药，连续4天，每日一次。第4天给药30min后，尾静脉注射浓度为2g/100ml的伊文思兰溶液0.15ml/只，并同时腹腔注射0.6％的醋酸溶液0.2ml/只，20min后处死小鼠，剪开腹腔，用5ml蒸馏水冲洗腹腔数次，吸取腹腔洗出液5～6ml，16.7/s离心，在722光栅分光光度计590nm处测定吸收度OD。试验数据用x±s表示，两组之间的比较用Dunnett t检验。实验结果见表3。
表3本发明组合物对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
与空白对照组比较，*P＜0.01，**P＜0.001结论表3中的结果表明，与空白对照组比较，炎琥宁注射液、组合物注射液、氢化泼尼松注射液均可降低小鼠腹腔毛细血管通透性，有效抑制炎性渗出(P＜0.01，P＜0.001)。其中组合物注射液疗效优于单用炎琥宁注射液，高剂量组疗效与阳性对照药物氢化泼尼松注射液疗效相近，提示两药合用，有协同增效作用。
实施例4本发明药物体外抗菌作用供试品炎琥宁，按干燥品计算，含C28H34KNaO1097.6％；金果榄提取物，自制，得率0.96％，含金果榄总碱64.3％，含盐酸巴马汀5.9％；组合物注射液，自制，炎琥宁+金果榄提取物40mg+30mg；阳性对照药物注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠，哈药集团制药总厂生产；氯化钠注射液山东长富洁晶药业有限公司。
细菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠杆菌0H1B4、肺炎克雷伯菌ATCC13883、小肠结肠炎耶氏菌、类白喉杆菌、表皮葡萄球菌、卡他球菌、福氏痢疾杆菌、鸭沙门氏菌、绿脓杆菌。
培养基M-H培养基、营养琼脂、牛肉浸汤，各种培养基均按方配制、分装、灭菌后持用。
试验方法采用琼脂二倍连续稀释法测定本发明药物胶囊剂的最小抑菌浓度(MIC)(1)将各种细菌接种活化，挑取典型菌落接种于肉汤管内，37℃孵育24小时做活菌计数，并以无菌生理盐水稀释成为1×106cfu/mL，待用。(2)将M-H琼脂加热熔化，加入药物(本发明药物组合物或者头孢哌酮钠舒巴坦钠)溶液混匀。倾倒于无菌培养皿中，作成含不同浓度药物的琼脂平板。用接种环取稀释菌液接种于含药物的琼脂平板，置37℃孵育24小时观察结果，并得出最小抑菌浓度(MIC)。试验结果见表4。
表4本发明组合物的抗菌活性(MIC)
结论从表4可见，本发明药物组合物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、小肠结肠炎耶氏茵、类白喉杆菌、表皮葡萄球菌、卡他球菌、福氏痢疾杆菌、鸭沙门氏菌、绿脓杆菌等10种常见致病细菌均有一定的抑制作用。
试验例5本发明组合物的小鼠体内抑菌试验受试动物健康小鼠120只，体重22～28g，雌雄兼用。
供试品炎琥宁，按干燥品计算，含C28H34KNaO1097.6％；金果榄提取物，自制，得率0.96％，含金果榄总碱64.3％，含盐酸巴马汀5.9％；组合物注射液，自制，炎琥宁+金果榄提取物40mg+30mg；炎琥宁注射液，自制；阳性对照药物盐酸左氧氟沙星注射液，江苏宜兴前进制药厂，10ml:0.1g；氯化钠注射液山东长富洁晶药业有限公司。
菌液用5％胃膜素稀释金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎双球菌混悬液，含菌量均为1010个/ml。
试验方法随机分为组合物注射液组、炎琥宁注射液组、注射用盐酸左氧氟沙星组、氯化钠注射液组，共12组，每组10只。每只小鼠腹腔注射菌液0.5ml感染，注射菌液后1、6小时分别腹腔注射组合物注射液15mg/kg，炎琥宁注射液15mg/kg，盐酸左氧氟沙星注射液40mg/kg，氯化钠注射液1.0ml感染后观察24小时动物生存数，根据动物生存数判断药品保护作用。实验结果见表5。
表5本发明组合物对感染小鼠的保护作用
*小鼠处于濒死状态而被处死。
结论金黄色葡萄球菌感染小鼠各治疗组中，组合物注射液组对感染小鼠的保护作用明显强于炎琥宁注射液，与盐酸左氧氟沙星注射液疗效相近。大肠杆菌感染小鼠各治疗组和肺炎双球菌感染小鼠各治疗组的结果，与金黄色葡萄球菌试验组相似。
实验例6 本发明药物组合物小鼠流感病毒性肺炎的作用受试动物昆明种小鼠90只，体重14～15g，雌雄各半。
病毒流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1，-70℃保存备用。
供试品炎琥宁，按干燥品计算，含C28H34KNaO1097.6％；金果榄提取物，自制，得率0.96％，含金果榄总碱64.3％，含盐酸巴马汀5.9％；
组合物注射液，自制，炎琥宁+金果榄提取物40mg+30mg；炎琥宁注射液，自制；氯化钠注射液山东长富洁晶药业有限公司。
试验方法将小鼠随机分为感染对照组、炎琥宁组、组合物不同剂量组，正常对照组组，每组10只。除正常组外，将小鼠用乙醚轻度麻醉，以15个LD50流感病毒液(FM1)滴鼻感染。从感染前一天开始腹腔注射给药，15mg/kg，每天2次，连续5天，其中感染对照组与正常对照组给予同体积生理盐水。第6天称取小鼠体重后解剖，摘取全肺称重，逐个计算肺指数值，并求出肺指数抑制率。公式肺指数＝肺重(g)/体重(g)×100％肺指数抑制率％＝(病毒对照组肺指数均值-试验组肺指数均值)/病毒对照组肺指数均值×100％注肺指数大，表示肺重量大，肺病变程度严重。
数据以x±s表示，采用t检验，比较组间差异性。试验结果见表6。
表6本发明组合物对流感病毒感染小鼠肺部炎症的影响
注与感染对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01结论如表6所示，感染后小鼠肺指数值明显增大。炎琥宁注射液与组合物注射液均能对流感病毒感染小鼠引起的肺炎有明显的抑制作用(P＜0.05)，肺指数值明显降低，肺组织病变程度明显减轻。其中组合物注射液高剂量组疗效最为明显(P＜0.01)。
实验例7 本发明药物组合物对小鼠肺内流感病毒增殖量的影响受试动物昆明种小鼠90只，体重14～15g，雌雄各半。
病毒流感病毒亚甲型鼠肺适应株M1，-70℃保存备用。
供试品炎琥宁，按干燥品计算，含C28H34KNaO1097.6％；金果榄提取物，自制，得率0.96％，含金果榄总碱64.3％，含盐酸巴马汀5.9％；组合物注射液，自制，炎琥宁+金果榄提取物40mg+30mg；炎琥宁注射液，自制；氯化钠注射液山东长富洁晶药业有限公司。
试验方法将小鼠随机分为感染对照组、炎琥宁组、组合物不同剂量组，正常对照组组，每组10只。除正常组外，将小鼠用乙醚轻度麻醉，以1000个LD50流感病毒液(FM1)滴鼻感染。从感染前一天开始腹腔注射给药，15mg/kg，每天2次，其中感染对照组与正常对照组给予同体积生理盐水。病毒感染后48小时处死小鼠，解剖取肺，摘取左侧中叶肺固定，按病理切片常规脱水、包理、制作石蜡切片。以间接免疫荧光法染色，以荧光素标记的抗感染病毒血清作示踪源，通过间接免疫荧光结合，观察感染鼠肺内特异性的病毒抗原，判断药物对病毒增殖的作用，荧光阳性数多，表明病毒颗粒增殖多。数据以x±s表示，采用t检验，比较组间差异性。试验结果见表7。
表7本发明组合物对对小鼠流感病毒增殖的影响
注与感染对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01结论表7结果表明，本发明药物组合物、炎琥宁注射液对小鼠肺内流感病毒增殖量均有明显有抑制作用。本发明药物组合物对流感病毒的增殖及所引起的肺炎的抑制作用强于炎琥宁注射液，提示炎琥宁与金果榄配伍有协同增效作用。
实验例8 本发明组合物对菌苗致热家兔的解热作用供试品炎琥宁，按干燥品计算，含C28H34KNaO1097.6％；金果榄提取物，自制，得率0.96％，含金果榄总碱64.3％，含盐酸巴马汀5.9％；组合物注射液，自制，炎琥宁+金果榄提取物40mg+30mg；炎琥宁注射液，自制；氯化钠注射液山东长富洁晶药业有限公司。
受试动物健康大耳白家兔，雌雄兼用，体重2.4～2.8kg。于实验前两天，每天测家兔正常肛门温度4次，选肛门温每天波动不超过0.2℃的家兔备用。
致热源伤寒、副伤寒三联菌苗，市购。
试验方法家兔40只，随机分为5组。实验当日早晨先测动物的基础体温，以0.5ml/kg的伤寒、副伤寒三联菌苗给家兔耳静脉注射致热，半小时后分别测肛温，并静脉注射相应的药物。给药后每1小时测肛温一次，共4次，以不同时间所测肛温与基础肛温之差值，为体温变化的指标。结果见表8。
表8炎金组合物对菌苗致热家兔的解热作用(x±s；n＝8)
注*P＜0.05，**P＜0.01，与对照组相比；#P＜0.05，与炎琥宁组相比。
结论各给药组都具有明显的解热作用(P＜0.05和P＜0.01)。其中组合物对菌苗引起的家兔体温升高有明显的抑制作用，且较单独使用炎琥宁持续时间长，用药4小时后仍有解热效果。提示炎琥宁与金果榄合同具有协同增效作用。
实验例9本发明组合物粉针剂特殊安全性实验1、过敏性实验试验动物豚鼠，18只，体重280～310g，雌雄兼用，随机分为供试药组、阴性对照和阳性对照三组，每大组6只。
供试品注射用组合物(自制，炎琥宁+金果榄提取物40mg+30mg)，使用时取炎琥宁溶于70ml 0.9％氯化钠注射液中，配成供试液。
阴性对照 氯化钠注射液，山东华信制药有限公司。
阳性对照药 5％卵白蛋白生理盐水溶液(自制)。
给药剂量 致敏剂量0.5ml/只；致敏次数隔日腹腔注射1次，连续3次；攻击剂量1ml/只，静脉注射。
试验方法按上述分组分别给豚鼠隔日腹腔注射上述药液0.5ml，共注射三次。然后将每大组豚鼠再分成两小组，每小组3只。第一小组豚鼠于第一次致敏后14天，第二小组于第一次致敏后21天进行抗原攻击，每只豚鼠均静脉注射上述药液1ml。观察并记录攻击后15min内豚鼠的表现。
试验结果及结论供试药组和阴性对照药组豚鼠均未发现过敏反应，而卵白蛋白组产生过敏反应并死亡。表明，注射用组合物无明显致敏作用。
2、溶血性实验试验动物雄性家兔，1只，体重2.4kg。
供试品注射用组合物(自制，炎琥宁+金果榄提取物40mg+30mg)，使用时取炎琥宁溶于70ml 0.9％氯化钠注射液中，配成供试液。
试验方法制备2％红细胞生理盐水混悬液备用。取洁净试管7支，编号并排列在试管架上，按下表顺序操作，混匀后置37℃水浴中温育，观察记录0.5、1、2、3、4h的结果。
试验结果及结论供试品0.1～0.5ml各管在0.5、1、2、3、4h均未出现溶血和红细胞凝集现象。表明，组合物注射液无明显溶血性。
3、血管刺激性实验试验动物家兔，体重2.1～2.3kg，雌雄兼用。
供试品注射用组合物(自制，炎琥宁+金果榄提取物40mg+30mg)，使用时取炎琥宁溶于70ml 0.9％氯化钠注射液中，配成供试液。
对照药 氯化钠注射液，山东华信制药有限公司。
给药剂量 家兔静滴给药剂量为50ml/kg。
试验方法取健康家兔6只，随机分为供试药组和0.9％氯化钠注射液对照组，每组3只，剂量均为20ml/kg。给药前将兔置固定箱中，于耳缘静脉按上述分组分别滴注供试药和0.9％氯化钠注射液，滴速为1ml/min(20滴/min)，观察给药后24h注射局部有无充血、水肿、出血、坏死。连续给药3天，于末次给药后24h在远离注射部位1cm的向心端取兔耳用10％福尔马林固定，做病理学检查。
试验结果及结论肉眼观察及病理检查表明，给药组与对照组无明显差别，用药部位的血管及周围组织均未见充血、水肿、出血、坏死，病理检查无异常。表明，注射用组合物静脉静滴对血管无刺激性。
实验例7 注射用组合物稳定性实验样品注射用组合物(自制，炎琥宁+金果榄提取物40mg+30mg)考察项目性状、PH值长期稳定性试验方法及结果将本品置温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置6个月、12个月，各项指标均无明显变化，实验结果表明注射用组合物长期放置基本稳定。
具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式
，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。以下实施例中各剂型的辅料可以用药学上可接受的辅料替换，或者减少、增加。
实施例1 金果榄提取物的制备取金果榄药材100kg，粉碎成粗粉，70％乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，加水调整浓缩液总量为100L，加入浓盐酸调pH值至1～2，搅拌，滤过，滤液通过已处理好的强酸型阳离子交换树脂，用水洗至洗脱液呈中性，将树脂晾干，加入适量的浓氨试液使润湿，乙醇回流提取5小时，乙醇液回收乙醇，真空干燥，即得金果榄提取物。
含量测定总生物碱含量测定取本品0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇20ml，超声处理30分钟，用甲醇10ml洗涤容器和残渣，合并洗液和滤液，置水浴上蒸干，加乙醇10ml使溶解，精密加硫酸滴定液(0.01mol/L)30ml与甲基红指示液2滴，用氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)滴定，同时做试剂空白，即得。
盐酸巴马汀含量测定色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水—乙腈(1∶1)为流动相；检测波长为345nm。理论板数按盐酸巴马汀峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备 取盐酸巴马汀对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备 取本品0.1g，精密称定，加甲醇20ml，超声提取30分钟，精密量取上清液5ml离心(8000r·min-1)，上清液微孔滤膜滤过，取续滤液即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
共制得金果榄提取物0.92kg，得率0.92％，含总生物碱61.2％，盐酸巴马汀6.1％。
以下实施例中所用的金果榄提取物均为本实施例中制备。
实施例2 本发明组合物粉针剂的制备处方炎琥宁 40.0g金果榄提取物27.6g(相当于金果榄原药材3000g)聚山梨酯80 30.0g甘露醇 300.0g无菌注射用水加至5000ml共制备 1000支制备工艺1)首先将配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，胶塞等进行无菌处理。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将炎琥宁加入配液量30％无菌注射用水中加热溶解完全。甘露醇加配液量30％的无菌注射用水加热搅拌溶解完全，聚山梨酯80加20％的无菌注射用水后制成水溶液加入金果榄提取物加热溶解，合并上述溶液，补加无菌注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的PH值。
6)经0.22um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)分装于抗生素玻璃瓶中，半压塞。将样品放入冻干机中冷冻干燥。预冻-45℃5小时，低温真空干燥-45℃～0℃20小时，然后升温至25℃真空干燥3小时。
9)冻干结束，压塞，轧盖。
10)成品全检，包装入库。
实施例3 本发明组合物水针剂的制备处方炎琥宁 40.0g金果榄提取物27.6g(相当于金果榄原药材3000g)丙二醇 700ml注射用水加至5000ml共制备 1000支制备工艺1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。
2)将炎琥宁加入配液量20％的注射用水中加热搅拌溶解完全。金果榄提取物加入丙二醇中加热搅拌溶解完全。
3)合并上述两溶液，补加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的PH值。
6)经0.45um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)将溶液熔封于玻璃安瓿中。
9)100℃流通蒸汽灭菌30分钟。
10)趁热将样品放入0.01％的亚甲蓝溶液中检漏。
11)灯检，成品全检，包装入库。
实施例4 本发明组合物氯化钠输液的制备处方炎琥宁 40.0g金果榄提取物 27.6g(相当于金果榄原药材3000g)聚山梨酯80 30.0g氯化钠 900.0g注射用水 加至100000ml共制备 1000瓶制备工艺1)前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。
2)将炎琥宁加入配液量20％注射用水加热搅拌溶解完全，将氯化钠用配液量20％的注射用水溶解完全。聚山梨酯80加20％的无菌注射用水后制成水溶液加入金果榄提取物加热溶解。
3)合并上述溶液，补加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的PH值。
6)经0.45um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)灌装于100ml的输液瓶中。
9)115℃热压灭菌30分钟。
10)灯检，成品全检，包装入库。
实施例5 本发明组合物葡萄糖输液的制备处方炎琥宁 40.0g金果榄提取物27.6g(相当于金果榄原药材3000g)聚山梨酯80 30.0g葡萄糖 5000.0g注射用水加至100000ml共制备 1000瓶制备工艺1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。
2)将炎琥宁加入配液量20％注射用水中加热搅拌溶解完全，将葡萄糖用配液量20％的注射用水溶解完全，加热煮沸15分钟。聚山梨酯80加20％的无菌注射用水后制成水溶液加入金果榄提取物加热溶解。
3)合并上述溶液，补加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的PH值。
6)经0.45um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)灌装于100ml的输液瓶中。
9)115℃热压灭菌30分钟。
10)灯检，成品全检，包装入库。
实施例6 本发明组合物片剂的制备处方炎琥宁40.0g金果榄提取物 27.6g(相当于金果榄原药材3000g)淀粉 40.0g微晶纤维素40.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 6.0g羧甲淀粉钠12.0g共制备1000片制备工艺1)将金果榄提取物、炎琥宁粉碎过100目筛备用。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用。
4)将炎琥宁、金果榄提取物、淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。
5)过20目筛制颗粒。
6)颗粒在60℃的条件下烘干。
7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁和羧甲淀粉钠，过18目筛整粒，混合均匀。
8)取样，半成品化验。
9)按照化验确定的片重压片。
10)成品全检，包装入库。
实施例7 本发明组合物胶囊剂的制备处方炎琥宁40.0g金果榄提取物 27.6g(相当于金果榄原药材3000g)淀粉 20.0g微晶纤维素60.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 6.0g共制备1000粒制备工艺1)将金果榄提取物、炎琥宁粉碎过100目筛备用。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用。
4)将炎琥宁、金果榄提取物、淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。
5)过20目筛制颗粒。
6)颗粒在60℃的条件下烘干。
7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁，过18目筛整粒，混合均匀。
8)取样，半成品化验。
9)按照化验确定的装量装入胶囊。
10)成品全检，包装入库。
实施例8 本发明组合物颗粒剂的制备处方炎琥宁 40.0g金果榄提取物 27.6g(相当于金果榄原药材3000g)糖粉 930.0g2％HPMC50％乙醇溶液适量共制备 1000包制备工艺1)将蔗糖粉碎过100目筛备用。将金果榄提取物、炎琥宁粉碎过100目筛备用。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将金果榄提取物、炎琥宁与糖粉以等量递加的方法混合均匀，加入2％HPMC50％乙醇溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材，4)过20目筛制颗粒。
5)颗粒在60℃的条件下烘干。
6)干颗粒过18目筛整粒。
7)取样，半成品化验颗粒中主药的含量，确定装量。
8)包装，成品全检，包装入库。
实施例9 本发明组合物滴丸剂的制备处方炎琥宁 40.0g金果榄提取物27.6g(相当于金果榄原药材3000g)聚乙二醇60001000g制备工艺将金果榄提取物、炎琥宁粉碎过100目筛后备用。将聚乙二醇6000在水浴中加热熔融，待全部熔融后加入金果榄提取物、炎琥宁，搅拌溶解，60目筛过滤，保持60℃滴入冷至10℃以下的液体石蜡中制成丸。
实施例10 本发明组合物软胶囊剂的制备处方炎琥宁40.0g金果榄提取物 27.6g(相当于金果榄原药材3000g)大豆油300.0g大豆磷脂 40.0g蜂蜡 20.0g共制备1000粒制备工艺将炎琥宁和金果榄提取物粉碎过100目筛，将处方量的大豆油和大豆磷脂、蜂蜡加热熔融，混匀，放冷，加入炎琥宁、金果榄提取物研匀，压制成软胶囊即可。
实施例11 本发明组合物口服液体剂的制备处方炎琥宁40.0g金果榄提取物 27.6g(相当于金果榄原药材3000g)丙二醇2000ml苯甲酸钠 15.0g甜菊甙10.0g纯化水加至10000ml共制备1000支制备工艺1)将炎琥宁加入配液量50％的纯化水中加热搅拌溶解完全。金果榄提取物加入丙二醇加热搅拌溶解完全。
2)将苯甲酸钠和甜菊甙用配液量20％的水溶解完全。
3)合并上述溶液，补加纯化水水至全量。
4)过0.8um的微孔滤膜过滤。
5)半成品化验。
6)灌装。成品全检，包装入库。
权利要求
1.一种药物组合物，其特征在于该组合物由14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐和金果榄制成，其重量比为14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐10～160份、金果榄1000～9000份。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于其中的14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐和金果榄的重量比为14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-琥珀酸半酯盐20～80份、金果榄2000～4000份。
3.如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于其中的14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐和金果榄的重量比为14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐40份、金果榄3000份。
4.如权利要求1～3所述的药物组合物，其特征在于其中的14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐为单钾盐、单钠盐或钾钠盐。
5.如权利要求1～3所述的药物组合物的制备方法，其特征在于其中的金果榄的提取工艺包括以下步骤a.取金果榄药材，粉碎成粗粉，用乙醇提取，滤过，滤液回收乙醇；b.调整浓缩液总量，加入浓盐酸调pH值，搅拌，滤过；c.滤液通过已处理好的阳离子交换树脂，用水洗至洗脱液呈中性；d.树脂晾干，加入适量的浓氨试液使润湿，乙醇回流提取，提取液回收乙醇，真空干燥，即得。
6.如权利要求1～3所述的任一药物组合物，其特征在于该组合物可制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型。
7.如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于临床上或药学上可接受的剂型为注射剂。
8.如权利要求1所述的药物，其特征在于该药物还可以由14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐和金果榄提取物制成，其重量比为14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐10～160份、金果榄5～180份；其中的金果榄提取物中金果榄总碱的含量不低于30％，盐酸巴马汀含量不低于5％。
9.如权利要求8所述的药物，其特征在于该药物还可以由14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐和金果榄提取物制成，其重量比为14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯盐20～80份、金果榄10～80份；其中的金果榄提取物中金果榄总碱的含量不低于30％，盐酸巴马汀含量不低于5％。
10.如权利要求8～9所述的药物，其特征在于该药物可以制成任何一种药剂学上所说的剂型。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，公开了一种具有抗感染、抗病毒作用的药物组合物及其制备方法，该药物组合物由水溶性的14－脱羟－11，12－二脱氢穿心莲内酯－3，19－二琥珀酸半酯盐和金果榄制成，其重量比为水溶性的14－脱羟－11，12－二脱氢穿心莲内酯－3，19－二琥珀酸半酯盐10～160份、金果榄1000～9000份；或是由14－脱羟－11，12－二脱氢穿心莲内酯－3，19－二琥珀酸半酯盐和金果榄提取物制成，其重量比为水溶性的14－脱羟－11，12－二脱氢穿心莲内酯－3，19－二琥珀酸半酯盐10～160份、金果榄5～180份。该药物组合物可以制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型。两药合用，可以协同发挥抗感染、抗病毒及解热作用，主要用于上呼吸道感染。
文档编号A61K31/365GK1939415SQ20051004477
公开日2007年4月4日 申请日期2005年9月26日 优先权日2005年9月26日
发明者蔡军 申请人:蔡军