专利名称：一种具有降糖降脂作用的含苦瓜、南瓜提取物的产品的利记博彩app
技术领域：
本发明属植物药物技术领域。具体涉及一种具有降糖降脂作用的含苦瓜、南瓜提取物的产品。
美国科学家近20年的研究证明，肌醇(inositol)类分子(以肌醇myo-Inositol和D-手性-肌醇D-Chiro-inositol为代表)在胰岛素作用的信号传递过程中扮演了重要的角色。研究发现正常人血中及尿液中含有一定浓度的肌醇，而在II类糖尿病人中则几乎检测不到，提示这些病人可能无法产生足够量的肌醇，造成胰岛素作用的信号传递受阻。多个实验室的结果均确认，通过给试验动物补偿肌醇能有效促进胰岛素功能，降低血糖、血中胰岛素、血甘油三脂水平等。正在进行人体临床检验亦表明，纯化的D-手性-肌醇和肌醇对II类糖尿病、多囊性卵巢综合症有显著疗效。因此，若能从天然物质中有效地提取肌醇类分子，对于开发生产治疗II类糖尿病、多囊性卵巢综合症、高血压、肥胖症及其它心血管疾病的药品具有重大的科学价值和经济价值。
南瓜、苦瓜为葫芦科植物(Cucurbit moschata Duch)的果实，其营养成份全面而独特，是大众喜爱的蔬菜和保健食品。我国古代就有对南瓜食疗保健作用的记载。在《本草纲目》中，李时珍将南瓜与灵芝放在一起，说它有“补中、补肝气、益心气、益肺气、益精气”的作用。李时珍谓苦瓜“苦寒、无毒、除邪热、解劳乏、清心明目”。近年来现代医学的研究发现，南瓜还具有控制和辅助治疗糖尿病及由糖尿病引起的高血压、高血脂、肥胖症等作用。
但是，人们对苦瓜和南瓜中的功效成分尚不清楚，本发明人经过大量的研究，首次从南瓜和苦瓜中发现了大量的肌醇类分子，从而进一步在理论上解释了南瓜、苦瓜的降糖、降脂功效。另一方面本发明将可直接应用于开发生产治疗II型糖尿病、高血脂、高血压、肥胖症及其它心血管疾病的药品和相关的保健食品。
本发明提供了一种具有降糖、降脂作用的含苦瓜、南瓜提取物的产品。本发明的产品可以是药物组合物也可以是保健食品。
本发明提供了一种具有降糖、降脂作用的药物组合物，该药物组合物是包括苦瓜、南瓜中提取物作为活性成分与药用辅料组成的。其中活性成分与药用载体的配比，按重量百分比计含活性成分90％-10％及含药用载体10％-90％的比例配制。在本发明的药物组合物中，活性成分中的苦瓜与南瓜提取物可按各种比例配制组成100％的活性成分，也可以仅选用苦瓜或南瓜提取物之一种成为活性成分。
本发明的药物组合物可以为片剂、颗粒剂、胶囊、悬浮液或口服液。
本发明的药物组合物，一般人用量为1000-6000mg苦瓜提取物/天或1000-7000mg南瓜提取物/天或1000-7000mg苦瓜-南瓜提取物/天。
本发明提供了一种能预防和改善糖尿病的保健食品，该保健食品包括苦瓜、南瓜提取物作为活性成分为食用辅料组成的，其中活性成分与食用辅料的配比按重量百分比计，含活性成分90％-10％及含食用辅料10-90％的比例配制。在本发明的保健食品中，活性成分中的苦瓜与南瓜提取物可按各种比例配制组成100％的活性成分，也可以仅选用苦瓜或南瓜提取物之一种成为活性成分。
本发明的保健食品用量，一般成人用量为500-4000mg苦瓜提取物/天或500-4000mg南瓜提取物/天或500-4000mg苦瓜-南瓜抽提物/天。
本发明的另一目的是提供了从苦瓜或南瓜中分离提取肌醇分子的方法，该方法为a从南瓜中分离、提取肌醇分子的方法其特征为将南瓜与不同浓度的热乙醇或者甲醇(0％～80％)按不同的比例3-10(重量比)，在pH2-7的范围内水浴煮2-4小时，经过滤、离心、喷雾干燥即得南瓜提取物。用这种方法所得提取物中肌醇、南瓜多糖、果胶均具有较高的含量。其中以南瓜与20％的乙醇溶液按重量比为5的比例在pH2时，水浴煮3小时后，经过滤、离心、喷雾干燥所得南瓜提取物中所含肌醇、南瓜多糖、果胶均最高，分别达到1.7％、32％、4.5％；b.从苦瓜中分离、提取肌醇分子的方法取苦瓜100g，用1-10倍的0-80％乙醇或者甲醇匀浆，蒸沸1-3小时，经过滤、离心、喷雾干燥得苦瓜提取物，该提取物中所含肌醇、苦瓜甙均具有较高的含量。其中以苦瓜与30％的乙醇溶液按重量比为5的比例在pH2时，水浴煮3小时后，经过滤、离心、喷雾干燥所得南瓜提取物中所含肌醇、苦瓜甙均最高，分别达到3.2％、0.57％。
大规模生产抽提物的工艺可在此基础上略作修改，并添置大型设备如碾磨机、匀浆搅拌机、蒸汽蒸发炉、工业离心机、板框过滤机等。
本发明的又一目的是提供了上述一种具有降糖降脂作用的含苦瓜、南瓜提取物的产品的制备方法，该方法包括下列步骤(1)按上述方法分别制备苦瓜和南瓜提取物；(2)纯化将步骤(1)制得的苦瓜或南瓜提取物，分别按干重加入0.5倍量体积的75％丙腈，碾磨成匀浆；另外，用具有3-氨醛键修饰的9％硅胶填充制备分离柱，然后将提取物的匀浆上柱进行分离纯化，用60-75％丙腈洗脱，控制每分钟0.4ml，以5ml为单位吸集不同组分的洗脱液，分取含肌醇量高的洗脱液，浓缩至干燥得干粉；或者将步骤(1)制得的苦瓜或南瓜提取物碾磨成匀浆，用硅藻土或者皂土或者PVPP树脂填充的分离柱，匀浆物在此柱上得到分离。收集富含肌醇类分子的洗脱液，浓缩，喷雾干燥，制备成干粉。
(3)制备产品按配方要求取经步骤(2)纯化的苦瓜或南瓜提取物与药用辅料或食用辅料制成药物组合物或保健食品。
本发明的产品通过下列动物实验说明其效果本发明提取物的降糖实验结果如下1.鼠化学诱导糖尿病实验模型选取平均重量为250-280克的雄性Sprague-Dawley鼠，按45mg/kg的剂量IP注射STZ(Streptozocin，Sigma Chemicals Co.，溶于柠檬酸缓冲液中)溶液。24小时后从鼠尾静脉抽血，用葡萄糖氧化法(Beckman葡萄糖分析仪，Fullerton，CA)测定其中的血糖含量。选取血糖在350至400mg/dl的大鼠作为糖尿病试验动物(正常大鼠的血糖水平为116mg/dl)。
2.上述选取的经化学诱导的糖尿病大鼠随机分组，每组以一定剂量的经过本发明实施例二得到的抽取物处理(抽取物溶于0.5ml生理盐水中，用滴管喂食，每日一次)。阳性对照(纯化的肌醇及D-手性-肌醇)也溶于生理盐水中喂食。处理前和处理1天、2天、4天及8天后，以鼠尾静脉抽取0.5ml血样用测量葡萄糖含量。
按下表1中的剂量给予糖尿病大鼠，其结果为表1 提取物在STZ诱导的糖尿病大鼠中的降糖效应
*P＜0.05 **P＜0.01
上述数据均为10只实验鼠的平均值，0天时间的血糖含量设为100，并将其它时间点数据作相应调整。上述10组处理的0天血糖浓度分别为0mg/kg(对照)，381.7±14.5mg/dl；25mg/kg苦瓜抽提物，372.4±17.8mg/dl；50mg/kg苦瓜抽提物，375.8±20.1mg/dl；100mg/kg苦瓜抽提物，371.5±15.9mg/dl。25mg/kg南瓜抽提物，375.6±18.4mg/dl；50mg/kg南瓜抽提物，378.1±20.4mg/dl；100mg/kg南瓜抽提物，373.5±17.1mg/dl。25mg/kg苦瓜∶南瓜(1∶1)抽提物，377.2±18.9mg/dl；50mg/kg苦瓜∶南瓜(1∶1)抽提物，376.8±21.3mg/dl；100mg/kg苦瓜∶南瓜(1∶1)抽提物，374.2±17.5mg/dl。
由此可见，本发明的抽提物表现为1.降糖功效与其中所含的肌醇含量成正比，亦即肌醇含量越高，降糖功效越明显。
2.降糖功效不能完全由肌醇解释，还有其他物质协同作用，苦瓜甙、南瓜多糖和南瓜果胶是其中可能的三种活性物质。
表2 本发明抽提物样品中主要活性成份及含量 经过3-氨醛键修饰的9％硅胶填充柱或其他离子交换柱(硅藻土、皂土、PVPP树脂等)纯化，收集洗脱液，浓缩，喷雾干燥，制备成干粉后，苦瓜抽提物、南瓜抽提物、苦瓜∶南瓜(1∶1)抽提物中的Myo-Inositol和D-Chiro-Inositol的含量分别可达512mg/g、48mg/g；312mg/g、23mg/g；487mg/g、21mg/g；而其中的苦瓜甙、南瓜多糖、南瓜果胶的含量保持不变或略有提高。
本发明的产品具有很好的降糖降脂功效，在医学临床和人们的日常生活中均有广泛的用途。
图2南瓜抽提物降糖剂量效应纵座标为血糖含量，横座标为处理时间。
图3苦瓜、南瓜(1∶1)提取物降糖剂量效应纵座标为血糖含量，横座标为处理时间。
实施例二从苦瓜中分离、提取肌醇分子的方法取苦瓜100g，用1-10倍的0-80％的乙醇(水)或者0-80％的甲醇(水)匀浆，蒸沸1-3小时，过滤，取滤液烘干，得干粉。
实施例三从南瓜中分离、提取肌醇的方法取南瓜100g，用1-10倍的0-80％的乙醇(水)或者0-80％的甲醇(水)匀浆，调pH2-7，蒸沸1-3小时，过滤，滤液调pH至7，浓缩并干燥，得干粉。
实施例四本实施例是肌醇分子的纯化及测定为了进一步纯化肌醇类分子，将实施例一、二、三所得到的抽提物按干重加入0.5倍体积(0.5ml/g)的75％丙腈(acetonitrile)，碾磨成匀浆。制备分离柱，该分离柱用具有3-氨醛(aminopropyl)键修饰的硅胶(9％)填充(Aldrich Chemical Company Inc.产品)，匀浆物在此柱上得到分离。用60-75％丙腈洗脱，0.4ml/Min。以5ml为单位收集不同组分洗脱液，其中的1ml蒸发干燥用于气相色谱分解。各组分在Hewlett-Packard 5890 Series II气相色谱仪上分析，分离柱为DB-1701(30-mlength，0.25-mmi.d.，0.25um film thickness，J&w Scientific产品)。柱温为275℃和325℃。携带气(Carrier gas)是氦气(1.0ml/min)，split 1∶100；检测气是氢气(30ml/min)、空气(300ml/min)和氮气(30ml/min)。肌醇类分子含量是根据标准曲线，并与标样的保留时间和峰面积对比而计算的。肌醇、D-手性-肌醇及其它衍生物的标准均购自Sigma公司。
实施例五本实施例是肌醇分子的纯化为了进一步纯化肌醇类分子，将实施例一、二、三所得到的抽提物按干重加入0.5倍体积(0.5ml/g)的75％丙腈(acetonitrile)，碾磨成匀浆。制备分离柱，该分离柱用硅藻土或者皂土或者PVPP树脂填充，匀浆物在此柱上得到分离。收集富含肌醇类分子的洗脱液，浓缩，喷雾干燥，制备成干粉。
实施例六本实施例是苦瓜甙、南瓜多糖、果胶含量的测定。
1.苦瓜提取物中苦瓜甙的含量测定精密称取0.8g供试品于50ml锥形瓶中，加入10％硫酸10ml置电炉上煮沸，并保持微沸30分钟，取出放冷，转移至准备好的漏斗内，抽滤，洗净三角烧瓶并洗涤水解物至中性，并在105℃干燥，将坩埚内物质用氯仿洗涤多次至5ml容量瓶中，定容。用微量吸管吸取上述溶液50μl点于硅胶G薄层板上，置于层吸缸中以石油醚-氯仿-甲醇(1∶98∶1)展开。展开15cm取出，挥去溶剂后将薄层板在碘蒸汽筒内显色，用小针画出斑点位置，然后在空气中放置到碘完全挥发，将色斑刮入带塞试管中，用在同一位置的空白处取下同样大小的硅胶以作为对照；加浓硫酸至5ml，加热15分钟冷却测定。测定时取样品溶液50μl于50ml容量瓶中，加浓硫酸至刻度，90℃水浴半小时后，取出放置半小时，以不加样为空白，在400nm处测吸光度。
测定所用标样β-谷甾醇由中国生物制品检定所提供；所用仪器为紫外可见分光光度计。
2.南瓜多糖含量测定称取研细的南瓜提取物粉末3g，用水提醇沉法提取。加入水100ml、水浴回流提取4次，每次1小时，趁热过滤。合并四次水提所得液，经石油醚脱脂后，取下层清液；上层石油醚层再加入水相反复萃取，同样取下层清液，合并所有的水相层，浓缩成浆状物后，加入5倍量的无水乙醇沉淀多糖固体，冰箱内过夜。过滤，沉淀反复用无水乙醇洗涤多次，最后得到的多糖固体用水溶解，离心，上清液转移至100m.l容量瓶内，定容。稀释100倍后用于检测。检测时，精密量取样品溶液2ml依次分别加入2ml 5％苯酚、浓硫酸5ml于试管中，静置20分钟后，摇匀置30℃水浴30分钟后，取出至室温，以葡萄糖作为对照于波长487nm处检测。检测所用仪器为紫外可见分光光度计。
3.果胶含量测定精密称取样品0.5g于250ml烧杯中，加入150ml水溶解，煮沸1小时(煮沸过程中不断补充水，以保证其体积不变)，移入250ml容量瓶，加水至刻度、过滤；取25ml滤液于500ml烧杯中，加入100ml0.1mol/l的NaOH溶液，静置30分钟后，再加入50ml 1mol/l的HCL溶液，5分钟后加入50ml1mol/l的CaCl2溶液，放置1小时后煮沸5分钟，过滤，用热水洗涤至无Cl-，将沉淀物放入称量瓶中于105℃烘至恒重。即得果胶钙的量，通过公式换算得果胶含量。
实施例七制备苦瓜药物组合物取实施例二制得的苦瓜提取物按配比加入药用辅料，以常规方法制成片剂、颗粒剂、胶囊、悬浮液或口服液的药物组合物。
实施例八制备南瓜药物组合物取实施例三制得的南瓜提取物按配比加入药用辅料，以常规方法制成片剂、颗粒剂、胶囊、悬浮液或口服液的药物组合物。
实施例九制备苦瓜-南瓜药物组合物按配比取实施例二、三制得的苦瓜、南瓜提取物加入药用辅料，以常规方法制成片剂、颗粒剂、胶囊、悬浮液或口服液的药物组合物。
实施例十制备苦瓜保健食品按实施例六操作，以食用辅料代替药用辅料制得苦瓜保健食品。
实施例十一制备南瓜保健食品按实施例九操作，以南瓜提取物代替苦瓜提取物制得南瓜保健品。
实施例十二制备苦瓜-南瓜保健食品按实施例九操作，以苦瓜-南瓜提取物代替南瓜提取物，制得苦瓜-南瓜保健食品。
权利要求
1.一种具有降糖、降脂作用的药物组合物，其特征在于该药物组合物包括含苦瓜、南瓜提取物作为活性成分与药用辅料组成的。
2.一种具有降糖、降脂功效的保健食品，其特征在于该保健食品包括含苦瓜、南瓜提取物作为活性成分与食用辅料组成的。
3.根据权利要求1或2所述的一种具有降糖、降脂作用的药物组合物或保健食品，其特征在于其中所述的活性成分与药用辅料或食用辅料的配比，按重量百分比计，含活性成分90％-10％及含药用辅料或食用辅料为10％-90％的比例配制成100％的活性成分，也能仅选苦瓜或南瓜提取物的一种作为活性成分。
4.一种从苦瓜或南瓜中提取肌醇分子的方法，其特征在于该方法为a.从南瓜中分离、提取肌醇分子的方法其特征为将南瓜与不同浓度的热乙醇或者甲醇(0％～80％)按不同的比例3-10(重量比)，在pH2-7的范围内水浴煮2-4小时，经过滤、离心、喷雾干燥即得南瓜提取物干粉，用这种方法所得提取物中肌醇、南瓜多糖、果胶均具有较高的含量；其中以南瓜与20％的乙醇溶液按重量比为5的比例在pH2时，水浴煮3小时后，经过滤、离心、喷雾干燥所得南瓜提取物中所含肌醇、南瓜多糖、果胶均最高，分别达到1.7％、32％、4.5％；b.从苦瓜中分离、提取肌醇分子的方法取苦瓜100g，用1-10倍的0-80％乙醇或者甲醇匀浆，蒸沸1-3小时，经过滤、离心、喷雾干燥得苦瓜提取物干粉，该提取物中所含肌醇、苦瓜甙均具有较高的含量；其中以苦瓜与30％的乙醇溶液按重量比为5的比例在pH2时，水浴煮3小时后，经过滤、离心、喷雾干燥所得南瓜提取物中所含肌醇、苦瓜甙均最高，分别达到3.2％、0.57％。
5.一种如权利要求1所述的一种具有降糖、降脂作用的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤(1)制备苦瓜或南瓜提取物按权利要求4的方法制得；(2)纯化将步骤(1)制得的苦瓜或南瓜提取物，分别按干重加入0.5倍量体积的75％丙腈，碾磨成匀浆；另外，用具有3-氨醛键修饰的9％硅胶填充制备分离柱，然后将提取物的匀浆上柱进行分离纯化，用60％-75％丙腈洗脱，控制每分钟0.4ml，以5ml为单位吸集不同组分的洗脱液，分取含肌醇量高的洗脱液，浓缩至干燥得干粉；或者将步骤(1)制得的苦瓜或南瓜提取物碾磨成匀浆，用硅藻土或者皂土或者PVPP树脂填充的分离柱，匀浆物在此柱上得到分离，收集富含肌醇类分子的洗脱液，浓缩，喷雾干燥，制备成干粉；(3)制备药物组合物按配方要求，取经步骤(2)纯化的苦瓜、南瓜提取物与药用辅料制成药物组合物，片剂、颗粒剂、胶囊、悬浮液或口服液。
6.一种如权利要求2所述的一种具有降糖降脂功效的保健食品的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤(1)制备苦瓜或南瓜提取物按权利要求4的方法制得；(2)纯化将步骤(1)制得的苦瓜或南瓜提取物，分别按于重加入0.5倍量体积的75％丙腈，碾磨成匀浆；另外，用具有3-氨醛键修饰的9％硅胶填充制备分离柱，然后将提取物的匀浆上柱进行分离纯化，用60％-70％丙腈洗脱，控制每分钟0.4ml，以5ml为单位吸集不同组分的洗脱液，分取含肌醇量高的洗脱液，浓缩至干燥得干粉；或者将步骤(1)制得的苦瓜或南瓜提取物碾磨成匀浆，用硅藻土或者皂土或者PVPP树脂填充的分离柱，匀浆物在此柱上得到分离，收集富含肌醇类分子的洗脱液，浓缩，喷雾干燥，制备成干粉；(3)制备保健食品按配方要求，取经步骤(2)纯化的苦瓜、南瓜提取物与食用辅料制成保健食品。
全文摘要
本发明属植物药物技术领域。本发明提供了一种具有降糖降脂作用的含苦瓜、南瓜提取物的产品。本发明的产品经动物实验证实对糖尿病、高血脂等有很好的预防和治疗功效。本发明提供了制备方法，并首次提取了肌醇分子，同时证实了肌醇分子在降脂、降糖中的主要作用。
文档编号A61P3/10GK1431005SQ0311512
公开日2003年7月23日 申请日期2003年1月23日 优先权日2003年1月23日
发明者夏涛, 刘华奇 申请人:上海诺金科生物科技有限公司