专利名称：碱式棓酸铋在预防和/或减少皮肤劣化中的用途的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及碱式棓酸铋在预防和/或减少皮肤劣化中的新用途。
碱式棓酸铋是棓酸、冰醋酸和硝酸铋的反应产物，其由分子式C7H5BiO6表示。已知它是治疗急性或慢性腹泻的口服抗腹泻药，因为其可以与因异常发酵而大量存在于肠道内的H2S反应，从而缓解由于气体对肠道的刺激而引起的腹泻和疼痛。鉴于其本身是苯衍生物，碱式棓酸铋还可以用作消毒剂。
USP 6,232,341公开了包含碱式棓酸铋和冰片的用于伤口愈合的药物组合物。但是，现有技术没有教导或提示碱式棓酸铋在预防和/或减少皮肤劣化中的新用途。
发明内容
本发明的目的是提供预防和/或减少皮肤劣化的方法，所述方法包括以足以预防和/或减少皮肤劣化的有效量将碱式棓酸铋施用于皮肤。根据本发明的优选实施方案，该方法包括以足以预防和/或减少皮肤劣化的协同有效量将碱式棓酸铋和冰片一起施用于皮肤。
本发明的另一目的是提供用于预防和/或减少皮肤劣化的药物组合物，所述药物组合物包含足以预防和/或减少皮肤劣化的有效量的用于预防和/或减少皮肤劣化的碱式棓酸铋。根据本发明的优选实施方案，本发明的药物组合物包含足以预防和/或减少皮肤劣化的协同有效量的用于协同预防和/或减少皮肤劣化的碱式棓酸铋和冰片。
图2显示碱式棓酸铋和冰片对成纤维细胞增殖的影响。
图3显示碱式棓酸铋和冰片对酪氨酸的抑制百分数。
图4显示碱式棓酸铋和冰片的Lineweaver-Burk′s曲线。
在本发明中令人惊奇地发现，碱式棓酸铋在角质形成细胞和成纤维细胞的增殖以及酪氨酸酶的抑制方面有用，因此，可以预防和/或减少皮肤劣化。此外，发现碱式棓酸铋和冰片一起在预防和/或减少皮肤劣化方面显示协同作用。定义本文中使用的术语“碱式棓酸铋”指棓酸、冰醋酸和硝酸铋的反应产物，其由分子式C7H5BiO6表示。
本文中使用的术语“冰片”指从龙脑香(Dryobalanops aromatica)等分离的产物，其由分子式C10H17OH表示。
本文中使用的术语“有效量”指足以在预防和/或减少皮肤劣化方面提供改善的量。
本文中使用的术语“皮肤劣化”指下列症状皮肤老化、光损伤、球孢子菌病、痘凹、皱纹、细纹、弛缓构造、痤疮、丘疹、浮肿、不良颜色(poor color)、银屑病、老年斑、皮肤变色、粗糙皮肤和干燥皮肤。用于预防和/或减少皮肤劣化的方法和组合物本发明的一个目的是提供预防和/或减少皮肤劣化的方法，所述方法包括以足以预防和/或减少皮肤劣化的有效量将碱式棓酸铋施用于皮肤。
根据本发明，在本发明的方法中使用的碱式棓酸铋的有效量为0.03-40％(重量)。更优选地，碱式棓酸铋的有效量为0.5-20％(重量)。最优选地，碱式棓酸铋的有效量为1.5-10％(重量)。
在一个优选的实施方案中，本发明提供预防和/或减少皮肤劣化的方法，所述方法包括以足以预防和/或减少皮肤劣化的协同有效量将碱式棓酸铋和冰片一起施用于皮肤。
根据本发明，在本发明的方法中使用的碱式棓酸铋和冰片的协同有效量分别为0.01-30％(重量)和0.05-10％(重量)。更优选地，碱式棓酸铋和冰片的协同有效量分别为0.1-15％(重量)和0.1-5％(重量)。最优选地，碱式棓酸铋和冰片的协同有效量分别为2-6％(重量)和0.5-1％(重量)。
本发明的另一目的是提供用于预防和/或减少皮肤劣化的组合物，所述组合物包含足以预防和/或减少皮肤劣化的有效量的用于预防和/或减少皮肤劣化的碱式棓酸铋。
根据本发明，用于本发明的组合物的碱式棓酸铋的有效量为0.03-40％(重量)。更优选地，碱式棓酸铋的有效量为0.5-20％(重量)。最优选地，碱式棓酸铋的有效量为1.5-10％(重量)。
在另一个优选的实施方案中，本发明提供用于预防和/或减少皮肤劣化的组合物，所述组合物包含足以预防和/或减少皮肤劣化的协同有效量的用于协同预防和/或减少皮肤劣化的碱式棓酸铋和冰片。
根据本发明，用于本发明的组合物的碱式棓酸铋和冰片的协同有效量分别为0.01-30％(重量)和0.05-10％(重量)。更优选地，碱式棓酸铋和冰片的协同有效量分别为0.1-15％(重量)和0.1-5％(重量)。最优选地，碱式棓酸铋和冰片的协同有效量分别为2-6％(重量)和0.5-1％(重量)。
除了上述活性成分外，本发明的组合物可以进一步包含其它有助于预防和/或减少皮肤劣化的常规试剂，皮肤劣化如皮肤老化、光损伤、球孢子菌病、痘凹、皱纹、细纹、弛缓构造、痤疮、浮肿、不良颜色、银屑病、老年斑和皮肤变色。举例来说，可以使用选自α-羟基酸、抗氧化剂和维A酸的试剂。
根据本发明，在本发明的方法或组合物中使用的碱式棓酸铋或碱式棓酸铋和冰片可以配方成乳剂、糊剂、乳膏、软膏和凝胶糊剂等形式以局部给药。用于碱式棓酸铋或碱式棓酸铋和冰片的适当载体包括，但不限于水、盐溶液、醇、聚乙二醇、明胶、糖类(如乳糖、直链淀粉或淀粉)、硬脂酸镁、滑石、硅酸、粘石蜡、脂肪酸酯、羟甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等。
载体可以是各种形式，它可以是用于制备药物组合物混合物的稀释剂、赋形剂、接受剂(recipient)等。举例来说，可以使用的乳剂载体包括，但不限于，水包油型、油包水型、水包油包水型和聚硅氧烷包水包油型乳剂。这些乳剂的粘度可以在大范围内变化，如从约100cps至约200000cps，还可以使用机械泵容器或者使用采用常规推进剂的压缩气溶胶容器以喷雾形式给予乳剂。这些载体还可以以摩丝(mousse)形式给予。其它适当的局部载体包括无水液体溶剂，如油、醇和聚硅氧烷(例如矿物油、乙醇、异丙醇、二甲基硅氧烷、环甲卡因(cyclomethicone)等)；水基单相液体溶剂(例如水-醇溶剂系统)；以及这些无水和水基单相溶剂的浓缩形式(例如通过添加适当的树胶、树脂、蜡、聚合物、盐等，溶剂的粘度增加，形成固体或半固体)。
根据本发明，在本发明的方法中使用的活性成分的适当剂量和本发明的组合物的适当剂量可以由本领域技术人员通过常规方法确定，并且包括本文前面提及的公开碱式棓酸铋和冰片的现有技术中讨论的各自剂量，这些文献引入本文作参考。在任何情况下，本领域技术人员能够确定最适合个体的实际用量。实用性本发明提供可以用于预防和/或减少皮肤劣化的方法和组合物，皮肤劣化如皮肤老化、光损伤、球孢子菌病、痘凹、皱纹、细纹、弛缓构造、痤疮、丘疹、浮肿、不良颜色、银屑病、老年斑、皮肤变色、粗糙皮肤和干燥皮肤。更优选地，皮肤劣化包括痤疮、丘疹、皱纹、老年斑和皮肤变色。另外，在本发明中公开的组合物可以配方为药物或化妆品。如上所述，本发明的组合物可以调节粗糙皮肤和干燥皮肤，减少痤疮和丘疹，延缓皮肤老化，促进皮肤再生和收缩毛孔。下面的实施例进一步阐释本发明，但它们并不试图限制本发明的范围。本领域技术人员熟知的修改和替代仍在本发明的范围内。
将角质形成细胞分别与下列试剂组一起培养(a)0.7μg/ml、7μg/ml、70μg/ml和700μg/ml碱式棓酸铋；(b)0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml和100μg/ml冰片；(c)0.7μg/ml碱式棓酸铋和0.1μg/ml冰片、7μg/ml碱式棓酸铋和1μg/ml冰片、70μg/ml碱式棓酸铋和10μg/ml冰片、700μg/ml碱式棓酸铋和100μg/ml冰片。将细胞分别培养2、4、6、8、10和12天后，记录它们的数目来评价它们的增殖。如
图1(a)所示，和碱式棓酸铋一起培养的细胞表现出角质形成细胞增殖的显著增加。举例来说，和70μg/ml碱式棓酸铋一起培养的细胞在第十二天时数目已经达到对照的两倍。图1(b)显示冰片对角质形成细胞的增殖没有显著影响。另外，碱式棓酸铋和冰片表现出对角质形成细胞增殖的协同影响(见图1(c))。实施例2 碱式棓酸铋和冰片对成纤维细胞增殖的协同影响此外，进行成纤维细胞增殖的研究来评价碱式棓酸铋和冰片对皮肤的影响。由于其在细胞外基质蛋白(蛋白聚糖、胶原纤维和其它结构糖蛋白)合成中的活性，成纤维细胞是真皮结构部件中的主要成分。测试的成纤维细胞从Mackay Memorial Hospital，台北，台湾获得。
将成纤维细胞分别和3.4μg/ml碱式棓酸铋和0.6μg/ml冰片、35μg/ml碱式棓酸铋和5μg/ml冰片、87μg/ml碱式棓酸铋和13μg/ml冰片、347μg/ml碱式棓酸铋和53μg/ml冰片一起培养。将细胞分别培养2、4、6、8和10天后，记录它们的数目来评价它们的增殖。如图2所示，和低浓度的碱式棓酸铋和冰片一起培养的细胞表现出成纤维细胞增殖的显著增加。举例来说，和35μg/ml碱式棓酸铋和5μg/ml冰片一起培养的细胞在第二天时数目已经达到对照的两倍。实施例3 碱式棓酸铋和冰片对酪氨酸酶抑制的影响进行酪氨酸抑制的研究来评价碱式棓酸铋和冰片对皮肤的影响。黑色素生物合成在黑素细胞内发生，并包括酪氨酸到3，4-二羟基苯丙氨酸(多巴)和多巴到黑色素的氧化和聚合。因此，酪氨酸抑制剂可以通过阻断黑色素产生而用作化妆品的增白剂。
将在pH6.8的0.1M磷酸钠缓冲液中的含有或不含120μM、240μM、400μM、600μM、800μM和1600μM碱式棓酸铋和冰片以及50μl、135U/ml酪氨酸酶的0.09％L-多巴用于测试对酪氨酸的抑制。使所得溶液在37℃下反应15分钟，然后用分光光度计在475nm处检测。碱式棓酸铋和冰片对酪氨酸酶的抑制百分数由以下公式计算抑制百分数(％)＝[(A-B)-(C-D)]/(A-B)×100A＝不含碱式棓酸铋和冰片的溶液的OD475B＝不含酪氨酸和碱式棓酸铋和冰片的溶液的OD475C＝含有碱式棓酸铋和冰片的溶液的OD475D＝含有碱式棓酸铋和冰片但不含酪氨酸的溶液的OD475120μM、240μM、400μM、600μM、800μM和1600μM碱式棓酸铋和冰片的抑制百分数分别是11.1％、14.6％、19.7％、21.5％、29.5％和40.3％，IC50值大于1600μM(见图3)。
此外，酶动力学分析表明碱式棓酸铋和冰片是酪氨酸酶的竞争性抑制剂。
将50μl在0.1M磷酸钠缓冲液中的不同浓度的L-多巴和50μl120μM碱式棓酸铋和冰片混合，然后加入96孔板中。将50μl 135U/ml酪氨酸酶加入各浓度的L-多巴溶液中。将所得溶液加入板中，并在37℃下反应15分钟。在酪氨酸酶抑制中的碱式棓酸铋和冰片的Lineweaver-Burk′s曲线示于图4中。碱式棓酸铋和冰片的Ki值是971μM。实施例4 碱式棓酸铋和冰片施用于皮肤五个人A、B、C、D和E在他们的面部施用包含碱式棓酸铋和冰片的组合物。在施用碱式棓酸铋和冰片两个月后，人A的丘疹和痤疮减少，并且皮肤颜色变白；人B皮肤颜色有所改善；人C的皮肤细度更好；人D的皮肤干燥症状得到改善；人E的皮肤过敏得到改善。
权利要求
1.预防和/或减少皮肤劣化的方法，所述方法包括以足以预防或减少皮肤劣化的有效量将碱式棓酸铋施用于皮肤。
2.根据权利要求1的方法，其中碱式棓酸铋的量为0.03-40％(重量)。
3.根据权利要求1的方法，其中碱式棓酸铋的量为0.05-20％(重量)。
4.根据权利要求1的方法，其中碱式棓酸铋的量为1.5-10％(重量)。
5.根据权利要求1的方法，其中所述皮肤劣化为选自老化、光损伤、球孢子菌病、痘凹、皱纹、细纹、弛缓构造、痤疮、丘疹、浮肿、不良颜色、银屑病、老年斑、皮肤变色、粗糙皮肤和干燥皮肤的症状。
6.根据权利要求5的方法，其中所述症状选自痤疮、丘疹、皱纹、老年斑和皮肤变色。
7.预防或减少皮肤劣化的方法，所述方法包括以足以预防和/或减少皮肤劣化的协同有效量将碱式棓酸铋和冰片一起施用于皮肤。
8.根据权利要求7的方法，其中碱式棓酸铋和冰片的量分别为0.01-30％(重量)和0.05-10％(重量)。
9.根据权利要求7的方法，其中碱式棓酸铋和冰片的量分别为0.1-15％(重量)和0.1-5％(重量)。
10.根据权利要求7的方法，其中碱式棓酸铋和冰片的量分别为2-6％(重量)和0.5-1％(重量)。
11.根据权利要求7的方法，其中所述皮肤劣化为选自老化、光损伤、球孢子菌病、痘凹、皱纹、细纹、弛缓构造、痤疮、丘疹、浮肿、不良颜色、银屑病、老年斑和皮肤变色的症状。
12.根据权利要求7的方法，其中所述症状选自痤疮、丘疹、皱纹、老年斑和皮肤变色。
13.用于预防或减少皮肤劣化的组合物，所述组合物包含足以预防和/或减少皮肤劣化的有效量的用于预防和/或减少皮肤劣化的碱式棓酸铋。
14.根据权利要求13的组合物，其中碱式棓酸铋的量为0.03-40％(重量)。
15.根据权利要求13的组合物，其中碱式棓酸铋的量为0.5-20％(重量)。
16.根据权利要求13的组合物，其中碱式棓酸铋的量为1.5-10％(重量)。
17.根据权利要求13的组合物，其可以用作药物或化妆品。
18.根据权利要求13的组合物，其中所述皮肤劣化为选自老化、光损伤、球孢子菌病、痘凹、皱纹、细纹、弛缓构造、痤疮、丘疹、浮肿、不良颜色、银屑病、老年斑和皮肤变色的症状。
19.根据权利要求13的组合物，其中所述症状选自痤疮、丘疹、皱纹、老年斑和皮肤变色。
20.用于预防和/或减少皮肤劣化的组合物，所述组合物包含足以预防和/或减少皮肤劣化的协同有效量的用于协同预防和/或减少皮肤劣化的碱式棓酸铋和冰片。
21.根据权利要求20的组合物，其中碱式棓酸铋和冰片的量分别为0.01-30％(重量)和0.05-10％(重量)。
22.根据权利要求20的组合物，其中碱式棓酸铋和冰片的量分别为0.1-15％(重量)和0.1-5％(重量)。
23.根据权利要求20的组合物，其中碱式棓酸铋和冰片的量分别为2-6％(重量)和0.5-1％(重量)。
24.根据权利要求20的组合物，其可以用作药物或化妆品。
25.根据权利要求20的组合物，其中所述皮肤劣化为选自老化、光损伤、球孢子菌病、痘凹、皱纹、细纹、弛缓构造、痤疮、丘疹、浮肿、不良颜色、银屑病、老年斑和皮肤变色的症状。
26.根据权利要求20的组合物，其中所述症状选自痤疮、丘疹、皱纹、老年斑和皮肤变色。
全文摘要
本发明公开了碱式棓酸铋用于预防和/或减少皮肤劣化(skin deterioration)的新用途。本发明还公开了碱式棓酸铋和冰片在预防和/或减少皮肤劣化中的协同功效。
文档编号A61K45/06GK1459283SQ0212715
公开日2003年12月3日 申请日期2002年7月31日 优先权日2002年5月15日
发明者蔡英杰, 林佳燕, 施燕玲 申请人:友合生化科技股份有限公司