6－o－取代的红霉素衍生物的制备方法

专利名称：6－o－取代的红霉素衍生物的制备方法
技术领域：
本发明涉及制备6-O-取代的红霉素衍生物及其6-O-取代的红霉素酮基内酯(ketolide)的方法。具体来说，本发明涉及在膦存在下使用烷基化剂由红霉素类制备6-O-取代的红霉素衍生物、以及随后将其转化成6-O-取代的红霉素酮基内酯的钯催化方法。
背景技术：
6-O-甲基红霉素A(甲红霉素)是在U.S.专利4,331,803中公开的有效的大环内酯抗生素。
制备甲红霉素的方法一般是使用红霉素A作为原料的四步法步骤1任选将9-氧代基转化成肟；步骤2对2＇和4″羟基进行保护；步骤3将6-羟基甲基化；和步骤4脱去2＇、4″和9-位的保护基。
文献中已描述了制备6-O-甲基红霉素A的多种方法。6-O-甲基红霉素A可通过将红霉素A的2＇-O-3＇-N-二苄氧基羰基-去-N-甲基衍生物甲基化而制得(U.S.专利4,331,803)。6-O-甲基红霉素A还可以由9-肟红霉素A衍生物制得(参见例如U.S.专利5,274,085；4,680,386；4,668,776；4,670,549和4,672,109，U.S.4,990,602和欧洲专利申请0260938 A2)。本申请人所拥有的数份U.S.专利5,872,229；5,719,272；5,852,180；5,864,023；5,808,017；5,837,829和5,929,219公开了在制备6-O-甲基红霉素衍生物的方法中使用交替的保护基来保护肟羟基以及2＇-和4″-羟基。
自从发现了甲红霉素以来，已经发现了新的大环内酯抗生素化合物。U.S.专利5,866,549中公开了几类新的特别有效的大环内酯抗生素。大环内酯核的6-O-位可用C2-C6链烯基取代。这样的化合物一般可通过所述的制备6-O-甲基红霉素A的方法制得。然而，用不是甲基的取代基在6-O-位进行取代不易于实现，并伴有副反应、副产物、和低产率。
因此，人们朝着发现在红霉素衍生物的6-位引入不是甲基的取代基的更有效且更简洁的方法这一目标付出了很大努力。
钯催化醇羟基的烯丙基化是文献中已知的，参见例如Lakhmiri等人，″Synthesis De O-glycosides D＇Alcenyles″.J.CarbohydrateChemistry，12(2)，223，(1993)；Lakhmiri等人，Tetrahedron Letters，30(35)，No.35，pp 4673-4676，(1989)；和Lakhmiri等人，″糖的烯丙基醚的改进合成″，Synthetic Communications，20(10)，1551-1554(1990)。Goux C.等人，Synlett.，725(1990)中公开了使用烯丙基叔丁基碳酸酯的钯催化的苯酚衍生物烯丙基化。然而，没有任何关于钯催化的红霉素衍生物羟基的取代、衍生化或选择性烯丙基化的已知报道。
发明概述因此，一方面，本发明涉及制备6-O-取代的红霉素衍生物的方法，包括在钯催化剂和膦存在下将红霉素衍生物与下式烷基化剂反应 其中R独立地选自氢、具有1-10个碳原子的烷基、卤素、芳基、取代的芳基、杂芳基和取代的杂芳基；R1是具有1-10个碳原子的烷基，和X是O或NR＇，其中R＇是烷基或芳基，或者R1与R＇一起形成芳环或非芳环。
在本发明方法中使用的红霉素衍生物由式(I)表示 其中Rp独立地为氢或羟基保护基，但是Rp不能在两个位点上同时为氢；V选自a)Ob)式N-O-R2的肟；其中R2选自氢，低级链烯基，芳基(低级烷基)，和取代的芳基(低级烷基)；c)下式所示肟 其中R3选自烷基，烷基芳基，芳基，和取代的芳基；d)下式所示肟 其中R4选自低级烷基，环烷基，苯基，和芳基(低级烷基)；或R4和R5或者R4和R6与它们所连接的原子一起形成5-7元含一个氧原子的环；且R5和R6独立地选自氢原子低级烷基，苯基，芳基(低级烷基)；或者选自(R4和R5)、(R4和R6)或(R5和R6)的任一对取代基与它们所连接的原子一起形成任选地含一个氧原子的5-7元环；条件是(R4和R5)、(R4和R6)或(R5和R6)当中只有一对取代基可以与它们所连接的原子一起形成如上所定义的环；e)下式所示肟 其中R7、R8和R9分别独立地选自氢、低级烷基、芳基取代的烷基、芳基、环烷基和低级链烯基；f) 其中R10和R11分别独立地选自氢、烷基或氮保护基，或者R10和R11一起形成5-7元环烷基；和g) 其中R12和R13分别独立地选自氢、烷基或氮保护基，或者R12和R13一起形成5-7元环烷基；且Z是羟基或保护的羟基。
6-O-取代的红霉素衍生物由式(II)表示 其中Ra由下式表示 且其中R、Rp、V和Z如上所定义。
可任选将式(II)化合物脱保护或脱肟以获得式(III)化合物 其中Rp、Ra和Z如上所定义。
式(I)、(II)和(III)化合物可在如U.S.专利5,866,549(于1999年2月2日公布)中描述的式(IV)大环内酯抗生素的合成中用作中间体， 因此，另一方面，本发明方法还包括下述步骤(a)在胺碱或胺碱催化剂存在下将式(III)化合物 与1，1＇-羰基二咪唑反应，然后任选在强碱存在下与氨或氢氧化铵反应，以生成下式化合物 (b)通过用酸水解从步骤(a)所得化合物中除去二脱氧甲基己糖部分，以生成下式化合物 和(c)将3-羟基氧化，以及任选地脱保护并分离出所需化合物。
另一方面，本发明涉及制备式(IV)化合物的方法，包括用酸除去式(I＇)化合物的二脱氧甲基己糖部分；将2＇-以及任选地3-羟基官能团保护；用烷基化剂将所得化合物烷基化；脱肟；制备11，12-环状氨基甲酸酯；将3-羟基(如果被保护)脱保护；将3-羟基氧化；和任选地将2＇-羟基脱保护以获得式(IV)化合物。本发明方法是有效率的方法，并能以高于已知烷化方法的产率获得所需化合物。
发明详述定义本文中使用了很多术语来指明本发明的特定部分。当这样使用时，其具有下述含义术语“红霉素衍生物”是指这样的红霉素具有9-酮基，或者其中9-酮基被转化成不具有任何取代基或者具有特定取代基以代替肟羟基的氢的肟，并任选具有常规保护基以代替2＇和4″羟基的氢。
本文所用术语“红霉素9-肟衍生物”是指其中9-酮基被转化成如上所述的肟的红霉素。
本文所用术语“6-O-取代的红霉素衍生物”是指6-羟基的氢被不同取代基取代的红霉素9-肟衍生物或红霉素。
术语“羟基保护基”是本领域众所周知的，并且是指在进行化学转化的化合物的官能羟基上的、在合成期间能防止不需要的反应和降解的取代基(参见例如T.H.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groupsin Organic Synthesis，3rd edition，John Wiley & Sons，New York(1999))。羟基保护基的实例包括但不限于苯甲酰基、苄氧基羰基、乙酰基、或式SiR7R8R9所示的取代的甲硅烷基，其中R7、R8和R9相同或不同，并分别是氢原子、低级烷基、其中烷基部分具有1-3个碳原子的芳基取代的烷基、芳基、具有5-7个碳原子的环烷基、或具有2-5个碳原子的低级链烯基，并且R7、R8和R9当中至少有一个不是氢原子；等等。
术语“烷基”或“低级烷基”是指含有1-6个碳原子的烷基，包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基和新戊基。
术语“低级烷氧基”是指通过醚键连接在母体分子部分上的如上所定义的低级烷基。
术语“低级烷氧基(甲基)”是指经由亚甲基(-CH2-)连接在母体分子部分上的如上所定义的烷氧基。
术语“保护的羟基”是指用如上所定义的羟基保护基保护的羟基。
术语“极性非质子传递溶剂”是指没有易于脱去的质子的极性有机溶剂，包括但不限于N，N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、N-甲基-2-吡咯烷酮、六甲基磷酸三酰胺、四氢呋喃、1，2-二甲氧基乙烷、1，2-二氯乙烷、乙腈或乙酸乙酯等或它们的混合物。
本文所用术语“芳基”是指具有一个或两个芳环的单环或二环碳环系，包括但不限于苯基、萘基、四氢萘基、二氢茚基、茚基等。芳基(包括二环芳基)可未取代或者被1、2或3个独立地选自下列的取代基取代低级烷基、取代的低级烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰基氨基、苄氧基羰基、氰基、羟基、卤素、巯基、硝基、甲醛基、羧基、烷氧基羰基、氨基甲酰基、和保护的羟基。此外，取代的芳基包括四氟苯基和五氟苯基。
本文所用术语“杂芳基”是指这样的单环或二环稠合芳基具有5-10个环原子，其中有一个环原子是选自S、O和N；有0、1或2个环原子是独立地选自S、O和N的另外的杂原子；并且其余环原子是碳，该基团经由任一环原子连接在分子的剩余部分上，例如吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、噻二唑基、噁二唑基、噻吩基、呋喃基、喹啉基、异喹啉基等。
本文所用术语“取代的芳基”是指由于其中有1、2或3个氢原子被下述基团独立地代替而被取代的如上所定义的芳基Cl、Br、F、I、OH、CN、C1-C3-烷基、C1-C6-烷氧基、芳基取代的C1-C6-烷氧基、卤代烷基、烷硫基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、巯基、硝基、甲醛基、羧基、烷氧基羰基和氨基甲酰基。此外，任一取代基可以是芳基、杂芳基、或杂环烷基。取代的芳基还包括四氟苯基和五氟苯基。
本文所用术语“取代的杂芳基”是指由于其中有1、2或3个氢原子被下述基团独立地代替而被取代的如上所定义的杂芳基Cl、Br、F、I、OH、CN、C1-C3-烷基、C1-C6-烷氧基、芳基取代的C1-C6-烷氧基、卤代烷基、烷硫基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、巯基、硝基、甲醛基、羧基、烷氧基羰基和氨基甲酰基。此外，任一取代基可以是芳基、杂芳基、或杂环烷基。
本文所用术语“可药用盐”是指满足下述条件的本发明化合物的羧酸盐、酯、和前药，以及可能的话本发明化合物的两性离子形式在合理的医药判断范围内，适用于和人以及低级动物的组织接触，没有不适当的毒性、刺激、变态反应等，具有合理的受益/危险比例，并且对于其目的应用是有效的。可药用盐是本领域众所周知的，并且是指本发明化合物的相对没有毒性的无机和有机酸加成盐。例如，S.M.Berge等人在J.Pharmaceutical Sciences，661-19(1977)中详细地描述了可药用盐，该文献引入本发明以作参考。盐可以在本发明化合物的最终分离和纯化期间在原位制得，或者通过将游离碱官能团与合适的有机酸反应而单独制得。可药用无毒酸加成盐的实例有用无机酸例如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸，或用有机酸例如乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸，或通过使用其它本领域常用方法例如离子交换而形成的氨基的盐。其它可药用盐包括己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡萄庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡萄糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、palmoate、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、戊酸盐等。代表性碱金属或碱土金属盐包括钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐等。其它可药用盐包括(适当时)无毒铵盐、季铵盐，和使用抗衡离子例如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低级烷基磺酸根和芳基磺酸根形成的胺阳离子盐。
本文所用术语“可药用酯”是指可在体内水解的酯，并包括在人体内易于裂解以释放出其母化合物或盐的酯。合适的酯基包括例如衍生自可药用脂族羧酸，特别是链烷酸、链烯酸、环烷酸和链烷二酸，并且其中的烷基或链烯基部分有利地具有不超过6个碳原子的酯基。具体酯的实例包括甲酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙烯酸酯和乙基琥珀酸酯。
术语“可药用溶剂化物”表示包含一个或多个溶质分子例如本发明化合物和一个或多个溶剂分子的集合物。
本文所用术语“可药用前药”是指满足下述条件的本发明化合物的前药，以及可能的话本发明化合物的两性离子形式在合理的医药判断范围内，适用于和人以及低级动物的组织接触，没有不适当的毒性、刺激、变态反应等，具有合理的受益/危险比例，并且对于其目的应用是有效的。术语“前药”是指在体内能迅速转化成上式母化合物例如通过在血液中水解来转化的化合物。其充分论述参见T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugs as Novel Delivery Systems，Vol.14 ofthe A.C.S.Symposium Series，和Edward B.Roche，ed.，BioreversibleCarriers in Drug Design，American Pharmaceutical Association andPergamon Press，1987，这两篇文献引入本发明以作参考。
本发明方法包括通过下述方法制备式(IV)化合物将式(I)化合物与合适的烷基化剂反应以获得式(II)化合物，并如上文步骤(a)-(c)所述进行随后的转化。下文反应方案1中描述了本发明方法。
反应方案1 依据反应方案1，可首先通过U.S.专利4,990,602中描述的方法将式1红霉素的9-酮基转化成肟，然后保护红霉素衍生物的2＇-羟基，任选地保护4″-羟基，以获得式(I)红霉素9-肟。
制备保护的红霉素的方法记载于U.S.专利4,990,602；4,331,803；4,680,386；和4,670,549中，将这些文献引入本发明以作参考。还参考欧洲专利申请EP 260,938中。
红霉素的C-9-羰基可以以下式V表示的肟形式保护 其中R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8和R9定义如上。优选的肟是其中V是O-(l-异丙氧基环己基缩酮)肟，和O-苯甲酰肟的那些化合物。
尤其是，甲硅烷基醚还可用于保护红霉素衍生物的2＇-和4″-羟基。甲硅烷基醚用于保护9-肟部分及2＇-和4″-羟基的用途记载于美国专利5,892,008中。
红霉素的9-羰基还可通过将其转化为红霉素9-腙来保护，该方法记载于1997年9月10日提交的U.S.申请08/927,057中，该申请作为美国专利5,929,219已于1999年7月27日公布。
制备腙的方法记载于Sigal等，J.Am.Chem.Soc.，78，388-395，(1956)中。例如，9-腙可通过下述方法制备在肼的存在下，在醇类溶剂，如甲醇、乙醇或异丙醇中加热回流红霉素直至不剩原料。该反应通常持续约12-36小时。然后除去溶剂，所得固体粗品无需进一步纯化即可使用。
9-腙红霉素衍生物的氨基氮可任选地通过下列文献中描述的方法用氮保护基进行保护T.H.Greene和P.G.M.Wuts，ProtectiveGroups in Organic Synthesis，3rd edition，John Wiley & Sons，NewYork，Chapter 7，(1999)；和P.J.Kocienski，Protective Groups，Thieme，Chapter 6，(1994)；这些文献引入本文以供参考。
例如9-腙的氨基氮原子可通过下述方法保护在有机碱如三乙胺的存在下，在非质子传递溶剂中，用1-2当量甲硅烷基化剂，如三异丙基甲硅烷基三氟甲磺酸酯处理红霉素9-腙。该反应优选在三乙胺的存在下在二氯乙烷中进行。该反应形成9-(N-三异丙基甲硅烷基)腙红霉素衍生物，该衍生物可在2＇-位上和任选地4″-位上进行保护。
红霉素9-腙衍生物也可通过美国专利3,780,020和德国专利1,966,310中描述的方法转化为吖嗪。例如吖嗪衍生物可如下制备在使用或不使用共溶剂的情况下，在使用或不使用脱水剂如分子筛的情况下，用适宜的酮、醛或其缩醛、或者原甲酸酯处理腙。该反应在室温至酮、醛或共溶剂的沸点温度下进行。该反应进行约1-约24小时。吖嗪氮原子还可在催化量的酸如甲酸或乙酸的存在下，用适宜的缩酮处理9-吖嗪红霉素衍生物进行保护。将该反应混合物在室温搅拌过夜(6-18小时)。然后用碱将该混合物的pH调至8-13，再将产物萃取到适宜溶剂中。
2＇-和4″-羟基通过在非质子传递溶剂中与适宜羟基保护试剂的反应进行保护。代表性的羟基保护试剂包括，但不限于，乙酰化试剂、甲硅烷基化剂、酸酐等。羟基保护试剂的实例是，例如乙酰氯、乙酸酐、苯甲酰氯、苯甲酸酐、氯甲酸苄基酯、六甲基乙硅氮烷和三烷基甲硅烷基氯。
非质子传递溶剂的实例是二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃(THF)、N-甲基吡咯烷酮、二甲亚砜、二乙基亚砜、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、N，N-二甲基乙酰胺、六甲基膦酰三胺、它们的混合物，或者一种上述的溶剂与乙醚、四氢呋喃、1，2-二甲氧基乙烷、1，2-二氯乙烷、乙腈、乙酸乙酯、丙酮等的混合物。非质子传递溶剂对反应没有不利的影响。溶剂优选选自二氯甲烷、氯仿、N，N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃、N-甲基吡咯烷酮或它们的混合物。关于溶剂和保护羟基的条件的更详尽的讨论记载于T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups inOrganic Synthesis，3rd ed.，John Wiley & Son，Inc.，1999，该文献引入本文以供参考。
化合物1的2＇-和4″-羟基的保护可在获得化合物(I)的同时或之后进行，其中Rp可以是，例如乙酰基、苯甲酰基、三甲基甲硅烷基等。优选的保护基包括乙酰基、苯甲酰基和三甲基甲硅烷基。特别优选用于保护羟基和肟部分的保护基是苯甲酸酯基，其中Rp是苯甲酰基。
羟基的苯甲酰化通常通过用苯甲酰化试剂，如苯甲酰卤和苯甲酸酐处理红霉素9-肟来实现。优选的苯甲酰卤是苯甲酰氯。该反应一般用苯甲酸酐进行，得到保护的红霉素9-肟衍生物。对于红霉素9-肟化合物的保护而言，苯甲酸酐是相对较昂贵的试剂。
或者，红霉素9-肟衍生物可用苯甲酸钠和苯甲酰氯处理，得到保护的红霉素9-肟化合物。试剂的组合使用是一种可用以代替苯甲酸酐的成本效益更合算的手段。由于就地生成苯甲酸酐，该反应通过使用更廉价和更易得的原料使2＇-和4″-保护基及9-肟的羟基化更有效。通常，对于每当量红霉素A 9-肟，使用约3-约4.5摩尔当量的苯甲酰氯和苯甲酸钠。该反应优选使用约1∶1摩尔比例的苯甲酰氯和苯甲酸钠进行。该反应优选用四氢呋喃作溶剂，任选地在碱例如三乙胺或咪唑的存在下进行。
通常，在肟化后并在用适宜保护基处理之前分离红霉素衍生物。然而，在甲醇溶剂中，红霉素A用羟胺和甲酸转化得到红霉素A9-肟衍生物，该衍生物无需分离就可直接转化为保护的红霉素A 9-肟衍生物。相对于红霉素A，羟胺的优选用量为约7-约10摩尔当量。对于每摩尔红霉素A原料，使用约2-约5摩尔的甲酸。
对于未分离的红霉素A 9-肟中间体，优选地，任选在碱的存在下，用苯甲酸酐试剂进行苯甲酰化。该反应在任选与乙酸异丙基酯混合的四氢呋喃中进行，得到保护的红霉素A 9-肟中间体化合物。
然后在钯催化剂和膦助催化剂的存在下，将式(I)的红霉素衍生物与下式的烷基化剂反应 其中R，R1，和X定义如上，获得下式(II)表示的化合物 其中Ra，Rp，V和Z定义如上。
预期大多数钯(O)催化剂可用于该方法。某些钯(II)催化剂，例如乙酸钯(II)，它们通过膦的作用可就地转化为钯(O)类物质，也可用于该方法。参见，例如Beller et.al.Angew Chem.Int.Ed.Engl.，1995，34(17)，1848。钯催化剂可选自，但不限于，乙酸钯(II)、四(三苯基膦)钯(O)、三(二亚苄基丙酮)二钯、(四-二亚苄基丙酮)二钯等。对于该方法而言，其它钯催化剂优选于披钯碳和卤化钯(II)催化剂。
钯催化剂与膦的比例一般为约2∶1-约1∶8。
适宜的膦包括，但不限于，三苯基膦、二(二苯基膦)甲烷、二(二苯基膦)乙烷、二(二苯基膦)丙烷、1，4-二(二苯基膦)丁烷、二(二苯基膦)戊烷和三(邻甲苯基)膦等。
该反应在非质子传递溶剂中，优选在升高的温度，优选在50℃或高于50℃下进行。非质子传递溶剂包括，但不限于，N，N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、N-甲基-2-吡咯烷酮、六甲基磷酰三胺、四氢呋喃、1，2-二甲氧基乙烷、甲基叔丁基醚(MTBE)、庚烷、乙腈、乙酸异丙基酯和乙酸乙酯。最优选的溶剂是四氢呋喃或甲苯。
用于本发明方法的烷基化剂是烯丙型烃的碳酸酯和氨基甲酸酯，例如碳酸烯丙基酯和氨基甲酸烯丙基酯。用于该反应的烷基化剂通常具有前面描述的结构式，其中R1是含约1-10个碳原子的基团。优选的烷基化剂是其中R1是叔丁基、异丙基或N，N-二异丙基的化合物，例如碳酸叔丁基酯、碳酸异丙基酯或N，N-二异丙基氨基甲酸酯化合物。烷基化剂可包括，例如烯丙基异丙基碳酸酯、烯丙基叔丁基碳酸酯、烯丙基N，N-二异丙基氨基甲酸酯、3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯和1-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯。烷基化剂通过醇与各种引入碳酸酯或氨基甲酸酯部分的化合物反应得到。所述化合物包括，但不限于，氯甲酸叔丁基酯、2-(t-叔丁氧羰基-氧亚氨基)-2-苯基-乙腈、N-叔丁氧羰基氧基琥珀酰亚胺、二碳酸二叔丁基酯和1-(叔丁氧羰基)咪唑，该反应在有机或无机碱的存在下进行。反应温度可在约-30℃-约30℃之间变化。烷基化剂优选是二碳酸二叔丁基酯。
另一种将醇转化为碳酸酯或氨基甲酸酯的方法包括用光气或三光气处理醇制备醇的氯甲酸酯衍生物。然后通过Cotarca，L.，Delogu，P.，Nardelli，A.，Sunijic，V.Synthesis，1996，553中描述的方法将该氯甲酸酯衍生物转化为碳酸酯或氨基甲酸酯。该反应可在碱存在下，在各种有机溶剂，例如二氯甲烷、甲苯、乙醚、乙酸乙酯和氯仿中进行。碱的实例包括，但不限于，氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铵、二甲基氨基吡啶、吡啶、三乙胺等。可使用各种相转移试剂，包括四丁基卤化铵等。温度条件可在0℃-约60℃内变化。反应完成通常花费约3-5小时。
制备烷基化剂方法的一个实例记载于1999年6月24日提交的本申请人共同拥有的U.S.申请60/141,042中，该方法如下面的反应方案2所示。
反应方案2 根据反应方案2，在有机碱、钯催化剂和卤化铜或相转移试剂，如四丁基溴化铵的存在下，将市售的3-溴喹啉与炔丙醇反应。该反应在约40℃-约90℃的温度下进行。
将如此得到的3-(3-喹啉基)-2-丙炔-1-醇(i)通过两种方法之一还原为3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇。该还原反应在室温下通过用氢气和钯或铂催化剂催化氢化完成，以制备顺式异构体；或者使用金属氢化物类的试剂，例如氢化铝试剂进行。在-20℃-约25℃下，在甲苯中使用氢化铝锂(LAH)和二(2-甲氧基乙氧基)氢化铝钠(Red-Al)的反应制得反式异构体。某些添加剂适合用于催化氢化并且可以以良好产率得到顺式异构体。一种适宜的添加剂是3，6-二硫杂-1，8-辛二醇，当然，氢化中也可使用各种其它的添加剂。
然后，将上述获得的3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇通过与各种试剂的反应转化为碳酸酯或通过已知文献方法转化成氨基甲酸酯，如下所示， 其中X和R1如前述所定义。例如烯丙型醇，3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇可在0℃下，在羟基碱如氢氧化钠的存在下，与二碳酸二叔丁基酯反应，得到相应的碳酸酯。参见Houlihan等，Can.J.Chem.1985，153。
然后通过任选的脱保护和脱肟作用，将式(II)化合物转化为式(III)化合物。根据保护基的性质，肟羟基的脱保护反应可在中性、酸性或碱性条件下进行。式N-O-C(O)R3的被保护的肟的脱保护条件包括，但不限于，在室温或回流温度下用醇类溶剂处理，或者用伯胺如丁基胺处理。用于脱保护反应的醇类溶剂优选是甲醇和乙醇。式N-O-C(R5)(R6)-O-R4的被保护的肟可在乙腈中用酸的水溶液，例如乙酸、盐酸或硫酸水溶液转化。脱去保护基的方法、试剂和条件的更详尽的讨论记载于，例如T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groupsin Organic Synthesis，3rd ed.，John Wiley & Son.Inc.，1999，该文献引入本文以供参考。
9-肟的脱肟可按照，例如Greene(op.cit.)和其它人在文献中描述的方法进行。脱肟剂的实例是无机亚硝酸盐或硫氧化物化合物，如亚硝酸钠、亚硫酸氢钠(sodium hydrogen sulfite)、焦硫酸钠、硫代硫酸钠、硫酸钠、亚硫酸钠、连二亚硫酸氢钠(sodium hydrogensulfite)、焦亚硫酸钠、连二硫酸钠、硫代硫酸钾、焦亚硫酸钾等。使用的溶剂的实例是非质子传递溶剂，例如水、甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、三甲基甲硅烷醇或者一种或多种上述溶剂的混合物等。某些非质子传递溶剂可单独或者以其水溶液形式用于反应，例如四氢呋喃。
该脱肟反应通常是在酸，例如甲酸、乙酸、柠檬酸、草酸、酒石酸和三氟乙酸的存在下进行。酸的用量为式(II)化合物用量的约1-约10当量。在优选的反应中，脱肟反应在有机酸，如酒石酸的存在下，用亚硫酸钠进行。该优选的反应在四氢呋喃和水中进行，得到相应的9-酮基红霉素衍生物。
然后在强碱的存在下，将化合物(III)与羰基二咪唑反应，使11，12-二醇中间体直接转化为12-酰基咪唑(12-acylimidazolide)中间体。适宜碱的实例包括碱金属氢化物、胺碱或胺碱催化剂。优选的碱是六甲基二硅氮烷钠(sodium hexamethyldisilazide)和1，8-二氮杂双环[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU)。用六甲基二硅氮烷钠和DBU处理后，用氨或氢氧化铵处理，得到环状氨基甲酸酯。碱金属可以是钠、钾或锂，非质子传递溶剂可以是上述定义的那些溶剂之一。
该转化反应可分两步进行。第一步包括在非质子传递溶剂中、在羰基二咪唑的存在下，将化合物(III)与碱在约-30℃-约45℃下反应约8-约24小时，得到式(III＇)化合物。 根据使用的条件，该反应可能需要冷却或加热到约-20℃-约45℃，优选约0℃-约35℃。该反应需要约0.5小时-约10天，优选约10小时-约2天达到完全。按照Baker等在J.Org.Chem.，1988，53，2340中描述的方法安排该反应的顺序。然后将化合物(III＇)与氨或氢氧化铵反应使其转化为11，12-环状氨基甲酸酯。为有助于环合反应，可任选地加入碱，如叔丁醇钾。
或者，11，12-二醇用甲磺酰衍生物处理后，用胺碱处理，得到下式的1，2-二羟基烯酮中间体 制备化合物(III″)的优选试剂是甲磺酸酐的吡啶溶液，然后用胺碱，如DBU在丙酮或苯中处理。式(III＇)化合物用1，1＇-羰基二咪唑处理，得到式(III＇)化合物。任选在碱的存在下，式(III＇)化合物用氨处理，使12-酰基咪唑中间体转化为11，12-环状氨基甲酸酯。
大环内酯的二脱氧甲基己糖部分可在温和的酸水溶液的存在下通过水解除去，得到化合物2。代表性的酸包括稀盐酸、硫酸、高氯酸、氯乙酸、二氯乙酸或三氟乙酸。该反应的适宜溶剂包括甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇等。反应时间一般为0.5-24小时。反应温度优选为约-10℃-约60℃。
化合物2的3-羟基可使用改进的Swern氧化方法或Corey-Kim氧化方法氧化为酮(IV)。在一种方法中，二酰氯，如草酰氯促进适宜氧化剂，如二甲亚砜的活化，得到化合物2的二甲基烷氧基锍盐。所得中间体用仲胺或叔胺碱处理，得到相应的酮。用于该反应的优选的碱是二乙胺、三乙胺和Hunig碱。
其它适宜的氧化剂包括，但不限于，N-氯琥珀酰亚胺-二甲基硫醚、碳二亚胺-二甲基亚砜等。在典型的实施例中，在-10至25℃下，将化合物2加到预先在氯化溶剂如二氯甲烷中形成的N-氯琥珀酰亚胺和二甲基硫醚配合物中。搅拌0.5-4小时后，加入叔胺，如三乙胺或Hunig碱，得到相应的酮。
或者，含有钌过渡金属的化合物也适合在有机溶剂中进行该反应。一种试剂的实例是四丙基-过钌酸盐(TPAP)。该反应的优选溶剂是二氯甲烷。
将2＇-羟基脱保护得到所需的酮基内酯(IV)。当保护基是酯，例如乙酸酯或苯甲酸酯时，化合物可用甲醇或乙醇处理脱保护。当Rp是三烷基甲硅烷基时，化合物可在THF或乙腈中用氟源处理脱保护。
按照反应方案3所示的另一种方法，化合物(I＇)是红霉素A的9-肟化合物，如前面所述，用稀无机酸或有机酸使其进行酸水解除去二脱氧甲基己糖部分，得到化合物3。如前面所述，3-和2＇-羟基以及肟可用适宜的保护试剂适当保护，得到化合物4。可使用前面描述的保护试剂，通过保护和隔离各个官能团对肟和羟基进行同时或分步保护。然后如前面反应方案1所述，将化合物4烯丙基化、脱保护和脱肟，得到化合物5。化合物5的2＇-羟基和3-羟基可任选地被保护并与N，N-羰基二咪唑和六甲基二硅氮烷钠反应，然后与氨反应，再脱去2＇-和3-羟基的保护基，得到氨基甲酸酯2。氧化化合物2，得到式(IV)的化合物。
反应方案3 本发明还涉及下式表示的中间体化合物 其中V＇是氧或N-O-R14；其中R14选自乙酰基、苯甲酰基或三甲基甲硅烷基；在各种情况下，Rp＇独立地选自乙酰基、苯甲酰基或三甲基甲硅烷基；L和T各自是羟基；或者L与T一起形成11，12-氨基甲酸酯；Ra定义如上。优选地，R14和Rp＇各自是乙酰基或苯甲酰基。
在一个优选的方案中，Ra是3-(3-喹啉基)-2-丙烯基或2-烯丙基，并且Rp＇是苯甲酰基。缩略语实施例中采用的缩写是Ac表示乙酰基；THF表示四氢呋喃；CDI表示1，1＇-羰基二咪唑；DMF表示N，N-二甲基甲酰胺；DBU表示1，8-二氮杂双环[5.4.0]-十一碳-7-烯；DMSO表示二甲亚砜；并且TMSCl表示三甲基甲硅烷基氯；dppb表示1，4-二(二苯基膦)丁烷；Pd2(dba)3表示三(二亚苄基丙酮)二钯；IPAC表示乙酸异丙基酯；MTBE表示甲基叔丁基醚；DMAP表示N，N-二甲基氨基-吡啶；以及IPA表示异丙醇。
除非另有说明，原料、试剂和溶剂均购自Aldrich ChemicalCompany(Milwaukee，WI)。
通过参考实施例和实施例将更好地理解本发明的化合物和方法，它们仅是说明性的，而不是对本发明范围的限制，本发明的范围如所附的权利要求书所限定。
参考实施例下列参考实施例说明用于本发明方法的适宜烷基化剂的制备。如前面所述，烷基化剂提供了Ra表示的基团，该基团可连接于红霉素或酮基内酯衍生物的6-O-位。下列参考实施例并非描述了所有本发明烷基化剂的制备。
参考实施例1烯丙基叔丁基碳酸酯的制备下表1列出了原料和用量。
表1

按照Houlihan等，Can.J.Chem.1985，153中描述的方法制备碳酸酯。在安装有机械搅拌器、氮气入口接管和等压加料漏斗的3-L三颈圆底烧瓶中，加到烯丙醇、二碳酸二叔丁基酯和二氯甲烷并冷却到0℃。将0℃的30％ NaOH水溶液以使内部温度不超过20℃的速率滴加到快速搅拌的溶液中(约1小时)。该反应混合物在20℃搅拌2小时后，进行后处理。
将反应混合物粗品分配到1L水和500mL二氯甲烷中。分离有机层，用1L水和1L饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在真空下浓缩至干，得到约300g黄色油状物。粗产物经分馏(bp 96℃，于70mmHg)纯化，得到无色油状的产物，250.3g(68％)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ5.95(m，1H)，5.3(四个明显四重峰，2H)，4.55(三个明显二重峰，2H)，1.49(s，9H)。13C NMR(CDCl3，75MHz)δ153.1，131.9，118.3，81.9，67.4，27.6.MS(NH3，CI)176(M+NH4)+.C8H14O3的元素分析计算值C，60.73；H，8.92.实测值C，60.95；H，8.96。
参考实施例23-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯的制备步骤(1)3-(3-喹啉基)-2-丙炔-1-醇(化合物(i))的制备往预先用氮气吹扫的干燥的2L三颈烧瓶中加入3-溴喹啉(118.77g，570mmol)，炔丙醇(71.9g，1.28mol，2.25当量)，三乙胺(1500mL)，碘化铜(I)(3.62g，19mmol，0.033当量)和二氯二(三苯基膦)钯(II)(6.67g，9.5mmol)。将所得混合物机械搅拌并加热回流3小时。冷却后，将三乙胺溶液过滤并用三乙胺(300mL)洗涤。然后，减压浓缩滤液，得到固体，将其悬浮在5％ NaHCO3水溶液(600mL)并用乙酸乙酯萃取(1×600mL)。以相同方式处理过滤后剩余的固体(即，悬浮于5％ NaHCO3水溶液中并用乙酸乙酯萃取)。将合并的乙酸乙酯萃取液与硅胶(15g)和脱色炭(3g)搅拌后，滤过硅藻土滤垫。将滤液减压浓缩，得到黄褐色固体，使其在烤箱中于45℃干燥过夜。由此分离3-(3-喹啉基)-2-丙炔-1-醇。92.14g，88.3％产率。MS(Cl)(M+H)+184；NMR(300MHz，CDCl3)δ4.58(s，2H)，4.70(s，宽峰，1H)，7.57(m，1H)，7.70(m，1H)，7.77(d，1H)，8.10(d，1H)，8.10(s，H)，9.05(s，1H)。步骤(2A)顺式-3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇(化合物(ii)的制备往1L三颈圆底烧瓶中加入3-(3-喹啉基)-2-丙炔-1-醇(31.65g，173mmol)，乙醇(550mL)和5％用铅中毒的碳酸钙披钯(Lindlar催化剂，750mg，0.0024当量)。该非均匀混合物的上方用氢气吹扫后，通过一气球向反应物中供给氢。用TLC(1∶1乙酸乙酯/庚烷)监测反应进程。一旦反应完毕(～16小时)，该混合物用氮气吹扫并真空滤过硅藻土滤垫。然后减压浓缩产物滤液。将得到的残余物溶于乙酸乙酯(750mL)并用2N HCl萃取(2×750mL)。然后用2N NaOH调节该酸性产物水溶液的pH至9，再用乙酸异丙基酯反萃取(2×700mL)。然后有机层用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到油状物。该油状产物3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇(29.5g，92.2％)由顺式和反式烯醇的混合物组成，然后将其进行快速色谱(1∶1乙酸乙酯/庚烷)以分离纯净的顺式烯醇。
m.p.81-82℃.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.71(d，J＝2.2Hz，1H)，8.04(dd，J＝8.4，0.9Hz，1H)，7.90(d，J＝2.1Hz，1H)，7.74(m，1H)，7.66(m，1H)，7.51(m，1H)，6.61(br d，J＝11.8Hz，1H)，6.13(dt，J＝11.8，6.5Hz，1H)，4.81(dd，7Hz，2H).13C NMR(75MHz，CDCl3)δ150.8，146.5，135.0，134.4，129.6，129.5，128.7，127.5，126.9，126.9，59.0.C12H11NO的元素分析计算值C，77.81；H，5.99；N，7.56.实测值C，77.89；H，6.03；N，7.49。步骤(2B)3-(3-喹啉基)反-2-丙烯-1-醇的制备往干燥的250-mL三颈夹套圆底烧瓶中加入二(2-甲氧基乙氧基)氢化铝钠(Red-Al，70％ wt甲苯溶液，11.0g，38.1mmol，1.39当量)和无水THF(20mL)。通过等压滴料漏斗，往该预先冷却(0-2℃)和磁力搅拌下的溶液中加入3-(3-喹啉基)-2-丙炔-1-醇(5.0g，27.32mmol)的THF(50mL)溶液。使温度升高不超过15℃。添加完毕(20分钟)后，使该混合物温热到室温并搅拌1小时。然后使溶液再冷却到0℃并加入10％硫酸水溶液(20mL)进行骤冷，以使内部温度的升高不超过15℃。然后该双相反应混合物用浓氨水碱化至pH9-10，水层用乙酸乙酯反萃取(2×125mL)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，排外地得到固体形式的3-(3-喹啉基)反-2-丙烯-1-醇4.1g，81％。
1H NMR(300MHz，DMSO-δ6)9.17(d，J＝2.5Hz，1H)，8.39(d，J＝2.5Hz，1H)，8.10-8.0(m，2H)，7.82-7.64(m，2H)，6.90-6.75(m，2H)，5.15(t，J＝5.6Hz，1H)，4.30(dd，J＝5.6，3.0Hz，2H)，3.51(s，1H).13CNMR(75MHz，DMSO-δ6)δ149.3，146.7，133.6，131.8，130.0，129.0，128.7，128.0，127.4，126.9，125.0，61.5.C12H11NO的元素分析计算值C，77.81；H，5.99；N，7.56.实测值C，77.75；H，5.83；N，7.50。步骤(3)3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯的制备往安装有机械机械搅拌器的500-mL三颈圆底烧瓶中加入顺式和反式异构体混合物形式(81％顺式和19％反式)的3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇(13.03g，70.43mmol)、二碳酸二叔丁基酯(16.91g，77.48mmol，1.11当量)，四正丁基硫酸氢铵(742mg，2.17mmol)和二氯甲烷(135mL)。在搅拌下，将该混合物冷却到0-5℃，此时用45分钟加入25％氢氧化钠水溶液(33.3mL)，以使内部温度不超过20℃。待反应完毕(1-4小时)后，该反应混合物用二氯甲烷(50mL)稀释并用水洗涤(2×125mL)。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯18.35g油状物(91.4％)。该产物可进一步经硅胶色谱纯化，得到纯化的无色油状碳酸酯，该产物保持了顺式和反式异构体的初始比例17.50g，87.2％。
顺式异构体m.p.57-58℃.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.78(d，J＝2.2Hz，1H)，8.07(m，明显的双峰，J＝8.5Hz，1H)，7.93(d，J＝2.0Hz，1H)，7.78(dd，J＝8.1，1.0Hz，1H)，7.68(m，1H)，7.52(m，1H)，6.76(br d，J＝11.7Hz，1H)，6.05(dt，J＝11.8，6.6Hz，1H)，4.88(dd，J＝6.6，1.7Hz，2H)，1.47(s，9H).13C NMR(75MHz，CDCl3)δ153.1，150.8，147.0，134.7，129.5，129.3，129.1，128.8，127.8，127.4，126.9，82.4，63.3，27.6.C17H19NO3的元素分析计算值C，71.56；H，6.71；N，4.91.实测值C，71.31；H，6.62；N，4.91。
反式异构体m.p.55-56℃.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.00(d，1H)，8.08(br dd，1H)，7.80(dd，1H)，7.72-7.65(m，1H)，7.58-7.51(m，1H)，6.83(br d，J＝16.2Hz，1H)，6.52(dt，J＝16.2，5.9Hz，1H)，4.80(dd，J＝5.9，1.1Hz，1H)，1.52(s，9H).13C NMR(75MHz，CDCl3)δ153.2，149.1，147.6，132.9，130.6，129.4，129.2，129.0，127.8，126.9，1 25.4，82.4，67.0，27.7.C17H19NO3的元素分析计算值C，71.56；H，6.71；N，4.91.实测值C，71.59；H，6.81；N，4.80。
参考实施例3顺式-3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯的制备步骤(1)顺式-3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇的制备往安装有热电偶的干燥的3000-mL三颈夹套烧瓶中加入3-(3-喹啉基)-2-丙炔-1-醇(76g，415.3mmol)，5％Pd/CaCO3(1.52g)和3，6-二硫杂-1，8-辛二醇(0.76g)。然后加入3A乙醇(1125mL)并在室温(19℃)下剧烈搅拌所得混合物。用氢气吹扫该混合物的上方，然后抽空。将该吹扫和抽空过程重复两次。在反应混合物上方放置氢气球(0.32psi)，用HPLC分析检测还原进程。25小时后，终止反应。
使该混合物滤过硅藻土滤垫，滤饼用3A乙醇洗涤。减压浓缩滤液。残余物溶于甲基异丁基酮(MIBK，400mL)并使该溶液通过助滤剂(38g)短柱。用MIBK(125mL)漂洗烧瓶和滤饼直至滤液呈无色。将合并的滤液浓缩至200mL后，用MIBK(270mL)稀释，此时顺-3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇开始结晶。然后，该结晶溶液在搅拌下用庚烷(270mL)研制，而后在0℃冷却过夜。产物用冷MIBK/庚烷(3∶4，150mL)洗涤。湿的滤饼在真空烤箱中于50℃干燥6小时，得到顺-3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇(50.0g，70.0％产率，按原料的效能校正的)。经HPLC测定纯度为98.9％。步骤(2)顺式-3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇的Boc保护在三颈圆底烧瓶中，将固体顺式-3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇(10.0g，54.1mmol)，二碳酸二叔丁基酯(17.6g，80.6mmol，1.5当量)，甲苯(43g)和四正丁基硫酸氢铵(0.68g，2.0mmol)混合并搅拌(机械地)。用10分钟往该搅拌的混合物中缓慢地加入氢氧化钠水溶液(28g H2O和7.0g NaOH)。经1.5小时，使该双相混合物的温度温热到18-31℃并使其在室温下搅拌过夜。然后该反应物用甲苯(33ml)和水(19ml)稀释。混合物分层(水层pH12)，有机层顺序用水(1×28ml)和5％氯化钠水溶液(1×28ml)洗涤。该有机层再用氯化钠水溶液(7g NaCl，28gH2O)洗涤后，减压浓缩，浴温为50℃。将得到的油溶于庚烷(100g)并通过旋转蒸发浓缩(2X)。所得残余物溶于55ml庚烷中以使其结晶。在-5℃下收集产物，用冷的庚烷(10ml)洗涤并在室温真空干燥，得到近白色固体(13.6g，88.3％)。经HPLC测定其纯度为98.7％。
参考实施例4碳酸烯丙基异丙基酯的制备将异丙醇(2-丙醇，31.0ml，24.3g，0.4mol，1.1当量)、吡啶(64.0ml，62.6g，0.79mol，2.1当量)和500ml甲基叔丁基醚(MTBE)加到适宜的反应容器中并冷却到0℃。用10分钟时间加入氯甲酸烯丙基酯(40.0ml，45.4g，0.38mol，1.0当量)在100ml MTBE中的溶液。使反应混合物在0℃搅拌30分钟后，温热到室温(～25℃)并搅拌过夜(～16小时)。将该反应混合物粗品滤过1-英寸硅藻土短柱(短柱然后用200ml MTBE洗涤)，合并的有机层用200mL 20％浓盐酸洗涤两次，用200mL蒸馏水洗涤三次，经硫酸镁干燥并真空浓缩至干，得到37.4g(69％)的无色油状碳酸酯粗品。将该实验得到的粗品油与早先的实验得到的油合并，作为一批产物一起经真空蒸馏(b.p.74-76℃，于48-53mmHg压力)纯化。所有的光谱数据均与所论述的结构相一致。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.95(m，1H)，5.30(m，2H)，4.89(明显七重峰，1H)，4.61(m，2H)，1.3(d，6H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ154.2，131.6，118.1，71.5，67.7，21.4，MS(DCI-NH3)145(M+H)+。
参考实施例5(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯的制备往-10℃的搅拌下的喹啉-3-甲醛(3g，19.1mmol)的四氢呋喃(15mL)溶液中加入-5--10℃的乙烯基氯化镁的THF溶液(11.3mL，15wt.％，d＝0.975)。添加完毕后，HPLC显示反应达到完全。通过套管将该棕色溶液转移到-10--15℃的搅拌的二碳酸二叔丁基酯(4.4g，22.9mmol)的THF(10mL)溶液中。转移后，使该反应混合物在0-5℃温热1小时。该混合物再次冷却到-10℃，用60mL甲基叔丁基醚稀释后，用低于5℃的柠檬酸(4.8g，22.9mmol)的水(27mL)溶液处理。搅拌5小时后，分离有机层，用30mL 7％碳酸氢钠水溶液、2×30mL水洗涤并过滤。滤液真空浓缩，得到浅棕色油(5.5g)。粗产物通过柱色谱(硅胶，20∶80 EtOAc/己烷)得到纯净的碳酸酯(4.3g)。产率为79.0％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.93(明显的双峰，1H)，8.15(m，2H)，7.84(明显的双双峰，1H)，7.76(明显双三峰，1H)，7.58(明显双三峰，1H)，6.35(m，1H)，6.15(m，1H)，5.4(m，2H)，1.48(s，9H).13C NMR(75.5MHz，CDCl3)δ149.8，147.9，135.3，134.3，131.5，129.8，129.3，128.0，127.6，127.0，90.4，82.9，77.1，27.8.MS(DCI，NH3)286(M+H+).C17H19NO3的元素分析计算值C，71.56；H，6.71；N，4.91.实测值C，71.32；H，6.75；N，4.82。
参考实施例6烯丙基N，N-二异丙基氨基甲酸酯的制备将二异丙基胺(39.6mL，3当量)和200mL甲基叔丁基醚(MTBE)加到适宜的反应溶器中并冷却到0℃。用60分钟时间加入氯甲酸烯丙基酯(40.0mL，45.4g，0.38mol，1.0当量)在100mL MTBE中的溶液。反应混合物迅速变稠，再加入另外200mL MTBE。使该反应混合物温热到室温并再搅拌12小时，此时滤过1-英寸硅藻土短柱，该短柱用100mL 0.1N HCl洗涤两次，用100mL蒸馏水洗涤一次，经硫酸镁干燥，减压浓缩得到14.37g无色的油(83％)(经GC测定纯度＞97％)。该物质的纯度足以使其无需进一步纯化即可使用，其光谱数据与该结构相一致。
1H NMR(400MHz，d5-吡啶)δ6.02(m，1H)，5.30(dq，1H)，5.15(dq，1H)，4.72(m，2H)，3.95(br s，2H)，1.18(d，12H).13C NMR(100MHz，d5-吡啶)δ155.0，134.3，116.7，65.1，45.8(br)，20.6(br).MS(DCI-NH3)186(M+H)+。
实施例本发明公开的实施例描述了制备6-O-取代的红霉素和酮基内酯衍生物的方法。这些实施例旨在提供实现本发明方法的方式的实施例，而非以任何方式构成对本发明范围的限制。
实施例1用烯丙基叔丁基碳酸酯制备6-O-烯丙基-2＇，4″-O-二-三甲基甲硅烷基红霉素A-9-(O-异丙氧基-环己基缩酮)肟(化合物(III)，反应方案1)步骤(1)2＇，4″-二-三甲基甲硅烷基红霉素A-9-(O-异丙氧基环己基缩酮)肟的制备上述化合物按照美国专利4,990,602中描述的方法制备。步骤(2)6-O-烯丙基-2＇，4″-O-二-三甲基甲硅烷基红霉素A-9-(O-异丙氧基环己基缩酮)肟的制备将2＇，4″-O-二(三甲基甲硅烷基)红霉素A 9-(O-异丙氧基环己基缩酮)肟)(30.0g，29.0mmol，1当量)，烯丙基叔丁基碳酸酯(6.65g，1.45当量)，乙酸钯(33mg，0.005当量)，三苯基膦(330mg，0.043当量)和150mL THF加到适宜的反应容器中。将该反应混合物抽真空并以氮气吹扫数次后，加热回流19小时。冷却到室温(～25℃)后，加入～3.0mL市售漂白剂溶液(5.25％ NaOCl)并将该反应混合物快速搅拌30分钟。过滤该反应混合物除去块状白色沉淀并真空浓缩至干，得到几乎定量回收的产物(～31g)。
该粗产物(经HPLC测定纯度为87％)于80℃在300mL 10∶1异丙醇/庚烷中结晶纯化。冷却到室温后，过滤收集固体产物，干燥后得到23.94g无色固体(77％)(经HPLC测定纯度＞99％)。
mp221-223℃.IR(KBr)3528，3411，2968，2938，1735，1461，1455，1381，1365，1248，1170，1114，1095，1008，897，和840cm-1.1HNMR(400MHz，CDCl3)δ5.88(m，1H)，5.11(m，1H)，5.05-5.08(m，2H)，5.03(m，1H)，4.84(d，J＝4.7Hz，1H)，4.43(d，J＝6.9Hz，1H)，4.21-4.26(m，2H)，4.02-4.15(m，2H)，3.93(dd，J＝5Hz，1H)，3.89(dd，J＝2.2，1.51Hz，1H)，(m，4H)，3.66(m，1H)，3.30(s，3H)，3.23(s，1H)，3.16(d，J＝12.4Hz，1H)，3.12-3.18(m，1H)，2.88(m，1H)，2.70(明显的四重峰，m，1H)，2.53(br m，1H)，2.37(明显的双峰，1H)，2.24(br s，6H)，1.92-2.03(m，3H)，1.44-1.90(in，11H)，1.43(s，3H)，1.14-1.28(m，23H)，1.08(明显的三重峰，6H)，0.98(d，J＝7.2Hz，3H).0.85(t，J＝7.6Hz，3H)，0.15(s，9H)，0.10(s，9H).13C NMR(100MHz，CDCl3)δ175.5，169.3，137.0，114.8，103.9，102.4，96.4，80.7，79.7(6-C)，78.3，77.8，76.7，74.0(12-C)，73.4，73.2，70.0(11-C)，67.2，65.3，65.2，65.1，62.8，49.6，44.8，40.9，39.2，37.2，35.7，34.5，33.4，33.2，29.5，26.3，25.5，25.2，24.4，24.3，22.9，22.1，21.8，21.5，21.1，19.3，19.0，16.1，15.8，14.8，10.6，9.6，0.9，0.7.MS(DCI，NH3)1073(M+H+).C55H104N2O14Si2的元素分析计算值C，61.53；H，9.79；N，2.61.实测值C，61.61；H，9.73；N，2.52。
实施例2用烯丙基异丙基碳酸酯制备6-O-烯丙基2＇，4″-二-O-三甲基甲硅烷基-红霉素A 9-(O-异丙氧基环己基缩酮)肟按照实施例1步骤(2)的方法以80％的粗产物收率制备该标题化合物，不同的是用1.8摩尔当量的参考实施例4制备的烯丙基异丙基碳酸酯代替烯丙基叔丁基碳酸酯。
实施例36-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-2＇，4″-二-O-三甲基甲硅烷基-红霉素A 9-(O-异丙氧基环己基缩酮)肟的制备按照实施例1步骤(2)的方法以92％的粗产物收率制备该标题化合物，不同的是用1.2摩尔当量的参考实施例5制备的1-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯代替烯丙基叔丁基碳酸酯。
1H NMR(400MHz，CDCl3)9.06(明显的双峰，1H)，8.30(明显的双峰，1H)，8.04(明显的双峰，1H)，7.78(明显的双双峰，1H)，7.61(明显的双重双双峰，1H)，7.48(明显的双重双双峰，1H)，6.62-6.50(m，2H)，5.19(明显的双双峰，1H)，4.80(明显的双峰，1H)，4.56-4.39(m，2H)，4.28-4.24(m，2H)，4.13-4.01(m，2H)，3.83-3.65(m，5H)，3.30-3.15(m，6H)，2.91-2.82(m，1H)，2.75-2.70(m，1H)，2.65-2.51(m，1H)，2.35-2.20(m，7H)，2.10-1.02(m，50H)，0.89-0.82(m，4H)，0.16(s，9H)，0.12(s，9H).13CNMR(100MHz，CDCl3)175.8，169.3，150.5，147.4，132.4，131.6，128.4，128.0，126.5，126.3，103.9，102.4，96.5，80.7，79.9，78.5，77.6，77.0，73.9，73.4，73.1，70.0，67.2，65.2，65.1，64.4，62.8，49.5，44.9，40.8，39.6，37.3，35.6，34.3，33.5，33.4，26.3，25.5，24.3，24.2，22.9，22.7，22.0，21.8，21.6，21.2，19.4，18.9，16.1，15.6，14.7，10.9，9.5，0.9，0.7.C64H109N3O14Si2·H2O的元素分析计算值C，63.07；H，9.18；N，3.45.实测值C，63.02；H，9.07；N，3.33。
实施例4使用烯丙基-N，N-二异丙基氨基甲酸酯制备6-O-烯丙基2＇，4″-二-O-三甲基甲硅烷基-红霉素A 9-(O-异丙氧基环己基缩酮)肟按照实施例1步骤(2)的方法以71％的粗产物收率制备该标题化合物，不同的是用2.9摩尔当量的参考实施例6制备的N，N-二异丙基氨基甲酸酯代替烯丙基叔丁基碳酸酯。
实施例56-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12-环状氨基甲酸酯-3-酮基红霉素A的制备(化合物(IV)，反应方案1)步骤(1)红霉素A 9-肟2＇，4″，9-三苯甲酸酯的制备将固体红霉素A肟(2.006kg，2.677mol)加到50-L圆底烧瓶(安装有桨式搅拌器，热电偶和氮气入口)中并溶于乙酸异丙基酯(IPAC，15.5kg)中。浓缩IPAC，同时间歇性地加入四氢呋喃(THF，45.6kg)，得到终体积为22L(K.F.＝5.3mol％)。一次性地往烧瓶中加入二甲氨基吡啶(DMAP，0.3282kg，2.67mol)，三乙胺(1.198kg，11.84mol)和苯甲酸酐(2.547kg，11.269mol)并在25℃搅拌40小时。将反应混合物冷却到0-5℃，以使内部温度保持＜10℃的速率加入N，N-二甲基乙二胺(0.427kg，相对于测定的Bz2O的1.5当量)(一般约40分钟)。添加完毕后，将该混合物在5℃搅拌大约1小时直至没有苯甲酸酐残留。将该反应混合物转移到100-L容器中，用甲基叔丁基醚(MTBE，20L)稀释。有机层用5％ KH2PO4溶液洗涤(2×20kg)。有机层再用7％NaHCO3溶液(20kg)，和27％ NaCl溶液(10kg)洗涤。真空浓缩有机层除去THF，同时间歇性地加入IPA(16L)，至终体积为12L(NMR显示没有THF存在)。在良好的搅拌下使浆状物温热到45℃并搅拌1.5小时。使浆状物冷却到-5℃并搅拌1.5小时。过滤产物并用IPA洗涤(预冷至-10℃的，3×1L)。将该三苯甲酸酯转移到盘中并在通入氮气流下，于50℃真空干燥。产率为2.323kg(82％)。
IR 1722，1450，1379，1339，1262cm-1；1H NMR(CDCl3)δ0.75(d，3H，J＝7.7)，0.82(t，3H，J＝7.3)，0.90(d，3H，J＝5.1)，1.10(s，3H)，1.17-1.18(3H，m)，1.18(3H，d，J＝6.9)，1.21(3H，s)，1.31(3H，d，J＝7.0)，1.38(3H，s)，1.41(1H，m)，1.55(2H，m)，1.73(1H，dd，J＝5.2，15.3)，1.76(1H，m)，1.87(1H，m)，1.92-1.96(1H，m)，2.34(6H，s)，2.76-2.81(2H，m)，2.97(1H，bs)，3.22(1H，bs)，3.46(1H，d，J＝6.7)，3.52(3H，s)，3.79-3.86(3H，m)，3.87(1H，dd，J＝1.3，9.2)，4.39-4.44(2H，m)，4.91(1H，d，J＝9.8)，4.93(1H，d，J＝7.6)，5.02(1H，d，J＝4.9)，5.10(1H，dd，J＝3.6，10.4)，5.15(1H，dd，2.4，10.7)，7.45-7.50(6H，m)，7.56-7.62(3H，m)，8.00-8.07(5H，m)；13C(CDCl3)δ179.4，175.1，166.1，165.4，163.8，133.3，133.2，132.7，130.7，129.9，129.6，129.5，129.0，128.5，128.4，128.2，100.2，95.7，83.6，79.2，78.8，74.7，74.3，73.0，72.3，69.8，67.7，63.7，63.5，49.6，44.5，40.9，39.0，37.3，35.3，34.6，3 1.8，28.6，26.4，25.3，21.3，21.2，21.1，18.5，18.2，16.5，15.7，14.9，10.6，9.3.MS(ESI)m/z 1061(MH+).C58H80N2O16的元素分析计算值C，65.64；H，7.60；N，2.64；O，24.12.实测值C，65.37；H，7.42；N，2.52；O，24.38.；m.p.＝149-152℃。步骤(2)用3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯对红霉素A肟三苯甲酸酯烷基化和肟的脱保护将固体红霉素A肟三苯甲酸酯(1000.1g，0.942mol)加到10L旋转蒸发烧瓶中并溶于THF(4.066kg)。将THF真空蒸发，留下泡沫状的油。使该泡沫物再次溶于THF(3.427kg)并再次蒸发。将所得物质溶于THF(3.500kg)并转移到安装有回流冷凝器、氮气进口管、加热罩和机械搅拌装置的12-L圆底烧瓶中。使该容器脱氧。一次性地加入固体3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇，碳酸叔丁基酯(308.9g，1.08mol，1.15当量)后，加入Pd2(dba)3(8.61g，0.0094mol，0.01当量)和dppb(8.02g，0.018mol，0.02当量)。将该反应混合物加热回流(65℃)大约30分钟直至原料被消耗掉。
使反应混合物冷却到15℃。加入异丙醇(4.0L)，然后立即加入2N NaOH(234mL，0.234mol，0.5当量)。为促进水解完成，可视需要加入另外的氢氧化钠溶液。将该反应混合物倾入MTBE(12L)和7％碳酸氢钠水溶液(8L)中并搅拌4分钟。分层，形成一黑色界面。分离各层，除去该界面和水层。有机层用23％ NaCl水溶液(8L)洗涤，分离两层，再次除去黑色界面和水层。使用45℃的加热浴，在旋转蒸发仪上除去溶剂。使残留的泡沫物溶于THF(4L)并经旋转蒸发浓缩。分离产物，使所需产物呈无水的泡沫形式，重1262.1克。
IR(膜，cm-1)1725，1598，1487，1379，1342，1264；1H NMR(CDCl3)δ0.77(3H，d，J＝7.3)，0.79(3H，t，J＝7.3)，0.99(3H，d，J＝5.8)，1.05(3H，d，J＝7.0)，1.06(3H，s)，1.14(3H，d，J＝7.0)，1.16(3H，d，J＝7.0)，1.21(3H，s)，1.24(3H，d，J＝6.1)，1.37-1.43(3H，m)，1.50-1.54(1H，m)，1.56(3H，s)，1.71(1H，dd，J＝5.2，15.2)，1.74-1.78(1H，m)，1.89-1.94(1H，m)，1.99-2.04(1H，m)，2.35(6H，s)，2.47(1H，d，J＝15.0)，2.60(1H，q，J＝7.0)，2.81-2.87(1H，m)，2.96-3.02(1H，m)，3.55(3H，s)，3.67(1H，dd，J＝1.2，9.8)，3.78(1H，d，J＝5.8)，3.84-3.89(1H，m)，3.92-3.98(1H，m)，4.02(1H，dd，J＝7.0，11.3)，4.12(1H，dd，J＝3.8，11.3)，4.53-4.58(1H，m)，4.69(1H，s)，4.93(1H，d，J＝9.8)，5.01(1H，d，6.6)，5.12(1H，dd，J＝8.3，10.7)，5.25(1H，dd，J＝2.1，10.7)，6.17(1H，d，J＝16.1)，6.36(1H，ddd，J＝4.9，7.0，16.1)，7.40(1H，t，J＝8.2)，7.42-7.50(5H，m)，7.55-7.63(3H，m)，7.72(1H，d，J＝1.8)，8.01-8.05(5H，m)，8.80(1H，d，J＝2.0)，10.59(1H，bs)；13C(CDCl3)δ174.7，169.0，166.2，165.5，149.4，146.3，133.2，132.6，132.5，131.1，131.0，130.6，130.0，129.7，128.5，128.4，128.3，128.2，128.1，127.8，126.3，126.2，100.0，96.2，79.5，79.4，78.9，78.8，76.8，74.0，73.0，72.7，70.6，67.3，64.7，63.8，63.7，49.5，44.4，40.9，38.2，36.6，35.4，32.8，31.8，25.5，21.4，21.2，19.0，18.5，16.5，16.0，15.2，10.7，9.5.MS(ESI)m/z 1124(MH+).C63H85N3O15C，67.30；H，7.62；N，3.74；O，21.34.实测值C，67.02；H，7.61；N，3.59；O，20.99。步骤(3)红霉素A-6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-9-酮基-2＇，4″-二苯甲酸酯将红霉素A-6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-9-肟二苯甲酸酯固体(800g，78％效力)(由上步骤(2)获得)，L-酒石酸(0.280kg)，NaHSO3(0.2118kg)，H2O(3.38kg)和THF(1.2L)加到2加仑容器中。经过30分钟使该混合物加热到90℃并在充分搅拌下于85-90℃保持90分钟。借助1.6L和0.5L水将该反应混合物转移到30-L容器中，进一步用乙酸乙酯(EtOAc，2L)稀释。搅拌下，加入25％ K2CO3溶液(3.6L)。在简单搅拌下，该混合物进一步用MTBE(2L)稀释，放置直至形成两相。弃去底部的水层。经测定有机层含517.8g(84％)产物。将产物层浓缩至终体积约3L，其间间歇性地顺序加入EtOAc(1.2L)，然后是无水乙醇(EtOH，8L)。将该浆状物冷却到5℃，一旦上清液中酮的含量＜8mg/mL，就进行过滤。固体用冷EtOH洗涤(-10℃；3×200mL)后，转移到干燥的盘中并在通入氮气流下，于40℃真空干燥2天。所得结晶固体重485.4g。
IR 1722，1694，1265，1126，1070cm-1；1H NMR(CDCl3)δ0.79(3H，d，J＝7.6)，0.84(3H，t，J＝7.4)，0.95(3H，d，J＝6.1)，1.03(3H，d，J＝6.8)，1.04(3H，s)，1.14(3H，d，J＝7.0)，1.22(3H，d，J＝4.3)，1.23(3H，s)，1.24(3H，d，J＝4.0)，1.37-1.43(1H，m)，1.49(3H，s)，1.57(1H，d，J＝14.0)，1.75-1.79(3H，m)，1.87-1.92(1H，m)，1.96-2.02(1H，m)，2.36(6H，s)，2.50(1H，d，J＝15.0)，2.59-2.64(1H，m)，2.85-2.91(1H，m)，2.99(1H，q，J＝6.4)，3.00-3.05(2H，m)，3.54(1H，bs)，3.56(3H，s)，3.67(1H，s)，3.77(1H，dd，J＝1.9，9.7)，3.81(1H，d，J＝5.7)，3.92-3.98(1H，m)，4.02(1H，dd，J＝7.6，11.0)，4.19(1H，dd，J＝4.0，10.8)，4.47-4.52(1H，m)，4.95(1H，d，J＝9.4)，5.02(1H，d，J＝7.6)，5.05(1H，d，J＝4.9)，5.08-5.12(1H，m)，5.16(1H，dd，J＝2.4，11.0)，6.52-6.59(1H，m)，6.63(1H，d，J＝16.2)，7.44-7.52(5H，m)，7.58-7.63(3H，m)，7.79(1H，dd，J＝1.0，8.6)，8.02-8.06(5H，m)，8.27(1H，d，J＝1.8)，9.13(1H，d，J＝2.1).13C(CDCl3)δ220.2，175.1，166.1，165.4，150.2，147.4，133.4，132.8，132.7，130.8，130.2，129.8，129.6，129.1，128.8，128.7，128.4，128.3，128.2，127.9，126.4，99.9，96.2，80.0，79.2，78.8，78.7，76.5，74.2，73.0，72.5，68.7，67.9，67.4，64.9，63.8，63.7，58.3，49.5，45.5，44.4，40.9，38.1，37.7，37.4，35.4，31.8，25.6，21.3，21.2，21.1，21.0，18.6，18.3，16.3，12.2，10.7，9.5.MS(ESI)m/z 1109(MH+).C63H84N2O15C，68.21；H，7.63；N，2.53；O，21.63；实测值C，67.98；H，7.50；N，2.39；O，21.88.m.p.＝214-216℃。步骤(4)红霉素A 6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12-环状氨基甲酸酯2＇，4″-二苯甲酸酯将固体红霉素A 6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12-二醇2＇，4″-二苯甲酸酯(892.2g，96.6％效力，0.778mol)加到20-L旋转蒸发仪的烧瓶中，溶于THF(5.5L)。真空蒸发THF至大约25％原始体积。将该残余物再溶于THF(5.0L)并再次蒸发为此次蒸发前体积的大约25％。将物料溶于THF(3.5L)并转移到安装有等压加料漏斗、氮气入管和机械搅拌装置的12-L烧瓶中。加入DMF(1.25L)并搅拌得到的非均质悬浮液。一次性地加入固体CDI(495.6g.3.05mol)。用65分钟时间加入六甲基二硅氮烷钠溶液(NaHMDS，1.0M THF溶液，1071mL，1.071mole，1.3当量)并使内部温度保持低于33℃。将反应物在室温搅拌18小时直至HPLC分析表明中间体11，12-环状碳酸酯被完全消耗(＜1面积％)。
搅拌下，使12-酰基咪唑溶液冷却到-15℃并通过一根插入表面下的进气管通入氨气。使反应物在低于-5℃下保持1.5小时，直至HPLC表明不足1面积％的12-酰基咪唑存在。
使反应混合物的温度升至室温。将叔丁醇钾溶液(1M THF，918mL，0.918mol)加到该反应物中，同时使反应混合物温度保持低于35℃。根据HPLC分析表明环状氨基甲酸酯原料和C-10甲基差向异构体完全消失(＜1面积％)，表明在加入叔丁醇钾(KOtBu)后1.5小时反应达到完全。将该反应混合物倾入50-L装有乙酸异丙基酯(iPrOAc，13.5L)和5％ KH2PO4水溶液(13.5L)的分液漏斗中，搅拌，分层。有机层用另外5％ KH2PO4水溶液(13.5L)洗涤，然后用5％ KH2PO4(6.7L)洗涤。将水层合并并用iPrOAc(6.7L)萃取。合并的有机层用7％NaHCO3水溶液(13.5L)洗涤，然后用23％ NaCl水溶液(10L)洗涤。浓缩该有机溶液，使产物结晶。加入异丙醇(4L)并使该混合物浓缩至大约25％的初始体积。加入异丙醇(3.4L)并将该悬浮液在45℃搅拌30分钟后，冷却到4℃并在该温度下搅拌2小时。过滤固体产物，用1L冷的(+2℃)iPrOH洗涤。将产物在真空烤箱中于+55℃干燥48小时，得到793.2克白色粉末。终产物具有96.5％的效力，765.4克，由红霉素A-6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12-二醇2＇，4″-二苯甲酸酯计算的产率为87％。
IR 1771.3，1722，1453，1265，1169，1107cm-1；1H NMR(CDCl3)δ0.72(3H，t，J＝7.5)，0.78(3H，d，J＝7.7)，0.95(3H，d，J＝6.1)，1.08(3H，d，J＝6.7)，1.14(3H，d，J＝7.3)，1.21-1.24(9H，m)，1.31(3H，s)，1.36-1.40(2H，m)，1.47(3H，s)，1.58(1H.dd，J＝1.5，15.0)，1.72-1.86(5H，m)，2.36(6H，s)，2.51(1H，d，J＝15.0)，2.59-2.63(1H，m)，2.81(1H，m)，2.88(1H，q，J＝7.0)，3.01(1H，m)，3.56(3H，s)，3.71(1H，s)，3.75(1H，d，J＝6.1)，3.85(1H，dd，J＝1.5，8.8)，3.99(1H，dd，J＝7.6，11.0)，4.14(1H，dd，J＝6.1，11.0)，4.51(1H，m)，4.88(1H，dd，J＝3.0，9.5)，4.99(1H，d，J＝9.7)，5.05(1H，d，J＝4.9)，5.09(1H，dd，J＝7.7，10.7)，5.54(1H，s)，6.40(1H，ddd，J＝6.4，7.6，16.9)，6.63(1H，d，J＝16.2)，7.45-7.55(5H，m)，7.58-7.62(3H，m)，7.81(1H，d，J＝8.2)，8.03-8.07(5H，m)，8.23(1H，d，J＝1.9)，9.06(1H，d，J＝2.1).13C(CDCl3)δ217.9，175.8，170.6，166.1，165.3，157.9，149.9，147.6，133.4，132.7，132.4，130.7，129.9，129.8，129.7，129.6，129.1，128.9，128.4，128.3，128.2，128.1，128.0，126.6，100.0，96.0，83.7，79.6，79.4，78.7，78.0，76.0，73.0，72.4，67.5，64.9，63.7，57.7，49.6，45.2，44.6，40.8，39.2，38.1，37.3，35.2，31.9，22.3，21.8，21.4，21.2，21.0，18.5，18.4，15.5，13.7，13.4，10.6，9.4.MS(ESI)m/z 1134(MH+).C64H83N3O15)1/2H2OC，67.16；H，7.41；N，3.67；O，21.69；实测值C，67.18；H，7.24；N，3.45；O，21.71.m.p.＝166.5-168℃。步骤(5)红霉素A 6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12-环状氨基甲酸酯-3-羟基-2＇-苯甲酸酯的制备将6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12-环状氨基甲酸酯二苯甲酸酯(750.0g，96.5％效力，0.639mol)加到安装有热电偶、氮气入管和机械搅拌装置的12-L圆底烧瓶中。加入EtOH(3.64L)和2N HCl(3.64L)并加热到45℃直至HPLC检测不到原料的存在。冷却到室温后，将反应混合物倾入10L MTBE和10L水中，搅拌，分层。含有产物的水层(底部的)用6L iPrOAc稀释并在搅拌下用30％ K2CO3(4.2kg)溶液处理同时充分搅拌。将该有机溶液浓缩为浆状物，加入5LiPrOAc，并进一步浓缩，最终产物重766.2g。
IR 1771.3，1727，1456，1274，1159，1119cm-1；1H NMR(CDCl3)δ0.75-0.81(6H，m)，1.08(9H，m)，1.25(3H，d，J＝6.7)，1.32(3H，s)，1.36-1.40(1H，m)，1.39(3H，s)，1.42-1.46(2H，m)，1.71-1.77(2H，m)，1.80-1.86(1H，m)，1.98-2.01(1H，m)，2.29(6H，s)，2.53-2.59(H，m)，2.63-2.69(1H，m)，2.85(1H，q，J＝6.4)，2.91(1H，dt，j＝4.0，12.0)，3.37-3.41(1H，m)，3.53-3.57(2H，m)，3.72(1H，s)，3.82(1H，d，j＝1.8)，3.95-3.99(2H，m)，4.88(1H，d，J＝7.6)，5.04(1H，dd，J＝7.6，10.4)，5.11(1H，dd，J＝2.7，10.4)，5.47(1H，s)，6.37(11H，dt，J＝16，6.1)，6.65(1H，d，J＝16.2)，7.44-7.46(2H，m)，7.51(1H，t，J＝7.0)，7.57(1H，t，J＝7.0)，7.65(1H，s)，7.82(1H，d，J＝6.7)，8.07(1H，d，J＝6.7)，8.09(2H，dd，J＝1.5，7.0)，8.22(1H，d，J＝1.8)，9.06(1H，d，J＝2.1).13C(CDCl3)δ217.5，175.3，170.6，165.4，158.1，149.5，147.3，132.8，132.7，130.6，129.8，129.3，129.2，128.9，128.7，128.4，128.2，128.1，126.9，99.3，83.8，80.6，79.0，77.4，75.5，72.1，68.8，67.6，64.0，63.2，58.1，45.5，43.9，40.8，38.4，37.2，36.0，32.1，22.3，21.8，21.4，21.0，20.1，18.3，15.3，13.8，13.3，10.4，7.9.MS(ESI)m/z 872(MH+).C49H65N3O11的元素分析理论值C，67.49；H，7.51；N，4.82；实测值C，67.11；H，7.38；N，4.60.m.n.＝224-226℃。步骤(6)红霉素A 6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12-环状氨基甲酸酯-3-酮基-2＇-苯甲酸酯的制备将N-氯琥珀酰亚胺(NCS，117.2g，880.4mmol)加到安装热电偶、氮气接入管、机械搅拌器和加料漏斗的的5-L三颈圆底烧瓶中。加入CH2Cl2(740mL)并将该混合物冷却到-15℃(±5℃)。加入二甲亚砜(63.68g，73.6mL，1.026mol)，同时使内部温度保持在-15℃(±5℃)。添加完毕后，将该反应混合物再搅拌15分钟。将固体红霉素A 6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12-氨基甲酸酯-3-羟基-2＇-苯甲酸酯(734.7g，614mmol，72.8％效力)溶于1.91L CH2CL2中并将其加入，同时使内部温度保持在-15℃(±5℃)。添加完毕后，将该反应混合物搅拌1小时。加入Et3N(70.6g，698mmol)，同时使内部温度保持在-15℃(±5℃)。将所得混合物在-10℃(±5℃)搅拌1小时。将冷却的反应混合物倾入6.7L EtOAc中并加入2.7L 0.5N NaOH水溶液。搅拌并分离两层。顶部的含产物的层用5％ NaCl水溶液(3.3L)洗涤，然后用27％NaCl(3.3L)洗涤。将该有机溶液浓缩得到浆状物，分次加入MTBE(3L)并浓缩至大约1.5L。加入己烷(1.4L)并将该悬浮液在45℃搅拌30分钟。使悬浮液冷却到室温并搅拌直至经HPLC分析上清液中酮基内酯的浓度＜5mg/mL。将该浆状物过滤并用1∶1己烷/MTBE洗涤(4×300mL)。使产物在真空烘箱中于35℃干燥48小时至恒重，得到537.8克白色粉末(97％产率)。
IR 1771.3，1743，1719，1697，1456，1267.7，1172，1104cm-1；1HNMR(CDCl3)δ0.76(3H，t，J＝7.4)，1.01(3H，d，J＝7.9)，1.09(3H，d，J＝6.7)，1.12(3H，d，J＝7.0)，1.21(3H，d，J＝6.1)，1.36(3H，d，J＝16.9)，1.39(3H，s)，1.44(3H，s)，1.42-148(1H，m)，1.54(1H，dd，J＝2.5，14.7)，1.63(1H，dd，J＝11.7，14.7)，1.75-1.82(1H，m)，1.85(ddd，J＝3.4，7.6，14.5)，2.26(6H，s)，2.59-2.62(1H，m)，2.85-2.89(2H，m)，3.04-3.12(1H，m)，3.59-3.64(1H，m)，3.80-3.86(3H，m)，4.29(1H，d，J＝4.3)，4.59(1H，d，J＝7.6)，4.93(1H，d，J＝3.2，9.4)，5.03(1H，dd，J＝7.6，10.6)，5.49(1H，s)，6.16(1H，dt，J＝16，6.7)，6.56(1H，d，J＝6.56)，7.44(2H，t，J＝7.6)，7.50(1H，t，J＝7.6)，7.56(1H，t，J＝7.6)，7.64(1H，t，J＝7.6)，7.82(1H，d，J＝7.6)，8.02(2H，dd，J＝1.6，7.6)，8.06(1H，d，J＝8.4)，8.15(1H，d，J＝2.1)，9.02(1H，d，J＝2.1).13C(CDCl3)δ217.3，205.4，169.6，165.2，157.6，149.6，147.6，132.8，132.5，130.5，129.9，129.7，129.6，129.2，129.0，128.5，128.3，128.0，126.7，100.7，83.4，78.8，77.5，75.6，72.0，69.2，64.2，63.5，58.1，50.8，45.7，45.0，40.7，38.7，37.2，31.5，22.5，20.9，20.1，18.0，14.4，13.8，13.6，10.6.MS(ESI)m/z 870(MH+).C49H63N3O11的元素分析理论值C，67.64；H，7.30；N，4.83；实测值C，67.37；H，7.21；N，4.53；.m.p.＝150-152℃。步骤(7)6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12-环状氨基甲酸酯-3-酮基红霉素A的制备将结晶红霉素A 6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12-环状氨基甲酸酯-3-酮基-2＇-苯甲酸酯(495.0g，99.8％效力，0.568mol)加到安装有热电偶、氮气接入管和机械搅拌器的5-L三颈圆底烧瓶中。加入MeOH(1.51kg)并将该混合物加热回流直至HPLC检测不到原料(通常为14小时)。冷却到室温后，将反应混合物浓缩至约1L，并用97∶3EtOAc/庚烷(3L)和0.5N HCl(1.35L)稀释，并搅拌。除去底部含产物的层，顶部的有机层进一步用0.5N HCl(0.25L)洗涤。将两个底部的含产物层合并并用97∶3 EtOAc/庚烷(1L)洗涤。该底部的含产物层用EtOAc(2.5L)稀释并用15％(w/v)K2CO3溶液(1.4L)处理并分层。将顶部的含产物层浓缩至大约1.2L并用在100mL庚烷中的10mg结晶6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12-环状氨基甲酸酯-3-酮基红霉素A晶种接种。使产物在室温继续搅拌约1小时以使其形成足够的晶种床。该浆状物进一步用1.7L庚烷稀释并浓缩至大约2L。将产物过滤并用9∶1庚烷/EtOAc洗涤(3×300mL)。使产物在真空烘箱中于42℃干燥24小时至恒重，得到402.0g(92％)白色结晶固体。
IR 1769.7，1746.7，1714，1701，1457，1108，1049cm-1；1HNMR(CDCl3)δ0.79(3H，t，J＝7.5)，1.11(3H，d，J＝6.9)，1.13(3H，d，J＝7.5)，1.17(3H，d，J＝6.1)，1.39(3H，d，J＝6.9)，1.40(3H，d，J＝8)，1.43(3H，s)，1.47-1.53(1H，m)，1.51-1.54(1H，m)，1.66(1H，ddd，J＝1.8，2.0，12.6)，1.69(1H，dd，J＝1.2，14.5)，1.81(1H，d，J＝11.9)，1.84-1.90(1H，m)，2.26(6H，s)，2.44-2.52(1H，m)，2.61-2.67(1H，m)，2.96(1H，q，J＝6.5)，3.16-3.22(2H，m)，3.53-3.57(1H，m)，3.71(1H，dd，J＝7.2，11.9)，3.84(1H，dd，J＝6.5，11.9)，3.91(1H，s)，3.96(1H，q，J＝6.7)，4.36(1H，d，J＝7.3)，4.40(1H，d，J＝4.7)，4.94(1H，dd，J＝3.2，9.1)，5.48(1H，s)，6.16-6.21(1H，m)，6.5(1H，d，J＝16.0)，7.50(1H，t，J＝6.9)，7.63(1H，t，J＝6.9)，7.82(1H，d，J＝8.1)，8.05(1H，d，J＝8.4)，8.17(1H，d，J＝2.1)，9.02(1H，d，J＝2.3).13C(CDCl3)δ217.3，205.3，169.6，157.6，149.7，147.6，132.4，129.9，129.6，129.1，129.0，128.5，128.0，126.7，102.9，83.5，78.7，77.5，76.4，70.2，69.5，65.8，64.2，58.1，50.8，46.2，45.0，40.2，39.0，37.3，28.3，22.6，21.1，20.1，18.0，14.4，14.1，13.6，10.6.MS(ESI)m/z 766(MH+).C42H59N3O11的元素分析理论值C，65.86；H，7.76；N，5.49；实测值C，65.69；H，7.60；N，4.34；.m.p.＝211-213℃。
实施例66-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12环状氨基甲酸酯-3-酮基红霉素A的制备(化合物(IV)，反应方案1)步骤(1)红霉素A 9-肟-2＇，4″，9-三乙酸酯的制备将固体红霉素A肟(100.2g，0.1338mol)加入到2-L圆底烧瓶中并溶于四氢呋喃(400mL)。加入二甲氨基吡啶(2.07gm，0.013mol)和三乙胺(62mL，0.443mol)。将溶液冷却至0-5℃并用半小时的时间加入乙酸酐(39mL，0.413mol)。将溶液搅拌过夜。将溶液冷却至10℃并加入三乙胺(6mL)和乙酸酐(5mL)。将溶液搅拌过夜。将溶液冷却至10℃并加入三乙胺(1.5mL)和乙酸酐(1.5mL)。将溶液搅拌过夜。加入水(50mL)并将该溶液搅拌10分钟。加入乙酸乙酯(300mL)和5％碳酸氢钠(200mL)。分液并将有机层用5％碳酸氢钠(150mL)和15％氯化钠(150mL)洗涤。将有机溶液用硫酸钠干燥然后浓缩得到油(140g)。将该油溶于甲基叔丁基醚(MTBE，350mL)并加热至约40℃。加入庚烷(400mL)并将溶液冷却至室温。将该浆液冷却至5-10℃ 5小时。滤出产物，用庚烷/MTBE(2∶1，110mL)洗涤，然后于50℃干燥18小时。收率108.58g(92％)。MS(APCI)875(M+H+)。步骤(2)将红霉素A肟三乙酸酯用3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇碳酸叔丁酯烷基化和脱保护将红霉素A肟三乙酸酯(40.0g，45.7mmol)和3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇碳酸叔丁酯(13.67g，48.0mmol)加入到1-L旋转蒸发仪的烧瓶中。加入甲苯(400mL)以使固体溶解。真空蒸除溶剂。将残余物溶于甲苯(400mL)然后真空蒸除溶剂。将残余物溶于四氢呋喃(310mL)。在约300mmHg的压力和45℃的浴温下蒸除约150mL溶剂。将残余的溶液转移至三颈圆底烧瓶中并用氮气净化。向溶液中加入Pd2(dba)3(418mg，0.46mmol，0.01当量)和dppb(389mg，0.091mmol，0.02当量)。使溶液脱氧。将反应混合物加热至65℃约1小时。
将溶液转移至1-L的三颈圆底烧瓶中并加入异丙醇(160mL)。将溶液冷却至1℃，加入1N氢氧化钠溶液(28.8mL，28.8mmol，0.63当量)并将温度保持在3℃以下。1小时后，补加1N氢氧化钠(6.6mL，6.6mmol，0.14当量)并将反应液搅拌约1小时。将反应混合物倒入5％碳酸氢钠(250mL)和MTBE(500mL)的混合物中。分液，将有机相用15％氯化钠(200mL)洗涤。在旋转蒸发仪上蒸除溶剂。将剩余的泡沫溶于THF(200mL)然后通过旋转蒸发进行浓缩。重复该过程，得到53.17g干燥泡沫状的所需产物。步骤(3)红霉素A 6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-9-酮基-4″-乙酸酯将固体红霉素A-6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-9-肟-2＇，4″-二乙酸酯(38.0g，由以上步骤2制得)、乙酸(9.5mL)、NaHSO3(11.5g)、水(174mL)和THF(48mL)加入到1-L的三颈圆底烧瓶中。将混合物于大约70℃加热6小时。
将反应混合物加入到乙酸乙酯(150mL)和THF(150mL)的溶液中。向该混合物中加入25％碳酸钾(150mL)。将该两相的混合物于33-40℃搅拌然后使各层沉降。分液并将水层于35-48℃下用THF(70mL)和乙酸乙酯(70mL)的混合物萃取。将合并的有机层于大约40℃下用15％氯化钠(2×120mL)洗涤。将有机溶液真空浓缩得到泡沫(37g)。将该泡沫溶于甲醇(100mL)然后通过旋转蒸发浓缩。重复该过程。将所得残余物溶于甲醇(约60mL)并于44℃搅拌过夜。将混合物冷却至0℃1小时。过滤收集固体，用冷甲醇(8mL)洗涤然后于30℃下真空干燥18小时得到17.5g白色固体状产物。
将滤液浓缩并将残余物溶于甲醇(22mL)和水(7mL)。将混合物搅拌过夜。过滤分离出固体，用冷的甲醇/水(3∶1，4mL)洗涤然后于30℃下真空干燥18小时得到2.05g产物。步骤(4)红霉素A 6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-9-酮基-2＇-苯甲酸酯-4″-乙酸酯将红霉素A 6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-9-酮基-4″-乙酸酯(12.00g，12.72mm)、苯甲酸酐(3.74g，16.54mmol)、乙酸异丙酯(48mL)、THF(24mL)和三乙胺(2.67mL，19.1mmol)加入到圆底烧瓶中并将混合物于约55℃加热9小时。将溶液冷却至5℃并加入N，N-二甲基乙二胺(0.4mL，3.8mmol)。将混合物搅拌1小时。过滤除去固体并用乙酸乙酯(100mL)和水(50mL)洗涤。将合并的滤液转移至分液漏斗中并除去水层。将有机层用5％碳酸氢钠(50mL)和20％氯化钠(30mL)洗涤。加入乙酸乙酯(30mL)并将有机溶液真空浓缩。将残余物溶于乙腈(30mL)然后通过旋转蒸发浓缩。重复该过程。加入乙腈(40mL)并将该混合物加热至45℃ 25分钟。将混合物冷却至5℃。过滤分离出固体，用冷的乙腈(5mL)洗涤，于45℃真空干燥60小时得到12.55g产物。
1H NMR(400MHz，CDCl2)δ9.13(d，1H)，8.27(d，1H)，8.06(d，1H)，8.02(d，2H)，7.80(d，1H)，7.64(dt，1H)，7.58(t，1H)，7.50(t，1H)，7.46(t，2H)，6.62(d，1H)，6.55(dq，1H)，5.15(dd，1H)，5.10(dd，1H)，4.99(d，1H)，4.92(d，1H)，4.70(d，1H)，4.38(m，1H)，4.19(1H，dd)，4.02(dd，1H)，3.90(m，1H)，3.78(d，1H)，3.75(明显的双峰，1H)，3.65(明显的单峰，1H)，3.54(s(-OH)，1H)，3.48(s，3H)，3.04(s(-OH)，1H)，2.99(m，2H)，2.86(m，1H)，2.62(m，1H)，2.45(d，1H)，2.34(s，6H)，2.14(s，3H)，1.96(m，1H)，1.88(m，2H)，1.74(dd，1H)，1.68(dd，1H)，1.57(d，1H)，1.50(s，3H)，1.45(m，1H)，1.40(m，1H)，1.25(d，3H)，1.19(d，3H)，1.18(s，3H)，1.15(d，3H)，1.03(d，3H)，1.02(s，3H)，0.83(t，3H)，0.76(d，3H)。13C NMR(100MHz，CDCl3)δ220.3，175.1，170.4，165.4，150.3，147.4，130.8，130.2，129.6，129.2，128.8，128.3，128.2，128.0，126.5，99.8，96.2，49.4，45.5，44.3，40.9，16.3，15.9，12.3，10.7，9.4。MS(APCI)1047(M+H+)。步骤(5)红霉素A 6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-9-酮基-11.12-环状氨基甲酸酯-3-羟基-2＇-苯甲酸酯的制备向250-mL圆底烧瓶中加入红霉素A 6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-9-酮基-2＇-苯甲酸酯-4″-乙酸酯(4.00g，3.82mmol)、羰基二咪唑(CDI，2.75g，17.0mmol)、THF(25mL)和DMF(8mL)。将该混合物于18℃搅拌20分钟然后冷却至3℃。用10分钟的时间加入六甲基二硅氮烷钠(NaHMDS，1.0M的THF溶液，6.0mL，6mmol)。将溶液升温至室温并搅拌过夜。
将混合物冷却至5℃并向溶液中通入NH3(g)气泡35分钟。2.5小时后，向溶液中通入NH3(g)气泡30分钟。1.5小时后，向溶液中通入NH3(g)气泡20分钟。将混合物于5℃搅拌1.5小时。加入叔丁醇钾(KOtBu，1.0M的THF溶液，4.6mL，4.6mmol)，将溶液升温至室温并搅拌19小时。将反应混合物倒入5％ KH2PO4(60mL)中并用乙酸异丙酯(60mL)萃取。将有机层依次5％ KH2PO4(60mL)洗涤，然后再用5％ KH2PO4(30mL)洗涤。将合并的5％ KH2PO4洗涤液用乙酸异丙酯(40mL)萃取。将合并的乙酸异丙酯萃取液用5％碳酸氢钠(50mL)洗涤。将有机层真空浓缩。加入乙酸异丙酯(50mL)并将溶液真空浓缩得到4.38g白色泡沫。
将上述泡沫(4.26g)、乙醇(30mL)和2N盐酸(15mL)加入到100-mL的圆底烧瓶中。将溶液于50-55℃加热10小时。然后将反应混合物倒入水(35mL)和MTBE(40mL)中。分液并将MTBE层用2N盐酸(10mL)萃取。将合并的水层用MTBE(40mL)洗涤然后再次用MTBE(20mL)洗涤。用25％碳酸钾(13mL)将水层调至pH 9-10然后用乙酸乙酯(50mL)萃取。将水层用乙酸乙酯(25mL)萃取。将合并的乙酸乙酯层用15％氯化钠(20mL)洗涤。将乙酸乙酯层真空浓缩，溶于乙酸乙酯(35mL)，然后通过旋转蒸发浓缩。将所得残余物再次溶于乙酸乙酯(35mL)然后通过旋转蒸发浓缩。将残余物于45℃下溶于乙酸乙酯(10mL)。于40-45℃下缓慢加入庚烷(20mL)使产物结晶。将混合物冷却至室温搅拌1.5小时。将浆液冷却至5℃ 1小时。过滤分离出固体，用庚烷(5mL)洗涤然后于45℃真空干燥过夜得到产物。收率2.62g(79％)。MS(APCI)872(M+H+)。步骤(6)红霉素A 6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12-环状氨基甲酸酯-3-酮基-2＇-苯甲酸酯的制备将N-氯代琥珀酰亚胺(NCS，435g，3.27mmol)加入到25-mL三颈圆底烧瓶中，加入二氯甲烷(5mL)并将混合物冷却至-15℃(±5℃)。加入二甲硫醚(0.28mL，3.82mmol)并将内温保持在-15℃(±5℃)。加料结束后，将反应混合物继续搅拌30分钟。加入溶于10mL二氯甲烷的固体红霉素A 6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12-氨基甲酸酯-3-羟基-2＇-苯甲酸酯(2.00g，2.29mmol)并将内温保持在-15℃(±5℃)。加料结束后，将反应混合物继续搅拌1小时。加入Et3N(0.365mL，2.61mmol)并将内温保持在-15℃(±5℃)。将所得混合物于-10℃(±5℃)搅拌1.5小时。将冷却的反应混合物倒入50mL EtOAc中并加入25mL 0.5N氢氧化钠水溶液。搅拌然后分液。将含有产物的上层用5％氯化钠水溶液(25mL)洗涤，然后用饱和氯化钠水溶液(25mL)洗涤。将有机溶液用硫酸钠干燥然后浓缩。将残余物用MTBE(6mL)和庚烷(6mL)重结晶。将浆液在室温下过滤然后用MTBE/庚烷(1∶1，10mL)洗涤。将产物于40℃下真空干燥过夜得到1.99g白色粉末。MS(ESI)870(M+H+)。步骤(7)6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12-环状氨基甲酸酯-3-酮基红霉素A的制备将结晶红霉素A 6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12环状氨基甲酸酯-3-酮基-2＇-苯甲酸酯(1.84g，2.11mmol)加入到100-mL圆底烧瓶中。加入MeOH(15mL)并将混合物加热回流直至通过HPLC不能检测到原料(17小时)。冷却至室温后，将反应混合物浓缩，用97∶3EtOAc/庚烷(25mL)和0.5N HCl(15mL)稀释。分出含有产物的下层，将上层的有机层再次用0.5N HCl(10mL)洗涤。将两份含有产物的下层合并然后用97∶3 EtOAc/庚烷(20mL)洗涤。将含有产物的下层用97∶3 EtOAc/庚烷(40mL)稀释然后用10％(w/v)K2CO3溶液处理使pH达到9-10，然后分液。将水层用97∶3 EtOAc/庚烷(40mL)萃取。将合并的含有产物的EtOAc/庚烷层用15％氯化钠洗涤然后用硫酸钠干燥。将有机溶液浓缩得到粘稠的油。加入乙酸乙酯(2mL)和庚烷(4mL)并将混合物加热至38℃使产物结晶。加入庚烷(6mL)并将浆液于38℃加热45分钟。将浆液冷却至室温，过滤，用1∶9 EtOAC/庚烷(10mL)洗涤然后于45℃下真空干燥过夜得到1.32g(81％)白色结晶状固体。MS(ESI)766(M+H+)。
实施例76-O-红霉素A-9-肟-2＇，4″，9-三苯甲酸酯的制备步骤(1)红霉素A 9-肟的制备向250-mL圆底烧瓶中加入80.0mL MeOH然后冷却至0-5℃。分批加入羟胺(50％水溶液，34.8g，526mmol)，观察到轻微的放热(3至10℃)。将该甲醇溶液搅拌5分钟并使内温达到1.5℃。然后滴加甲酸(10.4g，226mmol)，控制滴加的速率使反应混合物的温度保持在25℃以下。将冷却的溶液转移到含有红霉素A(47.6g，64.8mmol)的三颈烧瓶中。在烧瓶上装配氮气入口接管、温度探针(T-型)和机械搅拌器。将反应混合物的温度升温至50℃，然后继续搅拌10小时。通过TLC监测反应混合物，TLC表明反应已经完成。将反应混合物冷却至23℃，用150mL IPAC稀释然后加入56g NaOH(6N)。将反应混合物的pH调至pH11-12，搅拌5分钟然后转移至分液漏斗中。排出水层并将有机层用100g NaOH(2N)洗涤。Karl-Fisher分析表明在有机层中含有4.7％(重量)的水。将产物直接用于以下的步骤(2)。步骤(2)红霉素A 9-肟的三苯甲酰化将以上步骤(1)制得的有机层浓缩得到浆液然后将其重新溶于100mL IPAC。真空蒸除溶剂使粗品肟共沸干燥。该浆液的Karl-Fisher分析表明含有0.243％的水(重量)。用100mL IPAC将该步骤重复一次。将浆液溶于200mL(1∶1)IPAC/THF混合物。Kf分析表明含有0.037wt.％的水。向装有机械搅拌器、气体入口接管和温度探针的1000-mL三颈圆底烧瓶中加入DMAP(7.42g，60.7mmol)和Bz2O(57.7g，225mmol)，然后加入粗品肟的IPAC-THF溶液。在加入肟溶液时开始搅拌。向反应混合物中加入Et3N(26.2mL，188mmol)，反应混合物的温度升至40℃。将反应混合物于40℃搅拌10.5小时，然后室温搅拌13-14小时。通过HPLC监测反应，此时的HPLC分析表明含有约4％的二苯甲酸酯。将反应混合物冷却至0-5℃然后加入6.7mL N，N-二甲基乙二胺(5.4g，所测定的Bz2O的1.5当量)。0-5℃下20分钟后，HPLC表明在反应混合物中不再含有苯甲酸酐。将反应混合物用50mL IPAC稀释然后向冷的反应混合物中加入100mL 10％KH2PO4。搅拌10分钟后，将反应混合物转移至1L的分液漏斗中并排出水相。将有机相依次用100mL KH2PO4、7％ NaHCO3(2×100mL)和100mL盐水洗涤。通过旋转蒸发于50℃和真空下蒸除溶剂得到棕色树胶状的固体。向烧瓶中补加100mL IPAC。将粗产物溶解，然后通过旋转蒸发在真空下蒸除溶剂至干对产物进行共沸干燥。以定量收率得到粗产物，为棕色树胶状固体。将粗产物于60℃下溶于60mL无水丙酮；加入215mL正庚烷。开始有白色固体结晶析出。然后将反应混合物加热至62℃使所有固体溶解。然后将反应混合物在室温下缓慢平衡，在室温下搅拌过夜后，通过真空过滤收集固体产物。将湿的滤饼用冷的1∶4丙酮/正庚烷溶液(50mL)洗涤然后于50℃下真空干燥过夜得到白色固体状的三苯甲酸酯(38.0g)，收率56％。
6-O-红霉素A-9-肟-2＇，4″，9-三苯甲酸酯可用于实施例5，步骤(2)-(7)的方法，得到式(VI)化合物。
实施例8红霉素A-9-肟-2＇，4″，9-三苯甲酸酯的制备向装有氮气入口接管、温度探针(T-型)和机械搅拌器的2L三颈圆底烧瓶中于室温(22℃)下加入500mL THF。于搅拌下向THF中加入PhCO2Na(75.0g，521mmol)，然后加入PhCOCl(60.4mL，521mmol)。在加料过程中，反应混合物的温度上升至27℃。继续搅拌30分钟，然后分5次加入红霉素A 9-肟(100.0g，134mmol，K.F.＝0.63％)，每次约20g。在加入红霉素A 9-肟的过程中使反应混合物的温度不超过40℃(需要定期地用水浴冷却)。在该步骤中，在烧瓶和氮气入口接管之间放置含有Et3N(57.7mL，414mmol)的加液漏斗。通过加液漏斗用15分钟的时间加入Et3N。在加入Et3N的过程中使反应混合物的温度不超过40℃(需要定期地用水浴冷却)。Et3N加料结束后，取走加液漏斗，分批加入DMAP(16.31g，134mmol)。将反应混合物(其中悬浮有白色固体)于40℃下搅拌14小时，然后室温搅拌13小时。将反应混合物冷却至0-5℃(在冷却时，反应混合物变为粘稠的浆液状溶液)然后加入5.0mL N，N-二甲基乙二胺(测定的Bz2O的1.5当量)。将浆液用150mL THF稀释然后继续搅拌1.5小时。通过HPLC监测反应。在0-5℃下1.5小时后，HPLC显示在反应混合物中含有微量的(0.8％)苯甲酸酐。将反应混合物用200mL IPAC稀释，然后向冷却的反应混合物中加入150mL 10％ KH2PO4。搅拌10分钟后，将反应混合物转移至2L的分液漏斗中并排出水相。将有机相用150mLIPAC稀释并依次用150mL 10％ KH2PO4、7％ NaHCO3(2×150mL)和200mL盐水洗涤。通过旋转蒸发于50℃和真空下蒸除溶剂。向烧瓶中补加250mL IPAC，将粗产物溶解，然后通过旋转蒸发在真空下蒸除溶剂至干对产物进行共沸干燥。以定量收率得到米黄色泡沫状粗产物。将其于60℃下加热溶于250mL无水丙酮并加入800mL正庚烷。开始有白色固体结晶析出。室温下搅拌过夜后，通过真空过滤收集固体产物。将湿的滤饼用-5℃的1∶6丙酮/正庚烷(100mL)洗涤然后于50℃下真空干燥过夜得到白色固体状红霉素A 9-肟-2＇，4″，9-三苯甲酸酯(118.0g)，收率82.8％。
红霉素A-9-肟-2＇，4″，9-三苯甲酸酯可用于实施例5，步骤(2)-(7)的方法，得到式(IV)化合物。
实施例96-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12环状氨基甲酸酯-3-酮基红霉素A-2＇，4″-二苯甲酸酯的制备在500mL三颈圆底烧瓶上装配高架的机械搅拌器、温度探针和氮气入口/出口。向反应瓶中加入红霉素A 6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11，12-二醇2＇，4″-二苯甲酸酯(实施例5，步骤(3))(50.00g，45mmol)、CDI(18.27g，113mmol，2.5当量)，然后加入DMF(61mL)和THF(153mL)。将该浑浊的混合物室温搅拌约5分钟，然后通过注射器加入DBU(10.1mL，68mmol，1.5当量)。一加入DBU后，内温便从21℃上升至27℃。当放热停止后，所有固体溶解形成澄清的溶液。然后将反应混合物于35℃加热过夜。15小时后的HPLC分析表明已完全转化成12-酰基咪唑中间体。
将12-酰基咪唑中间体冷却至＜0℃然后通过针头通入氨气(液面下)。将反应液保持在-4℃并通过HPLC监测反应。12-酰基咪唑中间体完全被消耗掉需要约5小时。
然后将反应混合物升温至0℃。加入叔丁醇钾(5.56g，50mmol，1.1当量)的THF(50mL)溶液并保持内温在10℃以下。加入碱后，将反应混合物升温至室温。HPLC表明反应在2小时内完成。
将反应混合物冷却至0℃并缓慢加入4.5N HCl溶液。用同样的酸溶液将水层的pH调至pH5-6(总共使用了64g，4.5N HCl)。将混合物和IPAc(113mL)一起转移至1L的分液漏斗中。混合并分液后，将有机层用5％ NH4Cl溶液(150mL)洗涤。将得到的有机部分减压浓缩得到白色固体的粘稠浆液。
向粗品混合物中加入IPA(225mL)。将混合物再次浓缩成粘稠的浆液(约75mL)。加入IPA(190mL)，将混合物在搅拌下于45℃的温浴中加热1小时。冷却至室温后，将混合物进一步冷却至0℃并在该温度下搅拌2小时，然后滤出固体。循环使用母液以协助转移固体。将固体用冷的IPA(56mL)冲洗，然后于65℃下减压干燥。
分离得到35.42g白色粉末状的干燥产物，收率69.3％，96.0％峰面积。
实施例102＇-O-苯甲酰基-3-脱红霉支糖-3-氧代-6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-11-脱氧-11-羧基氨基红霉素A 11，12-(环状氨基甲酸酯)的制备(化合物(IV)，反应方案3)步骤(1)脱红霉支糖红霉素A 9-肟盐酸盐的制备(a)形成肟将红霉素A(75g，0.1mol，1当量)和150mL异丙醇加入烧瓶中。将反应混合物搅拌形成浆液。向烧瓶中加入羟基胺(50mL，50％水溶液)，然后向反应混合物中加入乙酸(18.7mL，0.32mol，3.2当量)。将混合物于50℃加热30小时，有沉淀形成。将粗产物不经进一步纯化直接用于以下的步骤(b)。
(b)红霉支糖的水解将来自以上步骤(1)(a)的反应混合物冷却至约20℃。向反应瓶中滴加盐酸(500mL，2N)并将混合物升温至约35℃。析出的固体溶于溶液形成澄清的液体。向反应混合物中加入乙酸乙酯(300mL)，然后加入600mL 20％碳酸钾得到pH约为10的溶液。收集水层并用200mL乙酸乙酯萃取。合并乙酸乙酯层，用150mL水和100mL 15％氯化钠溶液洗涤然后真空浓缩。向溶液中加入乙酸异丙酯(150mL)然后再次浓缩。将残余物溶于500mL乙酸异丙酯和100mL异丙醇。将溶液进行搅拌并加入15mL浓盐酸的45mL异丙醇溶液。有沉淀形成。将反应混合物搅拌约30分钟然后冷却至5-10℃，过滤，用乙酸异丙酯(2×75mL)洗涤。将粗品物质在氮气下干燥得到71.3g粗品脱红霉支糖红霉素A 9-肟盐酸盐(收率111％)。步骤(2)3-脱红霉支糖红霉素A 9-(O-异丙氧基环己基缩酮)肟的制备将步骤(1)制得的3-脱红霉支糖红霉素A 9-肟盐酸盐(150.9g，255mmol，1当量)与乙腈和异丙基环己基缩酮(170.8mL，767.4mmol，3当量)混合。然后加入甲酸(38.2mL，895mmol，3.5当量)。将澄清的黄色溶液在氮气氛下室温搅拌。2-3小时后，将反应混合物用己烷(4×400mL)萃取。持续进行萃取，直至TLC和HPLC显示所有的缩酮物质已被除去。用2N氢氧化钠将反应混合物的pH调至pH＞9。除去水层并将乙腈层用半饱和的氯化钠溶液(100-150mL)萃取。然后分出乙腈层，用硫酸钠干燥然后浓缩得到白色泡沫(176.84g，94.7％)。用乙腈(3-4mL/R)重结晶以65-75％的回收率得到产物。步骤(3A)2＇-O-苯甲酰基-3-羟基-3-脱红霉支糖-红霉素A 9-(O-异丙氧基环己基缩酮)肟的制备将以上步骤(2)的化合物(20g，27.4mmol，1当量)在乙酸异丙酯(100mL)中混合。加入苯甲酸酐(约1.3当量)，然后加入Et3N(4.6mL，37.85mmol，1.2当量)。将反应混合物在氮气氛下室温搅拌过夜。在搅拌下加入半饱和的碳酸氢钠溶液(50mL)约15-30分钟。除去水相并将有机相用半饱和的氯化钠溶液洗涤。将有机相用硫酸钠干燥然后浓缩得到泡沫(22.4g，98％)。用粗产物进行甲硅烷基化反应。步骤(3B)2＇-O-苯甲酰基，3-O-三甲基甲硅烷基-3-脱红霉支糖-红霉素A 9-(O-异丙氧基环己基缩酮)肟的制备将来自以上步骤(3A)的化合物(8.20g，9.8mmol，1当量)在二氯甲烷(80mL)中混合。加入三甲基甲硅烷基咪唑(2.9mL，19.6mmol，2当量)，然后加入三甲基甲硅烷基氯(1.5mL，11.8mmol，1.2当量)。将反应混合物在氮气氛下室温搅拌30分钟。然后在搅拌下向反应混合物中加入半饱和的氯化钠溶液(25mL)5-10分钟。除去水层并将反应混合物用饱和氯化钠洗涤。分出二氯甲烷层，用硫酸钠干燥然后浓缩得到白色泡沫(9.39g，105.4％)。将粗产物用乙腈(5mL/g)结晶得到白色固体(6.96g，78.1％)。步骤(4)2＇-O-苯甲酰基-3-O-三甲基硅烷基-3-脱红霉支糖-6-O-[3-(3-喹啉基-2-丙烯基)]-红霉素A缩酮肟的制备向三颈圆底烧瓶中加入来自步骤(3B)的2＇-O-苯甲酰基-3-O-三甲基甲硅烷基-3-脱红霉支糖红霉素A缩酮肟(1.8g，2mmol，1当量)，然后加入THF(8mL)。将溶液用氮气净化。向溶液中加入3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯(741mg，2.6mmol，1.3当量)，然后加入dppb(17mg，0.04mmol，0.02当量)和Pd2(dba)3(18mg，0.02mmol)。将所得溶液在氮气氛下加热至66℃。回流1小时后，HPLC表明所有的原料已经消失。真空蒸除溶剂。向残余物中加入己烷(50mL)。将所得混合物用硅藻土垫过滤。将滤液用乙腈(3×3mL)萃取。将上面的己烷层真空浓缩得到1.73g浅黄色固体状的所需产物(80％收率)。步骤(5)2＇-O-苯甲酰基-3-脱红霉支糖-3-O-羟基-6-O-[(3-喹啉-3-基)丙-2-烯基]红霉素A的制备将2＇-O-苯甲酰基-3-O-三甲基甲硅烷基-3-脱红霉支糖-6-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-红霉素A缩酮肟(1.07g，1.0mmol)、NaHSO3(572mg，5.5mmol，5.0当量)和L-酒石酸(750mg，5mmol，5当量)在水/THF(5mL/1.5mL)中的混合物于82℃加热8小时。用2N氢氧化钠调节所得混合物的pH值，将产物用EtOAc(30mL)萃取。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥然后真空浓缩得到794mg浅黄色固体状的产物(94％收率，HPLC纯度为80％)。步骤(6)2＇-O-苯甲酰基-3-脱红霉支糖-3-O-三甲基甲硅烷基-6-O-[(3-喹啉-3-基)丙-2-烯基]红霉素A的制备向50mL的圆底烧瓶中加入2.01g 2＇-O-苯甲酰基-3-脱红霉支糖-3-O-羟基-6-O-[(3-喹啉-3-基)丙-2-烯基]红霉素A和10mL二氯甲烷。将溶液在氮气氛下搅拌。向反应液中加入0.42mL三甲基甲硅烷基咪唑，然后加入0.12mL三甲基甲硅烷基氯。将混合物在室温下搅拌2小时15分钟。加入半饱和的氯化钠(20mL)并将混合物搅拌5分钟。加入二氯甲烷(20mL)然后分液。将二氯甲烷层用20mL半饱和的氯化钠洗涤。将二氯甲烷层用硫酸钠干燥然后真空浓缩得到2.33g泡沫(107％收率，HPLC-82.7峰面积％)。步骤(7)2＇-O-苯甲酰基-3-脱红霉支糖-3-O-三甲基甲硅烷基-6-O-[(3-喹啉-3-基)丙-2-烯基]-11-脱氧-11-羧基氨基红霉素A 11，12-(环状氨基甲酸酯)的制备向在圆底烧瓶中的2＇-O-苯甲酰基-3-脱红霉支糖-3-O-三甲基甲硅烷基-6-O-[(3-喹啉-3-基)丙-2-烯基]红霉素A(2.3g，2.37mmol，1当量)中加入10mL四氢呋喃然后将溶液真空浓缩。将残余物溶于8mL四氢呋喃和8mL二甲基甲酰胺并将该溶液加入到含有1，1＇-羰基二咪唑(1.54g，9.50mmol，1当量)的25mL圆底烧瓶中。将溶液冷却至-12℃。加入六甲基二硅氮烷钠的四氢呋喃溶液(3.6mL 1M的溶液)并同时将反应混合物的温度保持在-12℃至-8℃。将溶液在冷却下搅拌30分钟。将溶液升温至2℃并搅拌1小时。有沉淀形成。将溶液升温至15-20℃并搅拌3小时得到澄清的溶液。HPLC表明存在12-酰基咪唑中间体(88峰面积％)。
将反应混合物真空浓缩除去四氢呋喃。将浓缩的反应混合物冷却至10℃并加入8mL浓氨水。有沉淀形成。加入异丙醇(4mL)，将反应混合物升温至室温并在该温度下搅拌14小时。
将反应混合物倒入150mL乙酸乙酯中，用5％碳酸氢钠(3×100mL)洗涤，用20％氯化钠(75mL)洗涤，用硫酸钠干燥然后真空浓缩得到2.25g泡沫(100％收率，HPLC-87.7峰面积％)。步骤(8)2＇-O-苯甲酰基-3-脱红霉支糖-3-O-羟基-6-O-[(3-喹啉-3-基)丙-2-烯基]-11-脱氧-11-羧基氨基红霉素A 11，12-(环状氨基甲酸酯)的制备向圆底烧瓶中加入75mg 2＇-O-苯甲酰基-3-脱红霉支糖-3-O-三甲基甲硅烷基-6-O-[(3-喹啉-3-基)丙-2-烯基]-11-脱氧-11-羧基氨基红霉素A 11，12-(环状氨基甲酸酯)和1mL异丙醇。向溶液中加入1mL 1N盐酸并将该溶液室温搅拌1小时15分钟。将反应混合物倒入含有50mL乙酸乙酯的烧瓶中，用5％碳酸氢钠(2×20mL)洗涤，用半饱和的氯化钠(20mL)洗涤，用硫酸钠干燥然后真空浓缩得到71mg泡沫(103％收率，HPLC-78.4峰面积％)。步骤(9)3-脱红霉支糖-3-氧代-6-O-[(3-喹啉-3-基)丙-2-烯基]-11-脱氧-11-羧基氨基红霉素A 11，12-(环状氨基甲酸酯)的制备[化合物(IV)，反应方案3]标题化合物通过美国专利5,866,549的方法从步骤(8)的化合物分两步制得。
实施例116-O-[3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-2＇-O-苯甲酰基红霉素A 9-(O-苯甲酰基)肟的制备向装有回流冷凝器、加液漏斗和氮气入口的250mL三颈圆底烧瓶中加入Pd2(dba3)(34mg，0.037mmol，0.03当量)和dppb(32mg，0.075mmol，0.006当量)。将烧瓶内的物质用氮气净化10分钟。将2＇-O-苯甲酰基红霉素A 9-(O-苯甲酰基)肟(12.0g，12.6mmol)和3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯(5.0g，17.6g，1.4当量)混合并溶于THF(75mL)中，然后通过加液漏斗一次性加入到烧瓶中。将形成的黄色溶液加热回流4小时，此时的HPLC分析表明2＇-O-苯甲酰基红霉素A9-(O-苯甲酰基)肟已被消耗掉。将反应混合物冷却并用含有20g硅胶的烧结的玻璃漏斗过滤。将硅胶垫用50∶50己烷/丙酮混合物洗涤，收集产物然后浓缩得到泡沫，将其用乙腈结晶得到8.7g浅黄色固体状的产物(61％)，其效力为已知标准物的98％。
上述化合物可以通过将肟脱保护并按照实施例5，步骤(3)-(7)中描述的方法转化成式(IV)化合物。
实施例126-O-烯丙基红霉素A肟2＇，4″，9-三苯甲酸酯的制备向适宜的反应容器中加入红霉素肟三苯甲酸酯(5.00g，4.71mmol，1当量)的50mL甲苯溶液。真空蒸除溶剂并用50mL无水THF代替。按照同样方法蒸除THF并用50mL新鲜的无水THF代替。向该溶液中加入烯丙基叔丁基碳酸酯(0.82g，5.19mmol，1.10当量)，将反应容器抽空并用氮气净化3次(KF＜0.01％)。加入Pd2(dba)3(86mg，0.02当量)和dppb(80mg，0.04当量)，将反应容器抽空并用氮气净化两次。将反应混合物加热回流3小时。冷却至室温后，加入1.0g过滤助剂并将该悬浮液搅拌30分钟，然后用1/2″的硅藻土垫过滤(用50mLTHF冲洗)。将溶液浓缩至干得到5.31g(约100％)粗产物。将粗品固体溶于100mL 70℃的庚烷，用1/2″的硅藻土垫过滤然后再次浓缩至干。将所得固体通过在30mL 1∶1 Et2O/己烷中结晶得到3.78g(73％)无色固体状产物。通过将液体进一步冷却至-10℃得到第二批产品(0.95g，18％)。总共分离得到4.73g(91％)产品。所有数据均与所需化合物的一致。
mp197-198℃，IR(KBr)3500(br)，3000，1730，1260，1175，1115，1055和720cm-1。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.01-8.08(m，6H)，7.53-7.77(m，3H)，7.40-7.51(m，6H)，5.70-5.80(m，2H)，5.21(m，明显的双双峰，1H)，5.09(m，1H)，5.01-5.06(m，2H)，4.93-5.01(m，2H)，4.92(m，明显的双峰，1H)，4.81(m，明显的双双峰，1H)，4.45(m，1H)，3.91(m，2H)，3.77(m，2H)，3.61-3.67(m，3H)，3.55(s，3H)，3.26(br s，1H)，2.98(m，明显的三双峰，1H)，2.87(m，1H)，2.72(m，明显的四峰，1H)，2.32(d，J＝8Hz，1H)，2.28(s，6H)，1.94(m，2H)，1.75(m，3H)，1.05-1.60(m，23H)，0.92(d，J＝6Hz，3H)，0.81(d，J＝7.2Hz，3H)，0.75(d，J＝7.6Hz，3H)，13C NMR(125MHz，CDCl3)δ177.6，174.8，166.4，165.8，163.3，134.7，133.5，133.1，132.8，131.0，130.0，129.8，129.7，129.4，128.7，128.5，128.4，117.1，99.8，96.2，79.1，78.8，78.5，76.7，74.1，73.0，72.6，69.5，67.3，65.7，63.7，63.6，49.4，44.2，40.8，37.6，36.5，35.3，34.3，31.6，28.6，21.3，21.21，21.19，21.1，18.9，18.4，16.3，15.9，15.1，10.3，9.3，MS(APCI+，NH3)1101(M+H+)，1118(M+NH4+)，分析计算值C61H84N2O16C，66.53；H，7.69；N，2.54。实测值C，66.52；H，7.72；N，2.52。
上述化合物可以通过将肟脱保护并按照实施例5，步骤(3)-(7)中描述的方法转化成式(IV)化合物。
实施例136-O-丙烯基喹啉红霉素A9-(O-异丙氧基环己基缩酮)肟2″，4″二-三甲基甲硅烷基醚的制备将2＇，4″-O-二(三甲基甲硅烷基)-红霉素A 9-(O-异丙氧基环己基缩酮)肟(10.3g，10.0mmol，1.0当量)和反-3-(3-喹啉基)-2-丙烯-醇叔丁基碳酸酯(3.4g，12.0mmol，1.2当量)溶于甲苯(100mL)。通过旋转蒸发除去甲苯以将原料共沸干燥。加入第二份甲苯(100mL)，通过旋转蒸发除去50mL。将甲苯溶液转移至含有Pd2(dba)3(92mg，0.1mmol，0.01当量)和dppb(171mg，0.4mmol，0.04当量)的烧瓶中。将溶液加热至70℃。3小时后，反应完成。冷却至室温后，加入1.0g过滤助剂并将该悬浮液搅拌30分钟，然后用硅藻土过滤。蒸除溶剂得到11.1g黄色固体(92％)。将一小部分该物质通过色谱法纯化(2∶1庚烷/丙酮)以提供用于鉴定的分析样品。所有数据均与所需化合物的一致。
1H NMR(400MHz，CDCl3)9.06(d，1H)，8.30(d，1H)，8.04(d，1H)，7.78(dd，1H)，7.61(ddd，1H)，7.48(ddd，1H)，6.62-6.50(m，2H)，5.19(dd，1H)，4.80(d，1H)，4.56-4.39(m，2H)，4.28-4.24(m，2H)，4.13-4.01(m，2H)，3.83-3.65(m，5H)，3.30-3.15(m，6H)，2.91-2.82(m，1H)，2.75-2.70(m，1H)，2.65-2.51(m，1H)，2.35-2.20(m.7H)，2.10-1.02(m，50H)，0.89-0.82(m，4H)，0.16(s，9H)，0.12(s，9H)。13C NMR(100MHz，CDCl3)175.8，130.8，129.2，128.7，128.4，128.0，126.5，126.3，103.9，102.4，96.5，80.7，79.9，78.5，77.6，77.0，73.9，73.4，73.1，70.0，67.2，65.2，65.1，64.4，62.8，49.5，44.9，40.8，39.6，37.3，35.6，34.3，33.5，33.4，26.3，25.5，24.3，24.2，22.9，22.7，22.0，21.8，21.6，21.2，19.4，18.9，16.1，15.6，14.7，10.9，9.5，0.9，0.7。分析计算值C64H109N3O14Si2·H2OC，63.07；H，9.18；N，3.45。实测值C，63.02；H，9.07；N，3.33。
上述化合物可以通过将肟脱保护并按照实施例5，步骤(3)-(7)中描述的方法转化成式(IV)化合物。
实施例14使用反式-3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯制备2＇，4″-O-二(苯甲酰基)-6-O-(3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基)-红霉素A 9-[(O-苯甲酰基)肟]往适宜的反应容器中加入在300mL甲苯中的红霉素A肟三苯甲酸酯(41.1g，38.6mmol，1当量)和反式-3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯(12.6g，44.2mmol，1.15当量)。真空除去溶剂并加入300mLTHF(K.F.滴定0.01％)。加入催化剂Pd2(dba)3(170mg，0.005当量)和dppb(160mg，0.01当量)并通过在氮气氛中排空和通风三次使反应混合物脱气。将反应物加热回流3小时，冷却到室温并真空浓缩至干。将残余物粗品(49g，理论值的105％)溶于60℃的100mL CH3CN，过滤并减压浓缩至干，得到46.8g浅黄色泡沫状的产物(99％)(经HPLC分析纯度＞96％)。
通过脱去肟的保护，然后按照实施例5步骤(3)-(7)中描述的方法，可将上述化合物转化为式(IV)的化合物。
实施例15使用顺式-3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯制备2＇，4″-O-二(苯甲酰基)-6-O-(3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基)-红霉素A 9-[(O-苯甲酰基)肟]往适宜的反应容器中加入红霉素A肟三苯甲酸酯(1.06g，1mmol，1当量)和顺式-3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯(0.31g，1.09mmol)和10mL THF。真空除去溶剂并加入10mL THF。加入催化剂Pd2(dba)3(9mg，0.01当量)和dppb(9mg，0.02当量)并通过三次排空和通入氮气使反应混合物脱气。将反应物加热回流。1小时后，经HPLC分析反应完成了大约70％，故再加入另外的0.08g碳酸酯(0.28当量)并回流过夜。使反应化合物冷却到室温并加入1.0g助滤剂。搅拌30分钟后，使反应混合物滤过硅藻土滤垫(20ml THF冲洗)并减压浓缩至干，得到1.31g(理论值的107％)。该粗产物经硅胶柱色谱纯化(用1∶2丙酮/庚烷洗脱)，得到1.10g(89％)无色固体的目的产物。
通过脱去肟的保护，然后按照实施例5步骤(3)-(7)中描述的方法，可将上述化合物转化为式(IV)的化合物。
实施例16使用1-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯制备2＇，4″-O-二(苯甲酰基)-6-O-[1-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-基]-红霉素A 9-[(O-苯甲酰基)肟]往适宜的反应容器中加入在100mL甲苯中的红霉素A肟三苯甲酸酯(16.20g，15.3mmol，1当量)和1-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯(仲碳酸酯)(5.00g，17.5mmol，1.14当量)。真空除去溶剂并加入50mL THF。加入催化剂Pd(OAc)2(34mg，0.01当量)和dppb(195mg，0.03当量)并将通过三次排空和通入氮气使反应混合物脱气。将反应物加入回流。4小时后，HPLC分析表明反应完全，使反应混合物冷却到室温并滤过1/4″硅胶短柱，减压浓缩至干，得到17.73g浅黄色固体(95％，经HPLC分析纯度＞95％)。
IR(KBr)2970，1730，1265，1170，和1060cm-1.1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.98(d，J＝2Hz，1H)，8.18(J＝2Hz，1H)，8.02-8.07(m，7H)，7.79(dd，J＝1.2，8.0Hz，1H)，7.57-7.65(m，4H)，7.41-7.53(m，7H)，6.49(m，1H)，6.19(d，J＝16Hz，1H)，5.30(dd，J-2.4，7.0Hz，1H)，5.10(m，1H)，5.05(s，1H)，5.00(m，1H)，4.93(d，J＝9.6Hz，1H)，4.49(m，1H)，4.33(s，1H)，4.14(明显的双双峰，1H)，3.96(m，1H)，3.65-3.91(m，5H)，3.56(s，3H)，3.25(s，1H)，2.93(m，1H)，2.91(m，1H)，2.74(明显的四重峰，1H)，2.49(明显的双峰，1H)，2.36(s，6H)，2.02(m，1H)，1.95(m，1H)，1.85(m，1H)，1.74(明显的双双峰，1H)，1.57(m，1H)，1.54(s，3H)，1.31-1.45(m，3H)，1.11-1.28(m，12H)，1.14(d，J＝6.8Hz，3H)，1.10(s，3H)，0.95(d，J＝6Hz，3H)，0.87(t，J＝7.2Hz，3H)，0.79(d，J＝7.6Hz，3H).13C NMR(100MHz，CDCl3)δ177.4，175.0，166.3，165.7，163.0，150.6，147.6，133.5，133.3，132.8，130.9，130.2，130.0，129.7，129.5，129.4，129.2，129.1，128.9，128.8，128.7，128.5，128.41，128.39，128.2，127.9，127.1，126.4，125.5，99.8，96.3，79.2，79.1，78.71，78.70，77.2，76.9，74.0，73.0，72.6，69.7，67.9，67.3，64.9，63.7，63.6，49.4，44.2，40.8，37.8，36.6，35.2，34.3，31.6，31.1，29.，28.6，25.4，21.3，21.21，21.2，21.0，18.7，18.4，16.3，15.9，15.1，10.5，9.3.MS(DCI/NH3)1228(M+H+)。C70H89N3O16的元素分析计算值C，68.60；H，7.46N，3.34.实测值C，68.43；H，7.30；N，3.42。
通过脱去肟的保护，然后按照实施例5步骤(3)-(7)中描述的方法，可将上述化合物转化为式(IV)的化合物。
权利要求
1.一种制备6-O-取代的红霉素衍生物的方法，包括在钯催化剂和膦的存在下，将红霉素衍生物与下式的烷基化剂反应 其中在各自情况下，R独立地选自氢、1-10个碳原子的烷基、卤素、芳基、取代的芳基、杂芳基和取代的杂芳基；R1是1-10个碳原子的烷基，和X是O或NR＇，其中R＇是烷基或芳基，或者R1和R＇一起形成芳环或非芳香环。
2.权利要求1的方法，其中的烷基化剂选自烯丙基异丙基碳酸酯、烯丙基叔丁基碳酸酯、烯丙基N，N-二异丙基氨基甲酸酯、3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯和1-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯。
3.权利要求2的方法，其中烷基化剂选自烯丙基叔丁基碳酸酯、3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯和1-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯。
4.权利要求1的方法，其中的钯催化剂选自乙酸钯、四(三苯基膦)钯、三(二亚苄基丙酮)二钯和(四-二亚苄基丙酮)二钯。
5.权利要求1的方法，其中的膦选自三苯基膦、二(二苯基膦)甲烷、二(二苯基膦)乙烷、二(二苯基膦)丙烷、1，4-二(二苯基膦)丁烷、二(二苯基膦)戊烷和三(邻甲苯基)膦。
6.权利要求1的方法，其中钯催化剂与膦的比例为约2∶1-约1∶8。
7.权利要求1的方法，其中的红霉素衍生物由下式表示 其中，在各自情况下，Rp独立地为氢或羟基保护基，但是Rp不能在两个位点上同时为氢；V选自a)Ob)式N-O-R2的肟；其中R2选自氢，低级链烯基，芳基(低级烷基)，和取代的芳基(低级烷基)；c)下式所示的肟 其中R3选自烷基，烷基芳基，芳基，和取代的芳基；d)下式所示的肟 其中R4选自低级烷基，环烷基，苯基，和芳基(低级烷基)；或者R4和R5或R4和R6与它们所连接的原子一起形成5-7元含一个氧原子的环；且R5和R6独立地选自氢原子，低级烷基，苯基，芳基(低级烷基)；或者选自(R4和R5)、(R4和R6)或(R5和R6)的任一对取代基与它们所连接的原子一起形成任选地含一个氧原子的5-7元环；条件是(R4和R5)、(R4和R6)或(R5和R6)当中只有一对取代基可以与它们所连接的原子一起形成如上所定义的环；e)下式所示的肟 其中，在各自情况下，R7、R8和R9分别独立地选自氢、低级烷基、芳基取代的烷基、芳基、环烷基和低级链烯基；f) 其中，在各自情况下，R10和R11分别独立地选自氢、烷基或氮保护基，或者R10和R11一起形成5-7元环烷基；和g) 其中，在各自情况下，R12和R13分别独立地选自氢、烷基或氮保护基，或者R12和R13一起形成5-7元环烷基；且Z是羟基或保护的羟基。
8.一种制备下式表示的化合物或其可药用盐、酯或前药的方法 其中Ra由下式表示 其中，在各自情况下，R独立地选自氢、1-10个碳原子的烷基、卤素、芳基、取代的芳基、杂芳基和取代的杂芳基；该方法包括下列步骤(a)在钯催化剂和膦的存在下，将红霉素衍生物与下式的烷基化剂反应 其中R定义如上；R1是1-10个碳原子的烷基，并且X是O或NR＇，其中R＇是烷基或芳基，或者R1和R＇一起形成芳环或非芳香环；(b)任选地对步骤(a)的6-O-取代的红霉素进行脱保护和脱肟，获得下式的化合物 其中Z是羟基或保护的羟基，并且Ra和Rp定义如上；(c)在胺碱或胺碱催化剂的存在下，将步骤(b)得到的化合物与1，1＇-羰基二咪唑反应，然后任选在强碱的存在下与胺或氢氧化铵进行反应，得到下式的化合物 (d)通过用酸水解从步骤(c)所得化合物中除去二脱氧甲基己糖部分，得到下式化合物 (e)将3-羟基氧化，并任选地脱保护和分离出所需化合物。
9.权利要求8的方法，其中的步骤(a)中的红霉素衍生物是下式化合物 其中，在各自情况下，Rp独立地为氢或羟基保护基，但是Rp不能在两个位点上同时为氢；V选自a)Ob)式N-O-R2的肟；其中R2选自氢，低级链烯基，芳基(低级烷基)，和取代的芳基(低级烷基)；c)下式所示的肟 其中R3选自烷基，烷基芳基，芳基，和取代的芳基；d)下式所示的肟 其中R4选自低级烷基，环烷基，苯基，和芳基(低级烷基)；或者R4和R5或R4和R6与它们所连接的原子一起形成5-7元含一个氧原子的环；且R5和R6独立地选自氢原子，低级烷基，苯基，芳基(低级烷基)；或者选自(R4和R5)、(R4和R6)或(R5和R6)的任一对取代基与它们所连接的原子一起形成任选含一个氧原子的5-7元环；条件是(R4和R5)、(R4和R6)或(R5和R6)当中只有一对取代基可以与它们所连接的原子一起形成如上所定义的环；e)下式所示的肟 其中，在各自情况下，R7、R8和R9分别独立地选自氢、低级烷基、芳基取代的烷基、芳基、环烷基和低级链烯基；f) 其中，在各自情况下，R10和R11分别独立地选自氢、烷基或氮保护基，或者R10和R11一起形成5-7元环烷基；和g) 其中，在各自情况下，R12和R13分别独立地选自氢、烷基或氮保护基，或者R12和R13一起形成5-7元环烷基；且Z是羟基或保护的羟基。
10.权利要求9的方法，其中Rp是乙酰基或苯甲酰基。
11.权利要求8的方法，其中步骤(a)的红霉素衍生物是红霉素9-肟衍生物，将所述红霉素9-肟衍生物用苯甲酰化剂处理。
12.权利要求11的方法，其中的苯甲酰化剂是苯甲酰氯或苯甲酸酐。
13.权利要求11的方法，其中苯甲酰化剂是苯甲酰氯和苯甲酸钠的组合物。
14.权利要求8的方法，其中的烷基化剂选自烯丙基异丙基碳酸酯、烯丙基叔丁基碳酸酯、烯丙基N，N-二异丙基氨基甲酸酯、3-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯和1-(3-喹啉基)-2-丙烯-1-醇叔丁基碳酸酯。
15.权利要求8的方法，其中的钯催化剂选自乙酸钯、四(三苯基膦)钯、三(二亚苄基丙酮)二钯和(四-二亚苄基丙酮)二钯。
16.权利要求8的方法，其中的膦选自三苯基膦、二(二苯基膦)甲烷、二(二苯基膦)乙烷、二(二苯基膦)丙烷、1，4-二(二苯基膦)丁烷、二(二苯基膦)戊烷和三(邻甲苯基)膦。
17.权利要求8的方法，其中钯催化剂与膦的比例为约2∶1-约1∶8。
18.权利要求8的方法，其中将步骤(a)制备的6-O-取代的红霉素衍生物与硫氧化物或亚硝酸钠化合物反应。
19.权利要求18的方法，其中的硫氧化物化合物是亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠或重亚硫酸钠(sodium bisulfite)。
20.权利要求19的方法，其中在有机酸的存在下，将亚硫酸氢钠与6-O-取代的红霉素衍生物反应。
21.权利要求20的方法，其中的反应在非质子传递溶剂中进行。
22.权利要求20的方法，其中的酸是酒石酸。
23.权利要求21的方法，其中的非质子传递溶剂是四氢呋喃。
24.权利要求8的方法，其中步骤(c)的胺碱或胺碱催化剂是六甲基二硅氮烷钠；1，8-二氮杂双环[5.4.0]-十一碳-7-烯；或它们的混合物。
25.一种制备下式化合物或其可药用盐、酯或前药的方法 其中Ra由下式表示 其中，在各自情况下，R独立地选自氢、1-10个碳原子的烷基、卤素、芳基、取代的芳基、杂芳基和取代的杂芳基；该方法包括下列步骤(a)通过用酸水解从红霉素衍生物中除去二脱氧甲基己糖部分，得到下式化合物 (b)保护羟基，得到下式化合物 其中Z是羟基或保护的羟基；(c)在钯催化剂和膦的存在下，用下式的烷基化剂处理步骤(b)所得的化合物 其中R定义如上；R1是1-10个碳原子的烷基；并且X是O或NR＇，其中R＇是烷基或芳基；或者R1和R＇一起形成芳环或非芳香环；获得下式化合物 (d)将步骤(c)所得的化合物进行脱保护和脱肟，获得下式化合物 (e)任选地保护2＇-和3-羟基，并在胺碱或胺碱催化剂的存在下，将步骤(d)所得化合物与1，1＇-羰基二咪唑反应，之后任选在强碱的存在下与氢氧化铵进行反应，获得下式化合物 (f)任选地脱去3-羟基的保护基并氧化3-羟基；和(g)任选地脱去羟基保护基。
26.权利要求25的方法，其中，在各自情况下，Rp独立地选自乙酰基、苯甲酰基和三甲基甲硅烷基。
27.权利要求25的方法，其中V是 其中R3是苯基并且Rp是苯甲酰基。
28.权利要求25的方法，其中V是N-O-R2，其中，在各自情况下，R2和Rp是三甲基甲硅烷基。
29.权利要求25的方法，其中2位Rp是乙酰基，4位Rp是三甲基甲硅烷基。
30.权利要求25的方法，其中步骤(a)的红霉素衍生物中的V具有下式结构 其中R5和R6与和它们所连的碳原子一起形成环己基环并且R4是异丙基。
31.一种下式表示的中间体化合物 其中V＇是氧或N-O-R14；其中R14选自乙酰基、苯甲酰基或三甲基甲硅烷基；在各种情况下，Rp＇独立地选自乙酰基、苯甲酰基或三甲基甲硅烷基；L和T各自是羟基；或者L与T一起形成11，12-氨基甲酸酯；Ra由下式表示 其中，在各自情况下，R独立地选自氢、1-10个碳原子的烷基、卤素、芳基、取代的芳基、杂芳基和取代的杂芳基。
32.权利要求31的中间体化合物，其中Rp＇独立地选自乙酰基或苯甲酰基。
33.权利要求32的中间体化合物，其中Ra是3-(3-喹啉基)-2-丙烯基或2-烯丙基，Rp＇是苯甲酰基，L是羟基并且T是羟基。
全文摘要
一方面,本发明涉及一种制备6－O－取代的红霉素衍生物的方法,包括在钯催化剂和膦的存在下,将2′－取代的和任选地4″－取代的9－肟红霉素衍生物与烷基化剂反应。另一方面,本发明涉及使用钯催化的烷基化反应制备6－O－取代的红霉素酮基内酯的方法。
文档编号A61P31/04GK1379780SQ00812013
公开日2002年11月13日 申请日期2000年6月15日 优先权日1999年6月24日
发明者E·J·斯托纳, M·J·彼得森, 顾宜音, R·D·钦克, A·J·科珀, M·N·德斯潘德, T·格里梅, A·R·海特, D·R·希尔, 玛格丽特·季萍·徐, S·A·金, M·R·莱恩纳, E·C·李, M·A·麦劳林, H·E·莫尔顿, J·J·纳皮尔, D·J·普拉塔, P·S·拉杰, M·拉斯穆森, D·里利, 健－和J·田, S·J·维滕伯格 申请人:艾博特公司