端粒酶抑制剂及其使用方法

专利名称：端粒酶抑制剂及其使用方法
技术领域：
本发明涉及抑制端粒酶活性的噻唑烷酮类化合物，含有这些化合物的药物组合物，以及这些化合物及药物组合物单独或与其它药物活性剂结合在治疗由端粒酶介导的病症或疾病如癌症方面的应用。
背景技术：
端粒酶催化端粒的合成。端粒是特征性串联重复(在哺乳动物中为TTAGGG)，它们在大多数真核生物染色体的端部。它们在人的胚细胞中可能长达15-25千碱基。随着每个细胞的分裂，大约有60-100个碱基从染色体的端部丢失，同时随着端粒的变短，细胞最终到了危险期且细胞程序性死亡被激发。参看Harley等人，(1991)突变研究256:271-282。端粒酶使端粒的长度恰好保持在危险水平之上，因此负责染色体的稳定性并参与细胞周期的调节。
端粒酶是一种核糖核蛋白反转录酶，它含有特有的用于端粒DNA合成的RNA模板。参看Blackbum,1992，生物化学年度评论，61:113-129。端粒酶出现在普通组织的干细胞和胚细胞中，且在85％以上的肿瘤中以更高含量存在(Kim等人，1994，科学，266:2011-2014)。由此，靶向端粒酶的药物将会对肿瘤从正常组织中分离出去具有很高的选择性。因此，已有人提出抑制端粒酶作为治疗癌症的新方法。
曾有报导，通过以端粒酶的RNA片段如肽核酸(Norton等人(1996)，自然生物技术，14:615-619)和硫代磷酸低聚核苷酸为目标的反义方法来抑制端粒酶的活性。由于端粒酶是一个反转录酶，使用反转录酶的抑制剂如AZT、以及其它核苷均有报导。通过可能由于端粒重复序列的交联造成的顺铂抑制端粒酶的活性也有过报道(Burger等人，(1997)Eur.J.Cancer 33:638-644)。
噻唑烷二酮包括一组结构相近的抗糖尿病化合物。这些化合物提高了耐胰岛素动物中靶组织(骨骼肌、肝、脂肪)的胰岛素敏感性。除这些对于高血糖的影响外，噻唑烷二酮也降低了NIDDM动物模型中脂肪和胰岛素的水平。近来，噻唑烷二酮--曲格列酮显现出对遭受葡萄糖耐受性损害的病人与遭受NIDDM的病人有相同的有益效果。这种葡萄糖耐受性损害是一种在NIDDM发展前产生的代谢病症(Nolan等人，(1994)N.Eng.J.Med.331,1188-1193)。尽管噻唑烷二酮的作用机制还不清楚，但有一点是知道的，那就是它们不会增加胰岛素分泌，或增大胰岛素受体结合部位的数量或亲和力，显示出噻唑烷二酮扩大了胰岛素信号发生中的后受体事件(Colca,J.R和Morton,D.R.(1990)新抗糖尿病药物(C.J.Bailey和P.RFlatt编辑)Smith-Gordon，纽约，255-261；Chang等人(1983)糖尿病32，839-845)。
噻唑烷酮被发现是培养前脂肪细胞系的有效诱因(Hiragun等人(1988)J.Cell Physiol.134,124-30；Sparks等人(1991)J.Cell.Physiol.146,101-109；Kleitzien等人(1992)Mol.Pharmacol.41,393-398)。此外，噻唑烷二酮与食欲控制紊乱(参看WO94/25026A1)及骨髓脂肪含量增加也有连带关系。除此之外，噻唑烷二酮化合物被建议用于牛皮癣(第5,824,694号美国专利)、更年期综合症和间质肿瘤(第5,814,647号美国专利)的治疗。
我们已经了解了对于实现本发明方法有用的一些化合物，以及制造这些化合物的方法。例如，以下专利公开了其中一些化合物WO91/07107；WO92/02520；WO94/01433；WO89/08651；JP Kokai69383/92；EP0155848；EP0193256；EP0295828；以及USP4,287,200；4,340,605；4,376,777；4,438,141；4,444,779；4,461,902；4,486,594；4,572,912；4,582,839；4,687,777；4,703,052；4,725,610；4,738,972；4,775,687；4,791,125；4,812,570；4,873,255；4,897,393；4,897,405；4,918,091；4,948,900；5,002,953；5,023,085；5,053,420；5,061,717；5,120,754；5,132,317；5,143,928；5,194,443；5,223,522；5,232,925；5,252,735；5,260,445；5,814,647；5,824,694；和5,874,454。
识别这些抑制端粒酶活性的化合物对于人类疾病的治疗有着非常重要的益处。抑制端粒酶的化合物可用于治疗端粒酶介导的疾病，如癌症，这是因为癌细胞表达端粒酶活性，而正常人体细胞在生物相关水平(即，维持细胞分裂后端粒长度的足够水平)不具有端粒酶活性。不幸的是，仅有很少的化合物被识别和表征，尤其是那些有高潜力或活性且可口服的生物可利用的化合物。因此，仍有对作为端粒酶抑制剂的有高潜力或活性的口服性生物可利用化合物的需要，以及对治疗癌症及其它端粒酶活性异常疾病的药物组合物和方法的需要。本发明满足这些及其它的需要。
发明概述本发明提供了一些方法、化合物及组合物，其通过靶向有端粒酶活性细胞而对于治疗端粒酶介导的疾病，如恶性病症，有着特异且有效的作用。本发明的这些方法、化合物及组合物可被用于广谱恶性细胞类型，以及避免目前癌症治疗模式不具有特异性且有极大毒性的问题。
本发明的第一方面以下发现某些已知的噻唑烷酮化合物以及在此揭示的新噻唑烷酮衍生物对于在体外、ex vivo和体内抑制端粒酶活性是有效的。因此，在某些方面，本发明提供了通过使端粒酶接触在此描述的化合物来抑制端粒酶的方法。在具体的实施例中，要被抑制的端粒酶是哺乳动物的端粒酶，如人的端粒酶。本发明的一个相关的方面是发现噻唑烷酮化合物抑制具有端粒酶活性的细胞，如许多癌细胞的增殖。因此，本发明的这方面提供抑制患有端粒酶介导之病症或疾病的病人、优选哺乳动物中端粒酶活性的方法，其包括向病人给药治疗有效量的抑制端粒酶的噻唑烷酮化合物或其药物学上可接受的盐。
本发明的另一方面提供抑制端粒酶的方法、化合物和药物组合物，包括使端粒酶接触具有下式(Ⅰ)的药物组合物或化合物或其药物学上可接受的盐 其中X是氧或硫， 是一个单键或双键；A是芳基或杂芳基；R1是氢或低级烷基；R2、R3和R4独立地从以下组中选择氢、卤素、烷基、芳基、羟基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、氰基、硝基、烷基脲基、芳香基脲基、二烷基脲基、二芳基脲基、烷基芳基脲基、烷基硫脲基、芳基硫脲基、二烷基硫脲基、二芳基硫脲基、烷基芳基硫脲基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、二芳基氨基、芳基烷基氨基、氨基羰基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、二烷基氨基羰基、二芳基氨基羰基、芳基烷基氨基羰基、烷羰氧基、芳羰氧基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、磺基、烷磺酰氨基、芳磺酰氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、烷基亚硫酰基、芳基亚硫酰基和杂芳基；L是一个直接的键或一个连接基团，其具有1-3个原子，并独立地选自于非取代或取代的碳、氮、氧或硫；以及n等于1或2。
本发明的再一方面提供了抑制端粒酶的方法、化合物和组合物，包括使端粒酶接触具有式(Ⅳ)的化合物或其药物学上可接受的盐 其中X是O或S； 是一个单键或双键；R5是H或低级烷基；以及Ar是取代或非取代的芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、芳基链烯基、杂芳基链烯基、芳基炔基或杂芳基炔基。
本发明的另一方面提供了抑制端粒酶的方法、化合物和组合物，包括使端粒酶接触具有式(Ⅴ)的组合物或化合物或其药物学上可接受的盐 其中X是O或S；R6是H或低级烷基；W是CH=CH、S或-N=C-；R7是OH、卤素、巯基、硝基、氰基、低级烷硫基、低级烷基、低级烷氧基、低级烷酰氧基、NR11R12(其中R11和R12独立地选自于以下组中氢、低级烷基、低级烷酰基、芳基、杂芳基、杂芳烷基、或R11和R12形成取代或非取代杂环)、CO2R13(其中R13选自于以下组中氢、低级烷基、芳烷基和杂芳烷基)、CONR11R12、取代或非取代芳基、取代或非取代杂芳基、芳氧基、杂芳氧基、芳烷氧基、杂芳烷氧基、低级烷酰基、芳酰基、低级链烯基、芳硫基或低级炔基；而且当W代表S,R7也可以是氢；L是O、S、SO、SO2、OCH2、SCH2、SOCH2、SO2CH2或N(R10)(CH2)m(其中R10是取代或非取代芳基、杂芳基、芳烷基、或杂芳烷基，m是0或1)、(CH2)N(R10)(CH2)m或CR13R14(其中R13和R14独立地选自于以下组中氢、羟基、芳基和杂芳基)；以及A1是以下式(A1)的环烷基 其中Z1到Z5独立选自于以下组中氢、低级烷基、低级链烯基、低级烷酰氧基、巯基、烷硫基、NR11R12、硝基、氰基、CO2R13、CONR11R12、芳基、杂芳基、芳氧基、杂芳氧基、芳烷氧基、杂芳烷氧基、卤素和低级烷酰基；其条件是当W是CH=CH时，A也可以是吡啶基。
本发明的新化合物作为有害的端粒酶的活性抑制剂有着许多有价值的应用，例如在哺乳动物如人中治疗癌症。本发明的药物组合物可被用于在体内杀死癌细胞或被用于ex vivo杀死癌细胞。因此，本发明提供在人和其它哺乳动物(如，牛、马、羊、鹿、猪和兽医们关注的猫和狗)中治疗癌症的化合物和组合物，以及治疗癌症和其它由端粒酶介导的病症或疾病。详细描述Ⅰ、定义除非下面另外定义，此处使用的术语具有通常被接受的科学意义。标准化学术语的定义可在参考书中找到，包括Carey和Sundberg(1992)“高级有机化学第三版”第A和B卷，Plenum出版社，纽约。
在此使用的术语“噻唑烷酮”或“噻唑烷酮衍生物”具有下列结构通式 其中X是O或S。当X是O，衍生物为噻唑烷二酮衍生物。当X是S，衍生物是噻唑烷酮硫酮衍生物，同时也被叫做绕丹宁(参看下面实施例25-28)。
在此使用的术语“烷基”是一个直的、支链的或环状的烃链片段或原子团，包含1至约20个碳原子，更优选1至约10个碳原子(例如，甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、环丁基、金刚烷基、noradamantyl、等等)。含8个或更少的碳原子的直链、支链或环状烃链在此也叫作“低级烷基”。烃链可进一步包括一个或更多个不饱和键，即、一个或更多个双或三键(例如，乙烯基、炔丙基、烯丙基、2-丁烯-1-基、2-环戊烯-1-基、1,3-环己二烯-1-基、3-环己烯-1-基、等等)。含双键的烷基基团例如刚提到的也叫作“烯”。同样，含三键的烷基基团也叫作“炔”。但是，对于环烷基基团，双键和/或三键的组合不包括那些使环状烃链具有芳香性的键联设置。
此外，在此使用的“烷基”进一步包括在烃片段或环中的一个或更多的碳原子中的一个或更多的取代。这些取代包括但不限于芳基；杂芳基；卤素(例如形成三氟甲基，-CF3)；硝基(-NO2)；氰基(-CN)；羟基；烷氧基或芳氧基(-OR)；硫基或巯基，烷基硫基或芳硫基(-SR)；氨基，烷基氨基，芳基氨基，二烷基或二芳基氨基，或芳基烷基氨基(-NRR′)；氨基羰基，烷氨基羰基，芳氨基羰基，二烷基氨基羰基，二芳基氨基羰基或芳基烷基氨基羰基(-C(O)NRR′)；羧基，或烷基-或芳基氧基羰基(-C(O)OR)；甲醛基(carboxaldehyde)，芳基羰基或烷基羰基(-C(O)R)；亚氨基(iminyl)，芳基亚氨基或烷基亚氨基(-C(=NR)R')；磺基(-SO2OR)；烷基磺酰基或芳基磺酰基(-SO2R)；脲基(-HNC(=O)NRR′)；硫代脲基(-HNC(=S)NRR′)；其中，R和R′独立地为氢、芳基、或烷基。包括取代基的杂环基团(如杂环、杂芳基和杂芳烷基)类似于上面描述的术语被限定。例如，术语“杂环氧基”指-OR，其中R是如下所定义的杂环。
“低级烷酰基”、“低级烷氧基”、“低级烷酰氧基”、“低级烷硫基”的烷基部分同上面定义的“烷基”相同。
术语“亚甲基”指-CH2-。
术语“次甲基”指亚甲基中的一个氢原子被如上面所描述的取代基替代。术语“次甲基”也可以指亚甲基中的一个氢原子被化合键替代以形成sp2-杂化碳中心(即＞C=O)。
术语“卤”或“卤素”指取代基氟、溴、氯和碘。
术语“羰基”指管能团-(CO)-。但是，它可被具有类似电子和/或结构特性的已知基团代替，例如硫代羰基(-C(S)-)、亚硫酰基(-S(O)-)、磺酰基(-SO2-)、膦酰基(-PO2-)、和亚甲基(-C(=CH2)-)。其它羰基的等同基团为医药和有机化学领域的技术人员熟知。
术语“芳基”指具有20或更少碳原子的环芳香烃链，例如苯基、萘基、联苯基和蒽基。芳基基团的一个或多个碳原子也可以被取代，例如烷基；芳基；杂环；甲酰基；卤素；硝基；氰基；羟基；烷氧基或芳氧基；硫或巯基、烷基硫基或芳基硫基；氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、二芳基氨基、或芳基烷基氨基；氨基羰基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、二烷基氨基羰基、二芳基氨基羰基、或芳基烷基氨基羰基；羧基、烷氧基羰基或芳氧基羰基；甲醛基，芳基羰基或烷基羰基；亚氨基、芳基亚氨基或烷基亚氨基；磺基；烷基磺酰基或芳基磺酰基；羟基亚氨基、芳氧基亚氨基或烷氧基亚氨基；脲基；或硫脲基。此外，芳基基团的两个或更多的烷基或杂烷基取代基可以结合起来构成稠合芳基-烷基或芳基-杂烷基环(如四氢萘基)。包括取代基的杂环基团(例如杂环氧基、杂芳氧基和杂芳烷基硫基)按照类似上面所描述的定义。
术语“芳烷基”指通过一个上面描述的烷基基团连接到母体结构上的芳基基团，如苄基、α-甲基苄基、苯乙基、等等。“芳烷基磺酰基”芳烷氧基中的芳烷基部分同上述“芳烷基”定义相同。
术语“芳酰基”、“芳基链烯基”、“芳基磺酰基”、“芳基硫基”、“芳氧基”、“芳基链烯基磺酰基”、“芳基炔基磺酰基”中的芳基部分与上述“芳基”定义相同。
术语“杂环”指上面定义的环烷基基团或芳基基团，其中一个或多个碳原子被非碳原子取代，特别是氮、氧、或硫。非芳香杂环也指“环杂烷基”。芳香杂环也指“杂芳基”。例如，这样的基团包括呋喃基、四氢呋喃基、吡咯基、吡咯烷基、噻吩基、四氢噻吩基、恶唑基、异恶唑基、三唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、吡唑烷基、恶二唑基、噻二唑基、咪唑基、咪唑啉基、吡啶基、哒嗪基、三嗪基、哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、吡嗪基、哌嗪基、嘧啶基、1,5-二氮杂萘基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、二氢吲哚基、中氮茚基、吲唑基、喹嗪基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、2,3-二氮杂萘基、喹唑啉基、喹喔啉基、喋啶基、奎宁环基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩恶嗪基、嘌呤基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、和苯并恶唑基。
“杂芳烷基”、“杂链烯基”、“杂芳炔基”、“杂芳磺酰基”、“杂芳烷基磺酰基”、“杂芳链烯基磺酰基”、“杂芳炔基磺酰基”、“杂芳氧基”和“杂芳烷氧基”的杂芳基部分与上述“杂芳基”定义相同。
上述杂环基团可进一步在杂芳基的一个或多个碳和/或非碳原子处包括一个或多个取代基，例如烷基；芳基；杂环；甲酰基；卤素；硝基；氰基；羟基；烷氧基或芳氧基；硫或巯基、烷基硫基或芳基硫基；氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、二芳基氨基、或芳基烷基氨基；氨基羰基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、二烷基氨基羰基、二芳基氨基羰基、或芳基烷基氨基羰基；羧基、烷氧基羰基或芳氧基羰基；甲醛基，芳基羰基或烷基羰基；亚氨基、芳基亚氨基或烷基亚氨基；磺基；烷基磺酰基或芳基磺酰基；羟基亚氨基、芳氧基亚氨基或烷氧基亚氨基；脲基；或硫脲基。此外，两个或更多的烷基取代基可以结合起来构成稠合杂环-烷基或杂环-芳基环。包括取代基的杂环基团(例如杂环氧基、杂芳氧基和杂芳烷基硫基)按照类似上面所描述的定义。
术语“杂环烷基”是指通过一个或多个上述烷基基团结合到母体结构上的杂环基团，例如2-哌啶基甲基等。在此使用的术语“杂芳烷基”指通过一个或多个上述烷基基团与母体结构连接的杂芳基，如2-噻吩甲基等。
本发明的化合物可用来抑制或降低端粒酶活性和/或具有端粒酶活性的细胞的增殖。在这里，这些酶或细胞增殖的抑制和降低是指相对于对照实验有更低水平的活性。对照实验中酶和细胞没有用测试化合物处理。在特定的实施例中，该被测活性至少被抑制或降低了10％。对于本领域的熟练技术人员，具体的应用中被测活性至少被抑制或降低20％、50％、75％、90％或100％是优选的。Ⅱ、端粒酶抑制剂如上所述，细胞的不死性涉及端粒酶的激活。更具体地说，端粒酶活性与许多肿瘤细胞系保持不死的能力之间的联系已通过端粒酶活性的分析得以证实(Kim等人)，这些细胞系包括皮肤、结缔组织、脂肪、乳腺、肺、胃、胰、卵巢、子宫颈、子宫、肾、膀胱、结肠、前列腺、中枢神经系统(CNS)、视网膜和血癌细胞系。表明端粒长度缩短的数据以及本分析可以提供给正常细胞复制衰老的信号(参看WO93/23572)，显示出抑制端粒酶活性可以是一种有效的抗癌疗法。“抑制作用”简单地说就是一种能在体内或体外降低端粒酶活性的药剂、药物或化学药品。这些抑制剂用标准筛选方法能很容易地被辩别，其中细胞提取物或其它有端粒酶活性的制剂与潜在的抑制剂相接触，然后在有和没有抑制剂、或抑制剂量变化的情况下测定端粒酶活性的水平。通过这种方法，不仅有用的抑制剂被识别出，此种抑制剂的优选水平也能在体外被测定，但是在体内有待于进一步测定。
在一相关的方面，本发明提供一种抑制细胞增殖或复制能力的方法。在这种方法中，在细胞复制过程期间，提供本发明的一种或多种能抑制端粒酶活性的噻唑烷酮化合物。如上所述，端粒酶对于线形染色体DNA的端部完全复制而不丢失每条链5′端的末端碱基起着关键的作用。不死的细胞和快速增殖的细胞用端粒酶在染色体末端加上端粒DNA重复。端粒酶的抑制作用会导致增殖的细胞不能增加端粒，且它们将最终停止分裂。对于本领域普通技术人员显而易见的是，这种抑制细胞增殖能力的方法对于治疗与细胞增殖率上升有关的病症是非常有效的，例如癌症(恶性细胞中端粒酶活性)、以及红细胞生成(红细胞生成的干细胞中端粒酶活性)。
因此在一个方面中，本发明提供防止或治疗许多类型癌症的组合物和化合物。特别是，正如在不同的人肿瘤细胞系和有端粒酶活性的肿瘤中所显示的，本发明的化合物可以提供一种普遍的治疗许多癌的方法。更重要地，本发明的噻唑烷酮化合物可以在很大程度上有效地区分恶性和正常的细胞，同时避免了目前化学疗法中存在的用药剂不加区分地杀死分裂细胞的许多有害的副作用。代表性的噻唑烷酮化合物包括glitazones，例如曲格列酮(也叫作CS-045(Sankyo)和CI-991(Park-Davis))、吡格列酮(也叫作AD-4833和U-72107E)、rosiglitazone(也叫作BRL49653)、恩格列酮(也叫作CP-68,722)、和环格列酮。
在另一方面，本发明提供了抑制端粒酶活性的新的化合物，有关新化合物或其药物学上可接受的性盐的药物组合物和方法，包括使端粒酶接触具有式(Ⅰ)的化合物或其药物学上可接受的盐 其中X是氧或硫， 是一个单键或双键；A是芳基或杂芳基；R1是氢或低级烷基；R2、R3和R4独立地从以下组中选择氢、卤素、烷基、芳基、羟基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、氰基、硝基、烷基脲基、芳香基脲基、二烷基脲基、二芳基脲基、烷基芳基脲基、烷基硫脲基、芳基硫脲基、二烷基硫脲基、二芳基硫脲基、烷基芳基硫脲基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、二芳基氨基、芳基烷基氨基、氨基羰基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、二烷基氨基羰基、二芳基氨基羰基、芳基烷基氨基羰基、烷羰氧基、芳羰氧基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、磺基、烷磺酰氨基、芳磺酰氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、烷基亚硫酰基、芳基亚硫酰基和杂芳基；L是一个直接的键或一个连接基团，其具有1-3个原子，并独立地选自于非取代或取代的碳、氮、氧或硫；以及n等于1或2。
在具体的实施例中，本发明的新的化合物具有式Ⅱ所示的一般结构 和其药物学上可接受的盐，其中X是O或S，且R2、R3、R4、L和n如上所限定。
在式Ⅰ的化合物中，A可以是芳基，以形成例如苯环部分。或者，A可以是杂芳基，如吡啶、喹啉、异喹啉、噻吩、呋喃、咪唑、苯并咪唑和吡唑等。优选的实施方案中，A是苯基，如式(Ⅱ)。在另一优选的实施方案中，当n是1,R1不可以是氢。在仍优选的实施方案中，R2和R3中至少有一个不是氢。在其它特别优选的实施方案中，R2和R3中至少有一个为卤素，最优选的是，R2和R3都是卤素以形成双卤素取代的苯环部分。
如上所述，L可以是一个直接的键，或者是1-3个原子的连接基团，其中连接基团的原子独立地选自于非取代或取代的碳、氮、氧或硫。本发明化合物有用的代表性的连接基团包括例如-O-、-S-、-NH-、-CH2-、-OCH2-、-OC(O)-、-CO2-、-NHC(O)-、-C(O)NH-、-OC(O)CH2-、-OC(O)NH-和-NHC(O)NH-。
代表化合物包括但不限于5-(2-(3,4-二氯苯基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(3-(3,4-二氯苯基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(4-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(2-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(4-(3,4-二氯苯甲酰氨基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(4-(N-3,4-二氯苯基脲基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(2-(N-3,4-二氯苯基脲基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(2-(N-3,4-二氯苯基氨甲酰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(3-(N-3,4-二氯苯基氨甲酰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(4-(N-3,4-二氯苯基氨甲酰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(4-(N-3,4-二氯苯基氨甲酰氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(4-(3,4-二氯苯氧基羰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(2-(3,4-二氯苯氧基羰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(2-(3,4-二氯苯基乙酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(3-(3,4-二氯苯基乙酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(4-(3,4-二氯苯基乙酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(2-(3,4-二氯苯甲酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(3-(3,4-二氯苯甲酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(4-(3,4-二氯苯甲酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(3,4-二-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(2-(3,4-二氯苯氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(4-(3,4-二氯苯氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(2,5-二-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(2,4-二-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮、5-(2-(3,4-二氯苄硫基)-3H-嘧啶-4-酮-6-基次甲基)绕丹宁、5-(2-(3,4-二氯苄硫基)嘧啶-4-基次甲基)绕丹宁、5-(2-(3,4-二氯苄硫基)嘧啶-4-基次甲基)绕丹宁、5-(3-氰基-2-(3,4-二氯苄硫基)吡啶-6-基次甲基)噻唑烷-2,4-二酮、以及5-(3-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，在具体的实施方案中，本发明的新化合物具有以下式Ⅲ所示的结构 以及它们的药物学上可接受的盐，其中X是氧或硫，R1、R2、R3、R4和L如上所限定。
在另一个实施方案中，本发明提供抑制端粒酶的方法、化合物和组合物，包括使端粒酶接触具有式(Ⅳ)的化合物或其药物学上可接受的盐 其中X是氧或硫； 是单键或双键；R5是氢或低级烷基；以及Ar是取代或非取代芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、芳基链烯基、杂芳基链烯基、芳基炔基或杂芳基炔基。
具有双键的式(Ⅳ)化合物可以通过噻唑烷衍生物与芳香族羰基化合物反应来得到。该反应可选择地在碱性催化剂以及溶剂中进行。碱性催化剂的用量通常在大约0.1到1当量，且可以是哌啶、哌啶嗡乙酸盐、二乙胺、吡啶、乙酸钠、碳酸钾、碳酸钠及类似物。溶剂可以是醇类，如甲醇、乙醇、丙醇等，醚类，如乙醚、四氢呋喃、二恶烷等，或碳氢化合物，如苯、甲苯、二甲苯等，和它们的混合物。反应在室温到大约200℃内进行，优选在50-100℃，且在约1小时至约50小时内完成。式(Ⅳ)的化合物中 为单键时，它可通过还原上述化合物的双键形成。通常，氢化反应需要贵金属催化剂，如钯、铂、铑等，这些是本领域所公知的。
在另一方面，本发明提供抑制端粒酶的方法、化合物和药物组合物，包括使端粒酶接触具有式(Ⅴ)的化合物或其可接受的盐 其中，X为氧或硫；R6为氢或低级烷基；W为CH=CH、S、或-N=C-；R7为H、OH、卤素、巯基、硝基、氰基、低级烷硫基、低级烷基、低级烷氧基、低级烷酰氧基、NR11R12(其中R11和R12独立地选自于以下组中氢、低级烷酰基、芳基、杂芳基、杂芳烷基，或者R11和R12形成取代和非取代的杂环)、CO2R13(其中R13选自于以下组中氢、低级烷基、芳烷基、和杂芳烷基)、CONR11R12、取代或非取代芳基、取代或非取代杂芳基、芳氧基、杂芳氧基、芳烷氧基、杂芳烷氧基、低级烷酰基、芳酰基、低级链烯基、芳硫基或低级炔基；L为O、S、SO、SO2、OCH2、SCH2、SOCH2、SO2CH2或N(R10)(CH2)m(其中R10为取代或非取代芳基、杂芳基、芳烷基或杂芳烷基，且m为0或1)、(CH2)N(R10)(CH2)m或者CR13R14(其中R13和R14独立地选自于以下组中氢、羟基、芳基、杂芳基)；以及A1为具有式(A1)的环芳烷基 其中，Z1到Z5独立地选自于以下组中氢、低级烷基、低级链烯基、低级烷酰氧基、巯基、烷硫基、NR11R12、硝基、氰基、CO2R13、CONR11R12、芳基、杂芳基、芳氧基、杂芳氧基、芳烷氧基、杂芳烷氧基、卤素和低级烷酰氧基，其条件是，当W为CH=CH时，A1可以为吡啶基。
式Ⅰ到Ⅴ代表的本发明化合物的例子在表1到表6显示，但本发明的化合物不限制于此。
表1
表2
p-Tol:4-甲基苯基表3
表4
表5
表5(续)
表5(续)
表5(续)
表6
Ⅲ、端粒酶抑制剂的合成本发明的化合物可以采用本领域所熟知的技术和材料合成，例如，高级有机化学第四版(Wiley1992)；Carey和Sundberg，高级有机化学第三版，第A和B卷(Plenum1992)；以及Green和Wuts，有机合成中的保护基第二版(Wiley1991)。本发明化合物的起始物可通过使用标准技术和市场上可买得到的前体原料来制备，如可从Aldrich Chemical Co.(Milwaukee,Wis.),Sigma Chemical Co.(St.Louis,Mo.),Lancaster Synthesis(Windham,N.H.),Apin Chemicals,Ltd.(New Brunswick,N.J.),Ryan Scientific(Columbia,S.C.),Maybridge(Cornwall,England),Arcos(Pittsburgh,Pa.)，和Trans WorldChemicals(Rockville,Md.)得到。
在此描述的合成本发明化合物的过程可能包括一步或多步保护和去保护过程(如缩醛基的形成和脱除)。此外，以下公开的合成过程可能包括不同的提纯方法，例如柱色谱法、快速色谱法、薄层色谱法(TLC)、重结晶、蒸馏、高压液相色谱法(HPLC)等。同时，鉴定和定量化学反应产物的多种多样的技术在化学领域广泛被了解，如质子和碳-13核磁共振(1H和13CNMR)、红外和紫外光谱仪(IR和UV)、X射线晶体学、元素分析、HPLC和质谱仪(MS)。保护、去保护、提纯、鉴定和定量的方法在化学领域也是众所周知的。
式Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ代表的各类化合物可以通过在以下的实施例中详细描述的通用过程1和通用过程2进行合成。合成上述各种化合物的具体方法在实施例中也被提供。其中L为SO或SO2的式Ⅳ化合物可通过在惰性溶剂中氧化相应的含S化合物来合成。惰性溶剂可以是二氯甲烷、甲醇、四氢呋喃、醚、己烷、甲苯、环己烷等以及它们的混合物。氧化剂可以为m-氯过苯甲酸、过氧化氢等。反应温度在大约-78℃至液体的沸点，优选从0℃到约30℃，反应时间约在0.5至12小时。Ⅳ、本发明中端粒酶抑制剂的抗肿瘤活性本发明的化合物显示出体内抑制端粒酶活性的活性。本发明的化合物在体外的活性也可以用在此描述的方法证实。正如在此所用的术语“exvivo”是指在组织培养中使用活的细胞进行测试。
用于识别本发明中抑制端粒酶活性的化合物的一种方法涉及使细胞、组织、或者优选含有端粒酶的细胞提取物或其它制剂与己知几个浓度的测试化合物在与端粒酶活性相容的缓冲液中相接触。测出对应于每一个浓度的测试化合物的端粒酶活性水平，且用标准技术对化合物的IC50(在样品制剂活性降至其最初或对照组水平一半时的被测化合物浓度)进行测定。使用其它测定本发明抑制端粒酶化合物的抑制浓度的方法以在此公开的作为基础，对于本领域技术人员是显而易见的。
用上述方法测定了本发明的几种化合物的IC50值，发现它们都低于100μm。
通过使用在此描述的化合物治疗恶性疾病，本发明的化合物会导致端粒酶阳性细胞系的危机。使用本发明的化合物治疗端粒酶阳性细胞系，如HEK-293和HeLa细胞，也将会使被处理细胞中端粒的长度缩短。
本发明的化合物还将会导致人肿瘤细胞系的细胞分裂过程中端粒酶缩短，所述细胞系例如是卵巢肿瘤细胞系OVCAR-5和SK-OV-3。但重要的是，以正常的人细胞作对照组，如成纤维细胞组织的BJ细胞，发现端粒酶长度的缩短与对照物质如二甲亚砜(DMSO)没有区别。本发明的化合物在低于5μM的量时对正常细胞没有显著的细胞毒性影响。
此外，本发明化合物对于端粒酶的专一性可以通过比较端粒酶与其它酶的活性(IC50)来确定，这些其他酶与端粒酶的核酸结合相似或与体外端粒酶修正活性相似。这些酶包括DNA聚合酶Ⅰ、HeLa RNA聚合酶Ⅱ、T3RNA聚合酶、MMLV反转录酶、局部异构酶Ⅰ、局部异构酶Ⅱ、终端转移酶和单链DNA结合蛋白(SSB)。相对于其它被筛选的酶，对端粒酶具有较低IC50值的化合物对端粒酶有专一性。
在体内，也可通过异种移植的小鼠模型进行测定，如将OVCAR-5肿瘤细胞移植入裸鼠，将小鼠用本发明的化合物处理，在最初剂量后的一段时间可能会增加肿瘤块，但是继续处理后肿瘤将会大量减少。相反，用对照物(如DMSO)处理的小鼠中肿瘤块预期将会继续增加。
通过以上所述，本领域技术人员将认识到，本发明还可提供选择涉及给药本发明化合物的治疗方案的方法。为此目的，应用末端限制片段(TRF)分析法是很有帮助的，其中肿瘤细胞中的DNA用对除端粒序列以外的序列特异性的限制酶消化来进行分析。消化DNA后，通过凝胶电泳根据大小将限制片段分离。然后，被分离的片段用专一性针对端粒序列的核酸探针进行探测，以测定样品细胞中含有端粒DNA的末端片段的长度。通过测定端粒的DNA长度，可估计端粒酶抑制剂的作用时间和是否还应用其它的疗法(如手术、化学疗法和/或辐射)。此外，在处理过程中，可通过测定在进行细胞分裂后端粒长度是否变短来显示治疗的有效性。Ⅴ、治疗疾病的端粒酶抑制药物组合物和方法本发明还提供能有效地抑制端粒酶阳性细胞增殖、治疗癌症和其它通过抑制端粒酶来有效治疗的病症的药物组合物。这些药物组合物包括在药物学上可接受的载体或盐中含有治疗有效剂量的本发明的端粒酶抑制化合物。
在一个实施方案中，本发明提供抑制端粒酶、同时抑制端粒酶阳性细胞的增殖、以及治疗哺乳动物癌症的方法、化合物和组合物。本发明的组合物包括在药物学上可接受的载体中含有治疗有效量的式Ⅰ到Ⅴ的化合物(或其药物学上可接受的盐)。本发明的化合物和组合物也可以用于治疗其它端粒酶介导的病症或疾病，例如过度增殖性的或自身免疫性的紊乱，例如牛皮癣、类风湿性关节炎、需要免疫系统抑制的免疫系统紊乱、对毒叶藤或毒栎的免疫系统反应等。
此外，本发明的端粒酶抑制剂结合其它抗癌症药剂，包括美国专利5,656,638、5,760,062、5,767,278、5,770,613和5,863,936中的其它端粒酶抑制剂，将会对癌症的治疗带来益处。此等组合的选择依赖于不同的因素，包括但不限于疾病的类型、病人的年龄和基本健康状况、疾病进展的侵蚀性、TRF的长度、待处理的疾病细胞的端粒酶活性和病人对于组合药物的耐受性。例如，在肿瘤发展到晚期时，建议组合本发明的端粒酶抑制化合物以及对降低肿瘤大小有效的其他药剂和治疗方法(如辐射、外科手术、化学疗法、和/或激素疗法)。此外，也有可能用本发明的端粒酶抑制化合物组合其它一种或多种对于治疗疾病副作用有效的药剂，如止痛药、或刺激病人自身免疫反应的药剂(如集落刺激因子)。
其中一种方法是，药物组合物包括本发明的端粒酶抑制剂和抗血管生成剂，如烟曲霉素、烟曲霉素衍生物、或AGM-1470。后一种化合物可从特科达化学公司得到，而前述的化合物描述在Ingber等人，12月6日，1990，“抑制血管生成和抑制肿瘤生长的烟曲霉素合成类似物”，自然348:555-557中。其他组合可包括但不限于用本发明的端粒酶抑制剂组合一种或多种抗瘤剂或添加剂(如亚叶酸或美司钠)。
适合与本发明的化合物组合的抗瘤剂包括但不限于烷化剂包括烷基磺酸酯如白消胺、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮丙啶，如benzodizepa、卡波醌、美妥替哌和乌瑞替哌；氮丙啶和甲基蜜胺，如六甲蜜胺、三乙烯蜜胺、三乙烯磷酰胺、三乙烯硫代磷酰胺和三羟甲基蜜胺；氮芥，如苯丁酸氮芥、萘氮芥、环磷酰胺、雌莫司汀、异环磷酰胺、盐酸氧氮芥、氮芥、美法仑、novembichine、phenesterine、泼尼莫司汀、曲磷胺、和乌拉莫司汀；亚硝基脲，例如卡莫司汀、chlorozotocin、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀和雷莫司汀。其它的药剂包括达卡巴嗪、甘露莫司汀、二溴甘露醇、二溴卫矛醇和哌泊溴烷。其它类别的相关药剂包括抗生素、激素类抗癌药和抗代谢物。此外，还包括为本领域普通技术人员熟知的其他组合。
其它适合于组合本发明化合物的药剂包括蛋白合成抑制剂，如相思豆毒蛋白、金精三羧酸、氯霉素、大肠杆菌素E3、防线菌酮、白喉毒素、伊短菌素A、吐根碱、红霉素、乙硫氨酸、氟化物、5-氟色氨酸、梭链孢酸、鸟苷酰基亚甲基二磷酸、鸟苷酰基亚氨二磷酸盐、卡那霉素、春雷霉素、摩雪霉素和O-甲基苏氨酸。其它蛋白合成抑制剂包括modeccin、新霉素、正缬氨酸、密旋霉素、巴龙霉素、嘌呤霉素、蓖麻毒蛋白、次黄嘌呤、志贺毒素、焦土霉素、司帕霉素、大观霉素、链霉素、四环素、藓霉素和甲氧苄啶。DNA合成的抑制剂也可以与本发明的化合物组合作为药物组合物的成分，其包括烷基化剂，如二甲基硫酸酯、丝裂霉素C、氮芥和硫芥、MNNG和NMS；嵌入剂如吖啶染料、放线菌素、阿霉素、蒽、苯并芘、溴化乙锭、二碘化丙锭-intertwining、以及其它如可替霉素、纺锤菌素的药剂。DNA碱基类似物如阿昔洛韦、线嘌呤β-1-D-阿拉伯糖苷、氨甲蝶呤、氨蝶呤、2-氨基嘌呤、蚜栖菌素、8-氮鸟嘌呤、重氮丝氨酸、6-氮尿嘧啶、2-叠氮基-2-脱氧核苷、5-溴脱氧胞苷、胞嘧啶β-1-D-阿拉伯糖苷、重氮氧正亮氨酸、二脱氧核苷、5-氟脱氧胞苷、5-氟脱氧尿嘧啶核苷、5-氟尿嘧啶、羟基脲以及6-巯基嘌呤也可与本发明的化合物组合进行治疗。拓扑异构酶抑制剂，如香豆毒素、萘啶酸、新生霉素和奥索利酸；细胞分裂抑制剂，包括秋水仙胺、秋水仙素、长春花碱和长春新碱；以及RNA合成抑制剂包括放线菌素D、α-鹅膏菌素和其它霉菌的鹅膏菌素、蛹虫草菌素(3′-脱氧腺苷)、二氯呋喃核糖基苯并咪唑、利福平、曲张链菌素和利迪霉素，也可结合本发明的化合物以提供药物组合物。
在另一实施方案中，本发明包括化合物和组合物，其中端粒酶抑制剂或者结合细胞毒性剂或与共价键结合，该细胞毒性剂已结合于目标物上，如单克隆抗体(如鼠或人单克隆抗体)。应认识到，后一种结合可使细胞毒性剂高度特异性地导入癌细胞中。因此，细胞毒性剂(即、游离形式)将仅会存在于被抗体靶击的细胞中。当然，本发明的端粒酶抑制剂也可结合具有抗癌治疗活性的单克隆抗体。
除了应用本发明的端粒酶抑制剂治疗哺乳动物以端粒酶活性为特征的疾病，如在此揭示的，端粒酶抑制剂还可被用于以端粒酶活性为特征的农业植物病原菌生物中。这些生物包括线虫，如经观察具有端粒酶活性的Ceanorhabditis elegans，还有真菌。根据测定真菌Ustilago maydis的DNA显现出具有串联TTAGGG重复的端粒是靠端粒酶维持，得知真菌具有端粒酶活性。同时，原生动物具有TTAGGG端粒且导致人的疾病。本发明的端粒酶抑制化合物可被单独用于具有端粒酶活性的植物病原菌生物感染的植物和土壤，或结合其它端粒酶抑制剂和/或其它用于控制植物疾病的药剂。测定控制此等植物病原菌生物的药物组合物和以及其恰当的制造方法对于农业领域普通技术人员而言是已知的。
对于线虫、原生动物和具有端粒酶活性真菌的测定显示出本发明所提供的端粒酶抑制剂可以用来治疗人及兽医上感性趣的动物如猫和狗的线虫感染。人和动物的线虫感染经常为钩虫及蛔虫感染的形式，并且导致宿主严重的继发性疾病如脑膜炎、心肌炎和各种神经性疾病。因此，本发明的这些端粒酶抑制化合物单独或结合其它端粒酶抑制剂和/或其它治疗剂使用，可用来控制人及动物线虫、原生动物和真菌的感染。
通常，本发明化合物的合适的有效剂量为每天每公斤体重0.001至1000毫克，优选在每天每公斤体重0.001至100毫克，仍优选在每天每公斤体重0.01至100毫克，更优选在每天每公斤体重0.1至10毫克。这些剂量优选是一天中在适当的时间间隔分一、二、三、四或更多次服用，或者通过连续泵服用。这些亚剂量可以单元剂量剂型给药，每单位剂量例如包含5至10,000毫克、优选在10至1000毫克的活性成分。优选地，每天一次的剂量至少等于TID，或者用连续泵给药系统来进行。
用于这些治疗的药物组合物可有多种形式。它们包括例如固体、半固体和液体剂型，如片剂、丸剂、粉末、液体溶液剂或混悬剂、脂质体以及可注射和可灌注的溶液。优选的剂型取决于给药和治疗的预期方式。正如本领域熟知的，药物组合物也最好包括常规的药物学上可接受的载体和辅剂。参看如REMINGTON′S PHARMACEUTICAL SCIENCES,Mack出版公司，Easton,Pa.，第17版(1985)。优选的是通过口服或非胃肠道(包括皮下、肌肉内、静脉内、表皮内)途径给药。更优选的给药方式为口服。本发明的治疗方法和药剂当然可伴随或结合其它治疗特定疾病或疾病状况的方法和药剂使用。
尽管可以单独使用本发明的活性成分，优选地用一种治疗剂作为药物配方或组合物的一部分。本发明的组合物包括在一种或多种药物或治疗可接受的载体中含有至少一种治疗有效剂量的本发明的端粒酶活性抑制化合物以及选择性地组合其它治疗成分。配制这些组合物的不同考虑被描述在例如Gilman等人(编辑)GOODMAN AND GILMAN′S治疗学的药理学基础，第8版，Pergamon出版社(1990)；以及上述REMINGTON′S中。在此对给药方法进行讨论，如对于口服、静脉内、腹膜内、肌肉内和其它给药的形式。通常，给药药物组合物的方法是进行预防和/或治疗的目的，可以是局部、非胃肠道、或口服。优选口服给药。根据给药方法，药物组合物可以多种单元剂量剂型给药。如上所述，适于口服的单元剂量剂型包括粉末、片剂、丸剂和胶囊。
可使用局部给药本发明的化合物，其方式可以是经皮将药物转运至病人的系统循环中。皮肤部位包括用于透皮给药的解剖学区域，如前肢、腹部、胸部、背部、臀部和mastodial区域。将包含化合物的局部用制剂或者给药化合物的透皮给药装置放置在皮肤上，由此可向皮肤给药本发明的化合物。在任一实施方案中，给药载体以容易放置和舒服地固定于皮肤为依据，进行外观设计、造型及大小设计。
多种经皮给药装置可用于本发明的化合物。例如，可使用一个简单的的粘着片，它包括支持材料和丙烯酸粘着剂。药物和任何渗透促进剂都可以配制入粘着浇注溶液中。粘着浇注溶液可直接浇注在支持材料上或者涂敷在皮肤上形成涂层。参看例如第4,310,509、4,560,555和4,542,012号美国专利。
在其它实施方案中，本发明的化合物通过液体蓄积系统给药装置进行转运。这些系统通常包括支持材料、膜片、以丙烯酸基粘着剂和剥离衬。膜片固定在支持材料上以形成蓄积层。药物或化合物和任何载体、促进剂、稳定剂、胶凝剂等之后掺入蓄积层中。参看例如第4,597,961、4,485,097、4,608,249、4,505,891、3,843,480、3,948,254、3,948,262、3,053,255和3,993,073号美国专利。
包括支持层、药物/渗透促进剂基质、膜片和粘着剂的基质型贴片也可用于经皮给药本发明的化合物。基质材料通常包括聚氨脂泡沫。药、任何促进剂、载体、稳定剂等与泡沫前体混合。使泡沫固化成粘的有弹性的基质，它可直接固定于支持材料上。参看例如第4,542,013、4,460,562、4,466,953、4,482,534和4,533,540号美国专利。
同时，本发明还包括局部皮肤施用的制剂，其含有本发明的化合物，其浓度通常在0.001至10％，同时混合无毒的药理可接受的局部用载体。这些局部制剂可通过混合依照本发明的活性成分和通常被用于局部的干、液体及乳剂的常规药物稀释剂和载体来制备。膏和乳剂可在合适的稠化和/或胶凝剂的基础上与液体或油状基质混合。这些基质可包括水和/或油，如液体石蜡或植物油，如豆油或蓖麻油。根据基质的性质，可被使用的稠化剂包括软石蜡、硬脂酸铝、cetostearyl醇、丙二醇、聚乙二醇、羊毛脂、氢化羊毛脂、蜂蜡等。
洗液剂可与液体或油状基质配制，且通常也包括以下的一种或多种稳定剂、乳化剂、分散剂、悬浮剂、稠化剂、着色剂、芳香剂等。粉末可结合任何合适的粉末基体，如滑石、乳糖、淀粉等。滴剂可结合水性基质或包含一种或多种分散剂、悬浮剂、增溶剂等的非水基质。本发明化合物的局部施用也适于治疗许多疾病，如皮肤癌和皮肤真菌感染(致病性真菌通常表达端粒酶活性)。
依照本发明的局部用药物组合物也可包括一种或多种防腐剂或抑菌剂，如羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、氯甲酚、苯扎氯铵等。局部用药的药物组合物也可包括其它活性成分，如抗微生物剂、尤其是抗生素、麻醉剂、止痛剂和止痒剂。
本发明的化合物还可通过粘膜转运。经粘膜转运(即舌下、颊和肠)给药使活性物质有效进入系统循环，同时降低了肝脏和肠壁菌丛的瞬时代谢。经粘膜给药的剂型(如片剂片、栓剂、油膏、阴道环、膜片和粉末)通常都与粘膜接触并迅速崩解和/或溶解，以允许被系统迅速吸收。值得注意的是，此种方法甚至可用于病人不能消化口服治疗成分的情况。同时本发明的端粒酶抑制剂输送被增强，可选择给药至粘膜的药物组合物，例如，对于结肠癌就可使用栓剂来给药端粒酶抑制剂。
对于给药至颊或舌下膜，通常使用口服制剂，例如锭剂、片剂或胶囊。制备这些制剂的方法在本领域被熟知，它包括但不限于，将药剂添加到预制的药片中；对惰性填料、粘合剂以及药剂或包含这种药剂的物质进行冷压制(在美国专利4,806,356中描述)；以及包胶。另一种口服制剂可用粘着剂施用于口腔粘膜，所述粘着剂例如是纤维素衍生物羟基丙基纤维素，例如在美国专利4,940,587中所述的。这种颊粘着制剂，当用于颊粘膜时，使药剂受控地释放进入口腔并通过颊粘膜。
非胃肠道给药通常以注射为特征，可为皮下、肌肉内或静脉注射。因此，本发明提供了静脉给药的药物组合物，它包括本发明的化合物的溶液被溶解或悬浮于可接受的载体中。注射剂可采用常规的形式，或者为液体溶液或者为悬浮液，在注射前应能溶解或悬浮于液体中的固体形式，或者为乳剂。适合的赋形剂例如是水、缓冲水、盐水、葡萄糖、甘油、乙醇等。这些药物组合物采用常规熟知的灭菌技术灭菌，如灭菌过滤。由此得到的溶液可以被包装以便使用或冻干，冻干的药剂在使用前与无菌的溶液混合。此外，如果愿意，要给药的药物组合物也可包括少量的无毒的辅助物质，例如润湿剂或乳化剂、pH缓冲溶剂等，例如乙酸钠、脱水山梨醇单月桂酸酯、油酸三乙醇胺等。这些制剂可用于治疗卵巢癌。
另一种非胃肠道给药的方法是运用植入缓慢释放或持续释放系统，这样可维持一个固定水平的剂量。参看如美国专利3,710,795。
可给药的液态药物组合物可以通过溶解、分散等技术制备，将如上所述的活性化合物和选择性药物辅剂加入到赋形剂中，例如水、盐水、葡萄糖水溶液、甘油、乙醇、橄榄油和其它亲油性溶剂等中，以形成溶液或悬浮液。如果需要，待给药的药物组合物可包括少量的无毒辅助物质，如润湿剂或乳化剂、pH缓冲溶剂等，例如乙酸钠、脱水山梨醇单月桂酸酯、油酸三乙醇胺等。制备这些剂型的具体方法为本领域普通技术人员所熟知；例如，参看上述REMINGTON′S PHARMACEUTICALSCIENCES。待给药的这些药物组合物或制剂包括治疗有效剂量的本发明的活性化合物。
对于固体组合物，可使用常规的无毒固体载体，包括例如药物级的甘露糖醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、钠糖精、滑石、纤维素、葡萄糖、蔗糖、碳酸镁等。对于口服给药，药物学上可接受的无毒的组合物可通过将任何通常使用的赋形剂，如以上所列出的载体，和0.1-95％、优选约为20％的活性成分混合而制备。
给药包含本发明化合物的组合物可以用于预防和或治疗目的。在治疗应用中，药物组合物用于已经得病的病人，如上面所描述的，用量为足以治愈或至少部分缓解疾病症状及其并发症的剂量。足以完成治疗的剂量被定义为“治疗有效量或剂量”。有效的剂量依赖于疾病的严重程度和病人的体重和基本状况。
除了体内治疗，本发明的化合物和组合物还可以用于ex vivo以达到治疗效果，例如对于患白血病的病人。在此种应用中，待治疗的细胞，例如血或骨髓细胞，从病人体内移走并且用有效剂量的本发明化合物处理。这些细胞在处理后移回病人体内。与其它方法相比，这种过程可允许细胞长时间或暴露于高浓度的治疗剂中。
一旦病人的情况改善，例如癌症病人的状况得到缓解，如果必要，则给病人给药维持剂量。随后，由于治疗的作用，可降低用药的剂量或频率，或二者共同降低到维持这种改善的水平。当症状缓解到预期的水平时，可停止治疗。但是，当病人疾病症状复发时，就要再次进行治疗。
在预防(如化学预防)应用中，可将含有本发明化合物的组合物给药于易感染某一特定疾病或有患病危险的病人。这种用药的剂量被称为“预防有效量或剂量”。在这样的应用中，具体的剂量也要依赖于病人的健康状况和体重而定。
对于阅读了本说明书的本领域的普通技术人员来说显而易见的是，本发明提供了对人类和哺乳动物端粒酶有价值的药剂。以上所描述的仅仅是一些有限的和说明性的特定化合物的举例性的说明，不应理解为对本发明范围的限制。本发明的其它特点和优点将会从下面的实施例和权利要求中得到说明。
实施例下面的实施例为了说明本发明进行了具体的描述，且同时提供了对抑制端粒酶活性化合物鉴定和测定的方法，以便于本领域的普通技术人员理解和应用本发明。实施例不应被认为是以任何形式限制本发明。
在下面的实施例1-24中运用了以下通用过程通用过程1偶联2,4-噻唑烷二酮(TZD)为醛。
将适当取代的醛(1当量)、2,4-噻唑烷二酮(1.5当量)和派啶(1.5当量)在EtOH中的溶液加热至90℃C持续2-16小时。所得的溶液用1N HCl水溶液酸化。所得的固体物质过滤后用水和/或醚洗涤，得到纯产物。另一种方案是，酸化的水溶液用氯仿或乙酸乙酯萃取，有机相用水洗涤，用Na2SO4干燥，减压浓缩得到粗产物，将该固体粗产物用柱色谱法或重结晶法在合适的溶剂中提纯。
反应通常在0.5毫摩尔水平进行。
实施例1制备5-(2-(3,4-二氯苯基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 步骤A制备醛向2-溴苯甲醛(1当量)和3,4-二氯苯基硼酸(1.2当量)的乙腈溶液中加入K2CO3(1.5当量)，随后加入Pd(PPh3)4(催化剂)。反应加热到75℃，持续搅拌16小时，之后反应物经EtOAc稀释，经水洗涤，Na2SO4干燥，减压浓缩，得到的粗醛用柱色谱提纯。步骤B通用过程1通用过程1之后得到5-(2-(3,4-二氯苯基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6,δ):7.70(d,1H),7.76(d,1H),7.59-7.42(m,5H),7.28(dd,1H)MS(ESI)计算349，实测348(M-H)-。
实施例2制备5-(3-(3,4-二氯苯基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 步骤A制备醛通过实施例1的步骤A用3-溴苯甲醛制备所需的醛。步骤B通用过程1通用过程1之后得到5-(3-(3,4-二氯苯基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6,δ):7.98(s,1H),7.94(s,1H),7.84(s,1H),7.79(d,1H),7.74-7.66(m,2H),7.63-7.53(m,2H)MS(ESI)计算349，实测348(M-H)-。
实施例3制备5-(4-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 步骤A制备醛向4-羟基苯甲醛的乙腈溶液中加入K2CO3(1.5当量)，随后加入3,4-二氯苄基氯(3当量)。所得的反应混合物加热到90℃，持续2-16小时，并同时滤掉沉淀。滤液用EtOAc稀释，用水洗涤，Na2SO4干燥，然后减压浓缩得到粗产物。此产物由CH2Cl2/己烷溶剂系统中重结晶提纯，以得到纯醛。步骤B通用过程1通用过程1之后得到5-(4-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6,δ):7.69(d,2H),7.62(d,1H),7.52(d,2H),7.41(d,1H),7.12(d,2H),5.20(s,2H)MS(ESI)计算379，实测378(M-H)-。
实施例4制备5-(2-(3,4-二氯苄氧基)-次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 步骤A制备醛通过实施例3步骤A的过程从2-羟基苯基醛制备所需的醛。步骤B通用过程1通用过程1之后得到5-(2-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
实施例5制备5-(4-(3,4-二氯苯甲酰氨基)-次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 步骤A制备醛向4-硝基苯甲醛(1当量)的三甲基原甲酸酯溶液中加入PTSA(催化剂)，所得到的混合物加热回流持续3-5小时，同时将反应混合物减压浓缩。残余物在乙醚中溶解，用NaHCO3和水洗涤，用Na2SO4干燥，减压浓缩以得到二甲基缩醛。
粗二甲基缩醛溶解在EtOH中，随后加入雷尼镍。0℃时，15分钟内向该混合物滴加水合肼(5当量)以控制其沸腾。反应物加热到室温，再搅拌3小时，然后过滤出去催化剂。滤液减压浓缩。将残余物再溶解于EtOAc中，用水洗涤，用Na2SO4干燥，减压浓缩以得到粗4-氨基苯甲醛二甲基缩醛。
在0℃，向4-氨基苯甲醛二甲基缩醛的CH2Cl2溶液中加入TEA(2当量)，之后加入3,4-二氯苯甲酰氯(1.5当量)。所得的混合物在室温下搅拌2-16小时，并用水和EtOAc稀释。分离有机层，用水洗涤，之后减压浓缩。残余物用CHCl3溶解，随后加入2N HCl水溶液。搅拌混合物1小时，分离出有机相，用饱和NaHCO3溶液和水洗涤，用Na2SO4干燥，减压浓缩以得到粗醛。该醛可用柱色谱法或重结晶法从合适的溶剂系统中得到纯4-(3,4-二氯苯甲酰氨基)苯甲醛。步骤B通用过程1通用过程1后得到5-(2-(3,4-二氯苄氧基)-次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6,δ):12.50(br s,1H),10.60(s,1H),8.18(d,1H),7.90-7.86(m,3H),7.78(d,1H),7.70(s,1H),7.56(d,1H)。
MS(ESI)计算392，实测391(M-H)-。
实施例6制备5-(4-(N-3,4-二氯苯基脲基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 步骤A制备醛向4-硝基苯甲醛(1当量)的三甲基原甲酸酯溶液中加入PTSA(催化剂)，所得到的混合物加热回流持续3-5小时，同时将反应混合物减压浓缩。残余物溶于乙醚中，用NaHC03和水洗涤，用Na2SO4干燥，减压浓缩以得到二甲基缩醛。
将粗二甲基缩醛溶于EtOH中，随后加入雷尼镍(催化剂)。0℃时，15分钟之内将水合肼(5当量)滴加到该混合物中以控制其沸腾。反应物加热到室温，再搅拌3小时之后过滤掉催化剂，将滤液减压浓缩。将残余物再溶解于EtOAc中，用水洗涤，用Na2SO4干燥，减压浓缩以得到粗氨基苯甲醛二甲基缩醛。
在氨基苯甲醛二甲基缩醛(1当量)的乙腈溶液中加入固体3,4-二氯苯基异氰酸酯(2当量)。所得的混合物搅拌6-16小时，同时用EtOAc稀释，用水洗涤，用Na2SO4干燥，减压浓缩以得到粗脲。将该脲在CH2Cl2中溶解，之后再加入50％TFA水溶液。搅拌所得的混合物2小时同时分离有机相，用饱和NaHCO3水溶液和水洗涤，用Na2SO4干燥，减压浓缩以得到粗产物。步骤B通用过程通用过程1之后得到5-(4-(N-3,4-二氯苯基脲基)次苄基)噻唑烷-2,4二酮。
NMR(DMSO-d6,δ):9.40(d,2H),8.58(s,1H),7.84(d,1H),7.76(d,2H),7.54(d,2H),7.48(d,1H),7.30(dd,1H)MS(ESI)计算407，实测406(M-H)-。
实施例7制备5-(2-(N-3,4-二氯苯基脲基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 步骤A制备醛通过使用实施例6步骤A的过程从2-硝基苯甲醛制备所需的醛。步骤B通用过程1
通用过程1之后得到5-(2-(N-3,4-二氯苯基脲基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6,δ):10.10(Br s,1H),7.70(d,1H),7.62(d,1H),7.42(dd,1H),7.26-7.22(m,2H),6.94(t,1H),6.70(d,1H),5.86(d,1H)。
实施例8制备5-(2-(N-3,4-二氯苯基氨甲酰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 步骤A制备5-(2-羧基次苄基)噻唑烷-2,4-二酮通过通用过程1的方法从2-羧基苯甲醛制备5-(2-羧基次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。步骤B羧基基团的精心处理将5-(2-羧基次苄基)噻唑烷-2,4-二酮在SO2Cl2中溶解，随后加入1-2滴DMF。所得的混合物加热到约80℃持续15-30分钟，同时减压浓缩。残余物在THF中溶解，并滴加到3,4-二氯苯胺(1.5当量)和TEA(2当量)的混合溶液中。再搅拌该混合物1-2小时，将反应混合物中的固体过滤。将滤液减压浓缩得到的固体用水和乙醚洗涤，以得到纯产物。
NMR(DMSO-d6,δ):10.80(Br s,1H),8.06(d,1H),7.93(s,1H),7.73-7.54(m,6H)。
MS(ESI)计算392，实测391(M-H)-
实施例9制备5-(3-(N-3,4-二氯苯基氨甲酰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 根据实施例8的方法分两步通过3-羧基苯甲醛制备5-(3-(N-3,4-二氯苯基氨甲酰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6,δ):8.12(d,1H),8.08(s,1H),7.97(d,1H),7.82(s,1H),7.77(d,1H),7.72-7.64(m,2H),7.60(d,2H)。
MS(ESI)计算392，实测391(M-H)-实施例10制备5-(4-(N-3,4-二氯苯基氨甲酰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 根据实施例8的方法通过4-羧基苯甲醛制备5-(4-(N-3,4-二氯苯基氨甲酰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6,δ):10-60(Br s,1H),8.12(s,1H),8.02(d,2H),7.82(s,1H),7.71(d,3H),7.58(d,1H)。
MS(ESI)计算392，实测391(M-H)-实施例11制备5-(4-(N-3,4-二氯苯氨甲酰氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 步骤A制备5-(4-羟基次苄基)噻唑烷-2,4-二酮通过通用过程1的方法从4-羟基苯甲醛制备5-(4-羟基次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。步骤B羟基的精心处理向5-(4-羟基次苄基)噻唑烷-2,4-二酮(1当量)的乙腈溶液中加入K2CO3(xs)，随后加入固体3,4-二氯苯基异氰酸酯(2当量)。所得的混合物搅拌6-16小时，之后将固体过滤，用水洗涤后得到纯产物。
NMR(DMSO-d6,δ):12.60(Br s,1H),10.60(br s,1H),7.76(d,2H),7.62(d,2H),7.56(dd,1H),7.41(dd,1H),7.37(dd,1H)。
MS(ESI)计算408，实测407(M-H)-
实施例12制备5-(4-(3,4-二氯苯氧基羰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 将5-(4-羧基次苄基)噻唑烷-2,4-二酮(从实施例8步骤A)在SO2Cl2中溶解，随后加入1-2滴DMF。所得的混合物加热到约80℃持续15-30分钟，并将反应混合物减压浓缩。残余物在THF中溶解，并滴加到3,4-二氯苯酚(1.5当量)和TEA(2当量)的混合溶液中。搅拌所得到的混合物1-2小时，将反应混合物中的固体过滤。滤液减压浓缩后得到的固体用水和乙醚洗涤，以得到纯酯。用另一种方法，在5-(4-羧基次苄基)噻唑烷-2,4-二酮(1当量)和3,4-二氯苯酚(1当量)的CH2Cl2溶液中加入DCC(1当量)。所得到的反应混合物搅拌16小时后过滤，滤液用水洗涤，减压浓缩后得到的粗产物经重结晶提纯。
NMR(DMSO-d6,δ):8.1 8(d,2H),7.80(d,2H),7.77-7.68(m,3H),7.38-7.33(m,1H)。
MS(ESI)计算393，实测392(M-H)-实施例13制备5-(2-(3,4-二氯苯氧基羰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 通过实施例12的方法制备5-(2-(3,4-二氯苯氧基羰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6,δ):8.28(s,1H),8.22(d,1H),7.80(t,1H),7.76(d,1H),7.73(d,1H),7.64(d,1H),7.38(dd,1H)。
MS(ESI)计算393，实测392(M-H)-实施例14制备5-(2-(3,4-二氯苯基乙酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 步骤A制备5-(2-羟基次苄基)噻唑烷-2,4-二酮通过通用过程1从2-羟基苯甲醛制备5-(2-羟基次苄基)噻唑烷-2,4-二2酮。步骤B羟基基团的精心处理将3,4-二氯苯乙酸在SO2Cl2中溶解，随后加入几滴DMF。所得的混合物加热到80℃持续15-30分钟，将反应混合物减压浓缩。残余物在THF中溶解，并缓慢加入到5-(4-羟基次苄基)噻唑烷-2,4-二酮(1.5当量)和TEA(1.5当量)的THF溶液中。搅拌混合物1-2小时，将反应混合物中的固体过滤出去。滤液减压浓缩得到浅黄色的固体。将该固体用EtOAc溶解，用饱和K2CO3水溶液洗涤。分离出有机相，用Na2SO4干燥，减压浓缩以得到纯产物。
NMR(DMSO-d6,δ):12.65(Br s,1H),7.65(d,1H),7.57(d,1H),7.55(s,1H),7.54-7.6(m,2H),7.41(d,1H),7.37(dd,1H),7.30(d,1H),4.00(s,2H)。
MS(ESI)计算407，实测406(M-H)-。
实施例15制备5-(3-(3,4-二氯苯基乙酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 用实施例14的方法通过3-羟基苯甲醛制备5-(3-(3,4-二氯苯基乙酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6,δ):12.60(Br s,1H),7.74(s,1H),7.66(d,1H),7.59(d,1H),7.53(t,1H),7.45(d,1H),7.38-7.33(m,2H),7.24(d,1H),4.00(s,2H)。
MS(ESI)计算407，实测406(M-H)。
实施例16制备5-(4-(3,4-二氯苯基乙酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 用实施例14的方法通过4-羟基苯甲醛制备5-(4-(3,4-二氯苯基乙酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6,δ):7.76(s,1H),7.66(d,1H),7.60(m,3H),7.36(dd,1H),7.28(d,2H),4.00(s,2H)。
MS(ESI)计算407，实测406(M-H)-。
实施例17制备5-(2-(3,4-二氯苯甲酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 步骤A制备5-(2-羟基次苄基)噻唑烷-2,4-二酮通过通用过程1从2-羟基苯甲醛制备5-(2-羟基次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。步骤B羟基基团的酰化将3,4-氯苯甲酰氯的THF溶液缓慢加入5-(羟基次苄基)噻唑烷-2,4-二酮(1.5当量)和TEA(1.5当量)的THF溶液中。搅拌得到的混合物1-2小时，将反应混合物中的固体过滤除去。滤液减压浓缩得到浅黄色的固体。将该固体用EtOAc溶解，用饱和K2CO3水溶液洗涤。分离出有机相，用Na2SO4干燥，减压浓缩以得到纯产物。
NMR(DMSO-d6,δ):8.30(s,1H),8.09(dd,1H),7.90(d,1H),7.68-7.62(m,1H),7.42-7.28(m,3H),7.18(s,1H)。
MS(ESI)计算393，实测392(M-H)-实施例18制备5-(3-(3,4-二氯苯甲酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 用实施例17的方法通过3-羟基苯甲醛制备5-(3-(3,4-二氯苯甲酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6,δ):8.27(s,1H),8.06(d,1H),7.86(d,1H),7.52-7.38(m,3H),7.24(s,1H),7.20(d,1H)。
MS(ESI)计算393，实测392(M-H)-
实施例19制备5-(4-(3,4-二氯苯甲酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 用实施例17的方法通过4-羟基苯甲醛制备5-(4-(3,4-二氯苯甲酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6,δ):8.26(d,1H),8.04(dd,1H),7.85(d,1H),7.58(d,2H),7.36(d,2H),7.39-7.34(m,3H)。
MS(ESI)计算393，实测392(M-H)-。
实施例20制备5-(3,4-二-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 步骤A制备醛将3,4二氯苄基氯(415μl,3mmol)加入到138mg(1mmol)3,4-二氯羟基苯甲醛和690mg碳酸钾在DMF中的混合物内。所得的混合物加热到70℃并搅拌过夜。反应混合物用20ml的水稀释，并将混合物过滤。收集过滤产生的白色沉淀并风干，得到426mg(93％)目的产物。
1H NMR(部分)(400MHz,DMSO-d6)δ9.9(s,1H),5.24(s,2H),5.19(s,2H)。步骤B通用过程1NMR(400MHz,DMSO-d6,δ):7.68-7.66(m,H),7.65(s,1H),7.63-7.59(m,2H),7.41-7.37(m,2H),7.21-7.20(m,1H),7.18-7.15(m,2H)。
MS(ESI)计算553，实测552(M-H)-。
实施例21制备5-(2-(3,4-二氯苯氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 步骤A制备醛将2-氟苯甲醛(248.23mg 210μl,2mmol)和3,4-二氯苯酚的混合物与碳酸钾在5mL二甲基乙酰胺中一起在90℃搅拌12小时。反应混合物用20ml的水稀释，并用25mL乙酸乙酯萃取。有机层用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤，之后用硫酸钠干燥，真空浓缩，在未经进一步纯化的情况下产物为棕色油。步骤B通用过程1NMR(DMSO-d6,δ)7.73(s,1H),7.59(m,2H),7.46(t,1H),7.34(m,2H),7.02(m,2H)MS(ESI)计算365，实测364(M-H)-实施例22制备5-(4-(3,4-二氯苯氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 应用制备5-(2-(3,4-二氯苯氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮的方法(实施例21)制备5-(4-(3,4-二氯苯氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
MS(ESI)计算365，实测364(M-H)-
实施例23制备5-(2,5-二-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 应用制备5-(3,4-二-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮的方法(实施例20)制备5-(2,5-二-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6,δ)7.88(s,1H),7.70-7.66(m,2H),7.64-7.60(m,2H),7.42-7.34(m,2H),7.12-7.10(m,2H),6.90(brs,1H)MS(ESI)计算553，实测552(M-H)-
实施例24制备5-(2,4-二-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 应用制备5-(3,4-二-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮的方法(实施例20)制备5-(2,4-二-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮MS(ESI)计算553，实测552(M-H)-在随后的实施例25-28中，应用下述的通用过程2通用过程2偶合绕丹宁得到醛将适当取代的醛(1当量)、绕丹宁(1当量)和乙二胺二乙酸(1当量)的甲醇溶液加热回流1-3小时。将所得的沉淀分离并分别用甲醇、水、10％硫酸氢钠水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和水洗涤，然后风干。
反应通常在0.1毫摩尔水平进行。
实施例25制备5-(2-(3,4-二氯苄硫基)-3H-嘧啶-4-酮-6-基次甲基)绕丹宁 步骤A制备醛向0.75g(3.7mmol)6-二甲氧基甲基-2-巯基-3H-嘧啶-4酮的DMF溶液中悬浮有0.66g碳酸钾的悬浮液中加入0.512mL(3.7mmol)3,4-二氯苄基氯。将该悬浮液静置2天。混合物用40mL乙酸乙酯和40mL 10％硫酸氢钠水溶液稀释。通过过滤分离出沉淀并用水洗涤，得到1.0g纯缩醛。
将0.8g6-二甲氧基甲基二2-(3,4-二氯苄硫基)-3H-嘧啶-4酮在70％三氟乙酸水溶液中的溶液搅拌12小时。溶液用固体碳酸氢钠中和，然后用乙酸乙酯萃取。有机层用硫酸镁干燥并浓缩。残余物用1∶1的醚∶己烷研制得到600g纯产物。步骤B通用过程2通用过程2后得到5-(2-(3,4-二氯苄硫基)-3H-嘧啶-4-酮-6-基次甲基)绕丹宁。
实施例26制备5-(2-(3,4-二氯苄硫基)嘧啶-4-基次甲基)绕丹宁 步骤A制备醛将1.66g(7.98mmol)4-二甲氧基甲基嘧啶-2-硫酮钠盐、2.7g碳酸钾和α,3,4-三氯甲苯的悬浮液搅拌2天。混合物倾入水中并用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，用硫酸镁干燥，并浓缩，最后得到1.65g巯基缩醛产物。
将0.8g所述的缩醛在5ml浓盐酸的悬浮液回流约5分钟，直到溶液澄清。溶液冷却后用水稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液中和，并用乙酸乙酯萃取。将有机层干燥(无水硫酸钠)并浓缩，得到100mg目的醛。步骤B通用过程2通用过程2后得到5-(2-(3,4-二氯苄硫基)嘧啶-4-基次甲基)绕丹宁。
实施例27制备5-(2-(3,4-二氯苄硫基)嘧啶-4基次甲基)绕丹宁
向搅拌的5-(2-(3,4-二氯苄硫基)嘧啶-4-基次甲基)绕丹宁(实施例25,0.3mmol)和甲苯(5ml)的悬浮液中加入2,6-二甲基-1,4-二氢-3,5-吡啶二甲酸二乙基酯(109mg,0.39mmol)和0.3克活性硅胶。将混合物加热到80℃并持续20分钟，在保持温热时过滤。滤饼用乙酸乙酯洗涤并将滤液蒸发至干。将残余物再溶于乙酸乙酯中，并用1N盐酸水溶液萃取。将有机层干燥(硫酸钠)并浓缩得到11mg纯产物。
实施例28制备5-(3-氰基-2-(3,4-二氯苄硫基)吡啶-6-基次甲基)噻唑烷-2,4-二酮 步骤A制备醛将0.2g(1mmol)3-氰基-6-二甲氧基甲基-吡啶-2-硫醇、过量碳酸钾和α,3,4-三氯甲苯(3mmol)的乙腈悬浮液加热到75℃并持续10分钟。Tlc证实反应结束。将混合物倾入水中并用乙酸乙酯萃取。有机层干燥(硫酸钠)并浓缩，得到固体巯基缩醛并用己烷洗涤。
所述的缩醛溶于氯仿(2ml)并加入2mL 50％的三氟乙酸水溶液。16小时后，TLC显示反应接近结束。混合物蒸发至干并立即进入步骤B(核磁共振图谱表明其与理论结构一致)。步骤B通用过程1通用过程1后得到5-(3-氰基-2-(3,4-二氯苄硫基)吡啶-6-基次甲基)噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6,δ):8.12(d,1H),7.68(d,1H),7.53(d,1H),7.48(d,1H),7.38-7.34(m,1H),7.31(s,1H),4.80(s,1H)实施例29制备5-(3-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮 步骤A制备醛向3-羟基苯甲醛的乙腈溶液中加入碳酸钾(1.5当量)，随后加入3,4-二氯苄基氯(3当量)。得到的反应混合物加热到90℃并持续2-16小时，过滤掉沉淀。滤液用EtOAc稀释，用水洗涤，用硫酸钠干燥并减压浓缩得到粗产物。通过重结晶从CH2Cl2/己烷溶液系统中得到纯醛。步骤B通用过程1通用过程1后得到5-(3-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6,δ):7.69(d,2H),7.61(d,1H),7.43-7.31(m,3H),7.12-7.08(m,2H),6.96(d,1H),5.11(s,2H)MS(ESI)计算378.98，实测378(M-H)-
实施例30制备化合物1将2-(4-甲基苯硫基)-5-硝基苯甲醛(1.00g,3.66mmol)、2,4-噻唑烷二酮(1.72g,14.7mmol)和哌啶(0.14mL,1.5mmol)在乙醇(40mL)中回流加热26小时。反应溶液冷却到室温，通过过滤收集沉淀析出的晶体，得到化合物1(577mg,42％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.38(s,3H),7.07(d,J=8.8Hz,1H),7.37(d,J=8.1Hz,2H),7.49(d,J=7.9Hz,2H),7.89(s,1H),8.14(dd,J=8.8,2.2Hz,1H),8.22(d,J=2.2Hz,1H),12.8(br s,1H)FABMS m/z 373(M+H)+C17H14N2O4S2=372实施例31制备化合物2将化合物1(200mg,0.538mmol)溶解在丙酮(30mL)中，将该溶液与三氯化钛(20％水溶液，4mL)混合，随后在室温下搅拌30分钟。向反应溶液加入饱和碳酸氢钠水溶液，混合物用乙酸乙酯萃取两次。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物从乙酸乙酯/己烷中重结晶得到化合物2(69mg,38％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ2.21(s,3H),5.86(br s,2H),6.70(dd,J=8.4,2.6Hz,1H),6.82(d,J=2.4Hz,1H),6.89(d,J=8.3Hz,2H),7.06(d,J=8.1Hz,2H),7.33(d,J=8.4Hz,1H),8.06(s,1H),12.5(br s,1H)FABMS m/z 342(M+)C17H14N2O2S2=342
实施例32制备化合物3化合物2(20mg,0.058mmol)溶解在二甲基甲酰胺(1mL)中，向溶液中加入乙酸酐(1mL)和三乙胺(0.016mL,0.12mmol)，随后在室温下搅拌50分钟。向反应溶液加入水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物通过制备性薄层色谱法(9/1氯仿/甲醇)提纯得到化合物3(7.0mg,31％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.08(s,3H),2.25(s,3H),7.07(d,J=8.3Hz,2H),7.14(d,J=8.3Hz,2H),7.45(d,J=8.6Hz,1H),7.58(dd,J=8.4,2.2Hz,1H),8.08(s,1H),8.09(d,J=2.4Hz,1H),10.3(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 385(M+H)+C19H16N2O3S2=384实施例33制备化合物4在冰冷却下，将化合物1(100mg,0.269mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)和甲醇(4mL)的混合溶剂中，将溶液与m-氯过苯甲酸(50％纯度，100mg,0.289mmol)混合，随后在室温下搅拌3小时。反应溶液与10％亚硫酸氢钠水溶液混合并用氯仿萃取。有机层用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用乙酸乙酯研制得到化合物4(86mg,82％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d3)δ2.30(s,3H),7.32(d,J=8.1Hz,2H),7.48(d,J=8.3Hz,2H),7.88(s,1H),8.20(d,J=2.2Hz,1H),8.32(d,J=8.6Hz,1H),8.50(dd,J=8.6,2.2Hz,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 387(M-H)-C17H12N2O5S2=388
实施例34制备化合物5化合物1(20mg,0.054mmol)溶解在二氯甲烷(5mL)和甲醇(1mL)的混合溶剂中，将溶液与m-氯过苯甲酸(50％纯度，187mg,0.540mmol)混合，随后在室温下搅拌1.5小时。反应溶液与10％亚硫酸氢钠水溶液混合并用氯仿-甲醇(9∶1)萃取四次。有机层用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物通过制备性薄层色谱法(6∶1氯仿/乙腈)提纯得到化合物5(10mg,46％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.36(s,3H),7.43(d,J=8.3Hz,2H),7.74(d,J=8.4Hz,2H),8.06(s,1H),8.28(br s,1H),8.49(s,2H),12.9(br s,1H)FABMS m/z 403(M-H)-C17H12N2O6S2=404实施例35制备化合物62-(4-氯苯硫基)苯甲醛(249mg,1.00mmol)、2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.5mmol)和哌啶(0.10mL,1.0mmol)在乙醇(8mL)中加热回流3小时。将反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(1mL)，之后用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用乙酸乙酯研制得到化合物6(274mg,70％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.24(d,J=8.4Hz,2H),7.42(d,J=8.6Hz,2H),7.5-7.6(m,4H),8.03(s,1H),12.7(br s,1H)FABMS m/z 348(M+H)+C16H1035ClNO2S2=347
实施例36制备化合物7在冰冷却下，将化合物6(20mg,0.057mmol)悬浮在二氯甲烷(5mL)中，悬浮液与m-氯过苯甲酸(50％纯度，22mg,0.063mmol)混合，随后在室温下搅拌20分钟。向反应溶液加入10％亚硫酸氢钠水溶液，混合物用氯仿/甲醇(9∶1)萃取。有机层用碳酸氢钠水溶液、水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用二异丙醚研制得到化合物7(15mg,72％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.55(d,J=9.0Hz,2H),7.59(d,J=9.0Hz,2H),7.6-7.8(m,2H),7.9-8.0(m,2H),8.02(s,1H),12.7(br s,1H)FABMS m/z 364(M+H)+C16H1035ClNO3S2=363实施例37制备化合物8在冰冷却下，将化合物6(20mg,0.057mmol)悬浮在二氯甲烷(5mL)中，悬浮液与m-氯过苯甲酸(50％纯度，200mg,0.57mmol)混合，随后在室温下搅拌3小时。向反应溶液加入10％亚硫酸氢钠水溶液，混合物用氯仿/甲醇(9∶1)萃取。有机层用饱和碳酸氢钠水溶液、水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用二异丙醚研制得到化合物8(16mg,74％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.60(d,J=7.5Hz,1H),7.68(d,J=8.8Hz,2H),7.7-7.8(m,1H),7.81(d,J=8.8Hz,2H),7.87(td,J=7.7,1.3Hz,1H),8.11(s,1H),8.27(dd,J=7.9,1.3Hz,1H),12.8(br s,1H)
FABMS m/z 380(M+H)+C16H1035ClNO4S2=379实施例38制备化合物94-(4-甲基苯硫基)-3-硝基苯甲醛(273mg,1.00mmol)、2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.50mmol)和哌啶(0.40mL,0.40mmol)在乙醇(8mL)中加热回流19小时。反应溶液冷却到室温，收集过滤析出的晶体得到化合物9(175mg,47％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.41(s,3H),6.92(d,J=8.6Hz,1H),7.40(d,J=7.9Hz,2H),7.54(d,J=8.3Hz,2H),7.72(dd,J=8.6,2.2Hz,1H),7.73(s,1H),8.46(d,J=1.8Hz,1H),12.7(br s,1H),FABMS m/z 373(M+H)+C17H12N2O4S2=372实施例39制备化合物102-苯氧基苯甲醛(合成，28(1995))(198mg,1.00mmol)、2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.50mmol)和哌啶(0.10mL,1.0mmol)在乙醇(5mL)中加热回流4小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(1ml)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用二异丙醚研制得到化合物10(199mg,67％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ6.95(d,J=8.1Hz,1H),7.05(d,J=7.5Hz,2H),7.20(t,J=7.3Hz,1H),7.32(t,J=7.7Hz,1H),7.4-7.5(m,3H),7.58(dd,J=7.7,1.3Hz,1H),7.95(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 298(M+H)+C16H11NO3S=297
实施例40制备化合物113-苯氧基苯甲醛(0.712mL,1.00mmol)、2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.50mmol)和哌啶(0.10mL,1.0mmol)在乙醇(5mL)中加热回流10小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(1ml)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用二异丙醚研制得到化合物11(141mg,47％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.0-7.3(m,5H),7.35(d,J=7.9Hz,1H),7.44(dd,J=8.4,7.5Hz,2H),7.54(t,J=7.9Hz,1H),7.82(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 298(M+H)+C16H11NO3S=297实施例41制备化合物123-(4-甲基苯氧基)苯甲醛(0.193mL,1.00mmol)、2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.50mmol)和哌啶(0.10mL,1.0mmol)在乙醇(5mL)中加热回流7小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(1ml)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物从乙醇/乙酸乙酯重结晶得到化合物12(98mg,32％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.31(s,3H),6.9-7.0(m,3H),7.12(t,J=2.0Hz,1H),7.23(d,J=8.4Hz,2H),7.29(br s,J=7.9Hz,1H),7.45(t,J=7.9Hz,1H),7.49(s,1H)FABMS m/z 312(M+H)+C17H13NO3S=311
实施例42制备化合物133-(3,4-二氯苯氧基)苯甲醛(0.198mL,1.00mmol)、2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.50mmol)和哌啶(0.10mL,1.0mmol)在乙醇(5mL)中加热回流7小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(1ml)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用乙酸乙酯研制得到化合物13(252mg,69％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.0-7.2(m,2H),7.25(t,J=2.0Hz,1H),7.38(d,J=7.7Hz,1H),7.38(d,J=2.8Hz,1H),7.52(t,J=8.0Hz,1H),7.53(s,1H),7.66(d,J=8.8Hz,1H)FABMS m/z 366(M+H)+C16H9ClNO3S=365实施例43制备化合物144-苯氧基苯甲醛(0.175mL,1.00mmol)、2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.50mmol)和哌啶(0.10mL,1.0mmol)在乙醇(5mL)中加热回流6小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(1ml)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用己烷/二异丙醚研制得到化合物14(252mg,85％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.0-7.2(m,4H),7.23(t,J=7.3Hz,1H),7.4-7.5(m,2H),7.62(d,J=8.8Hz,2H),7.78(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 298(M+H)+C16H11NO3S=297
实施例44制备化合物15氩气氛中，将4-氟苯甲醛(0.53mL,5.0mmol)和对苯酚(648mg,6.0mmol)溶解在二甲基乙酰胺(8mL)中，并且向溶液中加入碳酸钾(828mg,6.0mmol)和氧化铜(95mg,0.50mmol)，混合物加热回流1.5小时。反应溶液冷却到室温，加入水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用0.5N氢氧化钠水溶液、水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用硅胶柱色谱(6∶1己烷/乙酸乙酯)提纯得到4-(4-甲基苯氧基)苯甲醛(697mg,66％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ2.37(s,3H),6.98(d,J=8.4Hz,2H),7.03(d,J=8.6Hz,2H),7.21(d,J=8.6Hz,2H),7.82(d,J=9.0Hz,1H),9.91(s,1H)FABMS m/z 213(M+H)+C14H12O2=212这样获得的4-(4-甲基苯氧基)苯甲醛(212mg,1.00mmol)、2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.50mmol)和哌啶(0.10mL,1.0mmol)在乙醇(5mL)中加热回流6小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(1ml)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用二异丙醚研制得到化合物15(252mg,81％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.31(s,3H),7.01(d,J=8.4Hz,2H),7.06(d,J=8.8Hz,2H),7.25(d,J=8.6Hz,2H),7.60(d,J=8.8Hz,2H),7.76(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 312(M+H)+C17H13NO3S=311
实施例45制备化合物16(1)氩气氛中，将5-硝基水杨醛(334mg,2.00mmol)溶解在二甲基甲酰胺(5mL)中，将溶液与苄基溴(0.238mL,2.00mmol)和氢化钠(88mg,2.4mmol)混合,70℃搅拌13小时。反应溶液用冰冷却，加入水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用二异丙醚研制得到2-苄氧基-5-硝基苯甲醛(337mg,66％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ5.33(s,2H),7.18(d,J=9.2Hz,1H),7.4-7.5(m,5H),8.42(dd,J=9.2,2.9Hz,1H),8.73(d,J=2.9Hz,1H),10.5(s,1H)FABMS m/z 258(M+H)+C14H11NO4=257(2)这样获得的2-苄氧基-5-硝基苯甲醛(257mg,1.00mmol),2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.50mmol)和哌啶(0.10mL,1.0mmol)在乙醇(5mL)中加热回流6小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(1ml)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用二异丙醚研制得到化合物16(211mg,59％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ5.42(s,2H),7.3-7.6(m,6H),7.91(s,1H),8.25(d,J=2.6Hz,1H),8.35(dd,J=9.2,2.8Hz,1H),12.7(br s,1H)FABMS m/z 357(M+H)+C17H12N2O5S=356
实施例46制备化合物17(1)采用与实施例45(1)相同的方法，从5-硝基水杨醛(334mg,2.00mmol)和3,4-二氯苄基氯(0.305mL,2.20mmol)得到2-(3,4-二氯苄氧基)-5-硝基硝基苯甲醛(482mg,74％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ5.27(s,2H),7.14(d,J=9.2Hz,1H),7.30(dd,J=8.3,2.2Hz,1H),7.53(d,J=8.3Hz,1H),7.56(d,J=2.2Hz,1H),8.43(dd,J=9.2,2.9Hz,1H),8.74(d,J=2.9Hz,1H),10.5(s,1H)(2)这样获得的2-(3,4-二氯苄氧基)-5-硝基苯甲醛(326mg,1.00mmol)采用与实施例45(2)相同的方法得到化合物17(142g,33％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ5.42(s,2H),7.44(d,J=9.4Hz,1H),7.49(dd,J=8.3,2.0Hz,1H),7.72(d,J=8.3Hz,1H),7.80(d,J=1.8Hz,1H),7.90(s,1H),8.26(d,J=2.6Hz,1H),8.36(dd,J=9.4,2.8Hz,1H),12.8(br s,1H)FABMS m/z 425(M+H)+C17H1035Cl2N2O5S=424实施例47制备化合物18(1)采用与实施例45(1)相同的方法，从5-硝基水杨醛(334mg,2.00mmol)和4-甲基苄基溴(370mg,2.00mmol)得到2-(4-甲基苄氧基)-5-硝基苯甲醛(413mg,76％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ2.18(s,3H),5.28(s,2H),7.18(d,J=9.4Hz,1H),7.24(d,J=8.1Hz,2H),7.33(d,J=8.1Hz,2H),8.40(dd,J=9.2,2.9Hz,1H),8.72(d,J=2.9Hz,1H),10.5(s,1H)
FABMS m/z 272(M+H)+C15H13NO4=271(2)这样获得的2-(4-甲基苄氧基)-5-硝基苯甲醛(271mg,1.00mmol)采用与实施例45(2)相同的方法得到化合物18(200mg,54％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.32(s,3H),5.35(s,2H),7.24(d,J=7.9Hz,2H),7.38(d,J=7.9Hz,2H),7.47(d,J=9.3Hz,1H),7.88(s,1H),8.24(d,J=2.8Hz,1H),8.34(dd,J=9.2,2.8Hz,1H),12.7(br s,1H)FABMS m/z 371(M+H)+C18H14N2O5S=370实施例48制备化合物19(1)采用与实施例45(1)相同的方法，从3-羟基-4-硝基苯甲醛(334mg,2.00mmol)和4-甲基苄基溴(370mg,2.00mmol)得到3-(4-甲基苄氧基)-4-硝基苯甲醛(315mg,58％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ2.36(s,3H),5.27(s,2H),7.20(d,J=7.9Hz,2H),7.34(d,J=8.1Hz,2H),7.53(dd,J=8.1,1.5Hz,1H),7.64(d,J=1.5Hz,1H),7.92(d,J=8.1Hz,1H),10.0(s,1H)FABMS m/z 272(M+H)+C15H13NO4=271(2)这样获得的3-(4-甲基苄氧基)-4-硝基苯甲醛(271mg,1.00mmol)采用与实施例45(2)相同的方法处理并用乙酸乙酯/己烷重结晶得到化合物19(95mg,26％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.31(s,3H),5.32(s,2H),7.22(d,J=7.9Hz,2H),7.29(dd,J=8.4,1.5Hz,1H),7.36(d,J=8.1Hz,2H),7.64(d,J=1.7Hz,1H),7.81(s,1H),8.02(d,J=8.4Hz,1H),12.8(br s,1H)
FABMS m/z 371(M+H)+C18H14N2O5S=370实施例49制备化合物20(1)采用与实施例45(1)相同的方法,从4-羟基-3-硝基苯甲醛(334mg,2.00mmol)和4-甲基苄基溴(370mg,2.00mmol)得到4-(4-甲基苄氧基)-3-硝基苯甲醛(365mg,67％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ2.36(s,3H),5.31(s,2H),7.21(d,J=8.1Hz,2H),7.26(d,J=8.8Hz,1H),7.33(d,J=8.1Hz,2H),8.02(dd,J=8.6,2.0Hz,1H),8.34(d,J=2.0Hz,1H),9.92(s,1H)FABMS m/z 272(M+H)+C15H13NO4=271(2)这样获得的4-(4-甲基苄氧基)-3-硝基苯甲醛(271mg,1.00mmol)采用与实施例45(2)相同的方法处理并用乙酸乙酯/己烷重结晶得到化合物20(123mg,33％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.31(s,3H),5.34(s,2H),7.22(d,J=7.9Hz,2H),7.35(dd,J=8.1Hz,2H),7.60(d,J=9.0Hz,2H),7.81(s,1H),7.84(dd,J=9.0,2.2Hz,1H),8.15(d,J=2.2Hz,1H),12.7(br s,1H)FABMS m/z 371(M+H)+C18H14N2O5S=370实施例50制备化合物21(1)采用与实施例45(1)相同的方法，从5-羟基-2-硝基苯甲醛(334mg,2.00mmol)和4-甲基苄基溴(370mL,2.00mmol)得到5-(4-甲基苄氧基)-2-硝基苯甲醛(413mg,76％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ2.37(s,3H),5.16(s,2H),7.19(dd,J=9.0,2.9Hz,1H),7.21(d,J=7.5Hz,2H),7.31(d,J=8.1Hz,2H),7.41(d,J=2.9Hz,1H),8.15(d,J=9.2Hz,1H),10.5(s,1H)FABMS m/z 272(M+H)+C15H13NO4=271(2)这样获得的5-(4-甲基苄氧基)-2-硝基苯甲醛(271mg,1.00mmol)、2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.50mmol)和哌啶(0.10mL,1.0mmol)在乙醇(8mL)中加热回流1.5小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1NHCL(1mL)，用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用硅胶柱色谱提纯(19∶1氯仿/乙腈)和制备性薄层色谱法(10∶1氯仿/甲醇)得到化合物21(30mg,8.1％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ2.38(s,3H),5.16(s,2H),7.04(d,J=2.4Hz,1H),7.09(dd,J=9.2Hz,2.6Hz,1H),7.22(d,J=7.9Hz,1H),7.30(d,J=7.8Hz,2H),8.22(d,J=9.2Hz,1H),8.24(s,1H),9.00(br SR1H)FABMS m/z 371(M+H)+C18H14N2O5S=370实施例51制备化合物22氩气氛中，将水杨醛(0.213mL,2.00mmol)溶解在二甲基甲酰胺(5mL)中，向溶液中加入4-甲基苄基溴(370mg,2.00mmol)和氢化钠(88mg,2.4mmol),70℃搅拌1.5小时。反应溶液用冰冷却，加入水，用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，向其中加入2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.50mg)、哌啶(0.10mL,1.0mmol)和乙醇(5mL)，加热回流1.5小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(1mL)，然后混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用己烷/二异丙醚研制得到化合物22(542mg,83％通过两步得到)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.31(s,3H),5.19(s,2H),7.10(t,J=7.5Hz,1H),7.22(d,J=7.7Hz,2H),7.24(d,J=7.5Hz,1H),7.35(d,J=8.1Hz,2H),7.4-7.5(m,2H),8.01(s,1H),12.6(br 1H)FABMS m/z 326(M+H)+C18H15NO3S=325实施例52制备化合物23氩气氛中，将5-甲氧基水杨醛(0.249mL,2.00mmol)溶解在二甲基甲酰胺(5mL)中，向溶液中加入4-甲基苄基溴(370mg,2.00mmol)和氢化钠(88mg,2.4mmol),70℃搅拌1.5小时。反应溶液用冰冷却，加入水，用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，加入2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.50mg)、哌啶(0.10mL,1.0mmol)和乙醇(5mL)，加热回流1.5小时。反应溶液冷却到室温，收集过滤析出的晶体得到化合物23(419mg,59％通过两步得到得到)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.31(s,3H),3.75(s,3H),5.12(s,2H),6.90(d,J=2.9Hz,1H),7.05(dd,J=9.0,2.9Hz,1H),7.18(d,J=9.0Hz,1H),7.20(d,J=7.7,2H),7.32(d,J=8.1Hz,2H),7.95(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 356(M+H)+C19H17NO4S=355实施例53制备化合物24
氩气氛中，将5-氯水杨醛(313mg,2.00mmol)溶解在二甲基甲酰胺(5mL)中，向溶液中加入4-甲基苄基溴(370mg,2.00mmol)和氢化钠(88mg,2.4mmol),70℃搅拌0.5小时。反应溶液用冰冷却，加入水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，加入2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.50mg)、哌啶(0.10mL,1.0mmol)和乙醇(5mL)，加热回流4小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(5mL)，然后混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用己烷/二异丙醚研制得到化合物24(428mg,60％通过两步得到)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.31(s,3H),5.19(s,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),7.27(d,J=9.0Hz,1H),7.34(d,J=8.4Hz,1H),7.36(d,J=2.9Hz,1H),7.51(dd,J=9.0,2.8Hz,1H),7.87(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 360(M+H)+C18H1435ClNO3S=359实施例54制备化合物25氩气氛中，将5-溴水杨醛(1.00g,5.00mmol)溶解在二甲基甲酰胺(10mL)中，向溶液中加入4-甲基苄基溴(925mg,5.00mmol)和氢化钠(220mg,5.50mmol),70℃搅拌0.5小时。反应溶液用冰冷却，加入水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，加入2,4-噻唑烷二酮(702mg,6.00mmol)、哌啶(0.50mL,5.0mmol)和乙醇(40mL)，加热回流4小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(5mL)，然后混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用己烷/二异丙醚研制得到化合物25(1.27mg,63％通过两步得到得到)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.31(s,3H),5.19(s,3H),7.21(d,J=8.8Hz,3H),7.34(d,J=8.0Hz,2H),7.48(d,J=2.4Hz,1H),7.62(dd,J=8.8,2.4Hz,1H),7.86(s,J=1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 406,404(M+H)+C18H1479BrNO3S=403实施例55制备化合物262-二苯基氨基苯甲醛(273mg,1.00mmol)、2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.50mmol)和哌啶(0.10mL,1.0mmol)在乙醇(8mL)中加热回流4小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(2mL)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用乙酸乙酯研制得到化合物26(293mg,79％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ6.93(d,J=7.2Hz,2H),7.1-7.2(m,6H),7.3-7,5(m,6H),7.67(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 373(M+H)+C22H16N2O2S=372实施例56制备化合物272-苯基苯甲醛(Tetrahedron Lett.,38(32):5575(1997))(273mg,1.50mmol)、2,4-噻唑烷二酮(263mg,2.25mmol)和哌啶(0.15mL,1.5mmol)在乙醇(8mL)中加热回流3小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(2mL)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用二异丙基醚研制得到化合物27(344mg,82％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.3-7.4(m,2H),7.4-7.7(m,8H),12.6(brs,1H)FABMS m/z 282(M+H)+C16H11BrNO2S=281实施例57制备化合物283-苯基苯甲醛(Tetrahedron Lett.,38(32):5575(1997))(269mg,1.48mmol)、2,4-噻唑烷二酮(259mg,2.22mmol)和哌啶(0.15mL,1.5mmol)在乙醇(8mL)中加热回流3小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(2mL)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用二异丙基醚研制得到化合物28(355mg,85％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.3-7.8(m,8H),7.89(s,2H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 282(M+H)+C16H11NO2S=281实施例58制备化合物294-苯基苯甲醛(182mg,1.00mmol)、2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.5mmol)和哌啶(0.10mL,1.0mmol)在乙醇(6mL)中加热回流3小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(1mL)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用二异丙醚研制得到化合物29(187mg,67％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.4-7.6(m,3H),7.70(d,J=8.4Hz,2H),7.75(d,J=7.2Hz,2H),7.85(s,1H),7.86(d,J=8.1Hz,2H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 282(M+H)+C16H11NO2S=281实施例59制备化合物304-(α-羟基苄基)苯甲醛(有机化学杂志，62:4643(1997))(1.35g,6.37mmol)、2,4-噻唑烷二酮(894mg,7.64mmol)和哌啶(0.64mL,6.4mmol)在乙醇(6mL)中加热回流10小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(7mL)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用二异丙醚研制得到化合物30(1.73g,87％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ5.75(d,J=2.7Hz,1H),6.03(d,J=2.7Hz,1H),7.21(tt,J=7.2,1.5Hz,1H),7.31(t,J=7.2Hz,2H),7.38(d,J=7.3Hz,2H),7.53(s,4H),7.75(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 312(M+H)+C17H13NO3S=311实施例60制备化合物31化合物30(622mg,2.00mmol)溶解在乙腈(80mL)中，向该溶液中加入二氧化锰(2.61g)并将混合物加热回流4.5小时。反应溶液冷却到室温并通过Celite过滤，减压蒸发除去溶剂。残余物通过硅胶柱色谱(9∶1氯仿/乙腈)提纯，并用二异丙醚研制得到化合物31(73mg,12％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.58(t,J=7.5Hz,2H),7.6-7.8(m,5H),7.86(d,J=7.9Hz,2H),7.87(s,1H),12.7(br s,1H)FABMS m/z 310(M+H)+C17H11NO3S=309实施例61制备化合物32将化合物30(115mg,0.39mmol)溶解在二氯甲烷(15mL)中，向溶液中加入三氟乙酸(0.30mL,3.9mmol)和三乙基硅烷(0.81mL,5.1mmol)，并将混合物加热回流12小时。减压蒸发除去溶剂，残余物用丙酮/己烷重结晶得到化合物32(70mg,61％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ4.00(s,2H),7.1-7.3(m,5H),7.39(d,J=8.1Hz,2H),7.52(d,J=8.1Hz,2H),7.75(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 296(M+H)+C17H13NO2S=295实施例62制备化合物334-甲酰基三苯甲醇(有机化学杂志,63:9924(1998))(576mg,2.00mmol)、2,4-噻唑烷二酮(218mg,2.40mmol)和哌啶(0.20mL,2.0mmol)在乙醇(15mL)中加热回流9小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(2mL)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用乙酸乙酯/二异丙醚研制得到化合物33(684mg,78％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ6.61(s,1H),7.2-7.4(m,10H),7.37(d,J=8.4 Hz,2H),7.55(d,J=8.4Hz,2H),7.76(s,1H),1 2.6(br s,1H)FABMS m/z 388(M+H)+C23H17NO3S=387实施例63制备化合物34将化合物33(219mg,0.566mmol)溶解在二氯甲烷(15mL)中，向溶液中加入三氟乙酸(0.385mL,0.50mmol)和三乙基硅烷(0.80mL,0.50mmol)，在室温下搅拌10分钟。减压蒸发除去溶剂，残余物从己烷中重结晶得到化合物34(198mg,94％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ5.70(s,1H),7.1-7.4(m,12H),7.55(d,J=8.3Hz,2H),7.75(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 372(M+H)+C23H17NO2S=371实施例64制备化合物35氩气氛中，将二苯胺(338mg,2.00mmol)和4-溴苄基溴(500mg,2.00mmol)溶解在二甲基甲酰胺(8mL)中，在冰冷却下，向溶液中加入氢化钠(88mg,2.2mmol)，在室温下搅拌4小时。向反应溶液加入水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用硅胶柱色谱(14∶1己烷/丙酮)提纯得到N-(4-溴苄基)二苯胺(478mg,71％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.93(s,2H),6.94(tt,J=7.3,1.1Hz,2H),7.03(dd,J=8.8,1.1Hz,4H),7.2-7.3(m,6H),7.42(d,J=8.6Hz,2H)
FABMS m/z 339,337(M+)C19H1679BrN=337氩气氛中，将所得到的N-(4-溴苄基)二苯胺(440mg,1.30mmol)溶解在四氢呋喃(6mL)中并且冷却到-78℃。向其中加入1.6M丁基锂己烷溶液(1.3mL,2.0mmol),5分钟后再加入二甲基甲酰胺(0.20mL,2.6mmoL)，再搅拌5分钟。向反应溶液中加入水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用硅胶柱色谱(9∶1己烷/乙酸乙酯)提纯得到4-(N,N-二苯基氨基甲基)苯甲醛(213mg,57％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ5.06(s,2H),6.96(t,J=7.3Hz,2H),7.03(d,J=8.6Hz,4H),7.25(dd,J=8.6,7.3Hz,4H),7.52(d,J=8.4Hz,2H),7.83(d,J=8.3Hz,2H),9.97(s,1H)FABMS m/z 287(M+)C20H17NO=287所得到的4-(N,N-二苯基氨基甲基)苯甲醛(198mg,0.690mmol)、2,4-噻唑烷二酮(117mg,1.10mmol)和哌啶(0.068mL,0.69mmol)在乙醇(6ml)中加热回流5小时。反应溶液冷却到室温，收集过滤析出的晶体得到化合物35(240mg,90％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ5.06(s,2H),6.92(t,J=7.2Hz,2H),7.05(d,J=8.4Hz,4H),7.25(t,J=7.7Hz,4H),7.48(d,J=8.3Hz,2H),7.55(d,J=8.4Hz,2H),7.75(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 386(M+)C23H18N2O2S=386实施例65制备化合物36
氩气氛中，将4-溴苯胺(344mg,2.00mmol)溶解在二甲基甲酰胺(5mL)中，在冰冷却下，向溶液中加入氢化钠(200mg,5.00mmol)和苄基溴(0.52mL,4.4mmol)，在室温下搅拌11小时。向反应溶液加入水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用乙酸乙酯重结晶得到4-溴-N,N-二苄基苯胺(442mg,63％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.63(s,2H),6.59(d,J=9.0,2H),7.2-7.4(m,12H)FABMS m/z 353,351(M+)C20H1879BrN=351氩气氛中，将所得的4-溴-N,N-二苄基苯胺(425mg,1.21mmol)溶解在四氢呋喃(5mL)中并冷却到-78℃。向其中加入1.6M丁基锂己烷溶液(1.1mL,1.8mmol),5分钟后再加入二甲基甲酰胺(0.186mL,2.4mmoL)，再搅拌5分钟。向溶液中加入水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用硅胶柱色谱(9∶1己烷/乙酸乙酯)得到4-(二苄基氨基)苯甲醛(192mg,53％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.75(s,4H),6.79(t,J=9.0Hz,2H),7.2-7.4(m,10H),7.69(d,J=9.0,2H),9.73(s,1H)FABMS m/z 302(M+)C21H19NO=301所得到的4-(二苄基氨基)苯甲醛(181mg,0.601mmol)、2,4-噻唑烷二酮(105mg,0.900mmol)和哌啶(0.059mL,0.60mmol)在乙醇(7mL)中加热好了回流5小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(0.6mL)，然后将混合物用乙酸乙酯萃取。减压蒸发除去溶剂，残余物用二异丙醚研制得到化合物36(207mg,86％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ4.81(s,4H),6.81(d,J=8.8Hz,2H),7.2-7.4(m,12H),7.61(s,1H),12.3(br s,1H)FABMS m/z 400(M+)C24H20N2O2S=400实施例66制备化合物395-硝基-2-[(4-三氟甲基)苯氧基]苯甲醛(311mg,1.00mmol)、2,4噻唑烷二酮(234mg,2.00mmol)和哌啶(0.10mL,1.0mmol)在乙醇(8mL)中加热回流13小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(1mL)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用硅胶柱色谱(15∶1氯仿/乙腈)提纯，用二异丙醚研制得到化合物39(146mg,36％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.16(d,J=9.2Hz,1H),7.45(d,J=8.4Hz,2H),7.89(d,J=8.4Hz,2H),7.93(s,1H),8.30(dd,J=9.2,2.8Hz,1H),8.39(d,J=2.2Hz,1H),12.8(br s,1H)FABMS m/z 411(M+H)+C17H9F3N2O5S=410实施例67制备化合物40氩气氛中，将2-溴-5-羟基苯甲醛(201mg,1.00mmol)溶解在二甲基甲酰胺(3mL)中，向该溶液中加入4-甲基苄基溴(185mg,1.00mmol)和氢化钠(48mg,1.2mmol)，随后在70℃搅拌3小时。反应溶液用冰冷却，加入水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，加入2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.5mmo1)、哌啶(0.10mL,1.0mmol)和乙醇(6mL)，之后加热回流13小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(5mL)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，之后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用硅胶柱色谱(20∶1氯仿/乙睛)提纯，用二异丙醚研制得到化合物40(142mg,35％通过两步得到)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.31(s,3H),5.13(s,2H),7.0-7.1(m,2H),7.21(d,J=7.7Hz,2H),7.34(d,J=7.7Hz,1H),7.69(d,J=8.6Hz,1H),7.79(s,1H),12.7(br s,1H)FABMS m/z 406,404(M+)C18H1479BrNO3S=403实施例68制备化合物41氩气氛中，将2,5-二羟基苯甲醛(138mg,1.00mmol)溶解在二甲基甲酰胺(35mL)中，向该溶液中加入4-甲基苄基溴(370mg,2.00mmol)和氢化钠(88mg,2.2mmol)，随后在70℃搅拌2小时。反应溶液用冰冷却，加入水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，加入2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.5mmol)、哌啶(0.10mL,1.0mmol)和乙醇(8mL)，之后加热回流2小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(5mL)，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，之后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用己烷/二异丙醚研制，得到化合物41(340mg,76％通过两步得到)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.30(s,6H),5.05(s,2H),5.11(s,2H),6.93(br s,1H),7.1-7.2(m,2H),7.20(d,J=7.7Hz,4H),7.32(d,J=7.9Hz,4H),7.93(s,1H),12.6Hz,1H)FABMS m/z 446(M+H)+C26H23NO4S=445实施例69制备化合物42氩气氛中，5′-溴-2′-羟基苯乙酮(215mg,1.00mmol)溶解在二甲基甲酰胺(5mL)中，向溶液中加入4-甲基苄基溴(185mg,1.00mmol)和碳酸钾(152mg,1.1mmol)，随后在70℃搅拌5小时。反应溶液用冰冷却，加入水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用0.1N氢氧化钠水溶液、水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，加入2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.5mmol)和乙酸钠(123mg,1.0mmol)，随后在190℃搅拌3-5小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(1mL)，用乙酸乙酯萃取。有机层用水和饱和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用硅胶柱色谱(30∶1氯仿/乙睛)提纯得到化合物42(102mg,24％通过两步得到)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ2.35(s,3H),2.61(s,3H),6.88(d,J=9.0Hz,1H),7.1-7.3(m,5H),7.41(dd,J=8.8,2.6Hz,1H),8.14(br s,1H)FABMS m/z 419,418(M+H)+C19H1679BrNO3S=417
实施例70制备化合物435-溴-2-(4-氯苯硫基)噻吩-3-羧基醛(167mg,0.500mmol)、2,4-噻唑烷二酮(88mg,0.75mmol)和哌啶(0.049mL,0.5mmol)在乙醇(5mL)加热回流6小时。反应溶液冷却到室温，加入水和1N HCL(0.5mL)，混合物用氯仿萃取。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用二异丙醚/乙酸乙酯研磨，得到化合物43(138mg,64％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.32(d,J=8.6Hz,2H),7.47(d,J=8.6Hz,2H),7.82(s,1H),7.98(s,1H),12.7(br s,1H)FABMS m/z 43 3,431(M+)C14H779Br35ClNO2S3=431实施例71制备化合物44氩气氛中，将化合物43(22mg,0.051mmol)溶解在二甲氧基乙烷(2mL)中，向该溶液中加入四(三苯基膦)钯(6mg,10mol％)、碳酸钠水溶液(0.5M,0.6mL)和苯基硼酸(31mg,0.25mmol)，加热回流12小时。反应溶液冷却到室温，加入水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用制备性薄层色谱(10∶1氯仿/丙酮)提纯得到化合物44(8.3mg,38％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.17(d,J=8.4Hz,2H),7.2-7.5(m,8H),7.91(s,1H),8.16(br s,1H)FABMS m/z 429(M+)C20H1235ClNO2S3=429
实施例72制备化合物45氩气氛中，将化合物43(32mg,0.075mmol)溶解在四氢呋喃(5mL)并冷却至-78℃。加入正丁基锂(1.6mol/L己烷溶液，0.3mL)，搅拌15分钟。反应溶液与水混合并用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用制备性薄层色谱(10∶1氯仿/丙酮)提纯得到化合物45(3.8mg,14％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.24(d,J=4.2Hz,1H),7.27(d,J=9.0Hz,2H),7.30(d,J=3.9Hz,1H),7.31(d,J=9.2Hz,2H),7.91(s,1H),8.42(br s,1H)FABMS m/z 353(M+)C14H835ClNO2S3=353实施例73制备化合物46氩气氛中，将三(4-溴苯基)胺(964mg,2.00mmol)溶解在四氢呋喃(10mL)中，并冷却至-78℃。加入正丁基锂(1.6mol/L己烷溶液，1.5mL,2.4mmol)，在-60℃或更低的温度下滴加二甲基甲酰胺(0.19mL,2.4mmol)，搅拌10分钟。向反应溶液加入水，并用乙酸乙酯萃取产物。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用硅胶柱色谱(洗脱溶剂己烷/乙酸乙酯=8/1)提纯得到4-(二(4-溴苯基)氨基)苯甲醛(377mg,44％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.02(d,J=8.8Hz,4H),7.04(d,J=8.6Hz,2H),7.45(d,J=8.8Hz,4H),7.71(d,J=8.8Hz,2H),9.84(s,1H)FABMS m/z 433,431,429(M+)C19H1379BR2NO=429
将4-(二(4-溴苯基)氨基)苯甲醛(356mg,0.826mmol)、2,4-噻唑烷二酮(145mg,1.24mmol)和哌啶(0.083mL,0.83mmol)在乙醇(8mL)中加热回流4小时。反应溶液冷却至室温，混入水和1N HCL(1mL)，用氯仿萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用硅胶柱色谱(洗脱溶剂氯仿/乙腈=15/1)提纯，用己烷研制得到化合物46(388mg,89％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.03(d,J=8.8Hz,2H),7.06(d,J=8.8Hz,4H),7.51(d,J=8.8Hz,2H),7.54(d,J=8.8Hz,4H),7.70(s,1H),12.5(br s,1H)FABMS m/z 532,530,528(M+)C22H1479BR2N2O2S=528实施例74制备化合物47氩气氛中，将化合物25(40mg,0.10mmol)溶解在1,2-二甲氧基乙烷(4mL)中，向其中加入苯基硼酸(24mg,0.20mmol)、2mol/L碳酸钠水溶液(0.15mL)、水(0.5mL)和四(三苯基膦)钯(6mg,5mol％),产物加热回流8小时。将反应溶液冷却至室温，混入水和1N HCL(1mL)，用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用制备性薄层色谱(展开溶剂氯仿/乙腈=12/1)提纯，用异丙醚研制得到化合物47(27mg,67％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.32(s,3H),5.25 2H),7.23(d,J=8.1Hz,2H),7.3-7.4(m,4H),7.49(t,J=7.6Hz,2H),7.63(d,J=8.6Hz,2H),7.64(d,J=1.7Hz,1H),7.76(dd,J=8.6,2.2Hz,1H),8.03(s,1H),12.6(br s,1H)
FABMS m/z 401(M+)C24H19NO3S=401实施例75制备化合物48用2-噻吩基硼酸(26mg,0.20mmol)代替苯基硼酸，采用与实施例74的相同方法从化合物25(40mg,0.10mmol)制备化合物48(7.5mg,18％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.32(s,3H),5.23(s,2H),7.14(dd,J=5.0,3.7Hz,1H),7.22(d,J=7.9Hz,2H),7.30(d,J=8.8Hz,1H),7.36(d,J=8.1Hz,2H),7.44(d,J=3.5Hz,1H),7.53(d,J=4.8Hz,1H),7.62(d,J=2.0Hz,1H),7.75(dd,J=8.8,2.0Hz,1H),7.98(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 407(M+)C22H17NO3S2=407实施例76制备化合物49氩气氛中，将三(4-溴苯基)胺(7.23g,15.0mmol)溶解在四氢呋喃(100mL)中并冷却至-78℃。加入正丁基锂(1.6mol/L己烷溶液，34mL,54mmol)，在-60℃或更低的温度下滴加二甲基甲酰胺(4.6mL,60mmol)，搅拌10分钟。向反应溶液加入水，产物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用硅胶柱色谱(洗脱溶剂己烷/乙酸乙酯=4/1，随后用氯仿/乙腈=30/1)提纯得到三(4-甲酰基苯基)胺(2.97g,60％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.25(d,J=8.8Hz,6H),7.85(d,J=8.8Hz,6H),9.95(s,3H)FABMS m/z 330(M+H)+C21H15NO3=329
将三(4-甲酰基苯基)胺(165mg,0.502mmol)溶解在甲醇(8mL)和氯仿(5mL)中。在冰冷却下，向溶液中加入硼氢化钠(9.5mg,0.25mmol)，在室温下搅拌15分钟。向反应溶液加入水，产物用氯仿萃取。有机层用盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用硅胶柱色谱(洗脱溶剂氯仿/乙腈=20/1-10/1)提纯得到4-((二(4-羟甲基)苯基)氨基)苯甲醛(107mg,64％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.46(br s,2H),4.66(s,4H),6.99(d,J=8.8Hz,2H),7.13(d,J=8.4Hz,4H),7.32(d,J=8.4Hz,4H),7.64(d,J=8.8Hz,2H),9.75(s,1H)FABMS m/z 333(M+)C21H19NO3=333将4-((二(4-羟甲基)苯基)氨基)苯甲醛(100mg,0.300mmol),2,4-噻唑烷二酮(53mg,0.45mmol)和哌啶(0.030mL,0.30mmol)在乙醇(5mL)中加热回流3小时。反应溶液冷却至室温，混入水和1NHCL(1mL)，产物用氯仿萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，用己烷研制得到化合物49(113mg,87％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)4.48(d,J=4.4Hz,4H),5.16(br t,J=5.1Hz,2H),6.89(d,J=8.8Hz,2H),7.09(d,J=8.3Hz,4H),7.32(d,J=8.5Hz,4H),7.44(d,J=9.0Hz,2H),7.66(s,1H),12.4(br s,1H)FABMS m/z 432(M+)C24H20N2O4S=432
实施例77制备化合物50氩气氛中,将实施例64得到的N-(4-溴苄基)二苯基胺(169mg,0.500mmol)溶解在二甲基甲酰胺(1.5mL)中，加入磷酰氯(0.116mL,1.25mmol),100℃搅拌30分钟。将反应溶液冷却至室温并倾入到饱和乙酸钠水溶液中，并用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用硅胶柱色谱(洗脱溶剂己烷/乙酸乙酯=4/1)提纯，得到4-(N-(4-溴苄基)-N-苯基氨基)苯甲醛(159g,87％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)4.98(s,2H),6.78(d,J=8.8Hz,2H),7.18(d,J=8.3Hz,2H),7.26(m,1H),7.27(d,J=8.4Hz,2H),7.42(m,2H),7.45(d,J=8.4Hz,2H),7.65(d,J=8.8Hz,2H),9.75(s,1H)FABMS m/z 368,366(M+H)+C20H1679BrNO=365将4-(N-(4-溴苄基)-N-苯基氨基)苯甲醛(153g,0.418mmol)、2,4-噻唑烷二酮(73mg,0.63mmol)和哌啶(0.042mL,0.42mmol)在乙醇(5mL)中加热回流3小时。反应溶液冷却至室温，混合入水和1N HCL(1mL)，用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，用己烷/异丙醚研制得到化合物50(150mg,87％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)5.06(s,2H),6.88(d,J=8.8Hz,2H),7.21(t,J=7.3Hz,1H),7.27(d,J=8.3Hz,2H),7.32(d,J=7.5Hz,2H),7.40(d,J=8.8Hz,2H),7.42(t,J=7.3Hz,2H),7.51(d,J=8.3Hz,2H),7.64(s,1H),12.4(br s,1H)FABMS m/z 466,464(M+)C23H1779BrN2O2S=464
实施例78制备化合物51冰冷却下,将化合物43(50mg,0.12mmol)溶解在二氯甲烷(8mL)和甲醇(2mL)的混合溶剂中。加入m-氯过苯甲酸(50％纯度，65mg,0.19mmol)，在室温下搅拌18小时。向溶液中加入5％亚硫酸氢钠水溶液，产物用氯仿萃取。有机层用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，用甲醇研制得到化合物51(30mg,56％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.73(d,J=8.4Hz,2H),7.75(s,1H),7.84(d,J=8.6Hz,2H),7.98(s,1H),12.8(br s,1H)FABMS m/z 450,448(M-H)-C14H779Br35Cl1NO3S3=449实施例79制备化合物52冰冷却下，将化合物43(50mg,0.12mmol)溶解在二氯甲烷(8mL)和甲醇(2mL)的混合溶剂中。加入m-氯过苯甲酸(50％纯度，398mg,1.2mmol)，在室温下搅拌17小时。向溶液中加入5％亚硫酸氢钠水溶液，产物用氯仿萃取。有机层用碳酸钠水溶液和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，用甲醇研制得到化合物52(23mg,41％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.71(d,J=8.6Hz,2H),7.78(s,1H),8.00(s,1H),8.05(d,J=8.6Hz,2H),12.9(br s,1H)FABMS m/z 466,464(M-H)-C14H779Br35ClNO4S3=465
实施例80制备化合物53将市场上可买得到的5-溴-2-(4-氯苯基硫基)噻吩-3-甲醛(1.00g,2.99mmol)(MAYBRIDGE，目录号KM05476)溶解在甲醇(75mL)中。加入p-甲苯磺酸(52mg,0.30mol)，混合物加热回流1.5小时。减压蒸发除去溶剂至总体积为约30mL。加入水和饱和碳酸氢钠水溶液，产物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂得到5-溴-2-(4-氯苯硫基)-3-(二甲氧基甲基)噻吩(1.12g,100％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)3.36(s,6H),5.55(s,1H),7.07(s,1H),7.15(d,J=8.6Hz,2H),7.24(d,J=8.8Hz,2H)FABMS m/z 380,378(M+)C13H1279Br35ClO2S2=378氩气氛中，将5-溴-2-(4-氯苯硫基)-3-(二甲氧基甲基)噻吩(1.04g,2.75mmol)溶解在四氢呋喃(15mL)中，并将混合液冷却到-78℃。加入正丁基锂(1.6mol/L己烷溶液，2.5mL,4.1mmol)，搅拌5分钟。加入干冰(约1g)，然后搅拌10分钟。向反应溶液加入水和1mol/L氢氧化钠水溶液使其pH值为10，混合物用醚洗涤。向水相层加入1mol/L盐酸，使其pH值为3，并用乙酸乙酯萃取水相层。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂。残余物溶解在四氢呋喃(10mL)中。加入1mol/L盐酸(2mL)，在室温下搅拌2小时。向反应溶液加入水，产物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用异丙醚研制得2-(4-氯苯基硫基)-3-甲酰基-5-噻吩羧酸(439mg,54％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.50(d,J=8.6Hz,2H),7.62(d,J=8.6Hz,2H),8.06(s,1H),9.68(s,1H)FABMS m/z 299(M+H)+C12H735ClO3S2=298将2-(4-氯苯基硫基)-3-甲酰基-5-噻吩羧酸(400mg,1.34mmol)、2,4-噻唑烷二酮(188mg,1.01mmol)和哌啶(0.133mL,1.34mmol)在乙醇(12mL)中加热回流3.5小时。反应混合物冷却至室温，加入1mol/LHCL(1.5mL)，收集过滤析出的晶体得到化合物53(411mg,77％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.66(d,J=8.4Hz,2H),7.77(d,J=8.4Hz,2H),7.83(s,1H),7.90(s,1H),12.6(br s,1H),13.4(br s,1H),FABMS m/z 396(M-H)-C15H835ClNO4S3=397实施例81制备化合物54将化合物53(80mg,0.20mmol)溶解在二甲基甲酰胺(3mL)中，加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(77mg,0.40mmol)和二乙基胺(0.041mL,0.40mmol)，在室温下搅拌3小时。向反应溶液加入水，产物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用制备性薄层色谱(9∶1氯仿/甲醇)提纯得到化合物54(22mg,24％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.06(br s,6H),3.13(br s,2H),3.41(br s,2H),7.41(d,J=8.6Hz,2H),7.47(d,J=8.6Hz,2H),7.69(s,1H),8.00(s,1H),12.7(br s,1H)FABMS m/z 451(M-H)-C19H1735ClN2O3S3=452
实施例82制备化合物55用苯胺(0.037mL,0.40mmol)代替二乙基胺，采用与实施例81相同的方法来得到化合物55(37mg,39％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.13(t,J=7.3Hz,1H),7.37(t,J=7.7Hz,2H),7.60(d,J=8.4Hz,2H),7.68(d,J=8.6Hz,2H),7.71(d,J=7.7Hz,2H),7.84(s,1H),8.04(s,1H),10.3(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 471(M-H)-C21H13ClN2O3S3=472实施例83制备化合物56用1-甲基哌嗪(0.044mL,0.40mmol)代替二乙胺，采用与实施例81相同的方法来得到化合物56(11mg,12％)。化合物56以盐酸盐的形式获得。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6，盐酸盐)δ(ppm)2.80(s,3H),3.25(m,8H),7.46(d,J=8.8Hz,2H),7.49(d,J=8.8Hz,2H),7.69(s,1H),7.98(s,1H)FABMS m/z 478(M-H)-C20H18ClN3O3S3=479实施例84制备化合物57用吗啉(0.035mL,0.40mmol)代替二乙胺，采用与实施例81相同的方法来得到化合物57(22mg,24％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)3.32(m,4H),3.55(m,4H),7.43(d,J=8.6Hz,2H),7.47(d,J=8.6Hz,2H),7.69(s,1H),7.98(s,1H),12.7(br s,1H)FABMS m/z 465(M-H)-C19H15ClN2O4S3=466实施例85制备化合物58将化合物53(36mg,0.090mmol)溶解在二氯甲烷(2mL)和四氢呋喃(2mL)中。向溶液中加入亚硫酰氯(0.032mL,0.36mmol)，将混合物加热回流2小时。反应溶液用冰冷却。加入甲醇(1mL)和三乙基胺(0.038mL,0.27mmol)，搅拌10分钟。向反应溶液加入水，产物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用制备性薄层色谱(9∶1氯仿/甲醇)提纯，用异丙醚研制得到化合物58(22mg,24％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)3.85(s,3H),7.67(d,J=8.6Hz,2H),7.77(d,J=8.4Hz,2H),7.88(s,1H),7.92(s,1H)12.6(br s,1H)FABMS m/z 410(M-H)-C16H1035ClNO4S3=411实施例86制备化合物59采用与实施例70相同的方法，通过市场上可买得到的3-苯氧基噻吩-2-甲醛(204mg,1.00mmol)(MAYBRIDGE，目录号KM05428)、2,4-噻唑烷二酮(176mg,1.5mmol)和哌啶(0.099mL,1.0mmol)得到化合物59(260mg,86％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)6.93(d,J=5.5Hz,1H),7.02(dd,J=8.6,1.1Hz,2H),7.15(t,J=7.5Hz,1H),7.39(dd,J=8.6,7.5Hz,2H)7.61(s,1H),7.91(d,J=5.5Hz,1H)FABMS m/z 302(M-H)-C14H9NO3S2=303实施例87制备化合物60将4-溴噻吩-2-甲醛(2.00g,10.5mmol)溶解在甲醇(80mL)中。加入p-甲苯磺酸(181mg,1.05mmol)，搅拌3小时。减压蒸发除去溶剂直至总体积为约20mL。加入碳酸氢钠水溶液，产物用乙醚萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂得到4-溴-2-二甲氧基甲基噻吩(2.36mg,100％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)3.36(s,6H),5.58(s,1H),7.00(t,J=1.0Hz,1H),7.20(d,J=1.3Hz,1H)氩气氛中，将4-溴-2-二甲氧基甲基噻吩(236mg,1.00mmol)溶解在四氢呋喃(4mL)中并冷却至-78℃。加入正丁基锂(1.6mol/L己烷溶液，0.81mL,1.3mmol)和4,4′-二氯联苯基二硫醚的四氢呋喃溶液(1.5mL)，搅拌15分钟。向反应溶液加入水，并用乙醚萃取产物。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，减压蒸发除去溶剂。残余物溶解在四氢呋喃(6mL)和1mol/L盐酸中，在室温下搅拌1小时。向反应溶液加入碳酸氢钠水溶液，产物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物通过制备性薄层色谱(9∶1己烷/乙酸乙酯)提纯得到4-(4-氯苯基硫基)噻吩-2-甲醛(71mg,28％),2,3-二(4-氯苯基硫基)噻吩-5-甲醛(29mg,7.4％)和5-(4-氯苯基硫基)噻吩-2-甲醛(53mg,21％)。
4-(4-氯苯基硫基)噻吩-2-甲醛1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.21(d,J=8.8Hz,2H),7.28(d,J=9.0Hz,2H),7.65(d,J=1.5Hz,1H),7.69(d,J=1.4Hz,1H),9.87(d,J=1.3Hz,1H)FABMS m/z 254(M+)C11H735ClOS2=2542,3-二(4-氯苯基硫基)噻吩-5-甲醛1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.19(d,J=8.4Hz,2H),7.29(d,J=8.4Hz,2H),7.37(d,J=8.6Hz,2H),7.43(d,J=8.6Hz,2H),7.53(s,1H)9.67(s,1H)FABMS m/z 397(M+H)+C17H1035Cl2OS3=3965-(4-氯苯基硫基)噻吩-2-甲醛1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.13(d,J=3.9Hz,1H),7.33(d,J=8.8Hz,2H),7.37(d,J=9.0Hz,2H),7.63(d,J=3.9Hz,1H),9.78(s,1H)FABMS m/z 255(M+H)+C11H735ClOS2=254将4-(4-氯苯基硫基)噻吩-2-甲醛(70mg,0.28mmol)、2,4-噻唑烷二酮(39mg,0.33mmol)和哌啶(0.028mL,0.28mmol)在乙醇(4mL)中加热回流4小时。反应溶液冷却至室温，混入水和1N HCL(1mL)，产物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用乙酸乙酯重结晶得到化合物60(57mg,58％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.25(d,J=8.6Hz,2H),7.41(d,J=8.6Hz,2H),7.65(m,1H),8.02(s,1H),8.12(m,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 352(M-H)-C13H835Cl2NO2S2=353实施例88制备化合物61采用与实施例87相同的方法，用实施例87制备的2,3-二(4-氯苯基硫基)噻吩-5-甲醛(28mg,0.071mmol)、2,4-噻唑烷二酮(10mg,0.085mmol)和哌啶(0.007mL,0.07mmol)制备化合物61(19mg,54％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.30(d,J=8.6Hz,2H),7.35(d,J=8.6Hz,2H),7.42(d,J=8.6Hz,2H),7.46(d,J=8.6Hz,2H),7.56(s,1H),7.96(s,1H),12.7(br s,1H)FABMS m/z 494(M-H)-C19H1135Cl2NO2S4=495实施例89制备化合物62采用与实施例87相同的方法，用实施例87制备的5-(4-氯苯基硫基)噻吩-2-甲醛(132mg,0.520mmol)、2,4-噻唑烷二酮(73mg,0.62mmol)和哌啶(0.052mL,0.52mmol)制备化合物62(113mg,62％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.33(d,J=8.6Hz,2H),7.44(d,J=8.6Hz,2H),7.68(d,J=3.9Hz,1H),8.01(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 352(M-H)-C13H835ClNO2S2=353实施例90制备化合物63
氩气氛中，将二异丙胺(0.21mL,1.5mol)的四氢呋喃(3mL)溶液用冰冷却，加入正丁基锂(1.6mol/L己烷溶液，0.81mL,1.3mmol)，将混合物冷却到-78℃。加入实施例87制备的4-溴-2-二甲氧基甲基噻吩(236mg,1.00mmol)的四氢呋喃(1mL)溶液，搅拌30分钟。加入4,4′-二氯联苯基二硫醚(287mg,1.0mmol)，然后搅拌10分钟。向反应溶液加入水，并用醚萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，得到3-溴-2-(4-氯苯基硫基)-5-二甲氧基甲基噻吩(355mg,94％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)3.36(s,6H),5.55(d,J=0.7Hz,1H),7.07(d,J=0.9Hz,1H),7.16(d,J=8.4Hz,2H),7.24(d,J=8.6Hz,2H)FABMS m/z 380,378(M+)C13H1279Br35ClO2S2=378将3-溴-2-(4-氯苯基硫基)-5-二甲氧基甲基噻吩(170mg,0.449)溶解在四氢呋喃(4mL)中,加入1mol/L盐酸(0.5mL)，在室温下搅拌4.5小时。向反应溶液加入碳酸氢钠水溶液，产物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用硅胶柱色谱(9∶1己烷/乙酸乙酯)提纯得到3-溴-2-(4-氯苯硫基)四氢噻吩-5-甲醛(126mg,85％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.38(d,J=8.4Hz,2H),7.43(d,J=8.6Hz,2H),7.63(s,1H),9.71(s,1H)FABMS m/z 335,333(M+H)+C11H679Br35ClOS2=332
采用与实施例87相同的方法，用3-溴-2-(4-氯苯基硫基)噻吩-5-甲醛(114mg,0.342mmol)、2,4-噻唑烷二酮(48mg,0.41mmol)和哌啶(0.034mL,0.34mmol)制备化合物63(73mg,49％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.31(d,J=8.8Hz,2H),7.47(d,J=8.6Hz,2H),7.81(s,1H),7.96(s,1H),12.7(br s,1H)FABMS m/z 432,430(M-H)-C14H779Br35ClNO2S3=431实施例91制备化合物64采用与实施例78相同的方法，用化合物63(19mg,0.044mmol)和m-氯过苯甲酸(50％纯度，23mg,0.066mmol)制备化合物64(14mg,49％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.73(d,J=9.0Hz,2H),7.75(s,1H),7.84(d,J=8.6Hz,1H),7.98(s,1H),12.8(br s,1H)FABMS m/z 448,446(M-H)-C14H779Br35ClNO3S3=447实施例92制备化合物65氩气氛中，将实施例90制备的3-溴-2-(4-氯苯基硫基)-5-二甲氧基甲基噻吩(500mg,1.32mmol)溶解在四氢呋喃(6mL)中，冷却到-78℃。加入正丁基锂(1.6mol/L己烷溶液，0.81mL,1.3mmol)和4-氯-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(528mg,2.64mmol)的四氢呋喃(1mL)溶液，搅拌10分钟。向反应溶液加入水，并用醚萃取产物。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物通过硅胶柱色谱(15∶1己烷/乙酸乙酯)得到3-(4-氯苯甲酰基)-2-(4-氯苯基硫基)-5-二甲氧基甲基噻吩(345mg,60％)1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)3.31(s,6H),5.45 1H),7.15(d,J=1.1Hz,114),7.39(d,J=8.8Hz,2H),7.46(d,J=8.6Hz,2H),7.53(d,J=8.8Hz,2H),7.73(d,J=8.6Hz,2H),FABMS m/z 439(M+H)+C20H1635Cl2O3S2=438将3-(4-氯苯甲酰基)-2-(4-氯苯基硫基)-5-二甲氧基甲基噻吩(335mg,0.736mmol)溶解在四氢呋喃(6mL)中。加入1mol/L盐酸(1mL)，在室温下搅拌1.5小时。向反应溶液加入碳酸氢钠水溶液，产物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物用硅胶柱色谱(5∶1己烷/乙酸乙酯)提纯，用乙酸乙酯/己烷重结晶得到3-(4-氯苯甲酰基)-2-(4-氯苯基硫基)噻吩-5-甲醛(203mg,68％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.50(d,J=8.4Hz,2H),7.52(d,J=8.4Hz,2H),7.62(d,J=8.8Hz,2H),7.74(d,J=8.8Hz,2H),7.83(s,1H),9.65(s,1H)FABMS m/z 393(M+H)+C16H1079Cl2O2S2=392采用与实施例70相同的方法，用3-(4-氯苯甲酰基)-2-(4-氯苯基硫基)噻吩-5-甲醛(193mg,0.490mmol)、2,4-噻唑烷二酮(69mg,0.59mmol)和哌啶(0.049mL,0.49mmol)制备化合物65(211mg,88％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.64(d,J=8.6Hz,2H),7.65(d,J=8.6Hz,2H),7.73(d,J=8.4Hz,2H),7.81(d,J=8.4Hz,2H),7.87(s,1H),7.94(s,1H),12.6(br s,1H)FABMS m/z 490(M-H)-C21H1135Cl2NO3S3=491
实施例93制备化合物66采用与实施例78相同的方法，用化合物65(50mg,0.10mmol)和m-氯过苯甲酸(50％纯度，53mg,0.15mol)得到化合物66(14mg,28％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.60(d,J=8.4Hz,2H),7.71(d,J=8.4Hz,2H),7.72(d,J=8.8Hz,2H),7.82(s,1H),7.89(d,J=8.8Hz,2H),8.04(s,1H),12.8(br s,1H)FABMS m/z 506(M-H)-C21H1135Cl2NO4S3=507实施例94制备化合物67将市场上可买得到的2-((4-氯苯基)硫基)-5-硝基苯甲醛(0.3g,1.0mmol)(MAYBRIDGE,目录号XAX00154)溶解在乙醇(8mL)中。加入噻唑烷二酮(0.36mg,3.0mmol)和哌啶(0.1mol,1.0mmol)，混合物在装有回流冷凝器和干燥管(CaCl2)的烧瓶中加热回流5.5小时。温度降至室温，加入1M HCL溶液。在常规处理后，残余物通过硅胶柱色谱(氯仿-氯仿∶甲醇=99∶1)纯制，然后通过从乙酸乙酯和己烷中重结晶提纯得到化合物67(0.109mg,27.9％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.24(d,J=8.8Hz,1H),7.59(s,4H),7.88(s,1H),8.17(dd,J=2.6,8.8Hz,1H),8.24(d,J=2.6Hz,1H),12.84(br s,1H)FABMS m/z 393(M+H)+C16H935ClN2O4S2=392
实施例95制备化合物68采用与实施例78的方法，由化合物67(0.02g,0.051mmol)制备化合物68(0.0137g,65.7％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.61(d,J=2.6Hz,4H),7.67(s,1H),8.25(d,J=8.8Hz,1H),8.35(d,J=2.3Hz,1H),8.40(dd,J=2.3,8.8Hz,1H),NH没有找到。
FABMS m/z 409(M+H)+C16H935ClN2O5S2=408实施例96制备化合物69将化合物67(0.03g,0.077mmol)溶解在二氯甲烷(5mL)和甲醇(1mL)中，加入m-氯过苯甲酸(0.03g,0.0092mmol)，在室温下搅拌1小时。加入10％亚硫酸氢钠水溶液，经常规处理后，残余物通过薄层色谱(氯仿∶甲醇=12∶1)提纯，再通过薄层色谱(氯仿∶乙腈=6∶1)提纯得到化合物69(0.041g,15,9％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.71(dt,J=2.0,8.8Hz,2H),7.87(dt,J=2.0,8.8Hz,1H),7.98(s,1H),8.31(s,1H),8.49(d,J=2.0Hz,2H),NH没有找到。
FABMS m/z 423(M-H)-C16H935ClN2O6S2=424
实施例97制备化合物70将2.5mol/L氢氧化钠水溶液(1.2mL,3.1mmol)和四丁基溴化铵(0.012g,0.031mmol)加入到3-氯苯硫醇(0.11g,0.73mmol)中，25℃搅拌10分钟。将2-氟-5-硝基苯甲醛(0.12g,0.73mmol)的甲苯(1.2mL)溶液加入到反应溶液中，110℃搅拌1.5小时。经常规后处理后，残余物通过硅胶柱色谱(经氯仿洗脱)提纯得到2-[(3-氯苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(72mg,34％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.01(d,J=8.8Hz,1H),7.44-7.54(m,3H),7.58(br s,1H),8.17(dd,J=2.4,8.8Hz,1H),8.69(d,J=2.6Hz,1H),10.29(s,1H)FABMS m/z 294(M+H)+C13H835ClNO3S=293将2-[(3-氯苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(70mg,0.24mmol)溶解在甲苯(3.5mL)中，加入2,4-噻唑烷二酮(0.11mg,0.95mmol)、哌啶(0.0094mL,0.095mmol)、乙酸(0.0054mL,0.095mmol)和分子筛4A(0.35g),110℃搅拌3小时。经常规后处理后，残余物通过薄层色谱(用氯仿/乙腈=10/1展开)提纯得到化合物70(41mg,440)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.34(d,J=8.8Hz,1H),7.60-7.47(m,3H),7.63(br s,1H),7.88(s,1H),8.20(dd,J=8.8,2.6Hz,1H),8.26(d,J=2.6Hz,1H),12.83(m,1H)FABMS m/z 391(M-H)-C16H935ClN2O4S2=392
实施例98制备化合物71将2.5mol/L氢氧化钠水溶液(1.7mL,4.4mmol)和四丁基溴化铵(0.017g,0.051mmol)加入到2-氯苯硫醇(0.17g,1.0mmol)中，25℃搅拌10分钟。向反应溶液加入2-氟-5-硝基苯甲醛(0.18g,1.0mmol)的甲苯(1.7mL)溶液，110℃搅拌2小时。经常规后处理后，残余物通过硅胶色谱(经氯仿洗脱)提纯得到2-[(2-氯苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.25g,83％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)6.88(d,J=8.8Hz,1H),7.42(ddd,J=7.5,7.5,1.4Hz,1H),7.51(ddd,J=7.3,7.3,1.6Hz,1H),7.62(dd,J=8.1,1.5Hz,1H),7.69(dd,J=7.5,1.7Hz,1H),8.16(dd,J=8.8,2.6Hz,1H),8.70(d,J=2.5Hz,1H),10.32(s,1H)FABMS m/z 293(M+)C13H835ClNO3S=293将2-[(2-氯苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.14g,0.49mmol)溶解在乙醇(5.8mL)中，加入2,4-噻唑烷二酮(0.23mg,2.0mmol)和哌啶(0.039mL,0.39mmol),80℃搅拌3小时。经常规后处理后，残余物通过薄层色谱(用氯仿/7腈=10/1展开)提纯得到化合物71(24mg,13％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.20(d,J=8.8Hz,1H),7.43-7.62(m,3H),7.71(m,1H),7.89(s,1H),8.20(dd,J=8.8,2.6Hz,1H),8.28(m,1H),12.82(m,1H)FABMS m/z 391(M-H)-C16H935ClN2O4S2=392
实施例99制备化合物72采用与实施例97相同的方法,由3,4-二氯苯硫醇(0.12g,0.68mmol)、2.5mol/L氢氧化钠水溶液(1.2mL,2.9mmol)、四丁基溴化铵(0.011 g,0.034mmol)和2-氟-5-硝基苯甲醛(0.12g,0.68mmol)的甲苯(1.2mL)溶液制备2-[(3,4-二氯苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.16g,79％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.02(d,J=8.8Hz,1H),7.41(dd,J=8.2,2.0Hz,1H),7.60(d,J=8.2Hz,1H),7.69(d,J=2.0Hz,1H),8.18(dd,J=8.8,2.5Hz,1H),8.69(d,J=2.6Hz,1H),10.28(s,1H)FABMS m/z 328(M+H)+C13H735Cl2NO3S=327采用与实施例97相同的方法，由2-[(3,4-二氯苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.12g,0.35mmol)、甲苯(5.8mL)、2,4-噻唑烷二酮(0.16g,1.4mmol)、哌啶(0.014g,0.14mmol)、乙酸(0.0080mL,0.14mmol)和分子筛4A(0.58g)制备化合物72(74mg,49％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.39(d,J=8.8Hz,1H),7.50(dd,J=8.4,1.8Hz,1H),7.75(d,J=8.5Hz,1H),7.88-7.83(m,2H),8.18(d,J=8.6,2.2Hz,1H),8.25(m,1H),12.82(m,1H)FABMS m/z 425(M-H)-C16H835Cl2N2O4S2=426实施例100制备化合物73采用与实施例97相同的方法，由4-溴苯硫醇(0.19g,1.0mmol)、2.5mol/L氢氧化钠水溶液(1.7mL,4.3mmol)、四丁基溴化铵(0.016g,0.051mmol)和2-氟-5-硝基苯甲醛(0.17g,1.0mmol)的甲苯(1.7mL)溶液制备2-[(4-溴苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.28g,82％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)6.98(d,J=8.9Hz,1H),7.41-7.46(m,2H),7.63-7.69(m,2H),8.13(dd,J=8.8,2.4Hz,1 H),8.68(d,J=2.6Hz,1H),10.29(s,1H)FABMS m/z 338(M+H)+C13H879BrNO3S=337采用与实施例97相同的方法，由2-[(4-溴苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.031g,0.091mmol)、甲苯(1.5mL)、2,4-噻唑烷二酮(0.043g,0.36mmol)、哌啶(0.0036g,0.036mmol)、乙酸(0.0025mL,0.036mmol)和分子筛4A(0-092g)制备化合物73(26mg,66％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.25(d,J=8.8Hz,1H),7.48-7.52(m,2H),7.20-7.25(m,2H),7.88(s,1H),8.18(dd,J=8.8,2.6Hz,1H),8.25(d,J=2.4Hz,1H),12.85(br s,1H)FABMS m/z 435(M-H)-C16H979BrN2O4S2=436实施例101制备化合物74采用与实施例98相同的方法，由4-甲氧基苯硫醇(0.14g,0.99mmol)、2.5mol/L氢氧化钠水溶液(1.8mL,4.4mmol)、四丁基溴化铵(0.016g,0.050mmol)和2-氟-5-硝基苯甲醛(0.17g,0.99mmol)的甲苯(1.8mL)溶液制备2-[(4-甲氧基苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.22g,76％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)3.89(s,3H),6.92(d,J=8.9Hz,1H),7.03(d,J=8.6Hz,2H),7.49(d,J=8.6Hz,2H),8.08(dd,J=9.0,2.4Hz,1H),8.63(d,J=2.2Hz,1H),10.29(s,1H)FABMS m/z 289(M+)C14H11N2O4=289采用与实施例98相同的方法，由2-[(4-甲氧基苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.11g,0.39mmol)、乙醇(1.5mL)、2,4-噻唑烷二酮(0.18g,1.5mmol)和哌啶(0.015g,0.15mmol)制备化合物74(26mg,18％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)3.34(s,3H),6.98(d,J=8.8Hz,1H),7.13(d,J=9.0Hz,2H),7.57(d,J=8.6Hz,2H),7.89(s,1H),8.14(dd,J=8.6,2.4Hz,1H),8.21(d,J=2.4Hz,1H)FABMS m/z 387(M-H)-C17H12N2O5S2=388实施例102制备化合物75采用与实施例97相同的方法由4-乙基苯硫醇(0.13g,0.95mmol)、2.5mol/L氢氧化钠水溶液(1.6mL,4.0mmol)、四丁基溴化铵(0.015g,0.047mmol)和2-氟-5-硝基苯甲醛(0.16g,0.95mmol)的甲苯(1.6mL)溶液制备2-[(4-乙基苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.22g,82％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)1.30(t,J=7.6Hz,3H),2.74(q,J=7.5Hz,2H),6.96(d,J=9.0Hz,1H),7.36(d,J=7.5Hz,2H),7.48(d,J=8.1Hz,2H),8.10(dd,J=9.0,2.2Hz,1H),8.66(d,J=2.6Hz,1H),10.31(s,1H)FABMS m/z 288(M+H)+C15H13NO3S=287
采用与实施例97相同的方法,由2-[(4-乙基苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.20g,0.69mmol)、甲苯(9.9mL)、2,4-噻唑烷二酮(0.32g,2.7mmol)和哌啶(0.027g,0.27mmol)、乙酸(0.016mL,0.27mmol)和分子筛4A(0.99g)制备化合物75(0.14g,51％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.21(t,J=7.7Hz,3H),2.68(q,J=7.7Hz,2H),7.09(d,J=8.8Hz,1H),7.39(d,J=8.1Hz,2H),7.51(d,J=8.1Hz,2H),7.39(s,1H),8.16(dd,J=8.6,2.3Hz,1H),8.22(d,J=2.0Hz,1H),12.82(m,1H)FABMS m/z 385(M-H)-C18H14N2O4S2=386实施例103制备化合物76采用与实施例94相同的方法，由市场上可买得到的(MAYBRIDGE,目录号XAX00131)2-苄硫基-5-硝基苯甲醛(0.27g,1.0mmol)制得化合物76(0.134g,35.9％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm).51(s,2H),7.31(m,3H)7.46(dt,J=1.7,6.6Hz,2H),7.78(s,1H),7.81(d,J=8.9Hz,1H),8.17(d,J=2.6Hz,1H),8.22(dd,J=2.6,8.9Hz,1H),12.82(br s,1H)EIMS m/z 371(M-H)-C17H12N2O4S2=372实施例104制备化合物77采用与实施例96相同的方法，由化合物76(0.03g,0.081mmol)制备化合物77(0.0055g,17.6％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)4.24(d,J=6.8Hz,2H),6.94(dd,J=2.2,5.0Hz,2H),7.20(dd,J=2.2,5.0Hz,3H),7.4(s,1H),7.89(d,J=8.7Hz,1H),8.21(d,J=2.2Hz,1H),8.38(dd,J=2.2,8.7Hz,1H),NH没有发现EIMS m/z 369(M+H)+C17H12N2O5S2=388实施例105制备化合物78采用与实施例96相同的方法，由化合物76(0.03g,0.081mmol)制备化合物78(0.0192g,59.0％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)4.78(s,2H),7.10(dd,J=1.8,4.5Hz,3H),7.27(dd,J=1.8,4.5Hz,3H),8.06(d,J=8.8Hz,1H),8.08(s,1H),8.36(dd,J=2.5,8.8Hz,1H),8.39(d,J=2.5Hz,1H),NH没有发现EIMS m/z 403(M-H)-C17H12N2O6S2=404实施例106制备化合物79采用与实施例97相同的方法，由4-氯苄基硫醇(0.11g,0.83mmol)、2.5mol/L氢氧化钠水溶液(1.4mL,3.5mmol)、四丁基溴化铵(0.013g,0.041mmol)和2-氟-5-硝基苯甲醛(0.14g,0.83mmol)的甲苯(1.4mL)溶液制备2-[(4-氯苄基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.17g,67％)。采用与实施例97相同的方法，由2-[(4-氯苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.12g,0.39mmol)、甲苯(6.1mL)、2,4-噻唑烷二酮(0.18g,1.6mmol)、哌啶(0.016mL,0.16mmol)、乙酸(0.0090mL,0.16mmol)和分子筛4A(0.61g)制备化合物79(0.11g,70％)。
2-[(4-氯苄基)硫基]-5-硝基苯甲醛1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)4.26(s,2H),7.34(s,4H),7.49(d,J=8.8Hz,1H),8.29(dd,J=8.8,2.6Hz,1H),8.65(d,J=2.5Hz,1H),10.23(s,1H)FABMS m/z 307(M+)C14H1035ClNO3S=307化合物791H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)4.50(s,2H),7.39(d,J=8.5Hz,2H),7.46(d,J=8.4Hz,2H),7.77(s,1H),7.80(d,J=8.8Hz,1H),8.17(d,J=2.4Hz,1H),8.21(dd,J=9.0,2.6Hz,1H),12.81(m,1H)FABMS m/z 405(M-H)-C17H1135ClN2O4S2=406实施例107制备化合物80将市场上可得到的(MAYBRIDGE，目录号XAX00146)4[(4-溴苯基)硫基]-3-硝基苯甲醛(0.12g,0.35mmol)溶解在甲苯(5.9mL)中。加入2,4-噻唑烷二酮(0.16mg,1.04mmol)、哌啶(0.014mL,0.14mmol)、乙酸(0.0080mL,0.14mmol)和分子筛4A(0.59g),110℃搅拌3小时。经常规后处理后，残余物通过乙醇研制得到化合物80(21mg,14％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.01(d,J=8.6Hz,1H),7.58-7.62(m,2H),7.73-7.82(m,4H),8.50(d,J=2.0Hz,1H),12.71(m,1H)FABMS m/z 435(M-H)-C16H979BrN2O4S2=436实施例108制备化合物81将市场上可得到的(MAYBRIDGE，目录号NRBOO117)4[(4-氯苯基)硫基]-3-硝基苯甲醛(0.31g,1.0mmol)溶解在乙醇(12mL)中。加入2,4-噻唑烷二酮(0.16mg,1.4mmol)、哌啶(0.014mL,0.14mmol),80℃搅拌3小时。反应液冷却到25℃，过滤收集析出的晶体得到化合物81(O.15g,36％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)6.98(d,J=8.5Hz,1H),7.08br s,1H),7.70-7.59(m,5H),7.73(dd,J=8.6,2.0Hz,1H),8.45(d,J=2.0Hz,1H)FABMS m/z 391(M-H)-C16H935ClN2O4S2=392实施例109制备化合物82采用与实施例96相同的方法，由化合物9(0.03g,0.081mmol)制备化合物82(0.0195g,62.0％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.49(s,3H),7.31(d,J=8.2Hz,2H),7.56(d,J=8.2Hz,2H),7.84(s,1H),8.28(dd,J=1.8,8.4Hz,1H),8.46(s,1H),8.49(t,J=1.8Hz,1H),NH没有发现EIMS m/z 389(M+H)+C17H12N2O5S2=388
实施例110制备化合物83将化合物9(0.07g,0.19mmol)溶解在二氯甲烷(12mL)中，加入甲醇(2.3mL)和m-氯过苯甲酸(0.13g,0.38mmol)，室温下搅拌1小时。加入10％亚硫酸氢钠水溶液。经过常规处理后，残余物用薄层色谱(氯仿∶甲醇=12∶1)提纯，用氯仿研制得到化合物83(0.019g,25.4％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.41(s,3H),7.50(d,J=8.3Hz,2H),7.84(s,1H),7.86(d,J=8.1Hz,2H),8.03(d,J=8.3Hz,1H),8.23(d,J=1.7Hz,1H),8.44(d,J=8.3Hz,1H),NH没有发现EIMS m/z 405(M+H)+C17H12N2O6S2=404实施例111制备化合物84采用与实施例94相同的方法，由市场上可得到的(MAYBRIDGE,目录号XAX00135)2-(环己基硫基)-5-硝基苯甲醛(0.26g,1.0mmol)制备化合物84(0.152g,41.8％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.30(m,1H),1.46(m,4H),1.61(m,1H),1.73(m,2H),2.00(m,2H),3.67(m,1H),7.79(d,J=8.5Hz,1H),7.83(s,1H),8.19(d,J=2.4Hz,1H),8.22(dd,J=2.4,8.5Hz,1H),12.82(br s,1H)FABMS m/z 363(M-H)-C16H16N2O4S2=364
实施例112制备化合物85采用与实施例96相同的方法,由化合物84(0.02g,0.055mmol)制备化合物85(0.0149g,71.3％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.30(m,8H),1.77(m,2H),2.73(m,2H),7.60(s,1H),8.24(s,1H),8.05(d,J=8.6Hz,1H),8.36(d,J=2.2Hz,1H),8.43(dd,J=2.2,8.6Hz,1H),NH没有发现。
FABMS m/z 381(M+H)-C16H16N2O5S2=380实施例113制备化合物86采用与实施例96相同的方法，由化合物84(0.03g,0.082mmol)制备化合物86(0.0034g,10.9％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.27(m,6H),1.59(m,1H),1.69(m,4H),8.23(d,J=8.4Hz,1H),8.24(s,1H),8.44(s,1H),8.46(d,J=8.4Hz,1H),NH没有发现。
FABMS m/z 395(M-H)-C16H16N2O6S2=396实施例114制备化合物87将p-甲苯硫醇(0.12g,1.0mmol)溶解在10％氢氧化钠水溶液(1.7mL)中，加入四丁基溴化铵(0.016g,0.05mmol)，在室温下搅拌5分钟。向其中滴加5-溴-2-氟苯甲醛(0.2gm1.0mmol)的甲苯(1.7mL)溶液，在室温下搅拌4小时。在常规处理后，用乙醇和己烷重结晶和提纯，得到5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.23g,74.1％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.39(s,3H),6.90(d,J=8.4Hz,1H),7.22(d,J=7.9Hz,2H),7.35(dd,J=1.7,8.1Hz,2H),7.46(dd,J=2.4,8.4Hz,1H),7.96(d,J=2.2Hz,1H),10.32(s,1H)FABMS m/z 308(M+H)+C14H1179BrOS=307采用与实施例94相同的方法，由5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.03g,0.1mmol)制备化合物87(0.021g,52％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.31(m,3H),7.14(d,J=8.8Hz,1H),8.23(d,J=8.3Hz,2H),8.28(d,J=8.3Hz,2H),7.60(s,1H),7.62(dd,J=2.2,8.8Hz,1H),7.90(s,1H),12.82(br s,1H)EIMS m/z 407(M+H)+C17H1279BrNO2S2=406实施例115制备化合物88采用与实施例114(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛)相同的方法，由3-溴-4-氟苯甲醛(0.2g,0.99mmol)制备3-溴-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.19g,63.6％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.44(s,3H),6.73(d,J=8.3Hz,1H),7.30(d,J=8.4Hz,2H),7.47(d,J=8.1Hz,2H),7.54(dd,J=1.7,8.4Hz,1H),8.00(d,J=1.7Hz,1H),9.84(s,1H)FABMS m/z 307(M+)C14H11BrOS=307
采用与实施例94相同的方法,由3-溴-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.15g,0.49mmol)制备化合物88(0.087g,43.9％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.49(s,3H),6.74(d,J=8.3Hz,1H),7.37(d,J=8.1Hz,2H),7.44(dd,J=2.0,8.5Hz,1H),7.48(d,J=8.1Hz,2H),7.70(s,1H),7.89(d,J=2.0,Hz,1H),12.64(br s,1H)EIMS m/z 407(M+H)+C17H1279BrNO2S2=406实施例116制备化合物89反应根据文献(Tetrahedron Lett.Vol.36,No.50，第9085-9088页，1995)描述的方法进行，产物用5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.06g,0.2mmol)和2-吡啶三氟甲烷磺酸盐(0.03g,0.2mmol)处理。残余物通过薄层色谱(己烷∶乙酸乙酯=8∶1)纯制，得到2-[(4-甲基苯基)硫基]-5-(2-吡啶基)苯甲醛(0.024g,38.5％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.41(s,3H),7.09(d,J=8.4Hz,1H),7.24(m,3H),7.42(d,J=8.4Hz,2H),7.76(dd,J=1.7,6.6Hz,2H),8.01(dd,J=2.2,8.5Hz,1H),8.50(d,J=2.2Hz,1H),8.69(d,J=4.6Hz,1H),10.43(s,1H)FABMS m/z 306(M+)C19H15NOS=305采用与实施例94相同的方法，由2-[(4-甲基苯基)硫基]-5-(2-吡啶基)苯甲醛(0.024g,0.08mmol)制备化合物89(0.026g,84.4％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.32(s,3H),7.26(d,J=8.4Hz,2H),7.30(d,J=8.4Hz,2H),7.33(dd,J=8.3,2H),7.41(m,1H),7.92(m,
1H),7.97(d,J=7.7Hz,1H),8.08(s,1H),8.07(dd,J=2.0,7.7Hz,1H),8.32(d,J=1.7Hz,1H),8.71(d,J=4.8Hz,1H),12.70(br s,1H)EIMS m/z 405(M-H)-C22H16N2O2S2=406实施例117制备化合物90将三(二次苄基丙酮)-二钯(0.18g,0.2mmol)和三苯基膦(0.21g,0.8mmol)溶解在四氢呋喃(60mL)中，在室温下搅拌30分钟。之后，加入5-溴-2-氟苯甲醛(0.4g,2.0mmol)和2-(三丁基甲锡烷基)-呋喃(1.25mL,4.0mmol)，并加热回流10小时。混合物冷却到室温，在常规处理后，残余物通过硅胶柱色谱(己烷∶乙酸乙酯=8∶1)提纯得到2-氟-5-(2-呋喃基)苯甲醛(0.38g,100％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)6.49(dd,J=1.8,3.5Hz,1H),6.69(d,J=3.3Hz,1H),7.21(t,J=9.9Hz,1H),6.49(d,J=1.8Hz,1H),7.90(m,1H),8.14(dd,J=2.4,6.6Hz,1H),10.39(s,1H)FABMS m/z 190(M+)C11H719FO2=190采用与实施例114(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛)相同的方法，由2-氟-5-(2-呋喃基)苯甲醛(0.1g,0.53mmol)制备2-[(4-甲基苯基)硫基]-5-(2-呋喃基)苯甲醛(0.14g,87.8％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.39(s,3H),6.59(d,J=1.8Hz,1H),6.69(d,J=3.3Hz,1H),7.07(d,J=8.4Hz,1H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),7.36(d,J=8.1Hz,2H),7.48(s,1H),7.66(dd,J=2.0,8.3Hz,1H),8.14(d,J=2.0Hz,1H),10.41(s,1H)
FABMS m/z 294(M+)C18H14O2S=294采用与实施例94相同的方法,由2-[(4-甲基苯基)硫基]-5-(2-呋喃基)苯甲醛(0.14g,0.47mmol)制备化合物90(0.17g,92.8％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.50(s,3H),6.65(m,1H),7.04(d,J=3.5Hz,1H),7.22(d,J=8.4Hz,2H),7.26(d,J=8.4Hz,2H),7.32(d,J=8.4Hz,1H),7.74(d,J=8.2Hz,1H),7.81(d,J=7.7Hz,1H),8.03(s,1H),12.71(br s,1H)EIMS m/z 392(M-H)-C21H15NO3S2=393实施例118制备化合物91采用与实施例96相同的方法,由化合物74(0.1g,0.25mmol)制备化合物91(0.069g,66.5％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.30(s,3H),6.67(dd,J=1.8,3.5Hz,1H),7.17(d,J=8.6Hz,1H),7.31(d,J=8.6Hz,2H),7.45(d,J=8.3Hz,2H),7.76(s,1H),7.87(d,J=1.8Hz,1H),8.01(d,J=5.9Hz,2H),8.02(s,1H),12.77(br s,1H)EIMS m/z 410(M+H)+C21H15NO4S2=409
实施例119制备化合物92采用与实施例117(合成2-氟-5-(2-呋喃基)苯甲醛)相同的方法，由2-(三丁基甲锡烷基)-噻吩(0.63mL,2.0mmol)制备2-氟-5-(2-噻吩基)苯甲醛(0.2g,100％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.10(t,J=4.4Hz,1H),7.21(dd,J=8.8,9.9Hz,1H),7.33(d,J=4.4Hz,2H),7.83(m,1H),8.08(dd,J=2.6,6.5Hz,1H),10.40(s,1H)FABMS m/z 206(M+)C11H719FOS=206采用与实施例114(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛)相同的方法，由2-氟-5-(2-噻吩基)苯甲醛(0.1g,0.49mmol)制备2-[(4-甲基苯基)硫基]-5-(2-噻吩基)苯甲醛(0.12g,77.4％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.39(s,3H),7.06(t,J=3.8Hz,1H),7.10(m,1H),7.24(d,J=8.3Hz,2H),7.33(m,4H),7.37(d,J=8.1Hz,2H),7.60(dd,J=2.4,8.3Hz,1H),8.03(d,J=2.4Hz,1H),10.42(s,1H)FABMS m/z 310(M+)C18H14OS2=310采用与实施例94相同的方法，由2-[(4-甲基苯基)硫基]-5-(2-噻吩基)苯甲醛(0.12g,0.38mmol)制备化合物92(0.14g,91.3％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.30(s,3H),7.18(d,J=3.8Hz,1H),7.24(d,J=4.8Hz,4H),7.56(d,J=7.7Hz,1H),7.63(d,J=5.1Hz,1H),7.72(s,1H),7.73(d,J=7.5Hz,1H),8.03(s,1H),12.71(br s,1H)EIMS m/z 408(M-H)-C21H15NO2S3=409
实施例120制备化合物93采用与实施例96相同的方法,由化合物92(0.1g,0.24mmol)制备化合物93(0.051g,49.4％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.30(s,3H),7.20(dd,J=3.7,5.0Hz,1H),7.32(d,J=8.1Hz,1H),7.46(d,J=8.3Hz,2H),7.66(d,J=3.7Hz,2H),7.69(d,J=3.7Hz,2H),8.01(m,3H),12.78(br s,1H)EIMS m/z 426(M+H)+C21H15NO3S3=425实施例121制备化合物94将二异丙基胺(0.35mL,2.5mmol)溶解在四氢呋喃(3.5mL)中，并将温度调节到0℃。滴加正丁基锂(己烷溶液)(1.24mL,2.0mmol)，搅拌10分钟。将反应温度降至-78℃。加入4-氟苄腈(0.2g,1.65mmol)，搅拌1小时。滴加二甲基甲酰胺(0.19mL,2.5mmol)，搅拌20分钟，然后进行常规处理。残余物通过薄层色谱(己烷∶乙酸乙酯=8∶1)纯制，得到2-氟-5-氰基苯甲醛(0.11g,43.4％)。
1H-NMR(300MHz,CDCL3)δ(ppm)7.46(t,J=8.8Hz,1H),7.90(m,1H),7.71(dd,J=2.2,6.2Hz,1H),10.36(s,1H)EIMS m/z 148(M-H)C8H419FNO=149
采用与实施例114(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛)相同的方法,由2-氟-5-氰基苯甲醛(0.1g,0.67mmol)制备5-氰基-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.15g,86.9％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.44(s,3H),6.92(d,J=8.6Hz,1H),7.31(d,J=7.9Hz,2H),7.44(d,J=8.3Hz,2H),7.49(dd,J=1.8,8.4Hz,1H),8.07(d,J=2.0Hz,1H),10.27(s,1H)FABMS m/z 253(M+)C15H11NOS=253采用与实施例94相同的方法，由5-氰基-2-[(4-甲基苯基)硫基]-苯甲醛(0.1g,0.4mmol)制备化合物94(0.09g,64.5％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.37(s,3H),7.00(d,J=8.3Hz,1H),7.34(d,J=8.3Hz,2H),7.46(d,J=8.3Hz,2H),7.76(dd,J=1.7,8.4Hz,1H),7.80(s,1H),7.84(s,1H),12.01(br s,1H)EIMS m/z 353(M+H)+C18H12N2O2S2=352实施例122制备化合物95采用与实施例114(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛)相同的方法，由2-氟-5-甲酰基苄腈(0.2g,1.34mmol)制备3-氰基-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.3g,89.9％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.44(s,3H),6.94(d,J=8.4Hz,1H),7.31(d,J=7.9Hz,2H),7.47(dd,J=1.8,8.1Hz,2H),7.78(dd,J=1.8,8.4Hz,1H),8.07(d,J=5Hz,1H),9.90(s,1H)FABMS m/z 254(M+H)+C15H11NOS=253
采用与实施例94相同的方法,由3-氰基-4-[(4-甲基苯基)硫基]-苯甲醛(0.2g,0.79mmol)制备化合物95(0.126g,45.3％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.50(s,3H),7.06(d,J=8.6Hz,1H),7.36(d,J=8.4Hz,2H),7.49(d,J=8.3Hz,2H),7.66(s,1H),7.71(dd,J=2.0,8.5Hz,1H),8.08(d,J=2.0Hz,1H),NH没有发现EIMS m/z 352(M+)C18H12N2O2S2=352实施例123制备化合物96采用与实施例114相同的方法(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛)，由3-溴-4-氟苯甲醛制备3-溴-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.18g,59.0％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.44(s,3H),6.73(d,J=8.3Hz,1H),7.30(d,J=7.9Hz,2H),7.47(d,J=8.1Hz,2H),7.54(dd,J=1.7,8.3Hz,1H),7.99(d,J=1.7Hz,1H),9.84(s,1H)EIMS m/z 307(M+)C14H1179BrOS=307将3-溴-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.2g,0.65mmol)溶解在甲醇(6.0mL)和二氯甲烷(6.0mL)中。加入硼氢化钠(0.025g,0.65mmol)，搅拌15分钟并进行常规处理。溶剂用真空干燥器除去。将残余物溶解在二氯甲烷(7.0mL)中。加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(0.12g,0.78mmol)和咪唑(0.053g,0.65mmol)，搅拌2小时并进行常规处理。产物通过硅胶色普(己烷∶乙酸乙酯=16∶1)纯制，得到3-溴-4-[(4-甲基苯基)硫基]苄基(叔丁基二甲基甲硅烷基)醚(0.27g,96.4％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)(0.62(s,6H),0.84(s,9H),2.29(s,3H),4.56(s,2H),6.76(d,J=8.3Hz,1H),7.00(dd,J=1.8,8.3Hz,1H),7.11(d,J=8.4Hz,2H),7.26(d,J=1.8Hz,2H),7.43(d,J=1.7Hz,1H),EIMS m/z 424(M+H)+C20H2779BrOSSi=423氩气氛中，将己烷(1.4mL)和乙醚(10.4mL)冷却到-78℃。加入正丁基锂(己烷溶液)(2.17mL,3.47mmol)和四甲基乙二胺(0.52mL,3.47mmol)，搅拌15分钟。加入3-溴-4-[(4-甲基苯基)硫基]苄基叔丁基二甲基甲硅烷基醚(0.37ml,0.87mmol)，然后搅拌30分钟。滴加二甲基甲酰胺(0.3ml,3.47mmol)在乙醚(4.3mL)中的溶液，搅拌45分钟。加热混合物到室温，进行常规处理。产物通过薄层色谱(己烷∶乙酸乙酯=16∶1)提纯得到5-羟甲基-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.58g,66.7％)1H-NMR(300MHz,CDCl3)((ppm)0.62(s,6H),0.84(s,9H),2.28(s,3H),4.64(s,2H),6.95(d,J=8.1Hz,1H),7.09(d,J=7.9,2H),7.23(d,J=8.3Hz,2H),7.28(dd,J=2.2,8.2Hz,1H),7.70(d,J=1.8Hz,1H),10.29(9,1H)EIMS m/z 373(M+H)+C21H28O2SSi=372采用与实施例94相同的方法，由5-羟甲基-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.1g,0.27mmol)制备化合物96(0.067g,70.4％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.27(s,3H),4.53(d,J=5.5Hz,2H),5.37(t,J=5.5Hz,1H),7.16(d,J=3.5,4H),7.31(s,1H),7.58(s,1H),7.98(s,1H),12.00(br s,1H)
EIMS m/z 356(M-H)-C18H15O3S2=357实施例124制备化合物97氩气氛中,将5-溴-2-氟苯甲醛(0.2g,1.0mmol)溶解在甲苯(2mL)中。加入三丁基(1-乙氧基乙烯基锡)(0.37mL,1.1mmol)和二(三苯基膦)氯化钯(0.007g,0.01mmol)，随后加热到100℃持续10小时。当残余物的温度降至室温时进行常规处理。产物通过薄层色谱(己烷∶乙酸乙酯=8∶1)提纯，得到5-乙酰基-2-氟苯甲醛(0.19g,58.3％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.65(s,3H),7.31(d,J=9.3Hz,1H),8.27(m,1H),8.45(dd,J=2.4,6.6Hz,1H),10.40(s,1H)EIMS m/z 167(M+H)+C9H719FO2=166采用与实施例114相同的方法(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛)，由5-乙酰基-2-氟苯甲醛(0.1g,0.6mmol)制备5-乙酰基-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.043g,26.5％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.43(s,3H),2.60(s,3H),6.93(d,J=8.6Hz,1H),7.29(d,J=7.9,2H),7.44(d,J=8.3,2H),7.86(dd,J=8.5,2.0Hz,1H),8.38(d,J=2.0Hz,1H),10.34(s,1H)FABMS m/z 271(M+H)+C16H14O2S2=270采用与实施例94相同的方法，由5-乙酰基-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.043g,0.16mmol)制备化合物97(0.059g,99.8％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.49(s,3H),2.51(s,3H),7.09(d,J=8.3Hz,1H),7.31(d,J=8.3Hz,2H),7.41(d,J=6.8Hz,2H),7.89(d,J=8.6Hz,1H),7.95(s,1H),8.01(s,1H),12.00(br s,1H)EIMS m/z 370(M+H)+C19H15NO3S2=369实施例125制备化合物98采用与实施例96相同的方法，由化合物97(0.083g,0.21mmol)制备化合物98(0.040g,49.8％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.29(s,3H),2.50(s,3H),7.30(d,J=8.3Hz,2H),7.47(d,J=7.9Hz,2H),7.78(s,1H),7.88(s,1H),8.04(s,1H),8.16(s,1H),8.17(d,J=3.3Hz,1H),NH没有发现EIMS m/z 386(M+H)+C19H15NO4S2=385实施例126制备化合物99采用与实施例114相同的方法(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛)，由2-氟-6-(三氟甲基)苯甲醛(0.19g,1.5mmol)制备2-[(4-甲基苯基)硫基]-6-(三氟甲基)苯甲醛(0.44g,100％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.42(s,3H),7.08(d,J=8.3,1H),7.27(d,J=7.3Hz,2H),7.33(t,J=7.7Hz,1H),7.43(d,J=8.1Hz,2H),7.50(d,J=7.7Hz,1H),10.53(q,J=2.2Hz,1H)EIMS m/z 296(M+)C15H1119F3OS=296
采用与实施例94相同的方法(合成化合物67),由2-[(4-甲基苯基)硫基]-6-(三氟甲基)苯甲醛(0.1g,0.3mmol)制备化合物99(0.11g,81.2％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.34(s,3H),7.23(d,J=7.7Hz,1H),7.29(d,J=7.9Hz,2H),7.37(d,J=8.3Hz,2H),7.51(t,J=7.7Hz,1H),7.66(d,J=7.7Hz,1H),7.70(s,1H),12.00(br s,1H)EIMS m/z 394(M-H)-C18H1219FNO2S2=395实施例127制备化合物100采用与实施例114相同的方法(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛)，由2-氟-5(三氟甲基)苯甲醛(0.1g,0.5mmol)制备2-[(4-甲基苯基)硫基]-5-(三氟甲基)苯甲醛(0.45g,86.4％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.43(s,3H),6.99(d,J=8.6Hz,1H),7.28(d,J=11.0,2H),7.43(d,J=8.1,2H),7.52(d,J=8.4Hz,1H),8.07(s,1H),10.34(s,1H)FABMS m/z 296(M+)C15H1119F3OS=296采用与实施例94相同的方法，由2-[(4-甲基苯基)硫基]-5-(三氟甲基)苯甲醛(0.1g,0.34mmol)制备化合物100(0.068g,50.9％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.35(s,3H),7.15(d,J=8.8Hz,1H),7.32(d,J=7.7Hz,2H),7.43(d,J=7.7Hz,2H),7.70(s,1H),7.71(d,J=7.0Hz,1H),7.92(s,1H),12.8(br s,1H)EIMS m/z 394(M-H)-C18H1219F3NO2S2=395
实施例128制备化合物101采用与实施例114相同的方法(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛),由2-氟-4(三氟甲基)苯甲醛(0.1g,0.5mmol)制备2-[(4-甲基苯基)硫基]-4-(三氟甲基)苯甲醛(0.47g,89.5％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.41(s,3H),7.23(d,J=4.6Hz,2H),7.24(m,1H),7.38(d,J=8.1,2H),7.50(d,J=8.1Hz,1H),7.95(d,J=7.9,1H),10.41(s,1H)EIMS m/z 296(M+)C15H1119F3OS=296采用与实施例94相同的方法，由2-[(4-甲基苯基)硫基]-4-(三氟甲基)苯甲醛(0.1g,0.34mmol)制备化合物101(0.082g,60.9％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.33(s,3H),7.28(d,J=8.1Hz,2H),7.35(d,J=8.3Hz,2H),7.38(s,1H),7.71(d,J=8.1Hz,1H),7.77(d,J=8.8Hz,1H),7.96(s,1H),12.78(br s,1H)EIMS m/z 394(M-H)-C16H1219F3NO2S2=395实施例129制备化合物102采用与实施例114相同的方法(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛)，由2-氟-3-(三氟甲基)苯甲醛(0.19g,1.5mmol)制备2-[(4-甲基苯基)硫基]-3-(三氟甲基)苯甲醛(0.44g,100％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.26(s,3H),6.97(d,J=2.2Hz,2H),7.03(d,J=8.1,2H),7.64(t,J=7.9Hz,1H),8.02(d,J=7.9,1H),8.09(d,J=7.7Hz,1H),10.60(d,J=0.7Hz,1H)EIMS m/z 296(M+)C15H1119F3OS=296采用与实施例94相同的方法，由2-[(4-甲基苯基)硫基]-3-(三氟甲基)苯甲醛(0.1g,0.3mmol)制备化合物102(0.13g,97.5％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.19(s,3H),6.89(d,J=8.3Hz,2H),7.05(d,J=7.9Hz,2H),7.80(s,1H),7.81(d,J=4.0Hz,1H),7.87(s,1H),8.00(dd,J=2.8,6.6Hz,1H),12.01(br s,1H)EIMS m/z 394(M-H)-C18H1219F3NO2S2=395实施例130制备化合物103采用与实施例96相同的方法，由化合物102(0.1g,0.25mmol)制备化合物103(0.043g,41.7％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.27(s,3H),7.23(d,J=8.3Hz,2H),7.27(d,J=8.8Hz,2H),7.79(d,J=7.7Hz,1H),7.93(t,J=7.7Hz,1H),8.07(d,J=7.7Hz,1H),8.18(s,1H),12.62(br s,1H)EIMS m/z 412(M+H)+C18H1219F3NO3S2=411
实施例131制备化合物104采用如实施例114所述的反应(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛)，并通过薄层色谱(己烷∶乙酸乙酯=8∶1)提纯，再通过另一薄层色谱(己烷∶乙酸乙酯=24∶1)提纯，由2-氟-5-甲氧基苯甲醛(0.25g,2.0mmol)获得2-[(4-甲基苯基)硫基]-5-甲氧基苯甲醛(0.05g,10.1％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.32(s,3H),3.86(s,3H),7.07(dd,J=3.1,8.6Hz,2H),7.13(m,4H),7.32(d,J=8.6Hz,1H),7.44(d,J=3.1Hz,1H),10.51(s,1H)EIMS m/z 258(M+)C15H14O2S=258采用与实施例94相同的方法，由2-[(4-甲基苯基)硫基]-5-甲氧基苯甲醛(0.05g,0.2mmol)制备化合物104(0.07g,97.1％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.24(s,3H),3.84(s,3H),7.02(d,J=8.3Hz,2H),7.09(m,2H),7.12(d,J=8.1Hz,2H),7.52(d,J=8.6Hz,1H),8.04(s,1H),12.01(br s,1H)EIMS m/z 356(M-H)-C18H15NO3S2=357实施例132制备化合物105采用与实施例114相同的方法(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛)，由2-氟-4-甲氧基苯甲醛(0.1g,0.65mmol)制备2-[(4-甲基苯基)硫基]-4-甲氧基苯甲醛(0.078g,46.2％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.39(s,3H),3.70(s,3H),6.45(d,J=2.4Hz,1H),6.76(dd,J=2.4,8.6Hz,1H),7.22(d,J=7.7Hz,2H),7.39(d,J=8.1,2H),7.80(d,J=8.6Hz,1H),10.20(s,1H)EIMS m/z 259(M+H)+C15H14O2S=258采用与实施例94相同的方法(合成化合物67)，由2-[(4-甲基苯基)硫基]-4-甲氧基苯甲醛(0.078g,0.3mmol)制备化合物105(0.091g,85.2％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.49(s,3H),3.74(s,3H),6.75(d,J=2.7Hz,2H),7.07(dd,J=2.7,8.6Hz,1H),7.23(d,J=8.3Hz,2H),7.49(d,J=8.8Hz,1H),8.04(s,1H),12.59(br s,1H)EIMS m/z 358(M+H)+C16H15NO3S2=357实施例133制备化合物106采用与实施例121相同的方法(合成2-氟-5-氰基苯甲醛)，由4-氯氟苯(0.48mL,4.5mmol)制备5-氯-氟苯甲醛(0.55g,77.6％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.16(t,J=9.4Hz,1H),7.56(m,1H),7.84(dd,J=2.8,5.9Hz,1H),10.32(s,1H)EIMS m/z 157(M-H)C7H435Cl19FNO=158采用与实施例114相同的方法(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛)，由5-氯-2-氟苯甲醛(0.15g,0.95mmol)制备5-氯-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.21g,85.1％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.38(s,3H),6.99(d,J=8.6Hz,1H),7.21(d,J=7.9Hz,2H),7.33(m,1H),7.35(d,J=8.3Hz,2H),7.82(d,J=2.4Hz,1H),10.34(s,1H),FABMS m/z 262(M+)C14H1135ClOS=262采用与实施例94相同的方法，由5-氯-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.1g,0.38mmol)制备化合物106(0.096g,70.1％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.30(s,3H),7.23(d,J=8.6Hz,2H),7.25(m,1H),7.27(d,J=8.4Hz,2H),7.48(s,1H),7.49(d,J=7.0Hz,1H),7.91(s,1H),12.01(br s,1H)EIMS m/z 362(M+H)+C17H1235ClNO2S2=361实施例134制备化合物107采用与实施例96相同的方法，由化合物106(0.1g,0.28mmol)制备化合物107(0.094g,90.0％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.30(s,3K),7.31(d,J=8.4Hz,2H),7.43(d,J=8.1Hz,2H),7.49(d,J=2.0Hz,1H),7.79(dd,J=2.0,8.5Hz,1H),7.88(s,1H),8.02(d,J=8.4Hz,1H),NH没有发现EIMS m/z 378(M+H)+C17H1235ClNO3S2=377
实施例135制备化合物108采用与实施例114相同的方法(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛),由4-氯-2-氟苯甲醛(0.32g,2.0mmol)制备4-氯-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.32g,60.4％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.41(s,3H),6.90(d,J=1.8Hz,1H),7.24(m,3H),7.40(d,J=8.1Hz,2H),7.76(d,J=8.3Hz,1H),10.29(s,1H),EIMS m/z 262(M+)C14H1135ClO=262采用与实施例94相同的方法，由4-氯-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.05g,0.2mmol)制备化合物108(0.052g,75.1％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.33(s,3H),7.11(d,J=1.5Hz,1H),7.28(d,J=8.3Hz,2H),7.35(d,J=8.3Hz,2H),7.508(d,J=2.2Hz,2H),7.51(s,1H),7.95(s,1H),12.72(br s,1H)EIMS m/z 326(M+)C17H12NO2S2=326实施例136制备化合物109采用与实施例114相同的方法(合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛)，由3-氯-4-氟苯甲醛(0.2g,1.26mmol)制备3-氯-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.29g,87.9％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.44(s,3H),6.77(d,J=8.3Hz,1H),7.30(d,J=8.4Hz,2H),7.46(d,J=8.1Hz,2H),7.50(dd,J=1.8,8.4Hz,1H),7.82(d,J=1.7Hz,1H),9.85(s,1H),
FABMS m/z 262(M+)C14H1135ClOS=262采用与实施例94相同的方法,由3-氯-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.15g,0.57mmol)制备化合物109(0.13g,65.1％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.38(s,3H),6.79(d,J=8.4Hz,1H),7.37(d,J=7.9Hz,2H),7.41(dd,J=2.2,8.7Hz,1H),7.48(d,J=8.1Hz,2H),7.71(s,1H),7.75(d,J=1.8Hz,1H),NH没有发现EIMS m/z 361(M+)C17H1235ClNO2S2=361实施例137制备化合物110将2-氟-5-硝基苯甲醛(0.055g,0.33mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(2.8mL)中，加入酚(0.077g,0.82mmol)和碳酸钾(0.11g,0.82mmol),25℃搅拌1小时。在常规处理后，残余物通过硅胶色谱法(用氯仿洗脱)纯制，得到5-硝基-2-苯氧基苯甲醛(77mg,98％)。
1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)6.91(d,J=9.4Hz,1H),7.20-7.14(m,2H),7.35(dd,J=7.2Hz,7.2Hz,1H),7.47-7.55(m,2H),8.31(dd,J=9.2,2.8Hz,1H),8.79(d,J=3.0Hz,1H),10.60(s,1H),FABMS m/z 244(M+H)+C13H9NO4=243将5-硝基-2-苯氧基苯甲醛(77mg,0.32mmol)溶解在甲苯(3.9mL)中，加入2,4-噻唑烷二酮(0.15g,1.3mmol)、哌啶(0.013mL,0.13mmol)、乙酸(0.0073mL,0.13mmol)和分子筛4A(0.39g),110℃搅拌3小时。在常规处理后，残余物通过薄层色谱法(用氯仿/乙腈=10/1展开)，得到化合物110(67mg,61％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)6.94(d,J=9.2Hz,1H),7.27(d,J=7.7Hz,2H),7.36(d,J=7.1,7.1Hz,1H),7.50-7.58(m,2H),7.99(s,1H),8.28(dd,J=2.7,9.2Hz,1H),8.38(d,J=2.8Hz,1H),12.81(m,1H)FABMS m/z 341(M-H)-C16H10N2O5=342实施例138制备化合物111将2-氟-5-硝基苯甲醛(0.13g,0.79mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(6.7mL)中，加入对甲酚(0.22g,2.0mmol)和碳酸钾(0.27g,2.0mmol),25℃搅拌1.5小时。在常规处理后，残余物通过硅胶色层(用氯仿洗脱)纯制，得到5-硝基-2-(4-甲基苯氧基)苯甲醛(0.20g,98％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.41(s,2H),6.89(d,J=9.4Hz,1H),7.04(d,J=8.5Hz,2H),7.25-7.32(m,2H),8.39(dd,J=9.2,3.0Hz,1H),8.79(d,J=2.9Hz,1H),10.60(s,1H),FABMS m/z 257(M+)C14H11NO4S=257将5-硝基-2-(4-甲基苯氧基)苯甲醛(0.11g,0.41mmol)溶解在甲苯(5.3mL)中，加入2,4-噻唑烷二酮(0.19g,1.6mmol)、哌啶(0.016mL,0.16mmol)、乙酸(0.0094mL,0.16mmol)和分子筛4A(0.53g),110℃搅拌2小时。在常规处理后，残余物用乙醇研制，得到化合物111(60mg,41％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.36(s,3H),6.90(d,J=9.2Hz,1H),7.15(d,J=8.2Hz,2H),7.33(d,J=8.6Hz,2H),7.99(s,1H),8.25(dd,J=9.2,1.8Hz,1H),8.36(d,J=2.6Hz,1H),12.80(m,1H)FABMS m/z 355(M-H)-C17H12N2O5S=356实施例139制备化合物112将市场上可买得到的2-[4-(2,2-二甲基乙基)苯氧基]-5-硝基苯甲醛(0.12g,0.41mmol)(MAYBRIDGE，目录号XAX00137)溶解在乙醇(4.9mL)中。加入噻唑烷二酮(0.19g,1.6mmol)和哌啶(0.016mL,0.16mmol),80℃搅拌2小时。在常规处理后，残余物通过薄层色谱(氯仿/乙腈=10/1)纯制，得到化合物112(49mg,30％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.31(s,9H),6.92(d,J=9.2Hz,1H),7.18(d,J=8.6Hz,2H),7.53(d,J=8.6Hz,2H),7.98(s,1H),8.27(dd,J=9.2,2.4Hz,1H),8.35(d,J=2.2Hz,1H),12.78(br s,1H)FABMS m/z 397(M-H)-C20H18N2O5S=398实施例140制备化合物113采用与实施例96相同的方法，由化合物100(0.11g,0.27mmol)制备化合物113(0.079g,71.1％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.29(s,3H),7.31(d,J=8.3Hz,2H),7.47(d,J=8.1Hz,2H),7.74(s,1H),7.77(s,1H),8.03(d,J=7.9Hz,1H),8.24(d,J=7.9Hz,1H),NH没有发现
EIMS m/z 412(M+H)+C18H1219F3NO3S2=411实施例141制备化合物113采用与实施例96相同的方法,由化合物94(0.1g,0.28mmol)制备化合物114(0.046g,43.5％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.29(s,3H),7.29(d,J=8.1Hz,2H),7.47(d,J=8.3Hz,2H),7.83(s,1H),7.86(d,J=7.9Hz,1H),8.01(d,J=8.1Hz,1H),8.15(d,J=8.3Hz,1H),NH没有发现EIMS m/z 369(M+H)+C16H12N2O3S2=368实施例142制备化合物115采用与实施例97相同的方法，由4-三氟甲基苯硫醇(74mg,0.42mmol)、2.5mol/L氢氧化钠水溶液(0.71mL,1.8mmol)、四丁基溴化铵(6.7mg,0.021mmol)和2-氟-5-硝基苯甲醛的甲苯(0.71mL)溶液制备2-[(4-三氟甲基苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.13g,93％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.04(d,J=8.8Hz,1H),7.70(d,J=8.1Hz,2H),7.77(d,J=8.6Hz,2H),8.18(dd,J=8.8,2.5Hz,1H),8.71(d,J=2.5Hz,1H),10.31(s,1H)FABMS m/z 327(M-)C14H819NO3S=327采用与实施例97相同的方法,由2-[(4-三氟甲基苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.12g,0.35mmol)、甲苯(5.8mL)、2,4-噻唑烷二酮(0.17g,1.4mmo1)、哌啶(0.014mL,0.14mmol)、乙酸(0.0080mL,0.14mmol)和分子筛4A(0.58g)制备化合物115(44mg,51％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.52(d,J=8.7Hz,1H),7.65(d,J=8.3Hz,2H),7.81(d,J=8.2Hz,2H),7.88(s,1H),8.24(dd,J=8.6,2.5Hz,1H),8.29(d,J=2.4Hz,1H),12.82(m,1H)FABMS m/z 425(M-H)-C17H919N2O4S2=426实施例143制备化合物116将实施例101制备的化合物74(57mg,0.15mmol)溶解在二氯甲烷(11mL)和甲醇(2.3ml)中。加入m-氯过苯甲酸(55mg,0.16mmol),在25℃下搅拌1.5小时。在常规后处理后，残余物通过薄层色谱(氯仿/甲醇=15/1)提纯得到化合物116(34mg,57％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)3.76(s,3H),7.02-7.08(m,2H),7.49-7.55(m,2H),7.81(s,1H),8.19(d,J=2.0Hz,1H),8.33(d,J=8.6Hz,1H),8.52(dd,J=8.6,2.2Hz,1H),12.86(m,1H)FABMS m/z 403(M-H)-C17H12N2O6S2=404实施例144制备化合物117采用与实施例143相同的方法，由实施例98制备的化合物71(52mg,0.13mmol)、二氯甲烷(10mL)、甲烷(2.1mL)和m-氯过苯甲酸(50mg,0.15mmol)制备化合物117(37mg,68％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.55-7.66(m,3H),7.80-7.85(m,1H),8.08(s,1H),8.15(d,J=8.6Hz,1H),8.27(m,1H),8.45(dd,J=8.6,2.2Hz,1H),12.88(m,1H)FABMS m/z 407(M-H)-C16H935ClN2O5S2=408实施例145制备化合物118将3-溴-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.2g,0.65mmol)溶解在丙酮(3mL)中，冷却到0℃，加入琼斯试剂(0.082mL)，搅拌3.5小时。然后，加入异丙醇(0.1mL)。在常规处理后，残余物用己烷和乙酸乙酯重结晶和提纯，得到3-溴-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲酸(0.18g,84.7％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.39(s,3H),6.70(d,J=8.4Hz,1H),7.37(d,J=8.3Hz,2H),7.49(d,J=7.9Hz,2H)7.76(dd,J=1.1,8.7Hz,1H),8.07(d,J=1.1Hz,1H),CO2H没有发现FABMS m/z 322(M-H)-C14H1179BrOS=323采用与实施例115相同的方法(合成3-溴-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛)，由3-溴-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲酸(0.1g,0.31mmol)制备5-羧基-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.031g,36.7％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.50(s,3H),6.84(d,J=8.4Hz,1H),7.36(d,J=8.1Hz,2H),7.46(d,J=8.1Hz,2H)7.93(dd,J=2.0,8.4Hz,1H),8.46(d,J=2.0Hz,1H),10.22(s,1H),CO2H没有发现FABMS m/z 271(M-H)-C15H12O3S=272
采用与实施例94相同的方法，由5-羧基-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.094g,0.34mmol)制备化合物18(0.032g,25.3％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.34(s,3H),6.96(d,J=8.6Hz,1H),7.29(d,J=8.1Hz,2H),7.33(s,1H),7.37(d,J=7.2Hz,2H),7.64(s,1H),7.69(d,J=8.4Hz,1H),8.20(s,1H),NH没有发现FABMS m/z 370(M-H)-C18H13NO4S2=371实施例146制备化合物119采用与实施例94相同的方法，由市场上可获得的5-硝基-2-(吡啶-2-基硫基)苯甲醛(0.26g,1.0mmol)(MAYBRIDGE，目录号XAX00153)制备化合物119(0.120g,33.5％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.28(dd,J=4.8,7.7Hz,1H),7.40(dd,J=0.9,7.7Hz,1H),7.78(dd,J=1.3,7.7Hz,1H),7.86(s,1H),7.87(d,J=8.4Hz,1H),8.28(dd,J=2.4,8.4Hz,1H),8.32(d,J=2.4Hz,1H),8.42(dd,J=0.9,4.8Hz,1H),12.78(br s,1H)EIMS m/z=360(M+H)+C15H9N3O4S2=359实施例147制备化合物120采用与实施例96相同的方法，由化合物119(0.02g,0.056mmol)制备化合物120(0.0044g,21.2％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.49(m,1H),7.87(s,1H),7.98(d,J=7.9Hz,1H),8.07(m,1H),8.08(d,J=8.5Hz,1H),8.26(dd,J=2.2,8.5Hz,1H),8.43(d,J=2.2Hz,1H),8.54(d,J=4.8Hz,1H),NH没有发现EIMS m/z=360(M+H)+C15H9N3O5S2=359实施例148制备化合物121将N,N-二苯基苄胺(935mg,3.60mmol)悬浮在乙酸(20mL)中，加入六亚甲基三胺(1.12g,7.96mmol),90℃搅拌12小时。反应液冷却到室温，加入6mol/L氢氧化钠水溶液和水，产物用氯仿萃取。有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物通过硅胶柱色谱(洗脱液己烷/乙酸乙酯=20/1→10/1)纯制，得到4-(N-苯基苄基氨基)苯甲醛(742mg,72％)。
1H NMR(270MHz,CDCl3)δ(ppm)5.04(s,2H),6.80(d,J=8.6Hz,2H),7.2-7.45(m,10H),7.63(d,J=8.6Hz,2H),9.73(s,1H)将4-(N-苯基苄基氨基)苯甲醛(109mg,0.378mmol)、2,4-噻唑烷二酮(59.9mg,0.511mmol)和哌啶(0.045mL,0.46mmol)在乙醇(5mL)中加热回流6小时。反应液冷却到室温，加入1mol/L HCL，产物用氯仿萃取。有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发除去溶剂，残余物通过制备性薄层色谱(氯仿/甲醇=20/1)，得到化合物121(123mg,84％)。
1H NMR(270MHz,CDCl3)δ(ppm)5.08(s,2H),6.88(d,J=8.6Hz,2H),7.15-7.45(m,12H),7.61(s,2H),12.38(br s,1H)
实施例149制备化合物129将2-氟-5-硝基苯甲醛(31mg,0.18mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(3.1mL)中，加入4-巯基苯甲酸(85mg,0.55mmol)和三乙胺(0.13mL.0.92mmol),25℃搅拌20分钟。在常规后处理后，产物用薄层色谱提纯(用氯仿/甲醇=10/1展开)，得到5-硝基-2-[(4-羧基苯基)硫基]苯甲醛(60mg,100％)。
将5-硝基-2-[(4-羧基苯基)硫基]苯甲醛(60mg,0.20mmol)溶解在乙醇(2.4mL)中，加入2,4-噻唑烷二酮(92mg,0.79mmol)、哌啶(0.027mL,0.28mmol)、乙酸(0.0045mL,0.079mmol)和分子筛4A(0.30g),80℃搅拌2.5小时。在常规后处理后，残余物通过薄层色谱(用氯仿/甲醇=5/1展开)提纯得到化合物129(12mg,15％)。
5-硝基-2-[(4-羧基苯基)硫基]苯甲醛1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.04(d,J=8.8Hz,1H),7.74(d,J=8.0Hz,2H),8.09(d,J=8.2Hz,2H),8.28(dd,J=8.8,2.5Hz,1H),8.87(d,J=2.5Hz,1H),10.28(s,1H),13.10(m,1H)化合物1291H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.46(d,J=8.8Hz,1H),7.55(d,J=8.3Hz,2H),7.87(s,1H),7.98(d,J=8.7Hz,2H),8.21(dd,J=8.7,2.4Hz,1H),8.30(d,J=2.4Hz,1H),12.57-13.31(m,2H)FABMS m/z 401(M-H)-C17H10N2O6S2=402
实施例150制备化合物130将实施例149获得的5-硝基-2[(2-羧基苯基)硫基]苯甲醛(71mg,0.23mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(7.1mL)中，加入2.0mol/L二甲胺甲醇溶液(0.23mL,0.47mmol)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(90mg,0.47mmol)和1-羟基苯并三唑水合物(0.11g,0.94mmol),25℃搅拌30分钟。在常规后处理后，产物用硅胶色谱提纯(用氯仿洗脱)，得到N,N-二甲基-4-[(2-甲酰基-4-硝基苯)硫基]苯甲酰胺(59mg,75％)。
将N,N-二甲基-4-[(2-甲酰基-4-硝基苯)硫基]苯甲酰胺(0.12g,0.36mmol)溶解在甲苯(6.0mL)中，加入2,4-噻唑烷二酮(0.17g,1.5mmol)、哌啶(0.014mL,0.15mmol)、乙酸(0.0083mL,0.15mmol)和分子筛4A(0.60g),110℃搅拌4.5小时。在常规后处理后，残余物通过薄层色谱(用氯仿/乙腈=3/1展开)提纯，得到化合物130(48mg,31％)。
N,N-二甲基-4-[(2-甲酰基-4-硝基苯)硫基]苯甲酰胺1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)3.02(br s,3H),3.16(br s,3H),7.02(d,J=9.0Hz,1H),7.53-7.64(m,4H),8.13(dd,J=8.8,2.6Hz,1H),8.69(d,J=2.6Hz,1H),10.31(s,1H),FABMS m/z 331(M+H)+C16H14N3O4S=330化合物1301H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.92(br s,3H),2.99(br s,3H),7.36(d,J=8.8Hz,1H),7.50(d,J=8.2Hz,2H),7.57(d,J=8.0Hz,2H),7.89(s,1H),8.21(dd,J=8.8,2.2Hz,1H),5.27(d,J=2.2Hz,1H),12.83(m,1H),
FABMS m/z 428(M-H)-C19H15N3O5S2=429实施例151制备化合物131采用与实施例150相同的方法,由实施例149获得的5-硝基-2[(4-羧基苯基)硫基]苯甲醛(0.13g,0.42mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(7.1mL)、吗啉(0.073mL,0.83mmol),1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.16g,0.83mmol)和1-羟基苯并三唑单水合物制备4-{4-[(2-甲酰基-4-硝基苯基)硫基]苯甲酰基}吗啉(0.13g,78％)。
由4-{4-[(2-甲酰基-4-硝基苯基)硫基]苯甲酰基}吗啉(0.13g,0.34mmol)、甲苯(6.3mL)、2,4-噻唑烷二酮(0.16g,1.3mmol)、哌啶(0.013mL,0.13mmol)、乙酸(0.0077mL,0.13mmol)和分子筛4A(0.63g)制备化合物131(48mg,31％)。
4-{4-[(2-甲酰基-4-硝基苯基)硫基]苯甲酰基}吗啉1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)3.39-3.93(m,8H),7.04(d,J=9.0Hz,1H),7.56(d,J=8.2Hz,2H),7.62(d,J=8.3Hz,2H),8.13(dd,J=8.8,2.5Hz,1H),8.69(d,J=2.6Hz,1H),10.31(s,1H),FABMS m/z 373(M+H)+C18H16N2O5S=372化合物1311H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)3.27-3.45(m,4H),3.61(br s,4H),7.39(d,J=8.9Hz,1H),7.51(d,J=8.4Hz,2H),7.57(d,J=8.4Hz,2H),7.89(s,1H),8.21(dd,J=8.8,2.6Hz,1H),8.27(d,J=2.2Hz,1H),12.83(m,1H),FABMS m/z 470(M-H)-C21H17N3O6S3=471
实施例152制备化合物132向4-(甲硫基)苯硫醇(0.15mL,0.93mmol)中加入2.5mol/L氢氧化钠溶液(1.6mL,4.0mmol)和四丁基溴化铵(0.15mL,0.047mmol),25℃搅拌10分钟。将2-氟-5-硝基苯甲醛(0.16g,0.93mmol)的甲苯溶液(1.6mL)加入到反应溶液中，110℃搅拌1.5小时。在常规后处理后，产物通过硅胶色层法(用氯仿洗脱)纯制，得到5-硝基-2-[(甲硫)苯基]硫代苯甲醛(0.25g,89％)。
将5-硝基-2-[(甲硫基)苯基]硫代苯甲醛(0.23g,0.76mmol)溶解在甲醇(12mL)中，加入2,4-噻唑烷二酮(0.35g,3.0mmol)、哌啶(0.030mL,0.30mmol)、乙酸(0.017mL,0.30mmol)和分子筛4A(1.2g),110℃搅拌4小时。在常规后处理后，产物通过乙醇研制得到化合物132(12mg,15％)。
5-硝基-2-[(甲硫基)苯基]硫代苯甲醛1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.55(s,3H),6.98(d,J=9.0Hz,1H),7.32-7.38(m,2H),7.44-7.50(m,2H),8.11(dd,J=9.0,2.5Hz,1H),8.66(d,J=2.4Hz,1H),10.30(s,1H),FABMS m/z 306(M+H)+C14H11NO3S2=305化合物1321H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.52(s,3H),7.09(d,J=9.2Hz,1H),7.41(d,J=8.6Hz,2H),7.52(d,J=8.3Hz,2H),7.38(s,1H),8.16(dd,J=8.8,2.6Hz,1H),8.23(d,J=2.4Hz,1H),12.83(m,1H),
FABMS m/z 403(M-H)-C17H12N2O4S3=464实施例153制备化合物133采用与实施例134相同的方法,由实施例102制备的化合物75(0.11g,0.27mmol)、二氯甲烷(21mL)、甲醇(4.2mL)和m-氯过苯甲酸(0.10g,0.30mmol)制备化合物133(0.12g,100％)。
化合物1331H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.46-2.55(m,3H),3.93-4.04(m,2H),8.73(br d,J=7.7Hz,2H),8.88(br d,J=7.5Hz,2H),9.27(s,1H),9.58(s,1H),9.72(d,J=8.6Hz,1H),9.91(br d,J=8.3Hz,1H),14.21(m,1H),FABMS m/z 401(M-H)-C18H14N2O5S2=402实施例154制备化合物134采用与实施例134相同的方法，由实施例97制备的化合物70(0.11g,0.29mmol)、二氯甲烷(23mL)、甲醇(4.5mL)和m-氯过苯甲酸(0.11g,0.32mmol)制备化合物134(90mg,76％)。
化合物1341H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.49-7.62(m,3H),7.66(s,1H),7.99(s,1H),8.21(d,J=1.7Hz,2H),8.30(d,J=8.9Hz,1H),8.49(dd,J=8.4,2.0Hz,1H),12.89(m,1H),FABMS m/z 407(M-H)-C16H935ClN2O5S2=408
实施例155制备化合物135采用与实施例134相同的方法，由实施例99制备的化合物72(83mg,0.19mmol)、二氯甲烷(17mL)、甲醇(3.3mL)和m-氯过苯甲酸(74mg,0.21mmol)制备化合物135(32mg,37％)。
化合物1351H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.52(dd,J=8.4,1.8Hz,1H),7.79(d,J=8.4Hz,2H),7.86(d,J=2.1Hz,1H),7.99(s,1H),8.22(d,J=2.0Hz,1H),8.30(d,J=8.6Hz,1H),8.48(dd,J=8.6,2.0Hz,1H),12.88(m,1H),FABMS m/z 441(M-H)-C16H835Cl2N2O5S2=442实施例156制备化合物136将实施例107制备的化合物80(60mg,0.14mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)中，加入m-氯过苯甲酸(0.11g,0.33mmol),25℃搅拌1小时。在常规后处理后，用薄层色谱(用氯仿/甲醇=20/1展开)纯制，得到化合物136(20mg,33％)。
化合物1361H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.66(d,J=8.6Hz,2H),7.73(d,J=8.4Hz,2H),7.99(s,1H),8.27-8.32(m,1H),8.48(d,J=8.2Hz,1H),8.54(d,J=1.8Hz,1H),12.83(m,1H),FABMS m/z 451(M-H)-C16H979BrN2O5S2=452
实施例157制备化合物137使用4-氟-3-苯氧基苯甲醛(0.20g,0.93mmol)，进行与实施例114合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛类似的反应，随后进行常规处理。
溶剂通过真空干燥器从反应物和产物的混合物中除去，应用类似于合成化合物67的方法得到化合物137(0.11g,45％)。
化合物1371H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.50(s,3H),6.90(d,J=8.3Hz,1H),7.06(d,J=9.0Hz,2H),7.07(m,1H),7.21(t,J=7.3Hz,1H),7.30(m,1H),7.32(d,J=8.1Hz,2H),7.43(d,J=8.1Hz,4H),7.63(s,1H),12.55(br s,1H),EI-MS m/z 419(M+)C23H17NO3S2=419实施例158制备化合物138使用4-氟-3-甲氧基苯甲醛(0.20g,1.3mmol)，进行与实施例114合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛类似的反应，随后进行常规处理。
溶剂通过真空干燥器从反应物和产物的混合物中除去，应用类似于合成化合物67的方法得到化合物138(0.11g,45％)。
化合物1381H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.36(s,3H),3.90(s,3H),6.71(d,J=8.1Hz,1H),7.06(d,J=8.1Hz,1H),7.24(t,J=1.3Hz,1H),7.31(d,J=8.3Hz,2H),7.39(d,J=8.1Hz,2H),7.74(s,1H),12.57(br s,1H),EI-MS m/z 357(M-)C18H15NO3S2=357
实施例159制备化合物139将实施例145制备的化合物118(0.33g,0.89mmol)溶解在二甲基甲酰胺(15mL)中，加入碳酸钾(0.12g,0.89mmol)和苄基溴(0.13mL,1.1mmol)，在室温下搅拌10小时。然后进行常规处理，产物通过薄层色谱(己烷/乙酸乙酯=8/1)提纯得到化合物139(0.077g,50％)。
化合物1391H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.33(s,3H),5.37(s,2H),7.11(d,J=8.4Hz,1H),7.31(d,J=8.3Hz,2H),7.38(d,J=8.3Hz,2H),7.39(m,1H),7.41(d,J=8.3Hz,2H),7.46(d,J=7.3Hz,2H),7.91(d,J=1.8,8.4Hz,1H),7.96(s,1H),8.08(d,J=1.5Hz,1H),12.76(br s,1H),EI-MS m/z 461(M-)C25H19NO4S2=461实施例160制备化合物140采用与实施例96相同的方法(合成化合物69)，由化合物95(0.1g,0.28mmol)制备化合物140(0.067g,64.0％)。
化合物1401H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.34(s,3H),7.40(d,J=8.4Hz,2H),7.63(d,J=8.1Hz,2H),7.80(s,1H),8.09(dd,J=1.7,8.4Hz,1H),8.19(d,J=1.5Hz,1H),8.22(d,J=8.3Hz,1H),12.80(br s,1H),FABMS m/z 369(M+H)+C18H12N2O3S2=368
实施例161制备化合物141采用与实施例96相同的方法(合成化合物69),由化合物109(0.1g,0.28mmol)制备化合物141(0.094g,89.9％)。
化合物1411H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.49(s,3H),7.36(d,J=8.4Hz,2H),7.62(d,J=8.1Hz,2H),7.76(s,1H),7.79(s,1H)7.82(d,J=8.3Hz,1H),8.10(d,J=8.3Hz,1H),12.77(br s,1H),FABMS m/z 377(M-H)-C17H1235ClNO3S2=378实施例162制备化合物142将实施例123制备的3-溴-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.1g,0.33mmol)溶解在甲醇(5mL)中，加入对甲苯磺酸-水合物(0.0006g,0.003mmol)和甲基原甲酸(0.035mL,0.33mmol)，产物加热回流3小时。在常规处理后，溶剂通过真空干燥器除去，得到3-溴-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛二甲基缩醛粗产物。
利用所有的3-溴-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛二甲基缩醛粗产物，采用类似于实施例123中合成5-[羟甲基-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛的方法得到化合物3-甲酰基-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛二甲基缩醛(0.09g，得率为90.3％)。
采用与实施例94(合成化合物67)相同的方法，由3-甲酰基-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛二甲基缩醛(0.2g,0.67mmol)制备化合物142(0.21g,76.3％)。
3-甲酰基-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛二甲基缩醛1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.39(s,3H),3.32(s,6H),5.39(s,1H),6.99(d,J=8.3Hz,1H),7.22(d,J=7.9Hz,2H),7.38(d,J=8.3Hz,2H),7.43(dd,J=2.0,8.3Hz,1H),7.94(d,J=2.0Hz,1H),10.35(s,1H),FAB-MS m/z 302(M-)C17H18O3S=302化合物1421H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.49(s,3H),3.27(s,6H),5.44(s,1H),7.26(d,J=2.6Hz,4H),7.40(d,J=8.4Hz,1H),7.54(s,1H),8.04(s,1H),12.68(br s,1H),FABMS m/z 401(M-H)-C20H19NO4S2=402实施例163制备化合物143采用与实施例96相同的方法(合成化合物69)，由化合物88(0.07g,0.17mmol)制备化合物143(0.049g,69.4％)。
化合物1431H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.33(s,3H),7.35(d,J=8.1Hz,2H),7.63(d,J=8.3Hz,2H),7.79(s,1H),7.86(d,J=8.4Hz,1H),7.91(s,1H),8.08(d,J=8.3Hz,1H),12.76(br s,1H),FABMS m/z 422(M+)C17H1279BrNO3S2=422
实施例164制备化合物144将化合物142(0.17g,0.43mmol)溶解在二氯甲烷(14mL)和甲醇(2.6mL)中，加入1mol/L盐酸溶液(0.5mL)。加热回流2小时，产物冷却到室温，用乙酸乙酯萃取。减压蒸发除去溶剂，残余物从乙酸乙酯和己烷中重结晶得到化合物144(0.15g,98.2％)。
化合物1441H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.49(s,3H),7.12(d,J=8.4Hz,1H),7.34(d,J=8.3Hz,2H),7.45(d,J=8.1Hz,2H),7.83(d,J=8.3Hz,1H),7.95(s,1H),7.97(s,1H),9.97(s,1H),12.78(br s,1H),FABMS m/z 356(M+H)+C18H13NO3S2=355实施例165制备化合物145将化合物144(0.05g,0.14mmol)溶解在氯仿(4mL)中，加入[(叔丁氧基羰基)亚甲基]三苯基膦(0.13g,0.35mmol)。在加热回流2小时后，产物冷却到室温，用乙酸乙酯萃取。减压蒸发除去溶剂，残余物用制备性薄层色谱(展开液氯仿/乙腈=18/1)提纯。产物从乙酸乙酯和己烷中重结晶得到化合物145(0.038g,59.8％)。
化合物1451H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.48(s,9H),2.33(s,3H),6.49(d,J=16.1Hz,1H),7.08(d,J=8.3Hz,1H),7.27(d,J=8.6Hz,2H),7.35(d,J=8.3Hz,2H),7.56(d,J=16.1Hz,1H),7.69(s,1H),7.72(d,J=8.3Hz,1H),7.95(s,1H),12.70(br s,1H),
FABMS m/z 435(M-H)-C24H23NO4S2=454实施例166制备化合物146将化合物145(0.02g,0.04mmol)溶解在二氯甲烷(4mL)中，加入三氟乙酸(1mL)，在室温下搅拌1小时。进行常规处理，减压蒸发除去溶剂，残余物用乙酸乙酯研制得到化合物146(0.015g,87.5％)。
化合物1461H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.50(s,3H),6.51(d,J=16.0Hz,1H),7.11(d,J=8.1Hz,1H),7.27(d,J=8.4Hz,2H),7.34(d,J=8.1Hz,2H),7.60(d,J=16.0Hz,1H),7.70(s,1H),7.72(d,J=8.4Hz,1H),7.96(s,1H),12.50(br s,1H),12.71(br s,1H),FABMS m/z 396(M-H)-C20H15NO4S2=397实施例167制备化合物147采用与合成5-溴-2[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛相类似的方法，由4-氟-5-(三氟甲基)苯甲醛(0.20g,1.0mmol)制备4-[(4-甲基苯基)硫基]-3-(三氟甲基)苯甲醛(0.30g,100％)。
采用与实施例94相同的方法(合成化合物67)，由4-[(4-甲基苯基)硫基]-3-(三氟甲基)苯甲醛(0.2g,0.7mmol)制备化合物147(0.13g,50.2％)。
4-[(4-甲基苯基)硫基]-3-(三氟甲基)苯甲醛
1HNMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.43(s,3H),7.01(d,J=8.3Hz,1H),7.29(d,J=7.9Hz,2H),7.46(d,J=8.1Hz,2H),7.73(d,J=8.4Hz,1H),8.11(s,1H),9.93(s,1H)FABMS m/z 296(M+)C15H11F3OS=296化合物1471HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.49(s,3H),7.08(d,J=8.3Hz,1H),7.35(d,J=8.1Hz,2H),7.46(d,J=8.1Hz,2H),7.67(d,J=8.4Hz,1H),7.82(s,1H),8.02(s,1H),12.68(br s,1H),FABMS m/z 395(M+)C18H1219F3NO2S2=395实施例168制备化合物148采用与实施例96相同的方法(合成化合物69)，由化合物147(0.07g,0.18mmol)制备化合物148(0.047g,64.3％)。
化合物1481HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.49(s,3H),7.37(d,J=8.4Hz,2H),7.53(d,J=8.3Hz,2H),7.93(s,1H),8.10(d,J=7.7Hz,1H),8.11(s,1H),8.35(d,J=8.3Hz,1H),12.80(br s,1H),FABMS m/z 412(M+H)+C18H1219F3NO3S2=411
实施例169制备化合物149采用5-羧基-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.10g,0.37mmol)，进行与实施例81相类似的反应，得到5-(N,N-二乙基氨基羰基)-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.046g,36.7％)。
采用与实施例94(化合物67的合成)相同的方法，由5-(N,N-二乙基氨基羰基)-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.046g,0.13mmol)制备化合物149(0.043g,76.1％)。
5-(N,N-二乙基氨基羰基)-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛1HNMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)1.19(m,3H),1.53(m,4H)2.41(s,3H),6.98(d,J=8.3Hz,1H),7.23(d,J=8.4Hz,2H),7.36(dd,J=2.0,8.3Hz,1H),7.40(d,J=8.3Hz,2H),7.86(d,J=2.0,8.3Hz,1H),10.35(s,1H),FABMS m/z 328(M+H)+C19H21NO2S=327化合物1491HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.1(m,6H),2.50(s,3H)3.38(m,4H),7.16(d,J=8.3Hz,1H),7.27(d,J=8.3Hz,2H),7.34(d,J=8.4Hz,2H),7.37(d,J=8.1Hz,1H),7.39(s,1H),7.97(s,1H),12.03(br s,1H),FABMS m/z 427(M)+C22H22N2O3S2=427实施例170制备化合物150采用与实施例96相同的方法(合成化合物69)，由化合物149(0.09g,0.21mmol)制备化合物150(0.024g,26.2％)。
化合物1501HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.1(m,6H),2.29(s,3H)2.49(m,4H),7.31(d,J=8.4Hz,2H),7.40(s,1H),7.46(d,J=8.1Hz,2H),7.63(d,J=7.9Hz,1H),7.84(s,1H),8.05(d,J=8.1Hz,1H),NH没有发现FABMS m/z 443(M)+C22H22N2O4S2=443实施例171制备化合物151采用与实施例81相同的方法，使用5-羧基-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛(0.3g,1.1mmol)并用吗啉(0.19ml,2.2mmol)代替二乙胺制备4{3-甲酰基-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲酰基}-吗啉(0.092g,24.4％)。
采用与实施例94相同的方法(合成化合物67)，由4-{3-甲酰基-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲酰基}-吗啉(0.092g,0.27mmol)制备化合物151(0.066g,55.8％)。
4-{3-甲酰基-4-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲酰基}-吗啉1HNMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.41(s,3H),2.89(s,4H)2.97(s,4H),6.97(d,J=8.3Hz,1H),7.22(m,1H),7.26(d,J=7.9Hz,2H),7.41(d,J=8.1Hz,2H),7.89(d,J=1.8Hz,1H),10.34(s,1H)FABMS m/z 342(M+H)+C19H19NO3S=341化合物1511HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.30(s,3H),3.40(s,4H)3.60(s,4H),7.13(d,J=8.3Hz,1H),7.27(d,J=8.4Hz,2H),7.35(d,J=7.7Hz,2H),7.39(d,J=8.3Hz,1H),7.92(s,1H),8.29(d,J=3.9Hz,1H),12.02(br s,1H)FABMS m/z 441(M)+C22H20N2O4S2=441
实施例172制备化合物152采用与实施例124合成5-乙酰基-2-氟苯甲醛的方法相类似的方法,由5-溴-4-氟苯甲醛(1.0g,4.9mmol)制备3-乙酰基-4-氟苯甲醛(0.38g,47.0％)。
采用与实施例114合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛的方法相类似的方法，由3-乙酰基-4-氟苯甲醛(0.38g,2.3mmo1)并用3,4-二氯苯硫酚代替4-甲基苯硫酚制备3-乙酰基-4-[(3,4-二氯苯基)硫基]苯甲醛(0.l0g,13.7％)。
采用与实施例94相同的方法(合成化合物67)，由3-乙酰基-4-[(3,4-二氯苯基)硫基]苯甲醛(0.1g,0.32mmol)制备化合物152(0.044g,32.5％)。
3-乙酰基-4-氟苯甲醛1HNMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.64(s,3H),7.25(dd,J=8.4,10.4Hz,1H),8.01(m,1H),8.35(dd,J=2.4,7.1Hz,1H),9.95(s,1H)CIMS m/z 167(M+H)+C9H7FO2=1663-乙酰基-4-[(3,4-二氯苯基)硫基]苯甲醛1HNMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.72(s,3H),6.95(d,J=2.0Hz,1H)7.37(dd,J=2.0,8.1Hz,1H),7.53(d,J=2.0Hz,1H),7.62(d,J=2.0Hz,1H),7.72(dd,J=1.8,8.3Hz,1H),8.35(d,J=1.8Hz,1H),9.95(s,1H)FABMS m/z 325(M+)C15H10Cl2O2S=325
化合物1521HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.69(s,3H),6.96(d,J=8.4Hz,1H)7.53(dd,J=2.0,8.3Hz,1H),7.66(dd,J=1.8,8.5Hz,1H),7.74(s,1H),7.78(d,J=8.3Hz,1H),7.86(d,J=2.0Hz,1H),8.32(d,J=1.8Hz,1H),NH没有发现FABMS m/z 424(M+)C18H11Cl2NO3S2=424实施例173制备化合物153采用与实施例96相同的方法(合成化合物69)，由化合物152(0.03g,0.071mmol)制备化合物153(0.094g,89.9％)。
化合物1531HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.50(s,3H),7.65(dd,J=2.0,8.3Hz,1H)7.74(dd,J=8.6Hz,1H),7.93(d,J=1.7Hz,1H),7.96(s,1H),8.11(dd,J=1.8,8.3Hz,1H),8.34(s,1H),8.46(d,J=8.8Hz,1H),12.77(br s,1H)FABMS m/z 440(M+)C18H11Cl2NO4S2=440实施例174制备化合物154采用与实施例114的合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛的方法相类似的方法，由5-硝基-2-氟苯甲醛(0.30g,1.77mmol)并用2,3-二氯苯硫酚代替p-甲苯硫醇制备2-[(2,3-二氯苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.57g,97.9％)。
采用与实施例96相同的方法(合成化合物69)，由2-[(2,3-二氯苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.3g,0.91mmol)制备化合物154(0.088g,22.5％)。
2-[(2,3-二氯苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛1HNMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)6.91(d,J=8.8Hz,1H),7.34(d,J=8.1Hz,1H),7.58(dd,J=1.5,7.7Hz,1H),7.66(dd,J=1.7,8.1Hz,1H),8.19(dd,J=2.6,8.9Hz,1H),8.72(d,J=2.6Hz,1H),10.31(s,1H)FABMS m/z 328(M+)C13H7Cl2NO3S=328化合物1531HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.25(d,J=8.6Hz,1H),7.55(d,J=2.0Hz,1H),7.57(s,1H),7.81(s,1H),7.92(d,J=2.0Hz,1H),8.16(dd,J=2.4,8.7Hz,1H),8.30(d,J=2.4Hz,1H),NH没有发现FABMS m/z 425(M-H)-C16H835Cl2N2O4S2=426实施例175制备化合物155采用与实施例114的合成5-溴-2-[(4-甲基苯基)硫基]苯甲醛的方法相类似的方法，由5-硝基-2-氟苯甲醛(0.30g,1.77mmol)并用2,4-二氯苯硫酚代替p-甲苯硫醇制备2-[(2,4-二氯苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.53g,91.7％)。
采用与实施例96相同的方法(合成化合物69)，由2-[(2,4-二氯苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.3g,0.91mmol)制备化合物155(0.13g,32.4％)。
2-[(2,4-二氯苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛1HNMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)6.86(d,J=8.8Hz,1H),7.40(dd,J=2.2,8.3Hz,1H),7.61(s,1H),7.64(t,J=2.6Hz,1H),8.17(dd,J=2.6,8.8Hz,1H),8.71(d,J=2.6Hz,1H),10.30(s,1H)FABMS m/z 328(M+)C13H735Cl2NO3S=327化合物1551HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.38(d,J=8.8Hz,1H),7.41(s,1H),7.43(d,J=1.3Hz,1H),7.75(dd,J=3.9,5.7Hz,1H),7.80(s,1H),8.20(dd,J=2.4,8.8Hz,1H),8.32(d,J=2.4Hz,1H),NH没有发现FABMS m/z 425(M-H)-C16H835Cl2N2O4S2=426实施例176制备化合物156采用与实施例96相同的方法(合成化合物69)，由化合物154(0.037g,0.085mmol)制备化合物156(0.016g,43.1％)。
化合物1561HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.74(dd,J=2.0,8.4Hz,1H),7.77(s,1H),7.79(s,1H),7.82(t,J=2.2Hz,1H),8.00(d,J=8.6Hz,1H),8.30(dd,J=2.2,8.7Hz,1H),8.42(d,J=2.2Hz,1H),NH没有发现FABMS m/z 441(M-H)-C16H835Cl2N2O5S2=442
实施例177制备化合物157采用与实施例96相同的方法(合成化合物69)，由化合物155(0.066g,0.15mmol)制备化合物157(0.030g,44.1％)。
化合物1571HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.67(t,J=7.7Hz,1H),7.85(d,J=0.9Hz,1H),7.88(s,1H),8.10(d,J=8.8Hz,1H),8.14(s,1H),8.28(d,J=2.2Hz,1H),8.42(d,J=2.4Hz,1H),NH没有发现FABMS m/z 441(M-H)-C16H835Cl2N2O5S2=442实施例178制备化合物158采用与实施例96相同的方法(合成化合物69)，由化合物154(0.03g,0.070mmol)制备化合物158(0.0085g,26.4％)。
化合物1571HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.19(d,J=8.8Hz,1H),7.55(d,J=1.7Hz,1H),7.55(s,1H),7.70(s,1H),7.92(s,1H),8.11(dd,J=2.6,8.8Hz,1H),8.36(d,J=2.4Hz,1H),NH没有发现实施例179制备化合物159采用与实施例96相同的方法(合成化合物69)，由化合物155(0.03g,0.070mmol)制备化合物159(0.13g,38.9％)。
化合物159
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.35(d,J=8.8Hz,1H),7.40(s,1H),7.42(d,J=4.4Hz,1H),7.75(dd,J=2.4,6.7Hz,1H),7.76(s,1H),8.18(dd,J=2.6,8.8Hz,1H),8.35(d,J=2.6Hz,1H),NH没有发现实施例180制备化合物160将2-氟-硝基苯甲醛(0.16mL,0.95mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(8.1mL)中，向溶液中加入4-巯基酚(0.11mg,0.86mmol)和三乙胺(0.27mL,1.9mmol),25℃搅拌1小时。在常规处理后，产物用硅胶柱色谱(用n-己烷/丙酮=4/1-1/1)提纯得到5-硝基-2-[(4-羟基苯基)硫基]苯甲醛(0.18g,70％)。
将5-硝基-2-[(4-羟基苯基)硫基]苯甲醛(0.17g,0.61mmol)溶解在甲苯(8.4mL)中,加入2,4-噻唑烷二酮(0.29mg,2.4mmol)、哌啶(0.024mL,0.24mmol)、乙酸(0.014mL,0.24mmol)和分子筛4A(0.84g),110℃搅拌2小时。在常规后处理后，经薄层色谱(用氯仿/甲醇=10/1)纯制，得到化合物160(34mg,15％)。
5-硝基-2-[(4-羟基苯基)硫基]苯甲醛1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)6.97(d,J=9.0Hz,1H),7.03(d,J=8.6Hz,2H),7.40(d,J=8.8Hz,2H),8.06(m,1H),8.61(br s,1H),8.63(d,J=2.3Hz,1H),12.29(s,1H)
化合物1601HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)6.94(d,J=8.8Hz,3H),7.45(d,J=8.6Hz,2H),7.87(s,1H),8.13(dd,J=2.4,8.8Hz,1H),8.20(d,J=2.2Hz,1H),10.20(s,1H),12.86(br s,1H)FABMS m/z 373(M-H)-C16H10N2O5S2=374实施例181制备化合物161采用与实施例97相同的方法，由3,4-二甲基苯硫醇(0.16mL,1.2mmol)、2.5mol/L氢氧化钠水溶液(2.1mL,5.2mmol)、四丁基溴化铵(0.020mg,0.61mmol)和2-氟-5-硝基苯甲醛(0.21mg,1.2mmol)的甲苯溶液(2.1mL)制备2-[(3,4-二甲基苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.16g,45％)。
化合物161(0.13g,64％)由2-[(3,4-二甲基苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛(0.16g,0.54mmol)、甲苯(7.8mL)、2,4-噻唑烷二酮(0.26mg,2.2mmol)、哌啶(0.022mL,0.22mmol)、乙酸(0.0l2mL,0.22mmol)和分子筛4A(0.78g)制备。
2-[(3,4-二甲基苯基)硫基]-5-硝基苯甲醛1HNMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)2.31(s,3H),2.36(s,3H),6.97(d,J=9.0Hz,1H),7.24-7.36(m,3H),8.09(dd,J=9.0,2.5Hz,1H),8.67(d,J=2.6Hz,1H),10.31(s,1H)FABMS m/z 287(M)+C15H13NO3S=287
化合物1691HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.25(s,3H),2.28(s,3H),7.06(d,J=9.0Hz,1H),7.33(s,2H),7.40(s,1H),7.88(s,1H),8.15(m,1H),8.21(m,1H),12.86(br s,1H)FABMS m/z 385(M-H)-C18H14N2O4S2=386实施例182制备化合物162采用与实施例134相同的方法，由实施例56制备的化合物72(0.061g,0.14mmol)、二氯甲烷(6.1mL)、甲醇(1.2mL)和m-氯过苯甲酸(0.75g,2.1mmol)制备化合物162(0.60mg,0.9％)。
化合物1621HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.96(d,J=8.4Hz,1H),8.02(dd,J=8.7,2.2Hz,1H),8.17(s,1H),8.28(s,1H),8.32(d,J=2.2Hz,1H),8.44(d,J=1.3Hz,2H),化合物183制备化合物163采用与实施例156相同的方法，由实施例108制备的化合物81(0.10g,0.26mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(5.1mL)和m-氯过苯甲酸(0.14g,0.82mmol)制备化合物163(0.0034g,32％)。
化合物1631HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.58(d,J=8.4Hz,2H),7.74(d,J=8.4Hz,2H),8.00(s,1H),8.30(dd,J=8.2Hz,1H),8.48(d,J=8.2Hz,1H),8.53(d,J=1.4Hz,1H),12.83(br s,1H)FABMS m/z 407(M-H)-C16H935ClN2O5S2=408实施例184制备化合物164向4-乙基苯硫醇(0.20g,1.2mmol)中加入2.5mol/L氢氧化钠水溶液(2.0mL,4.9mmol)和四丁基溴化铵(0.019g,0.58mmol),25℃搅拌5分钟。再加入4-氟-3-硝基苯甲醛(0.20g,1.2mmol)的甲苯溶液(2.0ml),25℃搅拌12小时。在常规处理后，产物用硅胶柱色谱(用氯仿洗脱)提纯得到4-[(4-乙基苯基)硫基]-3-硝基苯甲醛(0.25g,75％)。
将4-[(4-乙基苯基)硫基]-3-硝基苯甲醛(0.25g,0.86mmol)溶解在乙醇(9.9mL)中，加入2,4-噻唑烷二酮(0.40mg,3.4mmol)和哌啶(0.034mL,0.34mmol),80℃搅拌7小时。过滤收集析出的晶体得到化合物164(0.061g,19％)。
4-[(4-乙基苯基)硫基]-3-硝基苯甲醛1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)1.31(t,J=7.7Hz,3H),2.76(q,J=7.5Hz,2H),7.01(d,J=8.4Hz,1H),7.37(d,J=8.2Hz,2H),7.50(d,J=8.2Hz,2H),7.81(dd,J=8.4Hz,1.8Hz,1H),8.69(d,J=1.6Hz,1H),9.97(s,1H)FABMS m/z 287(M)+C15H13NO3S=287
化合物1641HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.24(t,J=7.5Hz,3H),2.70(q,J=7.3Hz,2H),6.92(d,J=8.6Hz,1H),7.08(br s,1H),7.43(d,J=8.1Hz,2H),7.56(d,J=8.0Hz,2H),7.58(s,1H),7.72(dd,J=8.6,2.0Hz,1H),8.44(d,J=1.8Hz,1H)FABMS m/z 385(M-H)-C18H14N2O4S2=386化合物185制备化合物165和166采用与实施例156相同的方法，由实施例184制备的化合物164(0.052g,0.14mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(2.6mL)和m-氯过苯甲酸(0.44g,1.3mmol)制备化合物165(0.014g,26％)和化合物166(0.016g,26％)。
化合物1651HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.13(t,J=7.7Hz,3H),2.61(q,J=7.5Hz,2H),7.34(d,J=8.3Hz,2H),7.51-7.56(m,2H),7.95(2,1H),8.30(dd,J=8.4,1.6Hz,1H),8.48-8.52(m,2H),12.87(m,1H)FABMS m/z 401(M-H)-C18H14N2O5S2=402化合物1661HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.19(t,J=7.7Hz,3H),2.71(q,J=8.4Hz,2H),7.51-7.60(m,2H),7.80(s,1H),7.86-7.95(m,2H),8.03(dd,J=8.8,1.5Hz,1H),8.21(d,J=1.1Hz,1H),8.45(d,J=8.2Hz,1H),12.90(m,1H)FABMS m/z 417(M-H)-C18H14N2O6S2=418
实施例186制备化合物167采用与实施例184相同的方法，由3,4-二氯苯硫醇(0.13g,1.0mmol)、2.5mol/L氢氧化钠水溶液(1.8mL,4.4mmol)、四丁基溴化铵(0.017g,0.52mmol)和4-氟-3-硝基苯甲醛(0.18g,1.0mmol)的甲苯(1.8mL)溶液制备4-[(3,4-二氯苯基)硫基]-3-硝基苯甲醛(0.29g,84％)。
化合物167(0.077g,15％)由4-[(3,4-二氯苯基)硫基]-3-硝基苯甲醛(0.40g,1.2mmol)、乙醇(16mL)、2,4-噻唑烷二酮(0.57mg,4.9mmol)和哌啶(0.048mL,0.49mmol)制备。
4-[(3,4-二氯苯基)硫基]-3-硝基苯甲醛1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.03(d,J=8.4Hz,1H),7.44(dd,J=8.3,2.0Hz,1H),7.63(d,J=8.3Hz,1H),7.72(d,J=2.0Hz,1H),7.88(dd,J=8.4,1.8Hz,1H),8.73(d,J=1.8Hz,1H),10.00(s,1H)FABMS m/z 328(M+H)+C13H735Cl2NO3S=327化合物1671HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.11(d,J=8.6Hz,1H),7.65(dd,J=8.3,2.2Hz,2H),7.77(dd,J=2.0,8.6Hz,1H),7.85(d,J=8.2Hz,1H),7.87(s,1H),8.02(d,J=2.0Hz,1H),8.52(d,J=2.0Hz,1H),12.74(br s,1H)FABMS m/z 425(M-H)-C16H835Cl2N2O4S2=426
化合物187制备化合物168采用与实施例156相同的方法,由实施例186制备的化合物167(0.031g,0.073mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(1.6mL)和m-氯过苯甲酸(0.035g,0.10mmoL)制备化合物168(0.017g,54％)。
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.69(m,1H),7.78(d,J=8.5Hz,1H),8.00(s,2H),8.28(d,J=8.1Hz,1H),8.48(d,J=8.9Hz,1H),8.53(s,1H),12.84(br s,1H)FABMS m/z 441(M-H)-C16H835Cl2N2O5S2=442实施例188制备化合物169和化合物170采用与实施例156相同的方法，由实施例181制备的化合物161(0.10g,0.27mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(5.2mL)和m-氯过苯甲酸(0.46g,4.0mmoL)制备化合物169(0.080g,75％)和化合物170(2.5mg,2.3％)。
化合物169:FABMS m/z 401(M-H)-C18H14N2O5S2=402化合物170:FABMS m/z 417(M-H)-C18H14N2O6S2=418实施例189制备N-(4-氯苯基)-4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯磺酰胺 步骤A通用过程1通用过程1后用苯甲醛得到5-次苄基-噻唑烷-2,4-二酮。
NMR(DMSO-d6):7.75(s,1H),7.6-7.4(m,5H)MS(ESI)205，实测204(M-H)步骤B制备4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯磺酰氯向用冰浴冷却的装有氯磺酸(10当量)的烧瓶中加入5-次苄基-噻唑烷-2,4-二酮。溶液在0℃下搅拌1小时，温热到室温并搅拌过夜。之后，将反应液小心地倒在冰上，将得到的沉淀过滤并空气干燥得到纯产物。
NMR(DMSO-d6):7.72(s,1H),7.66(d,2H),7.51(d,2H)MS(ESI)303，实测302(M-H)步骤C磺酰化反应将磺酰氯和4-氯-苯胺在吡啶中一起搅拌，加热至60℃持续12小时。溶液用EtOAC稀释，然后依次用10％NaHSO4和NaCl水溶液洗涤。分离有机层，用Na2SO4干燥，减压浓缩得到纯化合物。
MS(ESI)394，实测393(M-H)实施例190制备4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-N-p-甲苯基-苯磺酰胺
采用实施例189的方法，由p-甲苯胺制备4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-N-p-甲苯基-苯磺酰胺MS(ESI)374，实测373(M-H)实施例191制备4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-N-(4-甲氧基-苯基)-苯磺酰胺 采用实施例189的方法，由p-茴香胺制备4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-N-(4-甲氧基-苯基)-苯磺酰胺MS(ESI)390，实测389(M-H)实施例192制备4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺 采用实施例189的方法，由4-(三氟甲基)苯胺制备4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺。
MS(ESI)428，实测427(M-H)
实施例193制备4,5-二氯-N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基-甲基)-苯基]-邻氨甲酰基苯甲酸 步骤A在酸性环境下偶联2,4-噻唑烷二酮(TZD)为醛将3-硝基苯甲醛、TZD(1.25当量)、NaOAc(2当量)和乙酸酐(1当量)溶解在乙酸中，加热回流12小时。冷却反应物并收集析出的沉淀，洗涤并空气干燥得到纯产物。将滤液倾入到水中，过滤得到的沉淀得到额外的产物。
MS(ESI)250，实测249(M-H)步骤B硝基的还原将5-(3-硝基-次苄基)噻唑烷-2,4-二酮溶解在过量乙酸中。加入少量甲醇以使反应物充分溶解。将溶液缓慢加热，加入铁粉(5当量)。4小时后，过滤混合物以除去铁粉，用等量水稀释，并用EtOAc萃取。将有机层真空浓缩，得到棕色固体。残余物溶解在甲醇中，通过过滤除去杂质。浓缩滤液，所得残余物用己烷研制，经过滤收集得到产物。
MS(ESI)220，实测219(M-H)步骤C与乙酸酐缩合将5-(3-氨基-次苄基)-噻唑烷-2,4-二酮溶解在THF中，用4,5-二氯邻苯二甲酸酐和催化剂量的DMAP处理。将溶液搅拌8小时，过滤并真空浓缩。将残余物溶解于EtOAc中并用水洗涤。将有机层浓缩到油状，用己烷研制所得到的固体产物，过滤收集得到产物，为固体。
MS(ESI)436，实测435(M-H)实施例194制备3,6-二氯-N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-邻氨甲酰苯甲酸 应用实施例193的方法，由3,6-二氯邻苯二甲酸酐制备3,6-二氯-N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-邻氨甲酰苯甲酸。
MS(ESI)436，实测435(M-H)
实施例1954-叔丁基-N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-邻氨甲酰苯甲酸 应用实施例193的方法，由4-叔丁基-邻苯二甲酸酐制备4-叔丁基-N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-邻氨甲酰苯甲酸，其以64∶36区域异构体的混合物形式分离。
MS(ESI)425，实测423(M-2H)实施例196制备N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5亚基甲基)-苯基]-3-羟基-邻氨甲酰苯甲酸 应用实施例193的方法，由3-羟基邻苯二甲酸酐制备N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-3-羟基-邻氨甲酰苯甲酸，得到的是80∶20的区域异构体的混合物。
MS(ESI)384，实测383(M-H)
实施例197制备3-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基氨甲酰基]-吡嗪-2-羧酸 应用实施例193的方法，由2,3-吡嗪二甲酸酐制备3-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基氨甲酰基]-吡嗪-2-羧酸。
MS(ESI)370，实测369(M-H)实施例198制备3-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基氨甲酰基]-异烟酸 应用实施例193的方法，由吡啶-3,4-二甲酸酐得到3-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基氨甲酰基]-异烟酸，其以70∶30异构体的混合物形式存在。
MS(ESI)369，实测368(M-H)
实施例199制备3-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基氨甲酰基]-吡啶-2-羧酸 应用实施例193的方法，由2,3-吡啶二甲酸酐制备3-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基氨甲酰基]-比啶-2-羧酸，并分离得到其异构体的混合物。
MS(ESI)369，实测368(M-H)实施例200制备4-(4-氯-苯磺酰基氨基)-N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-苯甲酰胺 步骤A与酰氯缩合将制得的5-(3-氨基-次苄基)-噻唑烷-2,4-二酮溶解在吡啶中，并用4-硝基苯甲酰氯和催化剂量的DMAP处理。反应溶液搅拌20分钟，然后通过过滤收集沉淀。固体反复用水、饱和NaHCO3水溶液和10％盐酸水溶液洗涤。将得到的固体空气干燥。
MS(ESI)369，实测368(M-H)步骤B硝基的还原将4-硝基-N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-苯甲酰胺悬浮在异丙醇中。将少量氯化铵溶解在水中，并加入到上述溶液中。将混合物加热到70℃持续数小时。加入铁粉，持续搅拌4小时。通过过滤除去固体，滤液真空浓缩。将残余物溶解在EtOAc中，并用水洗涤。将有机层浓缩到油状，通过加入己烷使产物沉淀。
MS(ESI)339，实测338(M-H)步骤C与磺酰氯缩合将4-氨基-N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-苯甲酰胺溶解在吡啶中，并在60℃下于吡啶中用4-氯-苯磺酰氯处理12小时。冷却溶液，用EtOAc稀释，然后用10％硫酸氢钠水溶液及饱和氯化钠水溶液洗涤。分离有机相，用硫酸钠干燥，然后减压浓缩成油状物。用己烷研磨，得到纯产物。
MS(ESI)513，实测512(M-H)
实施例201制备N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-4-(甲苯-4-磺酰氨基)-苯甲酰胺 应用实施例200的方法，由p-甲苯磺酰氯制备N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-4-(甲苯-4-磺酰氨基)-苯甲酰胺。
MS(ESI)493，实测492(M-H)实施例202制备N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-4-(4-甲氧基-苯磺酰氨基)-苯甲酰胺 应用实施例200的方法，由4-甲氧基苯磺酰氯制备N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-4-(4-甲氧基-苯磺酰氨基)-苯甲酰胺。
MS(ESI)509，实测508(M-H)
实施例203制备N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-4-(4-三氟甲氧基-苯磺酰氨基)-苯甲酰胺 应用实施例200的方法，由4-(三氟甲氧基)苯磺酰氯制备N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-4-(4-三氟甲氧基-苯磺酰氨基)-苯甲酰胺。
MS(ESI)563，实测562(M-H)实施例204制备4-苯磺酰氨基-N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-苯甲酰胺 应用实施例200的方法，由苯磺酰氯制备4-苯磺酰氨基-N-[3-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯基]-苯甲酰胺。
MS(ESI)479，实测478(M-H)。
实施例205制备N-(4-氯-苯基)-4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-苯磺酰胺 步骤A制备4-苯氧基-苯甲醛将碳酸钾(1当量)、4-氟苯甲醛和苯酚(1.2当量)的悬浮液加热到150℃并搅拌2天。反应液冷却到室温并倾入到饱和碳酸氢钠溶液和冰中。溶液用乙醚萃取。合并的有机层用水洗涤，用Na2SO4干燥。真空浓缩得到橙色油状的纯产物。步骤B与TZD缩合得到5-(4-苯氧基-次苄基)-噻唑烷-2,4-二酮将4-苯氧基-苯甲醛、TDZ(1.5当量)和哌啶(2当量)的乙醇溶液加热到70℃，搅拌过夜。将反应液冷却到室温，倾入到10％盐酸溶液中。将得到的沉淀过滤，用水洗涤并空气干燥。
MS(ESI)297，实测296(M-H)。步骤C氯磺酰化得到4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-苯磺酰氯将5-(4-苯氧基-次苄基)-噻唑烷-2,4-二酮溶解在氯磺酸中，在0℃下搅拌30分钟。然后将溶液倾入到入冰中，过滤收集沉淀，空气干燥得到纯产物。
MS(ESI)395，实测394(M-H)。步骤D与4-氯苯胺缩合得到磺酰胺将4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-苯磺酰氯和4-氯苯胺(1.1当量)的吡啶溶液在温热下搅拌。然后真空除去吡啶，残余物溶解在EtOAc中。有机层用10％盐酸水溶液、碳酸氢钠水溶液和氯化钠水溶液洗涤，然后真空浓缩。得到的反应残余物用己烷研制得到纯产物。
MS(ESI)486，实测485(M-H)。
实施例206制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-p-甲苯基-苯磺酰胺 应用实施例205的方法，由p-甲苯胺制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-p-甲苯基-苯磺酰胺。
MS(ESI)466，实测465(M-H)。
实施例207制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-(4-三氟甲氧基-苯基)-苯磺酰胺
应用实施例205的方法，由4-(三氟甲氧基)苯胺制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-(4-三氟甲氧基-苯基)-苯磺酰胺。
MS(ESI)536，实测535(M-H)。
实施例208制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-(4-甲氧基-苯基)-苯磺酰胺 应用实施例205的方法，由p-茴香胺制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-(4-甲氧基-苯基)-苯磺酰胺。
MS(ESI)482，实测481(M-H)。
实施例209制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-苯基-苯磺酰胺 应用实施例205的方法，由苯胺制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-苯基-苯磺酰胺。
MS(ESI)452，实测451(M-H)。
实施例210制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-苯磺酰胺 应用实施例205的方法，由3,4,5-三甲氧基苯胺制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-苯磺酰胺。
MS(ESI)542，实测541(M-H)。
实施例211制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-(4-吗啉-4-基苯基)-苯磺酰胺 应用实施例205的方法，由4-吗啉代苯胺制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-(4-吗啉-4-基苯基)-苯磺酰胺。
MS(ESI)537，实测536(M-H)。
实施例212制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-(4-异丙基-苯基)-苯磺酰胺 应用实施例205的方法，由4-异丙基苯胺制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-(4-异丙基-苯基)-苯磺酰胺。
MS(ESI)494，实测493(M-H)。
实施例213制备N-(2-氯-苯基)-4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-苯磺酰胺 应用实施例205的方法，由2-氯苯胺制备N-(2-氯-苯基)-4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-苯磺酰胺。
MS(ESI)486，实测485(M-H)。
实施例214制备N-(3-氯-苯基)-4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-苯磺酰胺 应用实施例205的方法，由3-氯苯胺制备N-(3-氯-苯基)-4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-苯磺酰胺。
MS(ESI)486，实测485(M-H)。
实施例215制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-(4-羟基-苯基)-苯磺酰胺 应用实施例205的方法，由4-氨基苯酚制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-(4-羟基-苯基)-苯磺酰胺。
MS(ESI)486，实测467(M-H)。
实施例216制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-(2-羟基-苯基)-苯磺酰胺
应用实施例205的方法，由2-氨基苯酚制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-(2-羟基-苯基)-苯磺酰胺。
MS(ESI)468，实测467(M-H)。
实施例217制备N-(2-叔丁基-苯基)-4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]苯磺酰胺 应用实施例205的方法，由2-叔丁基苯胺制备N-(2-叔丁基-苯基)-4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]苯磺酰胺。
MS(ESI)508，实测507(M-H)。
实施例218制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-异丙基-N-苯基-苯磺酰胺 应用实施例205的方法，由N-异丙基苯胺制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-异丙基-N-苯基-苯磺酰胺。
MS(ESI)494，实测493(M-H)。
实施例219制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基]-N-(3-羟基-苯基)-苯磺酰胺 应用实施例205的方法，由3-氨基苯酚制备4-[4-(2,4-二氧-噻唑烷-5亚基甲基)-苯氧基]-N-(3-羟基-苯基)-苯磺酰胺。
MS(ESI)468，实测467(M-H)。
实施例220制备5-[2-(3,4-二氯-苄基磺基)-嘧啶-4-亚基甲基]-2-硫代-噻唑烷-4-酮 步骤A用苄基卤对嘧啶硫醇进行烷基化向4-二甲氧基甲基-嘧啶-2-硫醇的钠盐在DMF和碳酸钾(2当量)中的悬浮液中加入α,3,4-三氯甲苯(1当量)，将悬浮液搅拌两天。反应混合物用水稀释，用EtOAc萃取。有机层用水、氯化钠水溶液洗涤，用硫酸镁干燥，真空浓缩。步骡B缩醛的去保护将2-(3,4-二氯-苄基磺基)-4-二甲氧基甲基-嘧啶的浓盐酸悬浮液回流5分钟。将反应液冷却并倾入到水中。加入饱和碳酸氢钠水溶液，将中和后的溶液用EtOAc萃取。有机层用Na2SO4干燥，真空浓缩得到产物。步骤C与绕丹宁缩合将绕丹宁(1当量)、乙二胺二乙酸(1当量)和2-(3,4-二氯-苄基磺基)-嘧啶-4-甲醛在甲醇中搅拌回流1小时。所得沉淀通过过滤收集,用甲醇、水、硫酸氢钠水溶液和碳酸氢钠水溶液洗涤。固体物质空气干燥。步骤D双键还原在2,6-二甲基-1,4-二氢-3,5-吡啶羧酸盐(1.1当量)和活性硅胶的存在下，将5-[2-(3,4-二氯-苄基磺基)-密啶-4-基甲基]-2-硫代-噻唑烷-4-酮在甲苯中的悬浮液加热到80℃。将悬浮液过滤并用EtOAc洗涤。滤液真空蒸发，所得残余物重新溶解在EtOAc中，用1N HCL水溶液洗涤。有机层用Na2SO4干燥，真空浓缩得到粗产物。通过快速色谱得到纯产物。
MS(ESI)415，实测414(M-H)。
实施例221制备5-[3-氨基-2-(2,4-二氯-苯甲酰基)-噻吩并[2,3-b]吡啶-6-基亚甲基]-噻唑烷-2,4-二酮 步骤A6-二甲氧基甲基-2-巯基-烟酰腈的烷基化和环化将6-二甲氧甲基-2-巯基-烟酰腈和碳酸钾(1.52当量)的混合物用2,4-二溴乙酰苯(3.1当量)处理，搅拌过夜。烷基化和环化的产物作为固体物质被分离出来。步骤B缩醛的去保护(3-氨基-6-二甲氧基甲基-噻吩并[2,3-b]吡啶-2-基)-(2,4-二氯-苯基)-甲酮溶液在TFA和水的混合物中的溶液在室温下搅拌，直到TLC显示反应结束。反应液用冷的NaHCO3水溶液中和，并用EtOAc萃取。有机层用氯化钠水溶液洗涤，真空下部分浓缩，并0℃保存过夜。收集析出的沉淀得到产物，为纯的黄色粉末。步骤C与TZD缩合将醛与TZD和哌啶在乙醇中加热到90℃，持续3天。将反应液冷却，然后倾入到10％HCL水溶液中。通过过滤分离得到纯产物，为黄色固体。MS(ESI)449，实测448(M-H)。
实施例222制备2-氯-3-(2,4-二氧噻唑烷-5-亚基-甲基)喹啉 步骤A在碱性条件下将2,4-噻唑烷二酮(TZD)偶联为醛将2-氯-3-喹啉甲醛、TZD(1.5当量)和哌啶(1.5)溶解在乙醇中，并加热回流5小时。反应混合物冷却到室温，倾入到乙醇中，加入1N HCL，收集黄色沉淀，用乙醚洗涤数次，室温下空气干燥24小时得到纯产物(得率为45％)。
1HNMR(DMSO-d6)δ:12.8(br s,1H,NH),8.5(s,1H),8.2(d,1H),8.0-7.8(m,3H),7.7(t,1H)MS(ESI)290，实测289(M-H)。HPLC:92％纯度实施例223制备2-苯硫基-3-(2,4-二氧噻唑烷-5-亚基-甲基)喹啉 步骤A将2-氯-3-(2,4-二氧噻唑烷-5-亚基-甲基)喹啉和苯硫酚(1.2当量)与乙氧基乙醇混合，在氮气保护下加热回流2小时。将反应混合物冷却到室温，加入乙醚，过滤除去浅黄色沉淀，用乙醚清洗数次，室温下空气干燥24小时得到纯产物(得率为36％)。
1HNMR(DMSO-d6)δ(br s,1H,NH),8.3(s,1H),8.1(d,1H),7.7(t,1H),7.6-7.5(m,4H),7.5-7.4(m,3H)MS(ESI)364，实测363(M-H)。HPLC:88％纯度实施例224制备2-(4-氯苯硫基)-3-(2,4-二氧噻唑烷-5-亚基-甲基)喹啉 标题化合物通过实施例223的方法制备。得率为69％。
1HNMR(DMSO-d6)δ12.8(br s,1H,NH),8.3(s,1H),8.00(d,2H),7.9(s,1H),7.7(t,1H),7.6-7.4(m,6H)MS(ESI)398，实测397(M-H)；399(M+H)。HPLC:92％纯度实施例225制备2-(3,4-二氯苯硫基)-3-(2,4-二氧噻唑烷-5-亚基-甲基)喹啉 标题化合物采用实施例223的方法并用乙醇为溶剂制备。得率为72％。
1HNMR(DMSO-d6)δ12.8(br s,1H,NH),8.34(s,1H),8.05(d,1H,J=8),7.87(d,1H,J=1.6),7.83(s,1H),7.71-7.53(m,6H)MS(ESI)433，实测431；432；433(M-H)433；435；436(M+H),HPLC纯度为96％
实施例226制备2-(4-氟苯硫基)-3-(2,4-二氧噻唑烷-5-亚基-甲基)喹啉 上述化合物通过实施例223的方法制备，得率为23％。
1HNMR(DMSO-d6)δ12.6(br s 1H,NH),8.3(s,1H),8.00(d,1H),7.9(s,1H),7.7-7.4(m,5H),7.3(t,2H)MS(ESI)382，实测381(M-H)HPLC:100％纯度实施例227制备2-(4-甲基苯硫基)-3-(2,4-二氧噻唑烷-5-亚基-甲基)喹啉标题化合物采用实施例223的方法制备。得率为24％。1HNMR(DMSO-d6)δ12.8(br s,1H,NH),8.3(s,1H),8.00(d,1H),7.9(s,1H),7.7(t,1H),7.6-7.5(m,2H),7.4(d,2H),7.3(d,2H),2.1(s,3H)MS(ESI)378，实测377(M-H)HPLC:86％纯度实施例228制备2-(4-甲氧基苯硫基)-3-(2,4-二氧噻唑烷-5-亚基-甲基)喹啉 标题化合物采用实施例223的方法制备。得率为35％。
1HNMR(DMSO-d6)δ12.8(br s,1H,NH),8.2(s,1H),8.0(d,1H),7.9(s,1H),7.8-7.4(m,5H),7.0(d,2H),3.8(s,3H)MS(ESI)394，实测393(M-H)HPLC:98％纯度实施例229制备2-[4-(三氟甲基)苯硫基]-3-(2,4-二氧噻唑烷-5-亚基-甲基)喹啉 标题化合物采用实施例223的方法制备。得率为55％。
1HNMR(DMSO-d6)δ12.8(br s,1H,NH),8.3(s,1H),8.1(d,1H),7.9(s,1H),7.8-7.6(m,5H),7.5(t,2H)MS(ESI)432，实测431(M-H).HPLC:100％纯度实施例230制备2-(4-氯苯基亚硫酰基)-3-(2,4-二氧噻唑烷-5-亚基-甲基)喹啉 步骤A将实施例224制备的化合物溶解在CH2Cl2/CH3OH(5∶1)中，向该溶液中加入3-氯过氧苯甲酸(2当量的77％最高纯度物质)。在TLC分析显示初始反应物消失前，在室温下搅拌混合物4小时。反应混合物再额外搅拌2小时。在反应结束时，白色结晶产物析出。过滤收集产物，用乙醚洗涤数次，空气干燥48小时得到最终产物，得率为30％。
1HNMR(DMSO-d6)δ12.8(br s,1H,NH),8.5(s,1H),8.4(s,1H),8.2(d,1H),8.1(d,1H),7.9(t,1H),7.7(t,1H),7.6-7.4(m.4H)MS(ESI)414，实测413(M-H)；415(M+H).HPLC:100％纯度参考实施例1制备化合物122将实施例5制备的化合物5(23mg,0.056mmol)溶解在二甲基亚砜(2.0mL)和0.04mol/L缓冲溶液(pH7.2)(4.1mL)中，加入2-巯基乙醇(0.012mL,0.17mmo1),25℃搅拌40分钟。在常规后处理之后，残余物通过薄层色谱提纯(用氯仿/甲醇=10/1展开)纯制，得到初步纯化的产物。产物进一步用制备HPLC[ODS柱；用乙腈/磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲溶液洗脱(0.04mol/L；pH7.2)=30/70]，得到化合物122(5.7mg,31％)。
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)3.26-3.39(m,2H),3.65-3.73(m,2H),5.12(m,1H),7.73(d,J=8.6Hz,1H),7.82(s,1H),8.16-8.24(m,2H),12.80(m,1H)FABMS m/z 325(M-H)-C12H10N2O5S2=326参考实施例2制备化合物123将2-氟-5-硝基苯甲醛(48mg,0.28mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(2.4mL)中，加入二正丙基胺(0.15mL,1.1mmol)和碳酸钾(0.16g,1.1mmol),25℃搅拌1小时。在常规后处理后，残余物用硅胶色谱提纯(用氯仿洗脱)，得到2-(N,N-二-正丙基氨基)-5-硝基苯甲醛(49mg,69％)。
1HNMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)0.89(t,J=7.6Hz,6H),1.66(tq,J=7.6,7.6Hz,4H),3.38(m,4H),7.03(d,J=9.1Hz,1H),8.21(dd,J=9.1,2.7Hz,1H),8.60(d,J=3.0Hz,1H),10.01(s,1H)FABMS m/z 251(M+H)+C13H18O3N2=250将2-(N,N-二-正丙基氨基)-5-硝基苯甲醛(46mg,0.18mmol)溶解在乙醇(1.8mL)中，加入2,4-噻唑烷二酮(86mg,0.74mmol)和哌啶(0.0073mL,0.073mmol),80℃搅拌6.5小时。在常规后处理后，残余物通过薄层柱色谱(用氯仿/乙腈=10/1展开)提纯，得到化合物123(53mg,82％)。
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.81(t,J=7.3Hz,6H),1.48-1.61(m,4H),3.21(t,J=7.2Hz,4H),7.24(d,J=9.4Hz,1H),7.62(s,1H),8.13(m,1H),8.20(m,1H),12,63(br s,1H)FABMS m/z 348(M-H)-C16H19O4N3S=349参考实施例3制备化合物124将2-氟-5-硝基苯甲醛(0.11g,0.63mmol)溶解在乙醇(4.2mL)中，加入2,4-噻唑烷二酮(0.29mg,2.5mmol)和哌啶(0.025mL,0.25mmol),80℃搅拌6.5小时。在常规后处理后，残余物通过薄层柱色谱(用氯仿/7腈=10/1展开)提纯，得到化合物124(24mg,12％)。
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.57-1.72(m,6H),3.08-3.14(m,4H),7.26(d,J=8.6Hz,1H),7.56(s,1H),8.20(m,1H),8.21(s,1H),12.66(m,1H)FABMS m/z 332(M-H)-C15H15N3O4S=333参考实施例4制备化合物125将市场上可获得的2-吗啉代-5-硝基苯甲醛(0.11g,0.44mmol)(MAYBRIDGE，目录号RHO1290)溶解在乙醇(4.2mL)中，加入2,4-噻唑烷二酮(0.21mg,1.8mmol)和哌啶(0.018mL,0.18mmol),80℃搅拌6小时。将反应溶液冷却到25℃，过滤收集析出的晶体，得到化合物125(0.12g,82％)。
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)3.10-3.16(m,4H),3.73-3.80(m,4H),7.30(m,1H),7.67(br s,1H),8.221-8.28(m,2H),12.65(m,1H)FABMS m/z 334(M-H)-C14H13N3O5S=335参考实施例5制备化合物126采用与参考实施例4相同的方法，由4-羟基-2-甲氧基苯甲醛(71mg,0.47mmol)、乙醇(2.8mL)、2,4-噻唑烷二酮(0.22mg,1.9mmol)和哌啶(0.019mL,0.19mmol)制备化合物126(85mg,73％)。
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)3.82(s,3H),6.51(s,1H),6.53(dd,J=11.7,2.2Hz,1H),7.25(d,J=8.5Hz,1H),7.93(s,1H),10.39(s,1H),12.38(br s,1H)FABMS m/z 250(M-H)-C11H9NO4S=251参考实施例6制备化合物127采用与参考实施例3相同的方法，由2-三氟甲氧基苯甲醛(73mg,0.38mmol)、乙醇(2.9mL)、2,4-噻唑烷二酮(0.18g,1.5mmol)和哌啶(0.015mL,0.15mmol)制备化合物127(53mg,47％)。
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.53-7.68(m,4H),7.80(s,1H)FABMS m/z 288(M-H)-C11H619NO3S=289
参考实施例7制备化合物128采用与参考实施例4相同的方法，由10-[(4-氯苯基)硫基]蒽-9-甲醛(0.13mg,0.38mmol)、乙醇(5.4mL)、2,4-噻唑烷二酮(0.18g,1.5mmol)和哌啶(0.015mL,0.15mmol)制备化合物128(34mg,20％)。
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)6.92(d,J=8.6Hz,2H),7.25(d,J=8.4Hz,2H),7.64-7.77(m,4H),8.18(d,J=7.9Hz,2H),8.65(2,1H),8.78(d,J=8.1Hz,2H),12.68(m,1H)FABMS m/z 446(M-H)-C24H1435ClNO2S2=447参考实施例8制备化合物171向2-萘硫醇中加入2.5mol/L氢氧化钠水溶液(2.1mL,5.2mmol)和四丁基溴化铵(0.020g,0.0061mmol)，随后在25℃搅拌15分钟。向反应溶液中加入2-氟-5-硝基苯甲醛(0.21g,1.2mmol)的甲苯(2.1mL)溶液，随后在110℃搅拌3.5小时。在常规后处理后，得到2-[(2-甲酰基-4-硝基苯基)硫基]萘。将2-[(2-甲酰基-4-硝基苯基)硫基]萘(0.3g,0.98mmol)溶解在甲苯(15mL)中，加入2,4-噻唑烷二酮(0.46g,3.9mmol)、哌啶(0.039mL,0.39mmol)、乙酸(0.022mL,0.039mmol)和分子筛4A(1.5g),110℃搅拌2.5小时。在常规后处理后，产物用乙醇研制得到化合物171(0.13g，得率为33％)。
2-[(2-甲酰基-4-硝基苯基)硫基]萘1HNMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)6.99(d,J=8.8Hz,1H),7.52(dd,J=8.4,1.7Hz,1H),7.56-7.68(m,2H),7.85-7.98(m,3H),8.05(dd,J=2.4,8.8Hz,1H),8.15(s,1H),8.68(d,J=2.4Hz,1H),10.33(s,1H)FABMS m/z 310(M+H)+C17H11NO3S=309化合物1711HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.19(d,J=8.8Hz,1H),7.57(br d,J=8.5Hz,1H),7.59-7.68(m,2H),7.95(s,1H),7.97-8.04(m,2H),8.08(d,J=8.8Hz,1H),8.13(dd,J=8.4,1.8Hz,1H),8.28(br s,2H),12.82(m,1H)FABMS m/z 407(M-H)+C20H12N2O4S2=464实施例231制备具有亲和力的纯提取液用于筛选端粒酶抑制剂的提取液通常从过度表达端粒酶之蛋白催化亚单位(hTERT)的293细胞来制备。这些细胞端粒酶活性比母体293个细胞端粒酶活性大2-5倍。200ml堆积细胞(从约100升培养物中获得的)再悬浮于等体积的等渗缓冲液(10mM Hepes pH7.9,1mM MgCl2,lmM DTT,20mM KCL,1mM PMSF)中，用dounce均质器溶解。丙三醇浓度调节到10％，缓慢加入NaCl溶液，使最终浓度变为0.3M。溶解的细胞搅拌30分钟，在100000xg下离心1小时。向S100上清液中加入固体硫酸铵达到42％饱和浓度。对材料进行离心处理，沉淀物再悬浮于原溶液的1/5容量中，相对于含有50mM NaCl的缓冲溶液“A”中渗析。渗析后，提取液在25000xg下离心30分钟。在亲合色谱法前，加入三硝基甲苯X-100(0.5％)、KCL(0.3M)和tRNA(50μg/ml)。向提取液中加入寡亲和物(affinity oligo)(5′生物素TEG-生物素TEG-生物素TEG-GTAGAC CTG TTA CCA guu agg guu ag3′；低级亲和物的情况下代表2′O-甲基核糖核苷酸，高级亲和物的情况下代表脱氧核糖核苷酸)(1nmol每10毫升提取液)。在30℃下培养10分钟后，加入Nneutravidin小珠(Pierce；250μl的50％悬浮液)，混合物在4℃搅拌过夜。珠粒沉淀，用含有0.3M KCL的缓冲液“B”洗涤三次，用含有0.6M KCL的缓冲液“B”洗涤两次，用含有0.3M KCL的缓冲液“B”再洗涤两次。端粒酶在含有0.3M KCl、0.15％三硝基甲苯X-100和2.5摩尔过量的替代寡亲和物(5′-CTAACC CTA ACT GGT AAC AGG TCT AC-3′，为0.5ml每125μl堆积的Neutravidin小珠)的缓冲液“B”中于室温下洗脱30分钟。进行第二次洗脱并将洗脱液与第一次洗脱液合并。提纯的提取液通常具每分钟每μl提取液有10fmol已结合的核苷酸的特异活性，或每分钟每毫克总蛋白200核苷酸。
实施例232端粒酶特异活性的测定用以下缓冲溶液建立3个独立的100μl端粒酶分析50mM Tris-乙酸，pH8.2、1mM DTT、1mM EGTA、1mM MgCl2、100mM乙酸钾、500μM dATP、500μM TTP、10μM32p-dGTP(25Ci/mmol)和a00 nMd(TTAGGG)3。分别向各反应液加入2.5、5或10μl亲和提纯的端粒酶(参看实施例231)，反应物在37℃培养。在45和90分钟，从每个反应移走40μl等分，加入160μl停止缓冲溶液(100mM NaCl,10mM焦磷酸钠，0.2％SDS,2mM EDTA,100μg/ml tRNA)。加入10μl三氯乙酸(TCA)(100％)，样品在冰上培养30分钟。样品在微离心(12000xg力)下离心15分钟。沉淀用1ml95％乙醇洗涤，再在微离心(12000xg力)下离心5分钟。沉淀在50μl dH2O中再悬浮，转移到含有2.5ml5％TCA的冰冷溶液和10mM焦磷酸钠的12×75玻璃试管中。样品在冰上培养30分钟。样品在真空过滤管中，通过2.5cm湿(dH2O)GFC膜(S&S)过滤。滤液在真空下用5ml冰冷1％TCA洗涤3次，用5ml95％乙醇洗涤1次。滤液被干燥，应用闪烁液体在闪烁计数器记数。结合的核苷酸的fmol通过放射性示踪物的具体活性测定。提取液的活性以结合的dNTP为基础计算，用fmol dNTP/min/μl提取液表示。
实施例233端粒酶活性测试Bio-Tel闪烁涂层分析通过测量TTAGGG端粒酶重复片段加入到生物素化端粒酶底物引物--端粒酶催化的反应，提供了一种检测和/或测量端粒酶活性的方法。生物素化的产物在链霉抗生物素蛋白包被的微量滴定板中获得。如下面所描述的，寡核糖核酸探针补足标记有[33p]3.5端粒酶重复被用来检测端粒酶产物。未结合的探针通过洗涤除去，用于热处理端粒酶产物的探针的数量通过闪烁记数测定。方法1．化合物以浓缩原料液储存，并溶解于100％二甲基亚砜(DMSO)中。
2．为了测试，化合物在50％DMSO中稀释为15X工作原料液，将2μl分配到两个96-孔微滴定盘中(双份分析)。
3．端粒酶提取液稀释到特异活性为0.04-0.09fmol未结合的dNTP/每分钟/每μl端粒酶缓冲液，并将18μl该提取液的稀释液加入每个样品孔中，在室温下与化合物预培养30分钟。
4．端粒酶反应通过在含有端粒酶提取物和化合物的孔中加入10μlMaster Mix引发。这些盘被密封，在37℃培养90分钟。
5．反应通过加入10μl HCS停止。
6．25μl反应混合物移入96-孔链霉抗生物素蛋白包被的闪烁盘(NEN)，室温轻微搅拌下培养2小时。
7．各孔用180μl没有培养的2X SSC洗涤3次。
8．用于热处理生物素化的端粒酶产物的探针的数量通过闪烁记数测定。缓冲液端粒酶稀释缓冲液
50mM Tris-乙酸，pH8.21mM DTT1mM EGTA1mM MgCl2830nM BSAMaster Mix(MM)50mM Tris-乙酸，pH8.21mM DTT1mM EGTA1mM MgCl2150mM乙酸钾10μM dATP20μM dGTP120μM dTTP100nM生物素化引物(5′-生物素-AATCCGTCGAGCAGAGTT-3′)5.4nM标记的探针[5′-CCCTAACCCTAACCCTAACCC-(33P)A1-50-3′]；特异活性为约109cpm/μg或更高杂化俘获溶液(HCS)12X SSC(1X=150mM NaCl/30mM柠檬酸三钠)40mM EDTA40mM Tris-HCl,pH7.0应用上述检测方法，检测结果表明实施例1-29的化合物的端粒酶IC50低于100μM。
实施例234抗肿瘤活性Exvivo研究a．肿瘤细胞中端粒长度缩短应用标准的方法和物质，以正常细胞作为对照组(如正常人BJ细胞)，制备肿瘤细胞系的集落，例如卵巢癌细胞系OVCAR-5和SK-OV-3。在一个测试中，通过在每个15cm盘中接种约106个细胞制备所述的集落。通过培养，可以使这些盘中的细胞集落发展到80％融合，此时将每个集落分为2组。在分裂、涂层之后，其中一组用预定浓度亚急性剂量的本发明化合物处理(例如在约5μM和20μM之间)4-8小时；另一组为对照组(例如DMSO)。
每组继续分裂，然后所有组再次均分(接近融合)。接种同样数量的细胞以使其继续生长。每隔四天，以初始加入的浓度向样品中加入化合物或对照物。保留的细胞用来进行端粒酶长度分析。当未测定的细胞培养到接近于融合，样品再次按照所描述的进行分裂。这一系列的细胞倍增和分裂持续约20-25倍增。因此，可以获得端粒酶长度与细胞倍增的函数关系。
端粒酶长度通过用限制酶消化细胞的DNA(TRF分析)测定，这些酶针对人端粒酶中除重复性T2AG3序列以外的序列。被消化的DNA用标准凝胶电泳技术按大小分开，以测定端粒酶重复片段的长度。在用端粒酶DNA探针探测后，端粒酶重复片段在凝胶中作为高分子量DNA的涂层(大约2Kb-15Kb)。
端粒长度的分析结果将显示作为渐进性细胞倍增的函数，本发明化合物对于对照细胞端粒酶的长度减短的速度没有影响。但是，用本发明化合物处理肿瘤细胞系，可测到端粒长度的减短。用对照物处理的肿瘤细胞维持着稳定的端粒长度。因此，作为肿瘤细胞分裂的函数，本发明的化合物对端粒酶酶长度正常缩短有恢复作用。
在另一个实验中，应用上述方法，用浓度在1μM至约20μM的本发明化合物和对照物处理HEK-293细胞。在给药本发明的测试化合物的随后几周内，细胞进入危机(即细胞功能的停止)。此外，应用标准方法，细胞TRF分析显示了本发明的测试化合物对于减短端粒酶的长度是有效的。除了上述HEK-293细胞，这个分析可用于任何端粒酶-阳性细胞系，例如HeLa细胞。
b．特异性本发明的化合物应用标准的方法筛选出抗端粒酶以及具有核酸结合或对于端粒酶有修复活性的其它酶。被筛选的酶包括端粒酶、DNA聚合酶Ⅰ、HeLa RNA聚合酶Ⅱ、T3 RNA聚合酶、MMLV反转录酶、拓扑异构酶Ⅰ、拓扑异构酶Ⅱ、末端转移酶和单链DNA结合蛋白(SSB)。本发明化合物对端粒酶的特异性通过比较该化合物对端粒酶的IC50值和对其它每种被筛选酶的IC50值进行测定。如果对端粒酶的IC50值比对其它每种被筛选酶的IC50值低，则该化合物对端粒酶有高度特异性。
另一种方法是，本发明化合物的端粒酶抑制活性可根据已知方法(美国专利5,760,062)进行测定。即，每种药剂的二甲基亚砜(DMSO)溶液与从HEK293细胞的核提取液中不完全提纯的端粒酶混合，并且用作为底物的寡脱氧核苷酸和三磷酸脱氧核苷酸处理。得到的反应产物(具有端粒序列的DNA)在细胞膜上被吸收，应用被标记的具有补足端粒序列的寡脱氧核苷酸探针进行杂化。抑制的比例以有药剂时在细胞膜上标记的信号与无药剂(对照)时标记的信号的比例来计算。同时，每种以对照为基础抑制50％酶活性的药剂浓度作为IC50值使用。表7是被选择化合物抑制活性的测定结果。
表7体外端粒酶抑制活性
括号中的数据为化合物浓度为10μM时体外端粒酶的残余活性。
c．细胞毒性用HeLa细胞进行细胞毒性的XTT分析。在分析中使用的细胞系用浓度在1μM至1,000μM的本发明化合物处理72小时。在这段时期，样品的光密度(OD)在540纳米(nm)下进行测定。在浓度小于5μM下没有显著细胞毒性影响。除了对照细胞系如正常人的BJ细胞，其他肿瘤细胞系例如子宫肿瘤细胞系OVCAR-5和SK-OV-3可用于测定细胞毒性。其它对于细胞毒性的分析方法例如MTT分析(参看Berridge等人，1996，生物化学4:14-19)和alarmBlueTM分析(美国专利5,501,959)可被很好的使用。
有些化合物可能在高于5μM(例如在10-20μM浓度或更高)时导致G2抑制。优选地，应在低于细胞毒性水平下观察化合物对端粒酶抑制的影响。然而，因为许多癌化学疗法的有效性源于细胞毒性的影响，在本发明的范围内，本发明化合物以任何以化学治疗有效的剂量给药。体外研究可应用标准技术和材料构建人肿瘤细胞的异种移植模型，其中将OVCAR-5细胞植入裸鼠。小鼠被分为两组。其中的一组用本发明的化合物进行腹膜内处理。另一组用含有DMSO或乙醇、emulphor(油)和磷酸缓冲溶液(PBS)处理。在用标准方法进行异种移植后，周期性地测定每组小鼠的平均肿瘤重。
用本发明化合物处理的组中，平均肿瘤重在最初处理一段时间后会增加，在此之后，肿瘤重稳定然后开始下降。通过研究，对照组中的肿瘤会增加。因此，本发明的化合物预计会显著减慢肿瘤增长的速度并最终导致肿瘤减小及肿瘤的消失。
在另一实验中，每种药剂与人的肾肿瘤细胞系ACHN接触3天，然后通过已知的方法(美国专利5,629,154)制备细胞提取液以测量酶的活性。也就是说，用包含0.5％CHAPS的缓冲溶液制备细胞提取液。使用提取液，TRAP(端粒重复放大方法)分析在体外进行(TRAPEZETMELISA端粒酶检测试剂盒，由Intergen制造)。计算经药剂处理后的细胞提取液酶的活性与未经处理的细胞提取液酶的活性的比例。结果示于表8中。
表8体内端粒酶抑制活性
因此，本发明提供了抑制端粒酶活性和治疗端粒酶活性在其中具有有害影响的疾病状态的新化合物、药物组合物和方法，尤其是癌症。本发明的化合物提供了一种对于恶性细胞有高度选择性且有效的治疗方法，这些细胞需要端粒酶活性来保持不死；但是，这种治疗不影响非恶性细胞。
尽管对本发明的优选实施方案进行了说明和描述，但应该理解的是，在不脱离本发明的精神和范围下，可对本发明进行各种改变。
权利要求
1.一种抑制端粒酶的组合物，其包含具有2,4-二氧噻唑烷或4-氧代-2-硫代-噻唑烷骨架并具有端粒酶抑制活性的化合物。
2.根据权利要求1的组合物，其中所述的化合物具有2,4-二氧噻唑烷骨架。
3.根据权利要求1的组合物，其中所述的化合物具有4-氧代-2-硫代-噻唑烷骨架。
4.一种抗肿瘤组合物，其包括具有2,4-二氧噻唑烷或4-氧代-2-硫代-噻唑烷骨架并具有抑制端粒酶活性的化合物。
5.根据权利要求4的组合物，其中所述的化合物具有2,4-二氧噻唑烷骨架。
6.根据权利要求4的组合物，其中所述的化合物具有4-氧代-2-硫代-噻唑烷骨架。
7.一种抑制端粒酶的组合物，包括式(Ⅰ)的化合物或其药物可接受的盐 其中X是O或S； 是单键或双键；A是芳基或杂芳基；R1是氢或低级烷基；R2、R3和R4独立地从以下组中选择氢、卤素、烷基、芳基、羟基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、氰基、硝基、烷基脲基、芳香基脲基、二烷基脲基、二芳基脲基、烷基芳基脲基、烷基硫脲基、芳基硫脲基、二烷基硫脲基、二芳基硫脲基、烷基芳基硫脲基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、二芳基氨基、芳基烷基氨基、氨基羰基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、二烷基氨基羰基、二芳基氨基羰基、芳基烷基氨基羰基、烷羰氧基、芳羰氧基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、磺基、烷磺酰氨基、芳磺酰氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、烷基亚硫酰基、芳基亚硫酰基和杂芳基；L是一个直接的键或一个连接基团，其具有1-3个原子，并独立地选自于非取代或取代的碳、氮、氧或硫；以及n等于1或2。
8.根据权利要求7的组合物，其中X是O。
9.根据权利要求7的组合物，其中 是一个单键。
10.根据权利要求7的组合物，其中 是一个双键。
11.根据权利要求7的组合物，其中R1是氢。
12.根据权利要求7的组合物，其中A是芳基。
13.根据权利要求12的组合物，其中芳基选自于以下组中苯基、联苯基、萘基和蒽基。
14.根据权利要求13的组合物，其中化合物是式(Ⅱ)的化合物或其药物可接受的盐 其中X、R2、R3、R4、L和n如上所限定。
15.根据权利要求13的组合物，其中X是O,R1是H,A是蒽基，L是S,R3是4-卤素，R4是H，而n是1。
16.根据权利要求7的组合物，其中A是杂芳基。
17.根据权利要求16的组合物，其中杂芳基选自于以下组中吡啶、喹啉、异喹啉、噻吩、呋喃、咪唑、苯并咪唑和吡唑。
18.根据权利要求17的组合物，其中化合物是式(Ⅲ)的化合物或其药物可接受的盐 其中X、R1、R2、R3和R4和L如上所限定。
19.根据权利要求7的组合物，其中R3和R4是卤素。
20.根据权利要求7的组合物，其中n是1且R2不是氢。
21.根据权利要求7的组合物，其中所述的化合物选自于以下组中5-(2-(3,4-二氯苯基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(3-(3,4-二氯苯基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(4-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(2-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(4-(3,4-二氯苯甲酰氨基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(4-(N-3,4-二氯苯基脲基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(2-(N-3,4-二氯苯基脲基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(2-(N-3,4-二氯苯基氨甲酰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(3-(N-3,4-二氯苯基氨甲酰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(4-(N-3,4-二氯苯基氨甲酰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(4-(N-3,4-二氯苯基氨甲酰氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(4-(3,4-二氯苯氧基羰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(2-(3,4-二氯苯氧基羰基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(2-(3,4-二氯苯基乙酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(3-(3,4-二氯苯基乙酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(4-(3,4-二氯苯基乙酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(2-(3,4-二氯苯甲酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(3-(3,4-二氯苯甲酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(4-(3,4-二氯苯甲酸基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(3,4-二-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(2-(3,4-二氯苯氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(4-(3,4-二氯苯氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(2,5-二-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(2,4-二-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(2-(3,4-二氯苄硫基)-3H-嘧啶-4-酮-6-基次甲基)绕丹宁，5-(2-(3,4-二氯苄硫基)嘧啶-4-基次甲基)绕丹宁，5-(2-(3,4-二氯苄硫基)嘧啶-4-基次甲基)绕丹宁，5-(3-氰基-2-(3,4-二氯苄硫基)吡啶-6-基次甲基)噻唑烷-2,4-二酮，5-(3-(3,4-二氯苄氧基)次苄基)噻唑烷-2,4-二酮，以及它们药物学上可接受的盐。
22.一种抑制端粒酶的药物组合物，其包括式(Ⅳ)的化合物或其药物可接受的盐 其中X是O或S； 是一个单键或双键；R5是H或低级烷基；以及Ar是取代或非取代的芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、芳基链烯基、杂芳基链烯基、芳基炔基或杂芳基炔基。
23.根据权利要求22的组合物，其中 是一个双键。
24.一种抑制端粒酶的药物组合物，其包括式(Ⅴ)的化合物或其药物可接受的盐 其中X是S或O；W是CH=CH、S或-N=C-；R6是H或低级烷基；R7是OH、卤素、巯基、硝基、氰基、低级烷硫基、低级烷基、低级烷氧基、低级烷酰氧基、NR11R12(其中R11和R12独立地选自于以下组中氢、低级烷基、低级烷酰基、芳基、杂芳基、杂芳烷基，或R11和R12形成取代或非取代杂环)、CO2R13(其中R13选自于以下组中氢、低级烷基、芳烷基和杂芳烷基)、CONR11R12、取代或非取代的芳基、取代或非取代杂芳基、芳氧基、杂芳氧基、芳烷氧基、杂芳烷氧基、低级烷酰基、芳酰基、低级链烯基、芳硫基或低级炔基；而且当W代表S时，R7也可以是氢；L是O、S、SO、SO2、OCH2、SCH2、SOCH2、SO2CH2或N(R10)(CH2)m(其中R10是取代或非取代芳基、杂芳基、芳烷基、或杂芳烷基，m是0或1)、(CH2)N(R10)(CH2)m或CR13R14(其中R13和R14独立地选自于氢、羟基、芳基和杂芳基)；以及A1是以下式(A1)的环烷基 其中Z1到Z5独立地选自于以下组中氢、低级烷基、低级链烯基、低级烷酰氧基、巯基、烷硫基、NR11R12、硝基、氰基、CO2R13、CONR11R12、芳基、杂芳基、芳氧基、杂芳氧基、芳烷氧基、杂芳烷氧基、卤素和低级烷酰基，条件是当W为CH=CH时，A也可以是吡啶基。
25.根据权利要求24的组合物，其中W是S。
26.根据权利要求24的组合物，其中W是CH=CH。
27.根据权利要求24的组合物，其中L是OCH2。
28.根据权利要求24的组合物，其中L是N(R10)(CH2)。
29.根据权利要求24的组合物，其中L是S。
30.根据权利要求24的组合物，其中L是SO。
31.根据权利要求24的组合物，其中L是SO2。
32.根据权利要求26的组合物，其中L是SO。
33.根据权利要求26的组合物，其中L是SO2。
34.根据权利要求24的组合物，其中R7是硝基。
35.根据权利要求24的组合物，其中A1是4-甲基苯基。
36.根据权利要求26的组合物，其中A1是4-甲基苯基。
37.一种抑制端粒酶的方法，其包括使端粒酶接触如权利要求1-35中任一项权利要求所述的组合物。
38.一种抑制端粒酶阳性细胞增殖的方法，其包括使细胞接触如权利要求1-35中任一项权利要求所述的组合物。
39.根据权利要求38的方法，其中所述的细胞是哺乳动物的细胞。
40.根据权利要求39的方法，其中所述的细胞是人的细胞。
41.根据权利要求40中的方法，其中所述的细胞是癌细胞。
42.一种治疗肿瘤的方法，其包括使肿瘤接触如权利要求1-35中任一项权利要求所述的组合物。
43.一种药物组合物，其包括药物有效量的如权利要求1-35中任一项权利要求所述的化合物以及药物可接受的载体。
44.权利要求1-35中任一项权利要求所述的组合物在抑制端粒酶活性方面的应用。
45.权利要求1-35中任一项权利要求所述的组合物在抑制端粒酶阳性细胞增殖方面的应用。
46.权利要求1-35中任一项权利要求所述的组合物在制备抑制端粒酶活性的药物方面的应用。
47.权利要求1-35中任一项权利要求所述的组合物在制备抑制细胞中的端粒酶活性的药物方面的应用。
48.根据权利要求47的药物，其中所述的疾病为癌症。
49.权利要求1-35中任一项权利要求所述的组合物在制备抑制细胞中的端粒酶活性的药物方面的应用。
全文摘要
本发明涉及体外抑制端粒酶活性并治疗端粒酶介导的病症或疾病的噻唑烷酮类化合物、组合物及方法。本发明的方法、化合物和组合物可单独或与其它药物活性剂组合用于治疗由端粒酶介导的病症或疾病如癌症。还公开了测试或筛选端粒酶活性抑制剂的新方法。
文档编号A61K31/5377GK1321153SQ00801875
公开日2001年11月7日 申请日期2000年6月30日 优先权日1999年7月1日
发明者阿利森·C·钦, 瑞安·霍尔库姆, 米奇斯瓦夫·A·皮亚蒂什科, 乌品德·辛格, 理查德·L·托尔曼, 赤间务, 菅田丰, 浅井彰, 山下义则, 远藤薰, 山口弘之 申请人:杰龙公司, 协和发酵工业株式会社