一种中药微生态组合物、制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种中药微生态组合物、制剂及其制备方法，属于生物制药【技术领域】。本发明中药微生态组合物采用黄芪提取物与枯草芽孢杆菌的复配，目的在于利用黄芪提取物发酵培养枯草芽孢杆菌，将中药和微生态进行有机结合。其中，枯草芽孢杆菌具有改善饲料利用率、提高动物抗病力、增强动物免疫力的功能，黄芪具有增强机体特异性免疫(体液免疫和细胞免疫)和非特异性免疫的功能，且能显著促进机体抗体生成。利用黄芪发酵枯草芽孢杆菌，能有效提高中药药效，保护中药活性成分免遭破坏，同时改变微生物代谢途径，形成新的活性成分，应用于动物机体后能发挥协同作用，提高动物的生产性能及机体免疫力。
【专利说明】-种中药微生态组合物、制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种中药微生态组合物，同时还涉及一种中药微生态制剂及其制备方 法，属于生物制药【技术领域】。
【背景技术】
[0002] 枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种，属于革兰氏阳性菌，无荚膜，周生鞭毛，能运 动。枯草芽孢杆菌菌体在生长过程中能产生枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等多 种活性物质，对致病菌或内源性感染具有明显的抑制作用，还能迅速消耗环境中的游离氧， 造成肠道低氧环境，促进有益厌氧菌生长，并产生有机酸降低肠道pH值，间接抑制其他致 病菌生长，同时刺激动物免疫器官生长发育，激活T、B淋巴细胞，提高免疫球蛋白和抗体水 平，增强细胞免疫和体液免疫功能。另外，菌体自身能合成a-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等霉 素，在消化道中与体内的消化酶一同发挥作用。
[0003] 目前，枯草芽孢杆菌在净化水产养殖环境、作物病害防治、畜禽饲料添加等领域有 广泛应用。枯草芽孢杆菌作为一种无毒、无残留的绿色饲料添加剂，主要用于改善畜禽肠道 菌群平衡，提高动物的生产性能。目前常用的枯草芽孢杆菌制剂多以普通培养基进行培养， 然后以液体或喷雾干燥的粉剂形式存在。液体在运输、保存方面受到一定限制，且容易出现 二次发酵，导致发臭等现象出现。而粉剂形式在使用时容易出现胀气、结块、堵塞水线、搅拌 不均匀等现象。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种中药微生态组合物。
[0005] 同时，本发明还提供一种中药微生态制剂。
[0006] 最后，本发明提供一种中药微生态制剂的制备方法。
[0007] 为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：
[0008] -种中药微生态组合物，主要包括黄芪提取物和枯草芽孢杆菌。
[0009] 所述的黄芪提取物为黄芪水提液，即在黄芪中加水煎煮后过滤得到的滤液。具体 的，黄芪水提液的制备方法为：取黄芪加水煎煮3次，第一次煎煮加4?5倍量的水，第二次 加3?4倍量的水，第三次加2?3倍量的水，每次煎煮30?60分钟，合并三次煎煮液，过 滤即得黄芪水提液。
[0010] 具体的，中药微生态组合物，由以下组分组成：黄芪水提液500?700mL、肉汤 200?400mL、玉米粉80?120g、（NH 4)2SO4O. 01?0. 03g，以及接种量0. 5?2%的枯草芽 孢杆菌菌种。
[0011] 所述的肉汤可采用烹饪中的常用材料，根据原料的不同分为鸡汤、猪骨汤、牛肉 汤、羊肉汤、鲜鱼汤等，可取用其中任意一种。也可采用以下配方：蛋白胨l〇g，牛肉膏3g，氯 化钠5g，水1000mL，pH值7.4 ;121°C高压灭菌15min即得。
[0012] 所述的枯草芽孢杆菌的接种浓度为1?2X 109cfu/mL。
[0013] 一种中药微生态制剂，主要包括以下质量份数的组分：中药微生态组合物发酵浓 缩浸膏50份、碳酸氢钠36?40份、朽 1檬酸（无水朽1檬酸）32?36份、稀释剂134?142 份。
[0014] 具体的，中药微生态制剂，还包括以下质量份数的组分：矫味剂2?4份。
[0015] 所述的中药微生态组合物发酵浓缩浸膏的制备方法，包括以下步骤：
[0016] (1)准确取中药微生态组合物各组分，混合均匀后调节混合液pH值为7?9 ;
[0017] (2)取步骤（1)的混合液在35?40°C下发酵培养60?80小时，再浓缩至原体积 的1/6?1/4,即得。
[0018] 所述步骤（2)中发酵培养结束后，计数枯草芽孢杆菌的总量为1?2X109cfu/mL， 芽孢形成率为90%。
[0019] 所述步骤（2)中优选混合液在37°C下发酵培养72小时。
[0020] 所述步骤（2)中优选发酵液浓缩至原体积的1/5。
[0021] 所述步骤⑵中浓缩可采用旋转蒸发仪，蒸水温度60?70°C，负压0.05?0. IPa。
[0022] 所述的稀释剂为葡萄糖、蔗糖、乳糖、淀粉、糊精中的一种或多种。优选葡萄糖 (无水葡萄糖）、淀粉（可溶性淀粉）和糊精的混合物，三者的质量比为（9?10):(2? 4) : (0. 5 ?2)。
[0023] 所述的矫味剂为甜菊素、阿斯帕坦、木糖醇、糖精钠、糖精钙中的一种或多种。优选 阿斯帕坦。
[0024] -种中药微生态制剂，可以采用常规方法制备成泡腾片剂或泡腾颗粒。本发明仅 提供一种泡腾颗粒的制备方法，包括以下步骤：
[0025] (1)按照质量份数准确取各组分；
[0026] (2)酸性颗粒的配制：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂各取50%，与柠 檬酸混合均匀制成软材，制粒备用；
[0027] (3)碱性颗粒的配制：取剩余的中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂，与碳 酸氢钠混合均匀制成软材，制粒备用；
[0028] (4)将步骤（2)、⑶制得的颗粒混合均勻，加入矫味剂，干燥即得。
[0029] 所述步骤（2)、（3)中优选16目筛制粒。
[0030] 所述步骤（2)、（3)中制粒后在50?60°C条件下干燥，再整粒备用。
[0031] 本发明的有益效果：
[0032] 本发明中药微生态组合物采用黄芪提取物与枯草芽孢杆菌的复配，目的在于利用 黄芪提取物发酵培养枯草芽孢杆菌，将中药和微生态进行有机结合。其中，枯草芽孢杆菌 具有改善饲料利用率、提高动物抗病力、增强动物免疫力等功能，黄芪具有增强机体特异性 免疫（体液免疫和细胞免疫）和非特异性免疫的功能，且能显著促进机体抗体生成。本发 明利用黄芪发酵枯草芽孢杆菌，能有效提高中药药效，保护中药活性成分免遭破坏，并产生 新的药效，同时改变微生物代谢途径，形成新的活性成分，应用于动物机体后能发挥协同作 用，提高动物的生产性能及机体免疫力。
[0033] 本发明中药微生态制剂为泡腾颗粒剂型，能在较短时间内利用崩解剂发生酸碱反 应，产生大量气泡而迅速溶解，大大缩短溶解时间，使用方便，且能提高动物机体对活性成 分的吸收率，生物利用度高，有效发挥中药与有益菌的双重功效。
【具体实施方式】
[0034] 下述实施例仅对本发明作进一步详细说明，但不构成对本发明的任何限制。
[0035] 实施例1
[0036] 本实施例中中药微生态组合物，由以下组分组成：黄芪水提液600mL、肉汤300mL、 玉米粉100g、（NH 4)2SO4O. 02g，以及接种量1 %的枯草芽孢杆菌菌种；其中肉汤为牛肉汤；枯 草芽孢杆菌的接种总量为I X 109cfu/mL。
[0037] 本实施例中中药微生态制剂，由以下组分组成：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏 50g、碳酸氢钠40g、无水朽 1檬酸32g，稀释剂：无水葡萄糖98g、可溶性淀粉30g、糊精10g，矫 味剂：甜菊素2g。
[0038] 本实施例中中药微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
[0039] (1)黄芪水提液的制备：称取洁净的黄苗，加水煎煮3次，第一次加5倍量水，第二 次加3倍量水，第三次加2倍量水，每次煎煮30min，合并三次煎煮液，过滤得水提液；
[0040] (2)中药微生态组合物发酵浓缩浸膏的制备：准确取中药微生态组合物各组分， 混合后调节混合液PH值为9,在37°C下发酵培养72小时，发酵培养后，平板菌落计数枯草 芽孢杆菌的总量为1. 70 X 109cfu/mL，芽孢形成率为90 %，发酵液经旋转蒸发仪浓缩至原体 积的1/5,蒸水温度65°C，负压0. 09Pa ;
[0041] (3)酸性颗粒的配制：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂各取50%，与柠 檬酸混合均匀制成软材，16目筛制粒，在50°C条件下干燥，整粒备用；
[0042] (4)碱性颗粒的配制：取剩余的中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂，与碳 酸氢钠混合均匀制成软材，16目筛制粒，在50°C条件下干燥，整粒备用；
[0043] (5)将步骤（2)、⑶制得的颗粒混合均勻，加入矫味剂，干燥即得。
[0044] 实施例2
[0045] 本实施例中中药微生态组合物，由以下组分组成：黄芪水提液500mL、肉汤200mL、 玉米粉80g、（NH 4)2SO4O. Olg，以及接种量0.5%的枯草芽孢杆菌菌种；其中肉汤的配方为： 蛋白胨l〇g，牛肉膏3g，氯化钠5g，水1000mL，pH值7. 4,121°C高压灭菌15min ;枯草芽孢杆 菌的接种总量为I X 109cfu/mL。
[0046] 本实施例中中药微生态制剂，由以下组分组成：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏 50g、碳酸氢钠40g、无水朽 1檬酸36g，稀释剂：鹿糖135g，矫味剂：阿斯帕坦2g。
[0047] 本实施例中中药微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
[0048] (1)中药微生态组合物发酵浓缩浸膏的制备：准确取中药微生态组合物各组分， 混合后调节混合液PH值为9,在35°C下发酵培养80小时，发酵培养后，平板菌落计数枯草 芽孢杆菌的总量为1. 70 X 109cfu/mL，芽孢形成率为90 %，发酵液经旋转蒸发仪浓缩至原体 积的1/4,蒸水温度60°C，负压0. 05Pa ;
[0049] (2)酸性颗粒的配制：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂各取50%，与柠 檬酸混合均匀制成软材，16目筛制粒，在55°C条件下干燥，整粒备用；
[0050] (3)碱性颗粒的配制：取剩余的中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂，与碳 酸氢钠混合均匀制成软材，16目筛制粒，在55°C条件下干燥，整粒备用；
[0051] (4)将步骤⑵、⑶制得的颗粒混合均勻，加入矫味剂，干燥即得。
[0052] 实施例3
[0053] 本实施例中中药微生态组合物，由以下组分组成：黄芪水提液700mL、肉汤400mL、 玉米粉120g、（NH 4)2SO4O. 03g，以及接种量1. 5%的枯草芽孢杆菌菌种；其中肉汤为猪肉汤； 枯草芽孢杆菌的接种总量为I. 50X 109cfu/mL。
[0054] 本实施例中中药微生态制剂，由以下组分组成：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏 50g、碳酸氢钠36g、无水柠檬酸32g，稀释剂：可溶性淀粉118g、糊精24g，矫味剂：糖精钠 2g。
[0055] 本实施例中中药微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
[0056] (1)中药微生态组合物发酵浓缩浸膏的制备：准确取中药微生态组合物各组分， 混合后调节混合液PH值为7,在40°C下发酵培养60小时，发酵培养后，平板菌落计数枯草 芽孢杆菌的总量为1. 50 X 109cfu/mL，芽孢形成率为90 %，发酵液经旋转蒸发仪浓缩至原体 积的1/6,蒸水温度70°C，负压0. 08Pa ;
[0057] (2)酸性颗粒的配制：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂各取50%，与柠 檬酸混合均匀制成软材，16目筛制粒，在60°C条件下干燥，整粒备用；
[0058] (3)碱性颗粒的配制：取剩余的中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂，与碳 酸氢钠混合均匀制成软材，16目筛制粒，在60°C条件下干燥，整粒备用；
[0059] (4)将步骤（2)、⑶制得的颗粒混合均勻，加入矫味剂，干燥即得。
[0060] 实施例4
[0061] 本实施例中中药微生态组合物，由以下组分组成：黄芪水提液600mL、肉汤300mL、 玉米粉100g、（NH 4)2SO4O. 02g，以及接种量1 %的枯草芽孢杆菌菌种；其中肉汤由普通肉汤 培养基试剂（购自北京双旋微生物培养基制品厂）配制，pH值7.4,121°C高压灭菌15min; 枯草芽孢杆菌的接种总量为I X 109cfu/mL。
[0062] 本实施例中中药微生态制剂，由以下组分组成：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏 50g、碳酸氢钠38g、无水朽1檬酸32g，稀释剂：乳糖120g、糊精20g，矫味剂：天冬甜精2g。
[0063] 本实施例中中药微生态制剂的制备方法同实施例1。
[0064] 实施例5
[0065] 本实施例中中药微生态组合物，由以下组分组成：黄芪水提液600mL、肉汤300mL、 玉米粉100g、（NH 4)2SO4O. 02g，以及接种量1 %的枯草芽孢杆菌菌种；其中肉汤为牛肉汤；枯 草芽孢杆菌的接种总量为2X 109cfu/mL。
[0066] 本实施例中中药微生态制剂，由以下组分组成：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏 50g、碳酸氢钠40g、无水朽1檬酸36g，稀释剂：无水葡萄糖134g，矫味剂：阿斯帕坦4g。
[0067] 本实施例中中药微生态制剂的制备方法同实施例1。
[0068] 试验例
[0069] (1)黄芪发酵培养枯草芽孢杆菌的研究
[0070] 称取适量的洁净黄芪，分别加5倍量、3倍量、2倍量水煮沸三次，每次30min，分别 取留每次煮沸滤液，最后合并三次滤液为黄芪提取液。以制备的黄芪提取液为主，添加适量 液体普通肉汤、（NH 4)2SCV NaOH设计8种发酵培养基（由预试验得出），分别命名为1-8号 培养基，黄芪提取液：液体普通肉汤按（100:0、90:10、80 :20、70:30、60:40、50:50、40:60、 30:70)比例混合（V:V)，另加入0. 02g(NH4)2S04、0. 04g NaOH。将培养的枯草芽孢杆菌菌种 以I %的量接种于8种发酵培养基中，37°C转摇培养72h。菌体浓度的测定使用比浊法进行 测定，在培养过程中每隔12h分别取样，用紫外-分光光度测定OD6tltol值。
[0071 ] 对1-8号培养基培养结束后，分别取发酵液lmL，稀释至10_7、10_ 8、10_9倍，取0. ImL 的稀释液涂布于普通琼脂平板上（做两个重复），37°C培养24h，查出平板菌落数，根据公 式：每毫升细菌数=平板上菌落数X稀释倍数/平板上加菌液的量（mL)来计算发酵液中 细菌总量，结果见表1。
[0072] 表1黄芪发酵培养基的筛选结果
【权利要求】
1. 一种中药微生态组合物，其特征在于：主要包括黄芪提取物和枯草芽孢杆菌。
2. 根据权利要求1所述的中药微生态组合物，其特征在于：由以下组分组成：黄芪水提 液500?700mL、肉汤200?400mL、玉米粉80?120g、（NH 4)2S040. 01?0· 03g，以及接种量 0.5?2%的枯草芽孢杆菌。
3. -种中药微生态制剂，其特征在于：主要包括以下质量份数的组分：如权利要求2所 述中药微生态组合物发酵浓缩浸膏50份、碳酸氢钠36?40份、朽 1檬酸32?36份、稀释剂 134 ?142 份。
4. 根据权利要求3所述的中药微生态制剂，其特征在于：还包括以下质量份数的组分： 矫味剂2?4份。
5. 根据权利要求3或4所述的中药微生态制剂，其特征在于：所述的中药微生态组合 物发酵浓缩浸膏的制备方法，包括以下步骤： (1) 准确取权利要求1所述中药微生态组合物各组分，混匀后调节混合液pH值为7? 9 ； (2) 取步骤（1)的混合液在35?40°C下发酵培养60?80小时，再浓缩至原体积的 1/6?1/4,即得。
6. 根据权利要求3或4所述的中药微生态制剂，其特征在于：所述的稀释剂为葡萄糖、 蔗糖、乳糖、淀粉、糊精中的一种或多种。
7. 根据权利要求6所述的中药微生态制剂，其特征在于：所述的稀释剂为葡萄糖、淀粉 和糊精的混合物，三者的质量比为（9?10) : (2?4) : (0. 5?2)。
8. 根据权利要求4所述的中药微生态制剂，其特征在于：所述的矫味剂为甜菊素、阿斯 帕坦、木糖醇、糖精钠、糖精钙中的一种或多种。
9. 根据权利要求8所述的中药微生态制剂，其特征在于：所述的矫味剂为阿斯帕坦。
10. -种如权利要求4所述的中药微生态制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步 骤： (1) 按照质量份数准确取各组分； (2) 酸性颗粒的配制：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂各取50%，与柠檬酸 混合均匀制成软材，制粒备用； (3) 碱性颗粒的配制：取剩余的中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂，与碳酸氢 钠混合均匀制成软材，制粒备用； (4) 将步骤⑵、⑶制得的颗粒混合均勻，加入矫味剂，干燥即得。
【文档编号】C12R1/125GK104293690SQ201410240408
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年5月27日 优先权日:2014年5月27日
【发明者】乔宏兴, 王永芬, 胡晓波, 李骞, 边传周 申请人:河南牧业经济学院