一种高产糖化酶、α-淀粉酶和酸性蛋白酶的塔宾曲霉及其应用的利记博彩app
【专利摘要】本发明公开了一种高产糖化酶、α-淀粉酶和酸性蛋白酶的塔宾曲霉及其在白酒酿造中的应用，所述塔宾曲霉(Aspergillus?tubingensis)已于2014年3月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号是CGMCC?No.8899。所述菌株能够同时高产糖化酶、α-淀粉酶和酸性蛋白酶，属于微生物和发酵工程领域。两株曲霉经固态制曲，可以高产糖化酶、α-淀粉酶和酸性蛋白酶，增加白酒酿造中淀粉和蛋白的利用率，使用该霉菌可以提高白酒的出酒率并保持较好的风味。
【专利说明】一种高产糖化酶、α -淀粉酶和酸性蛋白酶的塔宾曲霉及其应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种塔宾曲霉及其应用，特别是一种利用塔宾曲霉在提高酿酒过程中酒精产率工艺中的应用。
【背景技术】
[0002]细菌、酵母和霉菌是中国白酒酿造过程中的三大类微生物，其中霉菌能够分泌多种酶类并降解淀粉、蛋白质等大分子物质，为细菌和酵母的生长和发酵提供物质基础。霉菌同时也能够分泌一些酯化酶和代谢产物，对中国白酒的风味也有一定的影响。中国白酒传统酿造过程中是开放式生产，过程中涉及到复杂的霉菌群落；复杂的霉菌群落既能产生了丰富的酶系，对白酒酿造有着正面贡献，但一些环境中有害的霉菌也可能被涉及，给白酒产品的质量带来了潜在的风险。
[0003]纯种霉菌的筛选和使用已经是行业的一种趋势，纯种霉菌麸曲能够代替部分大曲，提高白酒生产的出酒率，控制有害微生物的潜在危险。目前白酒生产中常用的霉菌有河内白曲霉(Aspergillus kawachii)、米曲霉(Aspergillus oryzae)等，这些筛选的霉菌具有较高的糖化力，提高了出酒率。但是传统筛选麸曲霉菌只以糖化酶为指标，所得菌株酶系较为单一，生产的麸曲白酒的酒质比大曲酒差，通常只能用于生产中低端白酒。
[0004]糖化酶、α -淀粉酶都能够降解淀粉，他们的含量和比例会控制发酵进程的速度，控制发酵温度过快上升，使得整个微生物群落正常演变，保证白酒发酵的正常进行。白酒酿造的主要原料高粱的成分除了淀粉之外，蛋白质也是一个重要的成分(8% -10% )，是酵母细菌生长的重要物质基础，也是形成风味物质的重要前体。同时，中国白酒发酵体系是一个偏酸的环境，在发酵结束的时候PH最低能够达到3.5，因此酸性蛋白酶也在白酒发酵过程中起到了重要的作用。
【发明内容】
[0005]本发明所要解决的技术问题是提供一种高产糖化酶、α -淀粉酶和酸性蛋白酶的塔宾曲霉及其在酿造白酒中的应用，以适应白酒发酵的过程，提高酒精的产率。
[0006]塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis),于2014年3月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，北京市朝阳区北辰西路I号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC N0.8899。
[0007]本发明所得塔宾曲霉的ITS rDNA序列，在GenBank中进行Blast对比确定其种属，与其同源序列最高的菌株为Aspergillus tubingensis,相似度为97%。
[0008]所述塔宾曲霉在PDA培养基上生长，菌落开始为白色，圆形，向四周扩散，然后从菌落中间开始产生白色孢子，最后整个菌落全部变成白色略带红色。菌丝细密。本菌株适应性很强，孢子在PDA培养及平板上30°C萌发，培养3d，菌落直径为4.2-6.5cm。
[0009]本发明菌株高产糖化酶、α -淀粉酶和酸性蛋白酶，其发酵工艺为:
[0010]种子(PDA)培养基:马铃薯先洗净去皮，再称取200g马铃薯切成小块，加水煮烂(煮沸20-30min)用八层纱布过滤，加20g琼脂，葡萄糖20g，再补足水分至1000毫升，121 °C灭菌20min冷却后贮存备用；
[0011]发酵培养基:称取新鲜麸皮(或者其他粉碎原料)并加水，使水分含量约为50%，121°C 灭菌 20min ；
[0012]种子培养方法:挑取一环塔宾曲霉的孢子，接种于种子培养基斜面，30°C培养3d-7d ；
[0013]发酵培养方法:250ml锥形瓶装培养基20g，将活化的孢子悬浮液接入灭过菌的发酵培养基并使最终浓度为5 X 16个/g麸皮，30°C静止培养48h-72h。
[0014]测定酶活如下:
[0015]
【权利要求】
1.一株高产糖化酶、α -淀粉酶和酸性蛋白酶的塔宾曲霉(Aspergillustubingensis)，于2014年3月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC N0.8899。
2.权利要求1所述塔宾曲霉(Aspergillustubingensis)在白酒酿造中的应用。
3.权利要求2所述的应用，其特征在于所述塔宾曲霉高产糖化酶、α-淀粉酶和酸性蛋白酶，能增加白酒酿造中淀粉和蛋白的利用率，改善出酒率。
4.如权利要求2或3所述的应用，其特征在于将活化的塔宾曲霉孢子悬浮液接种至固体培养基，接种浓度为1-5% w/w，在25-35°C环境中固态发酵32-72h，制成固态菌制剂，再将固态菌制剂作为种子接种到曲池中进行扩大培养24-72h，二级种子按照5-20% w/w接种量加入白酒生产中。
5.权利要求2所述的应用，其特征在于可以将活化的塔宾曲霉孢子悬浮液接种于灭菌的液态培养基，接种浓度为1-5% w/w，25-35°C培养24h_72h，制成液态菌制剂，再将液态菌制剂作为种子接种到曲池中进行扩大培养24-72h，二级种子按照5-20% w/w接种量加入白酒生产中。
6.权利要求4所述的应用，其特征在于，固态原料培养基，原料包括高粱、麸皮、小麦、大麦、豌豆、大米、玉米、糯米、青稞或其组合。
7.权利要求5所述的液体培养基，其特征在于，液态培养基为原料提取物，原料包括:高粱、麸皮、小麦、大麦、豌豆、大米、玉米、糯米、青稞或其组合。
8.权利要求2所述的应用，其特征在于所述塔宾曲霉以固态接种或者液态接种的形式加入。
9.权利要求2所述的应用，其特征在于所述塔宾曲霉可以将白酒出酒率从20-28%提高到25-33%，淀粉利用率提高3% _5%，并保持酒的风味。
【文档编号】C12N1/14GK104046569SQ201410185333
【公开日】2014年9月17日 申请日期:2014年5月5日 优先权日:2014年5月5日
【发明者】徐岩, 吴群 申请人:江南大学