一种采用玻璃珠法转化衣藻的实验方法
【专利摘要】本发明公开了一种采用玻璃珠法转化衣藻的实验方法。步骤如下：首先，将目的衣藻培养至其对数生长期；然后取3-5好身体更的培养液进行预处理，即首先将其进行离心处理，用0.5毫升的转化也对其进行悬空处理；然后加入烤箱中烘干，高温杀菌；加入1-2ug的质粒；充分振荡、摇匀；暗处培养至少24小时；即可进行染色验镜；其中所述质粒需要转入到莱茵衣藻硝酸还原酶缺陷型突变物种中；所述振荡，时间不能超过5分钟，需要瞬间剪切。本发明的有益效果是，成本较低、重复性好，转化效率低，整合基因的拷贝数不高，可以获得比较成功的表达。
【专利说明】一种采用玻璃珠法转化衣藻的实验方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种实验室的实验方法，具体来说一种采用玻璃珠法转化衣藻的实验方法。
【背景技术】
[0002]衣藻，(Chlamydomonas)亦称“单衣藻”。绿藻门，衣藻科。藻体为单细胞，球形或卵形，前端有两条等长的鞭毛，能游动。鞭毛基部有伸缩泡两个；另在细胞的近前端，有红色眼点一个。载色体大型杯状，具淀粉核一枚。无性繁殖产生游动孢子；有性生殖为同配、异配和卵式生殖。在不利的生活条件下，细胞停止游动，并进行多次分裂，外围厚胶质鞘，形成临时群体称“不定群体”。环境好转时，群体中的细胞产生鞭毛，破鞘逸出。广布于水沟、洼地和含微量有机质的小型水体中，早春晚秋最为繁盛。一些含蛋白质较丰富的种类，可培养作饲料或食用。衣藻属于真核生物，叶绿体为大型杯状，具淀粉核(starchstorage) —枚。无性繁殖产生游动孢子；有性生殖为同配、异配和卵式生殖。在不利的生活条件下，细胞停止游动，并进行多次分裂，外围厚胶质鞘，形成临时群体称“不定群体”。环境好转时，群体中的细胞产生鞭毛，破鞘逸出。广布于水沟、洼地和含微量有机质的小型水体中，早春晚秋最为繁盛。一些含蛋白质较丰富的种类，可培养作饲料或食用。
【发明内容】
[0003]为克服上述技术问题，我们提出了以下技术方案:
一种采用玻璃珠 法转化衣藻的实验方法，步骤如下:首先，将目的衣藻培养至其对数生长期；然后取3-5好身体更的培养液进行预处理，即首先将其进行离心处理，用0.5毫升的转化也对其进行悬空处理；然后加入烤箱中烘干，高温杀菌；加入l_2ug的质粒；充分振荡、摇匀；暗处培养至少24小时；即可进行染色验镜。
[0004]本发明中，其中所述质粒需要转入到莱茵衣藻硝酸还原酶缺陷型突变物种中。
[0005]本发明中，所述振荡，时间不能超过5分钟，需要瞬间剪切。
[0006]本发明的有益效果是，成本较低、重复性好，转化效率低，整合基因的拷贝数不高，可以获得比较成功的表达。
【具体实施方式】
[0007]—种采用玻璃珠法转化衣藻的实验方法，步骤如下:首先，将目的衣藻培养至其对数生长期；然后取3-5好身体更的培养液进行预处理，即首先将其进行离心处理，用0.5毫升的转化也对其进行悬空处理；然后加入烤箱中烘干，高温杀菌；加入2ug的质粒；充分振荡、摇匀；暗处培养至少24小时；即可进行染色验镜；其中所述质粒需要转入到莱茵衣藻硝酸还原酶缺陷型突变物种中；所述振荡，时间为7分钟，需要瞬间剪切。
[0008]以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变`，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种采用玻璃珠法转化衣藻的实验方法，其特征在于，步骤如下:首先，将目的衣藻培养至其对数生长期；然后取3-5好身体更的培养液进行预处理，即首先将其进行离心处理，用0.5毫升的转化也对其进行悬空处理；然后加入烤箱中烘干，高温杀菌；加入l_2ug的质粒；充分振荡、摇匀；暗处培养至少24小时；即可进行染色验镜。
2.如权利要求1所述的一种采用玻璃珠法转化衣藻的实验方法，其特征在于，其中所述质粒需要转入到莱茵衣藻硝酸还原酶缺陷型突变物种中。
3.如权利要求1所述的一种 采用玻璃珠法转化衣藻的实验方法，其特征在于，所述振荡，时间不能超过5分钟，需要瞬间剪切。
【文档编号】C12N15/79GK103757044SQ201310535542
【公开日】2014年4月30日 申请日期:2013年11月4日 优先权日:2013年11月4日
【发明者】刘军 申请人:刘军