一种用于抑菌效果评价的在虾中接种副溶血性弧菌方法
【专利摘要】本发明属于食品微生物和食品安全领域，公开一种在虾中接种食源性致病菌的方法。首先将预先培养好的副溶血性弧菌菌悬液稀释至适当浓度，通过煮沸法杀灭虾中固有微生物、无菌分割，将稀释好的副溶血性弧菌菌悬液接种到虾体上，于无菌条件下反复揉捏至微生物渗入到虾肉组织。该方法可以在接种副溶血性弧菌之后的虾中加入抑菌剂进行抑菌效果评价，操作简单，接种效果、重复性好。
【专利说明】一种用于抑菌效果评价的在虾中接种副溶血性弧菌方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种用于抑菌效果评价的在虾中接种副溶血性弧菌方法，属于食品微生物和食品安全领域。
【背景技术】
[0002]副溶血性弧菌是一种广泛分布于浅海的海水中，是一种重要的人类疾病病原菌。副溶血性弧菌主要附着在一些海洋生物体上，比如鳕鱼，沙丁鱼，鲭鱼，牙鲆，文蛤，章鱼，虾，蟹，龙虾，小龙虾，扇贝，牡蛎等。食物没有经过处理可能含有大量的副溶血性弧菌。因此食用该食物后，溶血性弧菌会主要集中在肠道细胞，进一步分泌出溶血素或细胞毒素等等，导致腹泻，头痛，呕吐，恶心，腹部绞痛等等。美国、澳大利亚、英国、比利时、法国、韩国和东南亚地区，都有该菌引起食物中毒爆发的报告。在中国，对副溶血性弧菌的报道最早见于1962年，在随后的几十年里出现了大量由该菌引起的中毒事件，以沿海城市最为严重。国家食源性疾病监测网对13个地区食源性疾病爆发情况的监测数据表明，自1992-2001年的食物中毒事件5770起，患者人数达162995人，其中由微生物引起的食源性疾病事件和涉及人数最多，分别占总体的38.5%和50.9%。在细菌性食物中毒的构成中，又以副溶血性弧菌引起的急性肠胃炎占首位。目前，副溶血性弧菌食物中毒已在数量上超过沙门氏菌中毒案例，成为我国的首要食源性致病菌。食物中毒对国民经济造成了巨大的损失，对人民的生命健康和安全造成了巨大威胁。积极寻求有效的控制措施，防止微生物在加工和储藏环节的滋长是保障食品安全，保证人民的身体健康的有效措施。
【发明内容】
[0003]本发明涉及一种用于抑菌效果评价的在虾中接种副溶血性弧菌方法，该方法可以在接种副溶血性弧菌之后的虾中加入抑菌剂进行抑菌效果评价，操作简单，接种效果、重复性好。
[0004]操作步骤如下:
1.副溶血性弧菌培养好之后，用无菌3.5%氯化钠溶液稀释至105?16CFUAiL。
[0005]2.无菌虾的利记博彩app为:将虾浸泡于3.5%氯化钠自来水溶液中100°C煮沸15?30分钟。
[0006]3.无菌条件下，各只虾称重，将2中副溶血性弧菌菌悬液体积和虾的重量按照1:1接种；移液枪吸取一半菌悬液缓慢滴加在虾体一面上，之后再吸取另一半菌悬液缓慢滴加在虾体另一面，滴加时避免菌悬液流下，保证菌悬液完全吸附于虾体组织中。
[0007]4.配戴无菌PE手套用手反复揉捏虾体5分钟，使微生物充分渗入虾体组织，揉捏力度适中，防止捏碎、捏散虾体组织；放置20分钟后，重复上述操作一次。
【权利要求】
1.用于抑菌效果评价的在虾中接种副溶血性弧菌方法，其操作步骤为: 1)副溶血性弧菌培养、菌悬液稀释； 2)无菌虾制作； 3)将I)接种到2)中无菌虾中； 4)无菌条件下揉捏使微生物充分渗入虾肉组织。
2.一种用于抑菌效果评价的在虾中接种副溶血性弧菌方法，其特征在于所述权利I中副溶血性弧菌培养好之后，用3.5%无菌氯化钠溶液稀释至105?16CFUAiL。
3.一种用于抑菌效果评价的在虾中接种副溶血性弧菌方法，其特征在于所述权利I中无菌虾的利记博彩app为:将虾浸泡于3.5%氯化钠自来水溶液中100°C煮沸15?30分钟。
4.一种用于抑菌效果评价的在虾中接种副溶血性弧菌方法，其特征在于所述权利I接种方法具体操作为:无菌条件下，各只虾称重，将1.2)中副溶血性弧菌菌悬液体积和虾的重量按照1:1接种；移液枪吸取一半菌悬液缓慢滴加在虾体一面上，之后再吸取另一半菌悬液缓慢滴加在虾体另一面，滴加时避免菌悬液流下，保证菌悬液完全吸附于虾体组织中。
5.一种用于抑菌效果评价的在虾中接种副溶血性弧菌方法，其特征在于所述权利.1.4)的操作方法为:. 1)1.3)完成后10分钟中，配戴无菌PE手套用手反复揉捏虾体5分钟，使微生物充分渗入虾体组织，揉捏力度适中，防止捏碎、捏散虾体组织； .2)放置20分钟后,重复5.1)中操作一次。
【文档编号】C12R1/63GK104278072SQ201310280109
【公开日】2015年1月14日 申请日期:2013年7月5日 优先权日:2013年7月5日
【发明者】贺菊萍, 刘辉, 刘恩岐, 王乃馨 申请人:徐州工程学院