通过毕赤酵母与不同的啤酒花品种的组合来提高啤酒风味的利记博彩app
【专利摘要】本发明已出人意料地发现毕赤酵母属(Pichia?spp.)菌株具有对啤酒发酵过程有用的有利特性。具体来说，可以在发酵过程中将毕赤酵母属酵母菌株与常规的啤酒酵母菌株和不同的啤酒花品种组合以产生协同效应-即使得发酵产物中酯的产生增加。更确切地说，可以使用所述酵母使啤酒中乙酸异戊酯、乙酸异丁酯、丙酸乙酯、戊酸乙酯、丁酸乙酯、癸酸乙酯以及辛酸乙酯的水平增加。另外，所述毕赤酵母属菌株与不同的啤酒花品种发生不同的相互作用，因此可以通过使用毕赤酵母属菌株与啤酒花的不同组合来调整啤酒的风味特点。本发明涉及一种使用毕赤酵母属酵母菌株和至少一种啤酒花品种酿造啤酒的方法、一种可通过这种方法获得的啤酒以及根据本发明的毕赤酵母属酵母菌株的用途。
【专利说明】通过毕赤酵母与不同的啤酒花品种的组合来提高啤酒风味
【技术领域】
[0001]本发明涉及啤酒酿造和提高啤酒风味的领域。确切地说，本发明涉及一种酿造啤酒的方法，所述方法包括使用毕赤酵母属(Pichia SPP.)(菌种)使加有啤酒花的麦芽汁发酵的步骤，其中啤酒花与毕赤酵母属酵母菌株进行相互作用以提高啤酒的风味。
【背景技术】
[0002]不同的啤酒含有许多源自于大麦芽、啤酒花、酵母发酵以及其他原料的风味化合物。然而，酵母发酵构成了啤酒酿造工艺的核心，这是因为在发酵期间，形成了最重要的风味化合物。发酵是酵母将麦芽汁中的单糖代谢成乙醇和二氧化碳的过程。然而，这些组分对于总体啤酒风味所起的影响相对较小。啤酒的香气和风味特征是由酵母在发酵期间产生的较少的风味挥发物所产生的。
[0003]另一个重要因素是啤酒花。在酿酒厂中使用两种啤酒花:苦型啤酒花和香型啤酒花。苦型啤酒花被用于窖藏啤酒以给与啤酒以额外的苦味。香型啤酒花被用于特制啤酒以提闻风味。
[0004]使用起子培养物是酵母行业中的一个惯例。然而，纯的酵母菌株往往不能兼有酿造中所需的所有最佳性状，这是因为在啤酒行业中使用特定的酵母菌株有以下两个主要目的:提闻生广过程的效率以及获得优质的最终广品(Saerens等，2010)。
[0005]在食品和饮料 行业中另外一个近期的趋势在于生产支持人类健康的饮料。举例来说，酿造行业已投资于集中在生产含有更少酒精和糖的啤酒方面的研究。
[0006]为了确保啤酒的优良品质，减少“不良”风味以及提高所希望的风味已经成为酿造行业中的重要问题。减少不良风味的重点在于低丁二酮产量，所述丁二酮是啤酒中一种不希望有的具有’奶油糖果’香气的风味化合物。啤酒中最合乎需要的风味化合物是酯和高级醇,会给与啤酒以水果香气(Verstrepen等，2003)。啤酒中最重要的风味活性酯是乙酸酯，如乙酸乙酯(“溶剂”样香味)和乙酸异戊酯(“香蕉”香味)；以及乙酯，如己酸乙酯和辛酸乙酯(“苹果”香味)。最重要的高级醇是异戊醇(“香蕉”香味)。
[0007]由于对于更健康的食品和饮料的需求不断增加，所以减少酒精饮料，特别是啤酒和葡萄酒中的乙醇和碳水化合物具有相当大的商业利益。当前生产低酒精型、酒精减少型以及无酒精型啤酒的方法，即改进的发酵法或发酵后乙醇去除法，分别会产生麦芽汁样口感或使香气组分丧失(Zufall和Wackerbauer, 2000)。在不含酒精的窖藏啤酒中，缺乏乙醇(少于0.1%)会增强通过冷接触法所生产的啤酒中的任何“麦芽汁样”异味。
[0008]提高饮料的感官品质以及开发新的饮料可以通过生物调味来实现(Vanderhaegen等，2003)。这种技术依赖于通过生物学方法，如使用特殊的酵母菌株使风味化合物和风味前体产生和转化。传统上，酿造师根据分别用于生产爱尔啤酒和窖藏啤酒的用途已经区分出如下两种类型的啤酒酵母:爱尔啤酒(ale)酵母和窖藏酵母。爱尔酿酒酵母和窖藏酿酒酵母属于酵母菌属(Saccharomyces):酿酒酵母(S.cerevisiae)(爱尔酵母)和巴斯德酵母(S.pastorianus)(窖藏酵母)。窖藏酵母被用于生产比尔森啤酒(pilsner beer),所述比尔森啤酒占据了世界上所生产啤酒的90%。另外10%是特制啤酒，由爱尔酵母生产。在比利时(Belgium)(以及目前也在美国)，另一种酵母菌种被用于生产拉比克啤酒(Iambicbeer)和盖斯啤酒(gueuze beer),即布鲁塞尔酒香酵母(Brettanomyces bruxellensis)(Verachtert等，1989)。这与葡萄酒行业形成巨大的反差，在葡萄酒行业中，使用大量的非酵母菌属菌株来提高自然发酵的‘野生’特征(Domizio等，2011)。这些菌株对于葡萄酒行业来说如今可通过诸如科汉森公司(Christian Hansen)和拉曼公司(Lallemand)之类的公司商购获得。
[0009]国际专利申请W02009/110807涉及用于发酵工艺的酵母菌株以及一种通过使用非酵母菌属酵母菌株提高发酵产物的风味的方法。W02009/110807涉及葡萄酒的发酵而并未提及在酿造啤酒中使用非酵母菌属菌种。
[0010]尚无研究已对非酵母菌属菌种对于啤酒中酯和高级醇的水平的影响进行研究。也只有少数研究报道了酵母对啤酒中的啤酒花风味的影响。迄今为止，有三项研究报道了酵母菌属菌种或酒香酵母属菌种在提高啤酒中的啤酒花萜类化合物方面的影响(King和Dickinson, 2003 ；Daenen 等，2007 ；以及 Takoi 等，2010)。
[0011]国际专利申请W02008/077986描述了一种通过使用在发酵期间表达编码单萜烯合酶的基因的遗传修饰的微生物用于生产芳族萜烯含量增加和/或不同的酒精饮料的方法。在此W02008/077986中，在用于使酒精饮料(啤酒作为一个实例连同其他酒精饮料(如葡萄酒、卡瓦酒(cava)、香槟、苹果酒以及清酒)一起被提及)发酵的理论上可能的酵母菌株(与例如像酵母菌属(Saccharomyces)的其他酵母菌株一起)的清单中提到了毕赤酵母。换句话说， 毕赤酵母属菌种用于制造啤酒的用途并未确切地并且毫无疑义地公开于W02008/077986 中。
[0012]德国专利DD288619A5描述了毕赤酵母用于使啤酒麦芽汁发酵的用途。该啤酒麦芽汁未添加有啤酒花。
[0013]对于控制发酵过程中化合物的存在和量的生物过程的了解是非常合乎需要的。具体来说，能够调控啤酒中乙酸酯的量和类型对于酿造师来说将是非常有利的。对啤酒中的酯和高级醇(特别是乙酸异戊酯)的量以及啤酒花风味进行调控将使得开发允许酿造师更精确地改变他们的产品当中这些所希望的风味的量的新技术成为可能。这种技术因此将具有重大的商业价值。除此之外，提高风味可以是生产低酒精型、酒精减少型或无酒精型啤酒的一种有用的方式。生产低酒精型、酒精减少型或无酒精型啤酒的问题在于因去除乙醇或因麦芽汁的密度较低而呈现麦芽汁样口感或丧失香气化合物。
[0014]因此，对于提高啤酒中所希望的风味的改良的方法存在需要。
【发明内容】
[0015]本发明所要解决的问题涉及提供一种用于酿造啤酒的新方法，其中使得诸如酯和高级醇之类的合乎需要的风味化合物的存在量提高。
[0016]所述解决方案是基于本发明的发明人的以下惊人的发现:通过使用如下的方法，能够生产具有改良的风味特点的啤酒，所述方法包括在使用常规的啤酒酵母使加有啤酒花的麦芽汁发酵之前或同时，使用毕赤酵母属酵母菌株使加有啤酒花的麦芽汁发酵。
[0017]因此，本发明的第一方面涉及一种酿造啤酒的方法，所述方法包括以下步骤:[0018]a)提供麦芽汁；
[0019]b)添加至少一种啤酒花品种以获得加有啤酒花的麦芽汁；
[0020]c)使用第一酵母菌株使加有啤酒花的麦芽汁发酵，其中所述第一酵母菌株是毕赤酵母属酵母菌株；以及
[0021]d)使用第二酵母菌株使加有啤酒花的麦芽汁发酵以获得啤酒，其中所述第二酵母菌株属于由酵母菌属菌种和酒香酵母属(Brettanomyces)菌种组成的组。
[0022]本发明的第二方面涉及一种可通过根据本发明的第一方面的方法获得的啤酒。
[0023]本发明的第三方面涉及毕赤酵母属菌种用于提高啤酒风味的用途。
[0024]本发明的第四方面涉及毕赤酵母属菌种用于酿造啤酒的用途。
【专利附图】
【附图说明】
[0025]图1图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在20°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的乙醛浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0026]图2图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在22°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的乙醛浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0027]图3图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在20°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的乙酸乙 酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0028]图4图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在22°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的乙酸乙酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0029]图5图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在20°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的乙酸异丁酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0030]图6图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在22°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的乙酸异丁酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0031]图7图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在20°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的乙酸异戍酯浓度。con=对照发酵,并且seq=连续发酵。
[0032]图8图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在22°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的乙酸异戍酯浓度。con=对照发酵,并且seq=连续发酵。
[0033]图9图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在20°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的乙酸己酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0034]图10图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在22°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的乙酸己酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0035]图11图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在20°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的丙酸乙酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0036]图12图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在22°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的丙酸乙酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0037]图13图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在20°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的丁酸乙酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0038]图14图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在22°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的丁酸乙酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。[0039]图15图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在20°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的戊酸乙酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0040]图16图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在22°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的戊酸乙酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0041]图17图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在20°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的己酸乙酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0042]图18图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在22°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的己酸乙酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0043]图19图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在20°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的辛酸乙酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。 [0044]图20图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在22°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的辛酸乙酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0045]图21图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在20°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的癸酸乙酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0046]图22图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在22°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的癸酸乙酯浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0047]图23图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在20°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的异丁醇浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0048]图24图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在22°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的异丁醇浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0049]图25图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在20°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的异戊醇浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0050]图26图示了在第5天(d5)和第13天(dl3)获得的在22°C下连续发酵和对照发酵的发酵产物中的异戊醇浓度。con=对照发酵，并且seq=连续发酵。
[0051 ] 图27图示了成品啤酒中的乙醛浓度。
[0052]图28图示了成品啤酒中的乙酸乙酯浓度。
[0053]图29图示了成品啤酒中的乙酸异戊酯浓度。
[0054]图30图示了成品啤酒中的丙酸乙酯浓度。
[0055]图31图示了成品啤酒中的丁酸乙酯浓度。
[0056]图32图示了成品啤酒中的戊酸乙酯浓度。
[0057]图33图示了成品啤酒中的己酸乙酯浓度。
[0058]图34图示了成品啤酒中的辛酸乙酯浓度。
[0059]图35图示了成品啤酒中的癸酸乙酯浓度。
[0060]图36图示了成品啤酒中的异丁醇浓度。
[0061]图37图示了成品啤酒中的异戊醇浓度。
[0062]图38图示了在使用和不使用毕赤酵母的情况下制备的啤酒中硫醇3-巯基己醇和乙酸3-巯基己酯的浓度。
【具体实施方式】[0063]
[0064]本文中的术语“麦芽汁”具有本领域中常规的含义并且指的是通过啤酒酿造的糖化过程所提取的含糖液体。
[0065]如本文所用的术语“啤酒”至少指的是由从发芽的谷物制备的麦芽浆和从未发芽的谷物制备的麦芽浆以及从发芽谷物和未发芽谷物的混合物制备的麦芽浆制备的啤酒。术语“啤酒”还指的是使用辅料制备的啤酒和具有所有可能的酒精含量的啤酒。
[0066]本文中的术语“酒精减少型啤酒”指的是酒精含量在1.2%与4.2%酒精体积百分比(alcohol by volume, ABV)之间的啤酒。
[0067]本文中的术语“低酒精型啤酒”指的是酒精含量在0.5%与1.2%ABV之间的啤酒。
[0068]本文中的术语“无酒精型啤酒”指的是酒精含量小于0.5%ABV的啤酒。
[0069]本文中的术语“加有啤酒花的麦芽汁”指的是在将麦芽汁煮沸之前或在将麦芽汁煮沸之后已添加有啤酒花的麦芽汁。
[0070]本文中的术语“遗传修饰的生物体”具有如由1996年有机贸易协会(19960rganicTrade Association)所定义的含义并且指的是使用如下技术形成的生物体,如微生物(如酵母)，所述技术通过在自然 条件或自然过程下不可能存在的手段使生物体的分子或细胞生物学发生改变。本文中的术语“未经过遗传修饰”指的是微生物不含异源基因。
[0071]在本发明上下文中，术语“突变株”应当被理解为借助于例如遗传工程、辐射和/或化学处理衍生自本发明菌株的菌株。优选的是，突变株是功能上等同的突变株，例如与母本菌株相比具有基本上相同的或改良的特性(例如与提高合乎需要的啤酒风味化合物有关的特性)的突变株。这种突变株是本发明的一部分。尤其，术语“突变株”指的是通过对本发明的菌株进行包括使用诸如甲烷磺酸乙酯(EMS)或N-甲基-N’ -硝基-N-硝基胍(NTG)之类的化学诱变剂、紫外光进行处理在内的任何常规使用的诱变处理所获得的菌株或指的是自发出现的突变株。可以对突变株进行多次诱变处理(单次处理应当被理解为一个诱变步骤和之后进行的筛选/选择步骤)，但本发明优选的是进行不超过20次，或不超过10次，或不超过5次处理(或筛选/选择步骤)。在本发明优选的突变株中，与母本菌株相比，酵母基因组中少于5%,或少于1%或甚至少于0.1%的核苷酸已变换成另一核苷酸,或缺失。
[0072]在本发明上下文中，术语“变体”应当被理解为在功能上等同于本发明菌株，例如具有基本上相同的或改良的特性(例如与提高合乎需要的啤酒风味化合物相关的特性)的菌株。这些变体可以使用适当的筛选技术来进行鉴定，并且是本发明的一部分。
[0073]除非在本文中另外指明或与上下文明显抵触，否则在描述本发明的上下文中(特别是在所附权利要求书的上下文中)使用术语“a/an( — ) ”和“所述”以及类似指示物应被理解为包括单数和复数。除非另外指出，否则术语“包含”、“具有”、“包括”以及“含有”应被理解为开放性术语(即，意指“包括但不限于”)。除非在本文中另外指明，否则在本文中对值的范围的叙述仅意图用作单独地指示属于该范围内的每个独立值的速记方法，并且每个独立值被并入到本说明书中，如同其在本文中被单独叙述一般。除非在本文中另外指明或另外与上下文明显抵触，否则本文所述的所有方法可以按照任何合适的顺序进行。除非另外要求，否则使用本文提供的任何和所有实例或示例性语言(例如“如”)仅意图更好地阐明本发明而不对本发明的范围构成限制。本说明书中的语言不应当被理解成指明任何未要求保护的要素对于实施本发明是必要的。[0074]本发明的实现方式和方面
[0075]酿造啤酒的工艺是本领域技术人员熟知的并且可以被概述成如下方式；由干燥的已发芽的谷粒(主要是大麦或小麦)制备麦芽，并且将所述麦芽研磨成粗麦芽粉，所述粗麦芽粉可以含有未发芽的辅料。将粗麦芽粉糖化(与水混合并且浸泡)以允许麦芽中的酶将淀粉转化成糖。在被称作过滤(Iauter)的过程中将谷粒和辅料与液体麦芽汁分离。可以通过将水添加到麦芽提取物中而跳过麦芽制备和糖化步骤。在添加啤酒花和/或诸如香草和糖之类的其他成分之后，将麦芽汁煮沸(也可以在煮沸之后添加啤酒花)，冷却并且充气。然后将麦芽汁转移到发酵罐中并且通过添加啤酒酵母使所述麦芽汁发酵。初期发酵典型地持续5至10天，之后可以是使用另一种啤酒酵母进行的二次发酵步骤。在发酵后，对新鲜的啤酒或“生”啤酒进行调节，任选地进行过滤并且充入二氧化碳。
[0076]将啤酒花添加至麦芽汁中以用苦味来平衡麦芽的甜味并且赋予啤酒以所希望的风味和香气。存在多种品种，包括但不限于阿塔纳姆(Ahtanum)、阿马里洛(Amarillo)、阿波罗(Apollo)、卡斯卡特(Cascade)、世纪(Centennial)、奇努克(Chinook)、西楚(Citra)、克雷斯特(Cluster)、哥伦布(Columbus)、水晶(Crystal)、伊瑞卡(Eroica)、格林纳(Galena)、冰川(Glacier)、格林伯格(Greenburg)、地平线(Horizon)、自由(Liberty)、千樓(Millenium)、胡德山(Mount Hood)、瑞尼尔山(Mount Rainier)、新港(Newport)、努格特(Nugget)、色乐西(Palisade)、桑特姆(Santiam)、西姆科(Simcoe)、斯特林(Sterling)、萨米特(Summit)、战斧(Tomahawk)、阿尔萨(Ultra)、先锋(Vanguard)、勇士(Warrior)、威廉麦特(Willamette)、宙斯(Zeus)、上将(Admiral)、金酉良(Brewer’s Gold)、比仑(Bullion)、挑战者(Challenger)、第一金(First Gold)、富格尔斯(Fuggles)、戈尔丁斯(Goldings)、海来尔德(Herald)、诺恩道(Northdown)dt^l (Northern Brewer)、菲尼克斯(Phoenix)、派洛特(Pilot)、先驱(Pioneer)、普罗葛拉斯(Progress)、塔吉特(Target)、惠特布雷德公司的金牌品种(Whitbread Golding Variety, WGV)、哈拉道(Hallertau)、赫斯布鲁克(Hersbrucke r)、萨兹(Saaz)、蒂特南(Tettnang)、司派尔特(Spalt)、法国福柯-考尔(Feux-Coeur Francais)、佳乐喜(Galaxy)、绿色子弹(Green Bullet)、莫图依卡(Motueka)、尼尔森索文(Nelson Sauvin)、太平洋美玉(Pacific Gem)、太平洋翡翠(Pacific Jade)、帕西菲卡(Pacifica)、林伍德之荣(Pride of Ringwood)、里瓦卡(Riwaka)、南十字星(Southern Cross)、卢伯林(Lublin)、马格努门(Magnum)、佩勒(Perle)、波尼希尔卢伯林(Polnischer Lublin)、萨菲尔(Saphir)、萨塔斯(Satus)、精选(Select)、斯迪塞尔斯伯特(Strisselspalt)、斯蒂莱恩戈尔丁斯(Styrian Goldings)、勃艮第拖拉非(Tardif de Bourgogne)以及传统(Tradition)品种。存在另外的品种，包括但不限于布拉沃(Bravo)、卡里普索(Calypso)、车兰(Chelan)、考梅脱(Comet)、埃尔多拉多(El Dorado)、圣胡安宝石红(San Juan Ruby Red)、萨塔斯、索尼特金牌(SonnetGolding)、超级格林纳(Super Galena)、蒂利卡姆(Tillicum)、布拉姆灵杂交(BramlingCross)、朝圣者(Pilgrim)、哈拉道海格力斯(Hallertauer Herkules)、哈拉道马格努门(Hallertauer Magnum)、哈拉道陶瑞斯(Hallertauer Taurus)、默克(Merkur)、欧宝(Opal)、袓母绿(Smaragd)、哈拉道香型(Halleratau Aroma)、寇哈图(Kohatu)、拉库(Rakau)、斯特拉(Stella)、斯蒂克布莱克(Sticklebract)、夏季萨兹(Summer Saaz)、超级阿尔法(Super Alpha)、超级荣耀(Super Pride)、托帕石(Topaz)、瓦依提(Wa1-1ti)、波恩(Bor)、君嘉(Junga)、玛连卡(Marynka)、普莱米特(Premiant)、斯拉德克(Sladek)Jjf蒂莱恩阿特拉斯(Styrian Atlas)、斯蒂莱恩奥罗拉(Styrian Aurora)、斯蒂莱恩波贝克(Styrian Bobek)、斯蒂莱恩塞里亚(Styrian Celeia)、西比拉(Sybilla)以及空知王牌(Sorachi Ace)品种。
[0077]本发明的发明人出人意料地发现某些毕赤酵母属酵母菌株在与将不同品种的啤酒花添加至麦芽汁中相结合时具有对啤酒酿造的发酵过程有用的有利特性。具体来说，在使用毕赤酵母属酵母菌株使加有啤酒花的麦芽汁发酵、然后使用包括酵母菌属和酒香酵母属的酵母在内的常规用于啤酒酿造的酵母菌株使加有啤酒花的麦芽汁发酵时，毕赤酵母属酵母菌株能够提高来自啤酒花的所希望的风味。
[0078]根据在以下实施例中所概述的对所有发酵的完全风味分析，明显的是，与对照发酵相比，在连续发酵中几乎每一种所测量的化合物均以更高的浓度存在。这意味着毕赤酵母属菌株对于最终啤酒的风味特点具有巨大的影响，这是因为在开始发酵时添加毕赤酵母属菌种是连续发酵与对照发酵之间存在的唯一差异。由于发现诸如乙酸异戊酯和乙酸异丁酯以及丙酸乙酯和戊酸乙酯之类的所有合乎需要的风味化合物均大幅增加，所以这显示出在所述酿造行业中使用毕赤酵母属菌种具有巨大的潜能。特别是对于低酒精型、酒精减少型以及无酒精型啤酒来说，提高水果风味可以掩盖通常存在的麦芽汁样风味。由于这是一个新兴的市场， 所以在这些啤酒发酵中使用毕赤酵母属菌种可获得巨大的潜能。
[0079]本发明用于酿造啤酒的方法包括以下步骤:
[0080]a)提供麦芽汁；
[0081]b)添加至少一种啤酒花品种以获得加有啤酒花的麦芽汁；
[0082]c)使用第一酵母菌株使加有啤酒花的麦芽汁发酵，其中所述第一酵母菌株是毕赤酵母属酵母菌株；以及
[0083]d)使用第二酵母菌株使加有啤酒花的麦芽汁发酵以获得啤酒，其中所述第二酵母菌株属于由酵母菌属菌种和酒香酵母属菌种组成的组。
[0084]如实施例中所示，通过这种方法，可以提高风味化合物并且可以通过添加不同品种的啤酒花来优化啤酒的风味特点。
[0085]在本发明的一个优选实施方案中，依序进行步骤c)和步骤d)，即首先在适用于发酵的条件下使用毕赤酵母属酵母菌株对加有啤酒花的麦芽汁进行接种，随后在适用于发酵的条件下使用第二酵母菌株对加有啤酒花的麦芽汁进行接种。
[0086]在一个更优选的实施方案中，使步骤c)中的发酵进行至少12小时，如至少24小时、如至少36小时、如至少48小时、如至少60小时、如至少72小时,之后在步骤d)中接种第二酵母菌株。在一个最优选的实施方案中，使步骤c)中的发酵进行至少36小时。
[0087]可以通过使用不同品种的啤酒花来实现啤酒的不同风味特点是本发明的一部分。至少一种啤酒花品种可以选自由以下各项组成的清单:阿塔纳姆、阿马里洛、阿波罗、卡斯卡特、世纪、奇努克、西楚、克雷斯特、哥伦布、水晶、伊瑞卡、格林纳、冰川、格林伯格、地平线、自由、千禧、胡德山、瑞尼尔山、新港、努格特、芭乐西、桑特姆、西姆科、斯特林、萨米特、战斧、阿尔萨、先锋、勇士、威廉麦特、宙斯、上将、金酿、比仑、挑战者、第一金、富格尔斯、戈尔丁斯、海来尔德、诺恩道、北酿、菲尼克斯、派洛特、先驱、普罗葛拉斯、塔吉特、惠特布雷德公司的金牌品种(WGV)、哈拉道、赫斯布鲁克、萨兹、蒂特南、司派尔特、法国福柯-考尔、佳乐喜、绿色子弹、莫图依卡、尼尔森索文、太平洋美玉、太平洋翡翠、帕西菲卡、林伍德之荣、里瓦卡、南十字星、卢伯林、马格努门、佩勒、波尼希尔卢伯林、萨菲尔、萨塔斯、精选、斯迪塞尔斯伯特、斯蒂莱恩戈尔丁斯、勃艮第拖拉非以及传统品种，但是使用另外的啤酒花品种也是本发明的一部分。
[0088]在一个优选实施方案中，至少一种啤酒花品种选自由萨兹、尼尔森索文、卡斯卡特以及阿马里洛组成的组。
[0089]至少一种啤酒花品种还可以选自由以下各项组成的清单:布拉沃、卡里普索、车兰、考梅脱、埃尔多拉多、圣胡安宝石红、萨塔斯、索尼特金牌、超级格林纳、蒂利卡姆、布拉姆灵杂交、朝圣者、哈拉道海格力斯、哈拉道马格努门、哈拉道陶瑞斯、默克、欧宝、祖母绿、哈拉道香型、寇哈图、拉库、斯特拉、斯蒂克布莱克、夏季萨兹、超级阿尔法、超级荣耀、托帕石、瓦依提、波恩、君嘉、玛连卡、普莱米特、斯拉德克、斯蒂莱恩阿特拉斯、斯蒂莱恩奥罗拉、斯蒂莱恩波贝克、斯蒂莱恩塞里亚、西比拉以及空知王牌品种。
[0090]在本发明的另一个优选实施方案中，在约12°C到约28°C的温度下进行步骤c)中的发酵。
[0091]在一个更优选的实施方案中，步骤c)中的发酵温度为约20°C到约22°C。最优选地，步骤c)中的发酵温度是约20°C。
[0092]优选地，在使用第二酵母菌株发酵期间，使毕赤酵母属酵母菌株保留在发酵培养物中。然而，也可以在接种第二酵母菌株之前通过本领域技术人员已知的技术将毕赤酵母属酵母菌株去除。
[0093]在本发明的另一个实施方案中，通过共同接种步骤c)中的第一酵母菌株和步骤
d)中的第二酵母菌株来同时进行步骤c)和步骤d)。
[0094]在一个优选实施方案中，使步骤d)中的第二发酵步骤进行至少12小时，如至少24小时、如至少48小时、如至少72小时、如至少96小时、如至少120小时。
[0095]在本发明的一个优选实施方案中，毕赤酵母属酵母菌株是未经过遗传修饰的酵母菌株。
[0096]在本发明的另一个优选实施方案中，毕赤酵母属酵母菌株是克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)菌株。
[0097]优选地，克鲁维毕赤酵母菌株选自由以下各项组成的组:克鲁维毕赤酵母PK-KRl和PK-KR2菌株，所述克鲁维毕赤酵母PK-KRl和PK-KR2菌株于2006年8月24日由新西兰奥克兰的奥克兰大学生物科学学院(邮编:1142) (University of Auckland, Schoolof Biological Sciences, Aucklandl 142, New Zealand)保藏在澳大利亚维多利亚州南墨尔本克拉克街541-65号的国家计量研究院(邮编:3205) (National MeasurementInstitute, 541_65Clarke Street, South Melbourne, Victoria3205, Australia),并且分别给予保藏号V06/022711和V06/022712 ;以及其突变株和变体。这些菌株描述于国际专利申请 W02009/110807 中。
[0098]在本发明的又另一个优选实施方案中，第二酵母菌株选自由酿酒酵母、巴斯德酵母以及布鲁塞尔酒香酵母组成的组。优选地，第二酵母菌株是酿酒酵母菌株。
[0099]在本发明的一个优选实施方案中，啤酒是低酒精型、酒精减少型或无酒精型啤酒。
[0100]在另一个优选实施方案中，在步骤c)中使用毕赤酵母属酵母菌株会使得选自下组的至少一种风味化合物的含量增加至少50%，如至少100%、如至少150%、如至少200%、如至少250%、如至少300%，该组由以下各项组成:乙酸异戊酯、乙酸异丁酯、丙酸乙酯、戊酸乙
酯、辛酸乙酯以及癸酸乙酯。
[0101]优选地，在步骤c)中使用毕赤酵母属酵母菌株会使得选自下组的至少一种风味化合物的含量增加至少50%，如至少100%、如至少150%、如至少200%、如至少250%、如至少300%，该组由以下各项组成:乙酸异戊酯、乙酸异丁酯、丙酸乙酯以及戊酸乙酯。
[0102]在本发明的又另一个优选实施方案中，在步骤c)中使用毕赤酵母属酵母菌株会使得选自下组的至少两种或更多种风味化合物的含量增加至少50%，如至少100%、如至少150%、如至少200%、如至少250%、如至少300%，该组由以下各项组成:乙酸异戊酯、乙酸异丁酯、丙酸乙酯、戊酸乙酯、辛酸乙酯以及癸酸乙酯。
[0103]优选地，在步骤c)中使用毕赤酵母属酵母菌株会使得选自下组的至少两种或更多种风味化合物的含量增加至少50%，如至少100%、如至少150%、如至少200%、如至少250%、如至少300%，该组由以下各项组成:乙酸异戊酯、乙酸异丁酯、丙酸乙酯以及戊酸乙酯。
[0104]在另一个非常优选的实施方案中，在步骤c)中使用毕赤酵母属酵母菌株会使得硫醇乙酸3-巯基己酯的含量增加至少10%，如至少20%、如至少30%、如至少40%、如至少50%。
[0105]术语“增加至少一种风味化合物的含量”和“增加硫醇乙酸3-巯基己酯的含量”可以被看作是如下文所论述使用毕赤酵母属菌种的固有特性。
[0106]在本发明的一 个优选实施方案中，在步骤b)中的至少一种啤酒花品种是萨兹并且在约20°C的温度下进行步骤c)中的发酵时，在步骤c)中使用毕赤酵母属酵母菌株使癸酸乙酯水平的增加比在所述至少一种啤酒花品种是卡斯卡特、尼尔森索文或阿马里洛时多至少50%。
[0107]在本发明的另一个优选实施方案中，在步骤b)中的至少一种啤酒花品种是尼尔森索文并且在约20°C的温度下进行步骤c)中的发酵时，在步骤c)中使用毕赤酵母属酵母菌株使癸酸乙酯水平的增加比在所述至少一种啤酒花品种是卡斯卡特或阿马里洛时多至少 50%o
[0108]在本发明的另一个实施方案中，在步骤b)中的至少一种啤酒花品种是卡斯卡特或尼尔森索文并且在约20°C的温度下进行步骤c)中的发酵时，在步骤c)中使用毕赤酵母属酵母菌株使戊酸乙酯水平的增加比在所述至少一种啤酒花品种是阿马里洛和萨兹时多至少50%。
[0109]在甚至另一个实施方案中，在步骤b)中的至少一种啤酒花品种是卡斯卡特并且在约20°C的温度下进行步骤c)中的发酵时，在步骤c)中使用毕赤酵母属酵母菌株使己酸乙酯和辛酸乙酯水平的增加比在所述至少一种啤酒花品种是尼尔森索文、阿马里洛或萨兹时多至少50%。
[0110]在本发明的又另一个实施方案中，在步骤b)中的至少一种啤酒花品种是选自下组的任何品种时:阿塔纳姆、阿马里洛、阿波罗、卡斯卡特、世纪、奇努克、西楚、克雷斯特、哥伦布、水晶、伊瑞卡、格林纳、冰川、格林伯格、地平线、自由、千禧、胡德山、瑞尼尔山、新港、努格特、芭乐西、桑特姆、西姆科、斯特林、萨米特、战斧、阿尔萨、先锋、勇士、威廉麦特、宙斯、上将、金酿、比仑、挑战者、第一金、富格尔斯、戈尔丁斯、海来尔德、诺恩道、北酿、菲尼克斯、派洛特、先驱、普罗葛拉斯、塔吉特、惠特布雷德公司的金牌品种(WGV)、哈拉道、赫斯布鲁克、萨兹、蒂特南、司派尔特、法国福柯-考尔、佳乐喜、绿色子弹、莫图依卡、尼尔森索文、太平洋美玉、太平洋翡翠、帕西菲卡、林伍德之荣、里瓦卡、南十字星、卢伯林、马格努门、佩勒、波尼希尔卢伯林、萨菲尔、萨塔斯、精选、斯迪塞尔斯伯特、斯蒂莱恩戈尔丁斯、勃艮第拖拉非以及传统品种，在步骤c)中使用毕赤酵母属酵母菌株所产生的风味化合物乙酸异戊酯、乙酸异丁酯、丙酸乙酯以及戊酸乙酯水平的风味特点不同于在步骤b)中的啤酒花品种是除选自下组外的任何其他品种时在步骤c)中使用毕赤酵母属酵母菌株所产生的风味特点:阿塔纳姆、阿马里洛、阿波罗、卡斯卡特、世纪、奇努克、西楚、克雷斯特、哥伦布、水晶、伊瑞卡、格林纳、冰川、格林伯格、地平线、自由、千禧、胡德山、瑞尼尔山、新港、努格特、芭乐西、桑特姆、西姆科、斯特林、萨米特、战斧、阿尔萨、先锋、勇士、威廉麦特、宙斯、上将、金酿、比仑、挑战者、第一金、富格尔斯、戈尔丁斯、海来尔德、诺恩道、北酿、菲尼克斯、派洛特、先驱、普罗葛拉斯、塔吉特、惠特布雷德公司的金牌品种(WGV)、哈拉道、赫斯布鲁克、萨兹、蒂特南、司派尔特、法国福柯-考尔、佳乐喜、绿色子弹、莫图依卡、尼尔森索文、太平洋美玉、太平洋翡翠、帕西菲卡、林伍德之荣、里瓦卡、南十字星、卢伯林、马格努门、佩勒、波尼希尔卢伯林、萨菲尔、萨塔斯、精选、斯迪塞尔斯伯特、斯蒂莱恩戈尔丁斯、勃艮第拖拉非以及传统品种。 [0111]在本发明的另一个实施方案中，在步骤b)中的至少一种啤酒花品种是选自下组的任何品种时:阿塔纳姆、阿马里洛、阿波罗、卡斯卡特、世纪、奇努克、西楚、克雷斯特、哥伦布、水晶、伊瑞卡、格林纳、冰川、格林伯格、地平线、自由、千禧、胡德山、瑞尼尔山、新港、努格特、芭乐西、桑特姆、西姆科、斯特林、萨米特、战斧、阿尔萨、先锋、勇士、威廉麦特、宙斯、上将、金酿、比仑、挑战者、第一金、富格尔斯、戈尔丁斯、海来尔德、诺恩道、北酿、菲尼克斯、派洛特、先驱、普罗葛拉斯、塔吉特、惠特布雷德公司的金牌品种(WGV)、哈拉道、赫斯布鲁克、萨兹、蒂特南、司派尔特、法国福柯-考尔、佳乐喜、绿色子弹、莫图依卡、尼尔森索文、太平洋美玉、太平洋翡翠、帕西菲卡、林伍德之荣、里瓦卡、南十字星、卢伯林、马格努门、佩勒、波尼希尔卢伯林、萨菲尔、萨塔斯、精选、斯迪塞尔斯伯特、斯蒂莱恩戈尔丁斯、勃艮第拖拉非、传统、布拉沃、卡里普索、车兰、考梅脱、埃尔多拉多、圣胡安宝石红、萨塔斯、索尼特金牌、超级格林纳、蒂利卡姆、布拉姆灵杂交、朝圣者、哈拉道海格力斯、哈拉道马格努门、哈拉道陶瑞斯、默克、欧宝、祖母绿、哈拉道香型、寇哈图、拉库、斯特拉、斯蒂克布莱克、夏季萨兹、超级阿尔法、超级荣耀、托帕石、瓦依提、波恩、君嘉、玛连卡、普莱米特、斯拉德克、斯蒂莱恩阿特拉斯、斯蒂莱恩奥罗拉、斯蒂莱恩波贝克、斯蒂莱恩塞里亚、西比拉以及空知王牌品种，在步骤c)中使用毕赤酵母属酵母菌株所产生的风味化合物乙酸异戊酯、乙酸异丁酯、丙酸乙酯以及戊酸乙酯水平的风味特点不同于在步骤b)中的啤酒花品种是除选自下组外的任何其他品种时在步骤c)中使用毕赤酵母属酵母菌株所产生的风味特点:阿塔纳姆、阿马里洛、阿波罗、卡斯卡特、世纪、奇努克、西楚、克雷斯特、哥伦布、水晶、伊瑞卡、格林纳、冰川、格林伯格、地平线、自由、千禧、胡德山、瑞尼尔山、新港、努格特、芭乐西、桑特姆、西姆科、斯特林、萨米特、战斧、阿尔萨、先锋、勇士、威廉麦特、宙斯、上将、金酿、比仑、挑战者、第一金、富格尔斯、戈尔丁斯、海来尔德、诺恩道、北酿、菲尼克斯、派洛特、先驱、普罗葛拉斯、塔吉特、惠特布雷德公司的金牌品种(WGV)、哈拉道、赫斯布鲁克、萨兹、蒂特南、司派尔特、法国福柯-考尔、佳乐喜、绿色子弹、莫图依卡、尼尔森索文、太平洋美玉、太平洋翡翠、帕西菲卡、林伍德之荣、里瓦卡、南十字星、卢伯林、马格努门、佩勒、波尼希尔卢伯林、萨菲尔、萨塔斯、精选、斯迪塞尔斯伯特、斯蒂莱恩戈尔丁斯、勃艮第拖拉非、传统、布拉沃、卡里普索、车兰、考梅脱、埃尔多拉多、圣胡安宝石红、萨塔斯、索尼特金牌、超级格林纳、蒂利卡姆、布拉姆灵杂交、朝圣者、哈拉道海格力斯、哈拉道马格努门、哈拉道陶瑞斯、默克、欧宝、祖母绿、哈拉道香型、寇哈图、拉库、斯特拉、斯蒂克布莱克、夏季萨兹、超级阿尔法、超级荣耀、托帕石、瓦依提、波恩、君嘉、玛连卡、普莱米特、斯拉德克、斯蒂莱恩阿特拉斯、斯蒂莱恩奥罗拉、斯蒂莱恩波贝克、斯蒂莱恩塞里亚、西比拉以及空知王牌品种。
[0112]在第二方面，本发明涉及一种可通过第一方面的方法获得的啤酒。
[0113]根据本发明的啤酒可以包含可检测量的毕赤酵母属酵母。但是，在有些情况下，在发酵后将该酵母从啤酒中去除。
[0114]然而，如本文在实施例中所示，使用毕赤酵母属菌种将赋予啤酒以不同于现有技术的风味特点，并且因此，使用毕赤酵母属菌种和不同的啤酒花品种所制备的啤酒本身将是新颖的。
[0115]当使用不同的啤酒花品种时，使用毕赤酵母属菌种酿造的啤酒含有不同的风味特点。举例来说，在20°C下进行的发酵中，与在使用卡斯卡特、尼尔森索文或阿马里洛时相比，在使用萨兹啤酒花时癸酸乙酯水平的增加多至少50%，并且与在使用卡斯卡特或阿马里洛时相比，在使用尼尔森索文时癸酸乙酯水平增加至少50%(参见图21)。在20°C下进行的发酵中，与在使用阿马里洛或萨兹时相比，在使用卡斯卡特或尼尔森索文啤酒花时戊酸乙酯浓度增加至少50%(参见 图15)。在20°C下进行的发酵中，与在使用尼尔森索文、阿马里洛或萨兹啤酒花时相比，在使用卡斯卡特啤酒花时己酸乙酯和辛酸乙酯浓度至少增加15%(参见图17和19)。
[0116]还预期的是，使用毕赤酵母属菌种酿造的啤酒将含有可检测量的硫醇(特别是乙酸3-巯基己酯(3MHA)和3-巯基己-1-醇(3MH))，如在W02009/110807中关于葡萄酒所述。
[0117]实施例
[0118]实施例1
[0119]材料与方法
[0120]发酵配置
[0121]在500ml麦芽汁中进行实验室规模的发酵试验。使用小麦芽提取物(Brewferm)来制备麦芽汁。将麦芽提取物与水混合以达到10° P的初始糖含量。将4X3升麦芽汁与以下4种不同的啤酒花品种一起煮沸:尼尔森索文、阿马里洛、萨兹以及卡斯卡特。将啤酒花颗粒于密闭的咖啡过滤器中添加到麦芽汁中并且将其煮沸，持续30分钟以提取啤酒花风味并且为啤酒增添苦味。添加啤酒花颗粒以达到23EBU。在煮沸之后，从麦芽汁中取出咖啡过滤器并且将麦芽汁转移至IL的瓶子中，通过水封将所述瓶子密封。
[0122]每种啤酒花品种，进行4次发酵。使用以下两种发酵温度:20°C和22°C。每种发酵温度，进行2种不同的接种:使用克鲁维毕赤酵母PK-KRl对一个瓶子进行接种(用于连续接种)，和使用可商购的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)小麦酵母菌株SafbrewWB_06(乐斯福公司(Lesaffre))并且根据供应商的建议对第二个瓶子进行接种(对照发酵)。以每毫升500万个细胞接种这两种酵母菌株。表1给出了关于发酵配置的概述。[0123]表1.发酵配置
【权利要求】
1.一种酿造啤酒的方法，所述方法包括以下步骤: a)提供麦芽汁； b)添加至少一种啤酒花品种以获得加有啤酒花的麦芽汁； c)使用第一酵母菌株使所述加有啤酒花的麦芽汁发酵，其中所述第一酵母菌株是毕赤酵母属(Pichia spp.)酵母菌株；以及 d)使用第二酵母菌株使所述加有啤酒花的麦芽汁发酵以获得啤酒，其中所述第二酵母菌株属于酵母菌属(Saccharomyces)或酒香酵母属(Brettanomyces)。
2.根据权利要求1所述的方法，其中依序进行步骤c)和步骤d)。
3.根据权利要求2所述的方法，其中使步骤c)中的所述发酵进行至少12小时，如至少24小时、如至少36小时、如至少48小时、如至少60小时、如至少72小时,之后开始步骤d)中的所述发酵。
4.根据权利要求1所述的方法，其中通过共同接种步骤c)中的所述第一酵母菌株和步骤d)中的所述第二酵母菌株来同时进行步骤c)和步骤d)。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中使步骤d)进行至少24小时，如至少36小时、如至少48小时、如至少72小时、如至少96小时、如至少120小时。
6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述至少一种啤酒花品种选自由萨兹(Saaz)、尼尔森索文(Nelso n Sauvin)、卡斯卡特(Cascade)以及阿马里洛(Amarillo)组成的组。
7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在约12°C至28°C下进行步骤c)中的所述发酵。
8.根据权利要求7所述的方法，其中在约20°C至22°C下进行步骤c)中的所述发酵。
9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述毕赤酵母属酵母菌株是克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)菌株。
10.根据权利要求10所述的方法，其中所述克鲁维毕赤酵母菌株选自由以下各项组成的组:克鲁维毕赤酵母PK-KRl和克鲁维毕赤酵母PK-KR2，所述克鲁维毕赤酵母PK-KRl和克鲁维毕赤酵母PK-KR2于2006年8月24日由新西兰奥克兰的奥克兰大学生物科学学院(邮编:1142)分别以保藏号V06/022711和V06/022712保藏在澳大利亚维多利亚州南墨尔本克拉克街541-65号的国家计量研究院(邮编:3205);以及其突变株和变体。
11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第二酵母菌株选自由酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、巴斯德酵母(Saccharomyces pastorianus)以及布鲁塞尔酒香酵母(Brettanomyces bruxellensis)组成的组。
12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述啤酒是低酒精型、酒精减少型或无酒精型啤酒。
13.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在步骤c)中使用毕赤酵母属酵母菌株会使得选自下组的至少一种风味化合物的含量增加至少50%:乙酸异戊酯、乙酸异丁酯、丙酸乙酯、戊酸乙酯、辛酸乙酯以及癸酸乙酯组成。
14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在步骤c)中使用毕赤酵母属酵母菌株会使得硫醇乙酸3-巯基己酯的含量增加至少10%。
15.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中当步骤b)中的所述至少一种啤酒花品种是选自下组的任何品种时:阿塔纳姆(Ahtanum)、阿马里洛、阿波罗(Apollo)、卡斯卡特、世纪(Centennial)、奇努克(Chinook)、西楚(Citra)、克雷斯特(Cluster)、哥伦布(Columbus)、水晶(Crystal)、伊瑞卡(Eroica)、格林纳(Galena)、冰川(Glacier)、格林伯格(Greenburg)、地平线(Horizon)、自由(Liberty)、千禧(Millenium)、胡德山(Mount Hood)、瑞尼尔山(Mount Rainier)、新港(Newport)、努格特(Nugget)、色乐西(Palisade)、桑特姆(Santiam)、西姆科(Simcoe)、斯特林(Sterling)、萨米特(Summit)、战斧(Tomahawk)、阿尔萨(Ultra)、先锋(Vanguard)、勇士(Warrior)、威廉麦特(Willamette)、宙斯(Zeus)、上将(Admiral)、金酿(Brewer’s Gold)、比仑(Bullion)、挑战者(Challenger)、第一金(First Gold)、富格尔斯(Fuggles)、戈尔丁斯(Goldings)、海来尔德(Herald)、诺恩道(Northdown)dt^l (Northern Brewer)、菲尼克斯(Phoenix)、派洛特(Pilot)、先驱(Pioneer)、普罗葛拉斯(Progress)、塔吉特(Target)、惠特布雷德公司的金牌品种(Whitbread Golding Variety，WGV)、哈拉道(Hallertau)、赫斯布鲁克(Hersbrucker)、萨兹、蒂特南(Tettnang)、司派尔特(Spalt)、法国福柯-考尔(Feux-CoeurFrancais)、佳乐喜(Galaxy)、绿色子弹(Green Bullet)、莫图依卡(Motueka)、尼尔森索文、太平洋美玉(Pacific Gem)、太平洋翡翠(Pacific Jade)、帕西菲卡(Pacifica)、林伍德之荣(Pride of Ringwood)、里瓦卡(Riwaka)、南十字星(Southern Cross)、卢伯林(Lublin)、马格努门(Magnum)、佩勒(Perle)、波尼希尔卢伯林(Polnischer Lublin)、萨菲尔(Saphir)、萨塔斯(Satus)、精选(Select)、斯迪塞尔斯伯特(Strisselspalt)、斯蒂莱恩戈尔丁斯(Styrian Goldings)、勃艮第拖拉非(Tardif de Bourgogne)、传统(Tradition)、布拉沃(Bravo)、卡里普索(Calypso)、车兰(Chelan)、考梅脱(Comet)、埃尔多拉多(ElDorado)、圣胡安宝石红(San Juan Ruby Red)、萨塔斯、索尼特金牌(Sonnet Golding)、超级格林纳(Super Galena)、蒂利卡姆(Tillicum)、布拉姆灵杂交(Bramling Cross)、朝圣者(Pilgrim)、哈拉道海格 力斯(Hallertauer Herkules)、哈拉道马格努门(HallertauerMagnum)、哈拉道陶瑞斯(Hallertauer Taurus)、默克(Merkur)、欧宝(Opal)、袓母绿(Smaragd)、哈拉道香型(Halleratau Aroma)、寇哈图(Kohatu)、拉库(Rakau)、斯特拉(Stella)、斯蒂克布莱克(Sticklebract)、夏季萨兹(Summer Saaz)、超级阿尔法(SuperAlpha)、超级荣耀(Super Pride)、托帕石(Topaz)、瓦依提(Wa1-1ti)、波恩(Bor)、君嘉(Junga)、玛连卡(Marynka)、普莱米特(Premiant)、斯拉德克(Sladek)、斯蒂莱恩阿特拉斯(Styrian Atlas)、斯蒂莱恩奥罗拉(Styrian Aurora)、斯蒂莱恩波贝克(Styrian Bobek)、斯蒂莱恩塞里亚(Styrian Celeia)、西比拉(Sybilla)以及空知王牌(Sorachi Ace)品种，在步骤c)中使用所述毕赤酵母属酵母菌株所产生的所述风味化合物乙酸异戊酯、乙酸异丁酯、丙酸乙酯以及戊酸乙酯的水平的风味特点不同于当在步骤b)中的所述啤酒花品种是除选自下组外的任何其他品种时在步骤c)中使用所述毕赤酵母属酵母菌株所产生的风味特点:阿塔纳姆、阿马里洛、阿波罗、卡斯卡特、世纪、奇努克、西楚、克雷斯特、哥伦布、水晶、伊瑞卡、格林纳、冰川、格林伯格、地平线、自由、千禧、胡德山、瑞尼尔山、新港、努格特、芭乐西、桑特姆、西姆科、斯特林、萨米特、战斧、阿尔萨、先锋、勇士、威廉麦特、宙斯、上将、金酿、比仑、挑战者、第一金、富格尔斯、戈尔丁斯、海来尔德、诺恩道、北酿、菲尼克斯、派洛特、先驱、普罗葛拉斯、塔吉特、惠特布雷德公司的金牌品种(WGV)、哈拉道、赫斯布鲁克、萨兹、蒂特南、司派尔特、法国福柯-考尔、佳乐喜、绿色子弹、莫图依卡、尼尔森索文、太平洋美玉、太平洋翡翠、帕西菲卡、林伍德之荣、里瓦卡、南十字星、卢伯林、马格努门、佩勒、波尼希尔卢伯林、萨菲尔、萨塔斯、精选、斯迪塞尔斯伯特、斯蒂莱恩戈尔丁斯、勃艮第拖拉非、传统、布拉沃、卡里普索、车兰、考梅脱、埃尔多拉多、圣胡安宝石红、萨塔斯、索尼特金牌、超级格林纳、蒂利卡姆、布拉姆灵杂交、朝圣者、哈拉道海格力斯、哈拉道马格努门、哈拉道陶瑞斯、默克、欧宝、祖母绿、哈拉道香型、寇哈图、拉库、斯特拉、斯蒂克布莱克、夏季萨兹、超级阿尔法、超级荣耀、托帕石、瓦依提、波恩、君嘉、玛连卡、普莱米特、斯拉德克、斯蒂莱恩阿特拉斯、斯蒂莱 恩奥罗拉、斯蒂莱恩波贝克、斯蒂莱恩塞里亚、西比拉以及空知王牌品种。
【文档编号】C12C12/00GK103781896SQ201280042813
【公开日】2014年5月7日 申请日期:2012年9月3日 优先权日:2011年9月2日
【发明者】S·萨伦, J·H·斯维格斯 申请人:科.汉森有限公司