α-羟酸去消化的方法及菌株的利记博彩app

文档序号:604097阅读:276来源:国知局
专利名称:α-羟酸去消化的方法及菌株的利记博彩app
技术领域
本发明涉及双菌耦联催化外消旋α -羟酸生产手性α _羟酸的方法,以及该过程中用到的新菌株。
(ニ)
背景技术
光学活性的α -羟酸是指手性碳上带有羟基同时带有羧基的ー类化合物,是重要的手性“砌块”,可用于不对称合成大量生物活性分子。在这类化合物中,光学纯扁桃酸在商业角度上被认为是最重要的代表。扁桃酸又称a-羟基苯こ酸、苯こ醇酸、苦杏仁酸,其R型和S型的结构式如下
权利要求
1.一种双菌耦联催化外消旋α-羟酸生产手性α-羟酸的方法,所述方法包括以式(I)所示的α-羟酸外消旋体为底物,以(S)-a-羟酸脱氢酶和(R)-酮酸还原酶为催化剂,在20 50°C、pH6. O 9. O缓冲液中进行反应10 48小时,制得相应(R) - α -羟酸;所述(S)- α -轻酸脱氢酶来自铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) CCTCC No M 2011394或中华根瘤菌(Sinorhizobium sp.)CCTCC No M 2011391的含酶菌体细胞,所述(R)-酮酸还原酶来自葡萄酿酒酵母(Saccharomyces ellipsoideus)CCTCC NO M 2011393的含酶菌体细胞;
2.如权利要求I所述的方法,其特征在于所述缓冲液所述缓冲液为下列之一pH6.O 6. 6的柠檬酸缓冲液、pH 6. 5 7. 8的磷酸盐缓冲液或ρΗ7· 4 9. O的Tris-HCl缓冲液。
3.如权利要求I所述的方法,其特征在于所述缓冲液中底物初始浓度为O.8 30g/L。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于所述缓冲液中底物初始浓度为I 20g/L。
5.如权利要求I所述的方法,其特征在于所述缓冲液中还添加有10 50g/L的辅助底物甘油。
6.如权利要求I所述的方法,其特征在于缓冲液中所述含酶菌体细胞各自添加量以湿重计分别为10 50g/L。
7.如权利要求I所述的方法,其特征在于转化反应结束后,转化液用HCl将pH调至1.0,经こ酸こ酯萃取后,减压蒸发,将得到的固体溶解于苯或こ酸こ酷,进行重结晶,析出的晶体过滤后,置于蒸发皿中干燥,得到光学纯的α-羟酸。
8.一株产(R)-酮酸还原酶菌株-葡萄酿酒酵母(Saccharomyces ellipsoideus)ZJB111,保藏于中国典型培养物保藏中心,地址中国,武汉,武汉大学,邮编430072,保藏编号CCTCC No M 2011393,保藏日期2011年11月13日。
全文摘要
本发明提供了一种双菌耦联催化外消旋α-羟酸生产手性α-羟酸的方法,所述方法包括以式(I)所示的α-羟酸外消旋体为底物,以(S)-α-羟酸脱氢酶和(R)-酮酸还原酶为催化剂,在20~50℃、pH 6.0~9.0缓冲液中进行反应10~48小时,制得相应(R)-α-羟酸;本发明以外消旋α-羟酸为底物,通过生物转化法去消旋化合成手性α羟酸,反应条件温和,对环境的污染少,减少了中间产物的提取步骤,产率和对应体过量值较高,分别达到90%和99%以上。
文档编号C12R1/41GK102660624SQ201210109160
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月13日 优先权日2012年4月13日
发明者张雅琴, 沈寅初, 薛亚平, 郑裕国 申请人:浙江工业大学
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