专利名称：一种花生抗氧化肽的制备工艺的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及花生抗氧化肽的制备工艺，属于食品蛋白加工领域。
背景技术：
人的衰老和许多疾病与自由基有关，食品在储运过程中易发生脂质氧化变质，因此，需要抗氧化剂来清除自由基和抑制脂质过氧化。由于合成抗氧化剂对人体健康存在潜在危害，于是，人们逐渐把目光转向天然抗氧化剂。抗氧化肽具有清除各种自由基，抑制脂肪氧合酶活力和抑制脂质过氧化链式反应等抗氧化功效，能在一定程度上消除机体内多种生理功能障碍，延缓机体衰老，减少各种老年性疾病发生，且可以阻止食品氧化变质，提高食品稳定性和延长食品贮藏期。因此，抗氧化肽成为近年来食品科学、营养学和预防医学等学科的研究热点之一。花生为豆科植物花生的种子，是世界上主要油料资源之一。花生蛋白质含量为 25 36%，是一种营养价值较高的植物蛋白，其生物价为58，含18种氨基酸，包括8种必需氨基酸。因此，酶解花生蛋白制备抗氧化肽的研究及其产品开发可以充分利用花生蛋白资源，拓展花生精深加工的领域。尽管一些研究者对花生蛋白源的抗氧化肽进行了一定研究，但是多数集中在由花生蛋白粉先制备花生分离蛋白，再由分离蛋白经酶水解制备花生抗氧化肽。这样不但增加了操作步骤，而且由于碱提酸沉法制备花生分离蛋白过程中引入了过多的酸碱，使得花生蛋白易变性，且增加了后续分离、纯化花生抗氧化肽的成本。本发明拟采用Viscozyme L，在其最适合水解花生蛋白粉工艺条件下，预先酶解花生蛋白粉，可以分解细胞壁、降解碳水化合物类，使花生蛋白质充分暴露于溶液中，有利于后续蛋白酶酶解，提高酶解效率，降低成本，为花生抗氧化肽的开发利用提供新的途径和理论基础。
发明内容
本发明的目的是提供具有较好功能性质和抗氧化活性的花生抗氧化肽的制备工艺。为达到上述目的，本发明采用以下步骤
低变性脱脂花生蛋白粉中加入蒸馏水，搅拌均勻，超声波中分散溶解，得到花生蛋白粉悬浮液；调节花生蛋白粉悬浮液的PH值，加入复合植物水解酶Viscozyme L，在恒温水浴振荡器中酶解，得到酶解液；调节酶解液的PH值，加入蛋白酶，在恒温水浴振荡器中酶解，灭酶，立即冷却到室温，离心，冷冻干燥得到花生抗氧化肽。具体来说，所述的方法如下
(1)低变性脱脂花生蛋白粉中加入蒸馏水，搅拌均勻，超声波中分散溶解，得到花生蛋白粉悬浮液；
(2)调节花生蛋白粉悬浮液的pH值，加入复合植物水解酶ViscozymeL，在恒温水浴振荡器中酶解，得到酶解液；(3)调节酶解液的pH值，加入蛋白酶，在恒温水浴振荡器中酶解，灭酶，立即冷却到室温，离心，冷冻干燥得到花生抗氧化肽。优选地，步骤(1)所述的低变性脱脂花生蛋白粉与蒸馏水的质量与体积比例为 1:10 1:20，超声波功率为300w，超声波频率为^kHz,温度为45°C，时间为30min。优选地，步骤(2)所述的调节花生蛋白粉悬浮液的pH值所用的溶液为浓度 0. 5mol/L的盐酸溶液，pH值调节至5. 0，WAViscozyme L量为l(Tl2FBG/g花生蛋白粉(FBG为Viscozyme L的酶活单位)，恒温水浴振荡器的温度为45°C，旋转式振荡速度为 150r/min，酶解时间为2h。优选地，步骤(3)所述的调节花生蛋白粉Viscozyme L酶解液的pH值所用的溶液为1. 2mol/L的氢氧化钠溶液，pH值调节至8. (Γ8. 5，蛋白酶为Alcalase (碱性蛋白酶)、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶以3:1.2:0.8比例混合的复合酶，蛋白酶的加入量为4500U/g花生蛋白粉(U为蛋白酶的酶活单位)，恒温水浴振荡器的温度为5(T60°C，旋转式振荡速度为 150r/min，酶解时间为9(Tl20min。灭酶的水浴温度为100°C，灭酶时间为20min，离心条件为 10°C，5000r/min 转速离心 15min。花生抗氧化肽产品具有较好的抗氧化活性，如清除DPPH自由基、清除羟自由基、 清除超氧阴离子自由基、铁还原力、钼还原力、铁离子螯合力、铜离子螯合力、抑制亚油酸过氧化能力、抗脂质体过氧化能力等。因此，它可以作为一种功能食品用于延缓机体衰老，预防“三高”疾病的发生，同时，也可以作为一种天然抗氧化剂用在食品工业中，防止食品因脂肪氧化而变质，提高食品货架期内的品质稳定性。此外，花生抗氧化肽产品还具有较好的功能性质，如乳化性、乳化稳定性、起泡性、泡沫稳定性、溶解性、吸水性、吸油性等。在食品加工过程中，它能赋予食品特有的加工特性，使终产品具有特殊的功能性质。花生抗氧化肽的制备为开发利用花生蛋白资源提供新的途径和理论基础。
具体实施例方式实施例1
低变性脱脂花生蛋白粉中加入蒸馏水，加入的比例为1:10 (g/mL)，用玻璃棒搅拌均勻，在超声波萃取仪中，在超声波功率300w，超声波频率^kHz,温度45°C的条件下，超声波分散溶解30min，得到低变性脱脂花生蛋白粉悬浮液；用浓度为0. 5mol/L的盐酸溶液调节低变性脱脂花生蛋白粉悬浮液的PH值至5. 0，加入复合植物水解酶Viscozyme L，加入量为10. 5FBG/g花生饼粕粉(FBG为Viscozyme L的酶活单位)，在恒温水浴振荡器中，以旋转式振荡方式，速度为150r/min，温度为45°C，恒温酶解池，得到花生蛋白粉Viscozyme L酶解液；用浓度为1. 2mol/L的氢氧化钠溶液调节花生蛋白粉Viscozyme L酶解液的pH值至 8. 2，加入Alcalase (碱性蛋白酶)、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶以3:1. 2:0. 8比例混合的复合酶4500U/g花生饼粕粉(U为蛋白酶的酶活单位)，在恒温水浴振荡器中，以旋转式振荡方式，速度为150r/min，温度为55°C，恒温酶解Mmin，酶解反应结束后，将酶解液放入100°C 恒温水浴中，灭酶20min，立即冷却到室温，得到花生蛋白粉蛋白酶酶解液，在10°C条件下， 以5000r/min转速离心15min，取上清液冷冻干燥得到花生抗氧化肽。该抗氧化肽的抗氧化活性如下清除DPPH自由基的IC5tl值为10. 33mg/mL,清除羟自由基的IC5tl值为4. 59mg/mL, 清除超氧阴离子自由基的IC5tl值为6. 98mg/mL，铁还原力的吸光值为0. 5时所需花生抗氧化肽的浓度为8. 37mg/mL，钼还原力的吸光值为0. 5时所需花生抗氧化肽的浓度为7. Ilmg/ mL,铁离子螯合力的IC5tl值为6. 47mg/mL,铜离子螯合力的IC5tl值为4. 58mg/mL,抑制亚油酸过氧化能力的IC5tl值为5. 34mg/mL抑制脂质过氧化能力的IC5tl值为5. 95mg/mL。功能性质如下乳化活性指数(EAI)为378. 48X 103m2/g，乳化稳定性指数(ESI)为39. 53min，起泡性为95. 46%，起泡稳定性为81. 23%，溶解度为99. 78%，吸水性2. 56g/g，吸油性2. 04g/g。实施例2
低变性脱脂花生蛋白粉中加入蒸馏水，加入的比例为1:15 (g/mL)，用玻璃棒搅拌均勻，在超声波萃取仪中，在超声波功率300w，超声波频率^kHz,温度45°C的条件下，超声波分散溶解30min，得到低变性脱脂花生蛋白粉悬浮液；用浓度为0. 5mol/L的盐酸溶液调节低变性脱脂花生蛋白粉悬浮液的PH值至5. 0，加入复合植物水解酶Viscozyme L，加入量为11. 5FBG/g花生饼粕粉(FBG为Viscozyme L的酶活单位)，在恒温水浴振荡器中，以旋转式振荡方式，速度为150r/min，温度为45°C，恒温酶解池，得到花生蛋白粉Viscozyme L 酶解液；用浓度为1. 2mol/L的氢氧化钠溶液调节花生蛋白粉Viscozyme L酶解液的pH值至8. 45，加入Alcalase (碱性蛋白酶)、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶以3:1.2:0.8比例混合的复合酶4500U/g花生饼粕粉(U为蛋白酶的酶活单位)，在恒温水浴振荡器中，以旋转式振荡方式，速度为150r/min，温度为58. 5°C，恒温酶解102min，酶解反应结束后，将酶解液放入100°C恒温水浴中，灭酶20min，立即冷却到室温，得到花生蛋白粉蛋白酶酶解液，在10°C 条件下，以5000r/min转速离心15min，取上清液冷冻干燥得到花生抗氧化肽。该抗氧化肽的抗氧化活性如下清除DPPH自由基的IC5tl值为7. 36mg/mL,清除羟自由基的IC5tl值为 2. 89mg/mL,清除超氧阴离子自由基的IC5tl值为4. 66mg/mL,铁还原力的吸光值为0. 5时所需花生抗氧化肽的浓度为5. 12mg/mL，钼还原力的吸光值为0. 5时所需花生抗氧化肽的浓度为3. ^mg/mL，铁离子螯合力的IC5tl值为4. 21mg/mL，铜离子螯合力的IC5tl值为1. 63mg/ mL，抑制亚油酸过氧化能力的IC5tl值为2. 77mg/mL抑制脂质过氧化能力的IC5tl值为2. 15mg/ mL。功能性质如下乳化活性指数(EAI)为390. 12X 103m2/g，乳化稳定性指数(ESI)为 40. 05min,起泡性为96. 25%，起泡稳定性为82. 34%，溶解度为99. 58%，吸水性3. 09g/g,吸油性 2. 69g/g。实施例3
低变性脱脂花生蛋白粉中加入蒸馏水，加入的比例为1:20 (g/mL)，用玻璃棒搅拌均勻，在超声波萃取仪中，在超声波功率300w，超声波频率^kHz,温度45°C的条件下，超声波分散溶解30min，得到低变性脱脂花生蛋白粉悬浮液；用浓度为0. 5mol/L的盐酸溶液调节低变性脱脂花生蛋白粉悬浮液的PH值至5. 0，加入复合植物水解酶Viscozyme L，加入量为10. 8FBG/g花生饼粕粉(FBG为Viscozyme L的酶活单位)，在恒温水浴振荡器中，以旋转式振荡方式，速度为150r/min，温度为45°C，恒温酶解池，得到花生蛋白粉Viscozyme L酶解液；用浓度为1. 2mol/L的氢氧化钠溶液调节花生蛋白粉Viscozyme L酶解液的pH值至 8. 36，加入Alcalase (碱性蛋白酶)、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶以3 1. 20. 8比例混合的复合酶4500U/g花生饼粕粉(U为蛋白酶的酶活单位)，在恒温水浴振荡器中，以旋转式振荡方式，速度为150r/min，温度为53°C，恒温酶解lHmin，酶解反应结束后，将酶解液放入100°C 恒温水浴中，灭酶20min，立即冷却到室温，得到花生蛋白粉蛋白酶酶解液，在10°C条件下， 以5000r/min转速离心15min，取上清液冷冻干燥得到花生抗氧化肽。该抗氧化肽的抗氧化活性如下清除DPPH自由基的IC50值为5. 21mg/mL，清除羟自由基的IC50值为2. 80mg/mL, 清除超氧阴离子自由基的IC5tl值为3. 25mg/mL，铁还原力的吸光值为0. 5时所需花生抗氧化肽的浓度为4. 12mg/mL，钼还原力的吸光值为0. 5时所需花生抗氧化肽的浓度为2. 09mg/ mL，铁离子螯合力的IC5tl值为2. 5%ig/mL，铜离子螯合力的IC5tl值为1. 8%ig/mL，抑制亚油酸过氧化能力的IC5tl值为1. 91mg/mL抑制脂质过氧化能力的IC5tl值为1. 58mg/mL。功能性质如下乳化活性指数(EAI)为374. 37X 103m2/g，乳化稳定性指数(ESI)为37. 96min，起泡性为97. 42%，起泡稳定性为83. 04%,溶解度为99. 66%，吸水性3. 36g/g，吸油性3. 25g/g。
权利要求
1.一种花生抗氧化肽的制备工艺，包括以下步骤(1)低变性脱脂花生蛋白粉中加入蒸馏水，搅拌均勻，超声波中分散溶解，得到花生蛋白粉悬浮液；(2)调节花生蛋白粉悬浮液的pH值，加入复合植物水解酶ViscozymeL，在恒温水浴振荡器中酶解，得到酶解液；(3)调节酶解液的pH值至8.(Γ8. 5，加入碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶以 3 1. 2 0. 8比例混合的复合酶，在恒温水浴振荡器中酶解，灭酶，立即冷却到室温，离心，冷冻干燥得到花生抗氧化肽。
2.根据权利要求1所述的花生抗氧化肽的制备工艺，其特征在于，步骤(1)所述的低变性脱脂花生蛋白粉与蒸馏水的质量与体积比例为l:l(Tl:20，超声波功率为300w，超声波频率为^kHz,温度为45°C，时间为30min。
3.根据权利要求1所述的花生抗氧化肽的制备工艺，其特征在于，步骤(2)所述的调节花生蛋白粉悬浮液的PH值所用的溶液为浓度0. 5mol/L的盐酸溶液，pH值调节至5.0，加入 Viscozyme L量为l(Tl2FBG/g花生蛋白粉，恒温水浴振荡器的温度为45°C，旋转式振荡速度为150r/min，酶解时间为浊。
4.根据权利要求1所述的花生抗氧化肽的制备工艺，其特征在于，步骤(3)所述的调节花生蛋白粉Viscozyme L酶解液的pH值所用的溶液为1. 2mol/L的氢氧化钠溶液，蛋白酶的加入量为4500U/g花生蛋白粉，恒温水浴振荡器的温度为5(T60°C，旋转式振荡速度为 150r/min，酶解时间为9(Tl20min;灭酶的水浴温度为100°C，灭酶时间为20min，离心条件为 10°C，5000r/min 转速离心 15min。
全文摘要
本发明公开了一种花生抗氧化肽的制备工艺，包括以下步骤低变性脱脂花生蛋白粉中加入蒸馏水，搅拌均匀，超声波中分散溶解，得到花生蛋白粉悬浮液；调节花生蛋白粉悬浮液的pH值，加入复合植物水解酶ViscozymeL，在恒温水浴振荡器中酶解，得到酶解液；调节酶解液的pH值，加入蛋白酶，在恒温水浴振荡器中酶解，灭酶，立即冷却到室温，离心，冷冻干燥得到花生抗氧化肽。以本发明制得的花生抗氧化肽产品具有较好的乳化性、乳化稳定性、起泡性、泡沫稳定性、溶解性、吸水性、吸油性等功能性质和清除自由基、还原力、螯合金属离子能力、抑制脂质过氧化能力等抗氧化活性，适合工业化生产。
文档编号A23J3/34GK102232465SQ20111023373
公开日2011年11月9日 申请日期2011年8月16日 优先权日2011年8月16日
发明者于丽娜, 孙杰, 张会翠, 张初署, 朱凤, 杨庆利, 毕杰 申请人:山东省花生研究所