专利名称：流产嗜性衣原体外膜重组蛋白及其编码基因与应用的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及一种重组蛋白及其编码基因与应用，尤其涉及一种流产嗜性衣原体外膜蛋白的重组蛋白及其编码基因，以及在检测高敏感性流产嗜性衣原体方面的应用。
背景技术：
衣原体(Chlamydia)是一大群与革兰氏阴性菌有密切关系的专性真核细胞内寄生的原核生物。流产嗜性衣原体是比较常见的导致母猪流产的病原体，同时其致病动物种类也非常广泛，能够引起公猪和其它动物包括长期与患畜有接触的人群的各种疾病。流产嗜性衣原体所引起的各种动物和人的感染已使许多国家的畜牧业生产和公共卫生影响遭受了巨大的经济损失。进入九十年代，猪衣原体在国内外感染总体均呈上升趋势，规模化猪场的不断发展也伴随着猪衣原体病感染的不断上升，给集约化养猪业造成严重的经济损失。为保障畜禽与人类健康，最根本的解决办法就是能够找到衣原体的相关致病因子，模拟相关致病因子在衣原体感染过程中的递呈过程，研究该致病因子与其重组蛋白免疫在抵抗流产衣原体感染方面的作用，从而探索预防猪流产嗜性衣原体性感染的新途径，并在此基础上研究新的衣原体相关诊断方法。在衣原体诊断方面，目前应用最多的仍然是主要外膜蛋白(MOMP)和脂多糖 (LPS)。他们主要用作ELISA方法中的包被抗原，进行衣原体抗体检测，如法国IDVET公司的流产衣原体检测试剂盒。有时也作为荧光抗体进行衣原体抗原检测，如英国OXOID公司的衣原体荧光检测试剂盒。基于流产衣原体和沙眼衣原体全基因序列测序工作的顺利完成， 给相关研究者提供了更好的衣原体研究基因平台。
发明内容
本发明的目的是提供一种抗原性好，特异性强、敏感性高的流产嗜性衣原体外膜重组蛋白及其编码基因。本发明所提供的流产嗜性衣原体外膜重组蛋白，命名为PompD-N，是如下a)或 b)a)由序列表中SEQ ID No. 2自氨基末端第173-611位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)序列表中SEQ ID No. 2所示的氨基酸序列组成的蛋白质。为了使a)的PompD-N蛋白质便于纯化，可在由序列表中SEQ IDNo. 2自氨基末端第173-611位所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。表1.标签序列
权利要求
1.流产嗜性衣原体外膜重组蛋白，是如下a)或b)a)由序列表中SEQID No. 2自氨基末端第173-611位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)序列表中SEQID No. 2所示的氨基酸序列组成的蛋白质。
2.编码流产嗜性衣原体外膜重组蛋白的基因。
3.根据权利要求2所述的基因，其特征在于是如下a)或b)或c)a)其核苷酸残基序列如序列表中SEQID No. 1自5'末端第517-1825位所示；b)其核苷酸残基序列如序列表中SEQID No. 1所示；c)在严格条件下与a)或b)限定的DNA片段杂交且编码与流产嗜性衣原体外膜重组蛋白的DNA分子。
4.一种重组表达载体，含有以流产嗜性衣原体外膜重组蛋白PompD-N的编码基因为目的基因的表达盒。
5.含有权利要求4所述重组表达载体的转基因细胞系及重组菌。
6.权利要求1所述流产嗜性衣原体外膜重组蛋白、权利要求2或3所述基因在检测流产嗜性衣原体中的应用。
7.流产嗜性衣原体的检测方法，是以权利要求1所述的流产嗜性衣原体外膜重组蛋白为抗原，以间接ELISA方法检待测样本中的流产嗜性衣原体抗体。
8.以权利要求1所述的流产嗜性衣原体外膜重组蛋白为包被抗原的流产嗜性衣原体酶联免疫吸附试剂盒。
9.根据权利要求8所述的流产嗜性衣原体酶联免疫吸附试剂盒，其特征在于还含有酶结合物工作液、阳性对照、阴性对照、样品稀释液、IOX浓缩洗涤液、显色液A、显色液B和终止液。
10.根据权利要求9所述的流产嗜性衣原体酶联免疫吸附试剂盒，其特征在于所述酶结合物工作液为HRP标记兔抗猪IgG多克隆抗体，所述阳性对照为猪C. abortus标准阳性血清，所述阴性对照为猪标准阴性血清。
全文摘要
本发明涉及流产嗜性衣原体外膜重组蛋白及其编码基因与应用。本发明的流产嗜性衣原体外膜重组蛋白，是如下a)或b)a)由序列表中SEQ ID No.2自氨基末端第173-611位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)序列表中SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质。本发明的流产嗜性衣原体外膜重组蛋白具有良好的抗原性，特异性强。以流产嗜性衣原体外膜重组蛋白为抗原，以间接ELISA方法可以检测流产嗜性衣原体，该方法操作简便，检测快速，成本低。
文档编号C12N1/19GK102180953SQ20111004856
公开日2011年9月14日 申请日期2011年2月28日 优先权日2011年2月28日
发明者何诚, 凌勇, 杨君敬, 欧长波, 潘青 申请人:中国农业大学