专利名称：一种生物发光试剂的热稳定剂的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及微生物快速检测技术领域，是一种生物发光试剂的热稳定剂。
背景技术：
三磷酸腺苷(ATP)生物发光法基于萤火虫发光原理，在荧光素酶的催化作用下， ATP与荧光素反应释放荧光，通过测试发光强度来实现微生物的快速检测。因无需进行微生物培养、操作简单、检测速度快，是目前国内外研究较多的一种微生物检测方法。但由于生物发光试剂中的荧光素酶很不稳定，对温度极为敏感，即使在室温下也很快失活，导致生物发光试剂必须现配现用，从而限制了 ATP生物发光法的应用范围，不利于现场检测研究。因此开发一种生物发光试剂的热稳定剂，延长其在4°C下的保存时间，使用时更为方便快捷，具有极其重要的应用价值。
发明内容
本发明的目的是提供一种生物发光试剂的热稳定剂配方，减弱生物发光试剂对温度的敏感性，克服现有生物发光试剂不稳定的缺点，延长生物发光试剂的保存时间，改变现配现用的状况，从而适用于微生物现场快速检测。为实现上述目的，本发明的技术解决方案是一种生物发光试剂的热稳定剂，其包括缓冲液，至少一种多羟基化合物或糖类，和至少一种抗氧化剂。所述的生物发光试剂的热稳定剂，其所述多羟基化合物或糖类，是从山梨醇、丙三醇、甘露醇、木糖醇、核糖醇、蔗糖、木聚糖或海藻糖中至少选取一种。所述的生物发光试剂的热稳定剂，其所述抗氧化剂，是从还原性谷胱甘肽、抗坏血酸或水溶性维生素E中至少选取一种。所述的生物发光试剂的热稳定剂，其所述缓冲液，为含有15 150mmol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris) (pH 7. 8)，0. 1 8mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)的水溶液。所述的生物发光试剂的热稳定剂，其所述多羟基化合物或糖类，其浓度在 0. 01mol/L 5mol/L 之间。所述的生物发光试剂的热稳定剂，其所述抗氧化剂，浓度在0. lmmol/L 20mmol/ L之间选取。本发明的一种生物发光试剂的热稳定剂，大大延长了生物发光试剂的保存时间， 并不局限于ATP生物发光法的应用，还可应用于提高其他含酶试剂的热稳定性。
图1是根据Arrhenius公式推算的添加本发明热稳定剂后温度与失效时间的关系曲线图。
具体实施例方式本发明的一种生物发光试剂的热稳定剂，所使用的生物发光试剂的制备方法，请参照申请号为200610112410.0的已申请专利。其包括缓冲液，至少一种多羟基化合物或糖类，和至少一种抗氧化剂。下面结合具体实施例对本发明进行描述实施例1生物发光试剂的热稳定剂，优选了一套组分所述多羟基化合物或糖类，是从山梨醇、丙三醇、甘露醇、木糖醇、核糖醇、蔗糖、木聚糖或海藻糖中至少选取一种。实施例中优选海藻糖。所述抗氧化剂，是从还原性谷胱甘肽、抗坏血酸或水溶性维生素E中至少选取一种。实施例中优选还原性谷胱甘肽。所述缓冲液，为含有三羟甲基氨基甲烷(Tris) (pH 7.8)、乙二胺四乙酸(EDTA)的水溶液。具体包含以下组分海藻糖0. 3mol/L还原性谷胱甘肽2mmol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris) 25謹ol/L乙二胺四乙酸(EDTA)0. lmmol/L将配制好的稳定剂与生物发光试剂(申请号200610112410. 0)按体积比为1 2 的比例混合，分成5份，分别放置在观1、321、371、401、451下测试失效时间，根据 Arrhenius公式推算在4°C下的保存时间，关系曲线如图1所示。经推算，当发光效率>80% 时，添加热稳定剂的生物发光试剂在4°C下的保存时间T > 1年。而未添加热稳定剂的生物发光试剂的保存时间仅为7天。以上实施例只是为了说明本发明，而不是对本发明的限制。在上述说明的基础上， 可以对本发明作许多改进和改变。本发明可以有不同于上述的其它实现方式，选用其它试齐U、改变试剂浓度等，均应在本发明权利要求书的保护范围之内。
权利要求
1.一种生物发光试剂的热稳定剂，其特征在于，包括缓冲液，至少一种多羟基化合物或糖类，和至少一种抗氧化剂。
2.如权利要求1所述的生物发光试剂的热稳定剂，其特征在于，所述多羟基化合物或糖类，是从山梨醇、丙三醇、甘露醇、木糖醇、核糖醇、蔗糖、木聚糖或海藻糖中至少选取一种。
3.如权利要求1所述的生物发光试剂的热稳定剂，其特征在于，所述抗氧化剂，是从还原性谷胱甘肽、抗坏血酸或水溶性维生素E中至少选取一种。
4.如权利要求1所述的生物发光试剂的热稳定剂，其特征在于，所述缓冲液，为含有 15 150mM、pH值7. 8的三羟甲基氨基甲烷，0. 1 8mM乙二胺四乙酸的水溶液。
5.如权利要求1或2所述的生物发光试剂的热稳定剂，其特征在于，所述多羟基化合物或糖类，其浓度在O.Olmol/L 5mol/L之间。
6.如权利要求1或3所述的生物发光试剂的热稳定剂，其特征在于，所述抗氧化剂，浓度在0. Immol/L 20mmol/L之间选取。
全文摘要
本发明公开了一种生物发光试剂的热稳定剂，包含缓冲液、至少一种多羟基化合物或糖类和至少一种抗氧化剂，其中生物发光试剂的制备方法参见申请号为200610112410.0的已申请专利。该热稳定剂可减弱生物发光试剂对温度的敏感性，保护其活性，尤其是其中荧光素酶的活性，延长试剂在4℃下的保存时间，减少现配现用的繁琐，可拓展其应用范围，适用于微生物快速检测领域。
文档编号C12Q1/66GK102559847SQ201010612028
公开日2012年7月11日 申请日期2010年12月29日 优先权日2010年12月29日
发明者刘春秀, 刘晓红, 罗金平, 蔡新霞 申请人:中国科学院电子学研究所