专利名称：一种烟草多酚氧化酶的分离技术的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及一种烟草，具体涉及一种烟草多酚氧化酶的分离技术，属化工技术领域。
背景技术：
多酚氧化酶是植物中广泛存在的一类铜蛋白物质，通过分子氧催化酚类物质氧化到醌，随后发生醌的聚合而褐色化。在不同的植物中都有几种不同的多酚氧化酶。由于多酚氧化酶的主要作用是酶棕色化反应而导致水果、蔬菜的变味及营养物质的流失。多酚氧化酶不但在烟草的成长过程中担任重要作用，而且影响着烟叶的颜色和香味。由于多酚氧化酶潜在的应用背景及对食物的保鲜作用，近年来，对于从烟草中提取多酚氧化酶，正处于研制阶段。
发明内容
本发明的目的是为克服上述现有技术的不足之处，提供一种烟草多酚氧化酶的分离技术，该技术采用新鲜烟叶切碎、勻浆、冷冻，通过粗酶液的提取，经超声波处理，离心提取上清夜进行层析分离，浓缩后得成品。本发明是以如下技术方案实现的一种烟草多酚氧化酶的分离技术，其特征是 该技术包括如下步骤(1)粗酶液的提取，将新鲜烟叶切碎，在4°C条件下勻浆，加入冷丙酮和水， 在-18 °C条件下保存24h;(2)将步骤(1)经4层纱布过滤，用150ml冷丙酮洗涤3次，室温下干燥池后冷冻备用；(3)在上述丙酮干粉中加入200ml的磷酸缓冲液，PH值为6. 5，超声波处理lh，离心，上清液中加入30%摩尔浓度的硫酸铵，4°C条件下搅拌4h后离心，取上清液，取80%摩尔浓度的硫酸铵，4°C条件下搅拌24h后离心；(4)将上述溶液进行层析分离，其中多酚氧化酶经透析袋脱盐浓缩后，在_18°C条件下保存备用。本发明的优点是该技术采用新鲜烟叶切碎、勻浆、冷冻，通过粗酶液的提取，经超声波处理，离心提取上清夜进行层析分离，浓缩后得成品。该分离技术，工艺简单，流程合理，所得多酚氧化酶可广泛用于医药、食品及相关领域。
具体实施例方式实施例、一种烟草多酚氧化酶的分离技术，其特征是该技术包括如下步骤(1)粗酶液的提取，将新鲜烟叶切碎，在4°C条件下勻浆，加入冷丙酮和水， 在-18 °C条件下保存24h;
(2)将步骤⑴经4层纱布过滤，用150ml冷丙酮洗涤3次，室温下干燥2h后冷冻备用；(3)在上述丙酮干粉中加入200ml的磷酸缓冲液，PH值为6. 5，超声波处理lh，离心，上清液中加入30%摩尔浓度的硫酸铵，4°C条件下搅拌4h后离心，取上清液，取80%摩尔浓度的硫酸铵，4°C条件下搅拌24h后离心；(4)将上述溶液进行层析分离，其中多酚氧化酶经透析袋脱盐浓缩后，在_18°C条件下保存备用。
权利要求
1. 一种烟草多酚氧化酶的分离技术，其特征是该技术包括如下步骤(1)粗酶液的提取，将新鲜烟叶切碎，在4°c条件下勻浆，加入冷丙酮和水，在-18°c条件下保存Mh ；(2)将步骤(1)经4层纱布过滤，用150ml冷丙酮洗涤3次，室温下干燥池后冷冻备用；(3)在上述丙酮干粉中加入200ml的磷酸缓冲液，PH值为6.5，超声波处理lh，离心，上清液中加入30%摩尔浓度的硫酸铵，4°C条件下搅拌4h后离心，取上清液，取80%摩尔浓度的硫酸铵，4°C条件下搅拌24h后离心；(4)将上述溶液进行层析分离，其中多酚氧化酶经透析袋脱盐浓缩后，在_18°C条件下保存备用。
全文摘要
本发明涉及一种烟草，具体涉及一种烟草多酚氧化酶的分离技术，属化工技术领域。该技术采用新鲜烟叶切碎、匀浆、冷冻，通过粗酶液的提取，经超声波处理，离心提取上清夜进行层析分离，浓缩后得成品。该分离技术，工艺简单，流程合理，所得多酚氧化酶可广泛用于医药、食品及相关领域。
文档编号C12N9/02GK102477413SQ20101057181
公开日2012年5月30日 申请日期2010年11月25日 优先权日2010年11月25日
发明者张晓雷 申请人:张晓雷