专利名称：一种防治螺旋粉虱的微生物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及微生物技术领域，具体地说是一种微生物及其制备方法。
背景技术：
螺旋粉虱属于同翅目Homoptera，粉虱科Homoptera，复孔粉虱属Aleyrodidae，是 一种危险性入侵害虫，正向世界各热带地区扩散。现在已经传入到亚洲、非洲、欧洲、美洲， 大洋洲的40多个国家和地区。2006年在中国海南陵水县椰林镇首次发现，通过调查发现这 种粉虱几乎已遍布海南各市县。螺旋粉虱的寄主植物广泛，已经报道的寄主植物多达95科 295属481种，能够危害包括蔬菜、果树、观赏植物和行道树等的重要害虫，螺旋粉虱成虫、 若虫均可造成危害，该虫所造成的产量损失可高达73% 80%，严重时可造成绝收。螺旋 粉虱为害广，繁殖快，给人们造成严重损失，防治也比较困难。鉴于螺旋粉虱为害的严重性， 国内外对该虫开展了药剂防治、生物防治等防治研究。当前主要以化学防治为主，但由于螺 旋粉虱为害的特殊性，寄主植物有高大乔木不易施药，有行道树和城市绿化苗木等施药易 于造成环境污染以及蔬菜花卉等使用化学农药对人体安全等原因，有鉴于此，人们在积极 研究使用生物防治手段来对该虫进行防控。用该虫的病原菌进行大规模应用是防治该虫的 一种有效方法。我们从该虫的自然感染死亡群体中分离筛选出一株病原菌，具有很高的杀 虫活性，经鉴定为Lecanicillium. sp.，目前还未见用该菌株进行螺旋粉虱防治的报道。
发明内容
为了防治新入侵的昆虫螺旋粉虱，本发明的目的是提供一株轮枝菌菌株 HNL20090101 (Lecanicillium sp.)，它具有很高的对螺旋粉虱的杀虫能力；并提供一种利 用该菌株进行固态发酵生产大量孢子的方法。本发明提供的轮枝菌菌株其特征在于该菌株是从虫生真菌自然感染的螺旋粉 虱的虫体上分离得到的野生菌株，将野生菌株回接到螺旋粉虱，从染病的螺旋粉虱再分离 得到复壮的轮枝菌菌株，本研究分离筛选菌株采用选择性培养基筛选法。该菌种属于轮枝 菌属(Lecanicillium sp.)，2010年10月19日菌种保藏于北京市朝阳区北辰西路中国 科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC N0. 4246。该菌株的 18s rDNA 与 Lecanicillium saksenae 菌株的相似性为 99. 48%，其 DNA 序列已递交到GenBank，可通过序列号查看。本发明用于防治螺旋粉虱具有明显效果。本发明的轮枝菌的形态特征在于，在PDA培养基上培养7天以后，菌落圆形， 平铺，白色，气生菌丝绒毛状致密如絮。实施例1 本发明的菌株HNL20090101对螺旋粉虱不同龄期若虫致病力测定。取培养的本发明菌株HNL20090101新鲜孢子，用适量的0. 吐温配制成孢子浓 度为IX IO7个/mL的孢子悬浮液，供试虫为采自番石榴叶片上的寄生为害的螺旋粉虱若虫，分别挑取螺旋粉虱的一龄、二龄、三龄和四龄若虫，每个叶片上均保留同一龄期的若虫， 剔除其余龄期的若虫供试验用。采用液浸法进行菌株致病力测定，浸液时间为30秒，对照 试验为加入等量吐温的蒸馏水，试验有三个重复，处理完毕后的供试虫在培养。统计 数据并计算虫口死亡率。试验结果见表1，从表中可以看出该菌株对螺旋粉虱若虫各龄期 均有防治效果，对二龄、三龄和四龄虫效果较好，室内防治效果分别达到88. 9%，99. 16%和 93. 99%。表1HNL20090101菌株对的不同龄期螺旋粉虱若虫的室内毒力测定
权利要求
1.一株轮枝菌菌株，其特征在于从虫生真菌自然侵染的螺旋粉虱分类获得的野生 菌株，将该菌株回接到螺旋粉虱复壮获得HNL20090101菌株，再通过单孢分离方法获 得纯化菌株，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，编号为 CGMCCN0. 4246 ο
2.根据权利1所述的菌株，其特征在于用于防治螺旋粉虱。
3.一种利用权利要求1所述菌株生产孢子的方法，其特征在于孢子制备采用液体和 固体两次发酵方法生产，以含大米、黄豆粉、谷壳为固态发酵的主要成分，其孢子产量可达 1. OX IO9 个/g。
全文摘要
本发明属于微生物技术领域，本发明提供一种微生物及其制备方法。其特征在于它是从自然感染的螺旋粉虱上分离获得的野生菌株，通过回接复壮和单孢分离技术分离纯化后获得纯菌，其保藏登记号为CGMCC NO.4246，本发明的菌株对螺旋粉虱若虫具有高毒性，可以用来防治农作物、花卉和行道树等寄主植物上的螺旋粉虱为害。本发明提供的孢子制备方法采用液体和固体两次发酵方法生产，以大米、黄豆粉、谷壳为固态发酵的主要成分，其孢子产量可达1.0×109个/g。
文档编号C12N1/14GK102071147SQ20101055402
公开日2011年5月25日 申请日期2010年11月23日 优先权日2010年11月23日
发明者代鹏, 张敬宝, 张方平, 牛黎明, 符悦冠, 贲庆贺, 韩冬银, 黄武仁 申请人:中国热带农业科学院环境与植物保护研究所