专利名称：细胞核酸释放剂的利记博彩app
技术领域：
本发明专利属核酸快速提取技术；释放剂可使细胞核酸和细胞内细菌或病毒核酸 同时释放出来，在蛋白固化剂的作用下，核酸和蛋白分离，实现细胞和细胞内微生物核酸快 速提取的目的。
背景技术：
目前国内外市场化细胞核酸提取均采用细胞裂解后在进行核酸提取和纯化的方 法，对细胞内存在的细菌或病毒核酸的提取，多先裂解细胞，然后在根据细菌或病毒核酸提 取的程序进行工作，步骤多，费时费工，且容易污染。简化操作步骤、提高实验效率是市场所
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发明内容
我们根据细胞膜结构特点和蛋白固化剂作用的机制，研发了“细胞核酸释放剂”， 可以在一管内同时进行细胞裂解、细胞内细菌病毒裂解，释放细胞核酸和细胞内细菌病毒 核酸，在蛋白固化剂的作用下，蛋白凝固与核酸分离，采用高保真扩增技术，可同时对细胞 和细胞内的细菌、病毒进行多重PCR扩增。
具体实施例方式取100 μ 1全血，加入100 μ 1红细胞裂解液，离心(8000RPM)吸净上清残液及红细 胞部分(勿丢失离心力方向的白细胞部分)，加入20 μ 1细胞悬浮液和20 μ 1细胞核酸释放 剂(CNR)混勻，37°C，30s — 99°C，7min — 37°C，30s, 13000RPM 离心 5 分钟，取上清液直接进 行PCR扩增。
权利要求
制备好的白细胞、碾碎的组织细胞或分离出的培养细胞，用细胞温化液制成悬液。
2.细胞悬液与等量的CNR混勻，直接进行温处理，37°C，30s—99°C，7min —37°C， 30s，13000RPM离心5分钟，取上清液直接进行PCR扩增。
3.无需去除细胞蛋白的纯化过程，省时省力，所得核酸纯度高完全满足各类PCR实验。
全文摘要
本项目将细胞裂解物质、蛋白变性剂和核酸提取试剂按一定比例混匀，制备出细胞核酸释放剂，该物质可直接裂解血细胞、组织细胞或培养细胞，或细胞内的病原微生物，在高温作用下使蛋白质凝集细胞核酸和细胞内病毒核酸同时裂解释放，通过高速离心使各种蛋白和细胞成分与核酸分离，上清液直接参与PCR反应，在特异性引物或探针的作用下扩增目的基因片段。具有快速、简单、纯度高、无污染等优点。
文档编号C12N15/10GK101955928SQ20091015753
公开日2011年1月26日 申请日期2009年7月13日 优先权日2009年7月13日
发明者不公告发明人 申请人:王海滨;杨利