专利名称：高产红曲色素紫色红曲霉Mp-41菌株及其应用的利记博彩app
技术领域：
本发明属于生物技术食品领域，涉及一株固体发酵高产色素紫色红曲霉 (Monascus purpureus)Mp-41菌株及其用途。
背景技术：
食用色素是食品工业、制药工业和日化工业不可缺少的一类添加剂，按其来源可 分为天然色素和制备色素两部分。近年来，由于安全问题，部分制备色素被限制使用，因此 开发利用无毒的天然色素日益受到人们的重视。利用食品安全级微生物制备天然色素是一 种比较理想的途径。 红曲色素以粮食为原料，是红曲霉培养过程中产生的次生代谢产物，具有着色、防 腐、保健和药用价值。基本原料充足，可以满足常年大规模生产的需要。 一般情况下，以大 米为原料，生产红曲米的回收率可达50% 60% ，红曲米的色素含量可达5% 10% ，而其 他天然色素在原料中的含量则大多在3%以下。 红曲霉(Monasus spp.)是一类十分重要的药用真菌，系中药红曲的基原菌。用于 食品生产的红曲霉主要种类有烟色红曲霉，紫色红曲霉和红色红曲霉等，食品工业上作为 食物及饮料加色剂，如制作红腐乳、酿酒、松糕，更可以用作唇膏加色等。使用红曲色素染色 的食物还具有消炎祛肿的特别功效。红曲色素属于聚酮类色素，是红曲霉代谢过程中产生 的一系列聚酮类化合物的混合物。红曲色素中已探明的结构有IO种，其中6种为醇溶性色 素，4种为水溶性色素。醇溶性色素有红斑素、红曲红素、红曲素、红曲黄素、红斑胺和红曲红 胺等。水溶性色素有N-戊二酰基红斑胺、N-戊二酰基红曲红胺、N-葡糖基红斑胺和N-葡 糖基红曲红胺等。这些色素中具有应用价值的主要是醇溶性的红曲素、红斑素和红曲红素。
发明内容
针对市场上红曲色素需求的日益增长，而传统生产红曲米工艺中采用的红曲霉菌
株产生色素水平较低等问题。本发明的一个目的是提供一种从自然环境不同场所筛选的高
产色素紫色红曲霉Mp-41菌株，该菌株可用于红曲色素的制备。本发明的第二个目的是提
供上述的高产红曲色素紫色红曲霉Mp-41菌株应用于红曲色素的制备。 为了实现上述的第一个目的，本发明采用了以下的技术方案 高产红曲色素紫色红曲霉Mp-41菌株，该紫色红曲霉Mp-41菌株的保藏编号为
CCTCC N0 :M209133，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉武汉大
学，保藏日期为2009年6月25日，分类命名为紫色红曲霉Mp-41 Monascus purpureus
Mp-41。该紫色红曲霉Mp-41菌株在麦芽汁琼脂培养基上25。C培养7d，菌落直径22mm，平
坦，气生菌丝稀疏短小，丝绒状，鹿皮褐色；25d直径达60mm，落叶棕色；显微镜观察菌丝光
滑，有隔膜，含油滴，有深浅不一的红褐色色素颗粒；分生孢子球形或倒梨形，单生或成链；
闭囊壳球形，透明或红色，囊内孢子可见，子囊孢子椭球形6 7X4. 5iim。 为了实现上述的第二个目的，本发明的高产红曲色素紫色红曲霉Mp-41菌株应用于红曲色素的制备。 高产红曲色素紫色红曲霉Mp-41菌株应用于红曲色素制备的方法，该方法包括以
下的步骤①取权利要求1所述的紫色红曲霉Mp-41菌株保藏菌种，在无菌条件下，挑取少
许菌种转接到PDA培养基上，活化培养；②挑取活化好的菌种到种子液中，培养发酵种子；
③在以大米为主要原料的固体培养基上接入上述发酵种子液，进行固体发酵；④发酵完毕，
用乙醇萃取醇溶性红曲色素。 作为优洗，该方法包括以下的步骤 ①取权利要求1所述的紫色红曲霉Mp-41菌株保存菌种，在无菌条件下接种针挑 少许菌种，转接于PDA培养基上，3(TC活化培养7d ; ②用打孔器打取PDA平板上的红曲霉菌落转接到种子培养基上，摇床转速180r/ min，温度为3(TC，发酵3d作为固体发酵的种子液； ③将大米浸泡，沥干后灭菌，无菌水调节初始含水量为30% 40%，接入1% 5X的种子培养液，3(TC下培养14d，烘干后制成红曲米； ④红曲米研磨成粉，加入乙醇溶液，摇匀后调节pH为8.0，加塞放入6(TC水浴保温 萃取2h，取出后冷却得色素提取液。 作为优选，上述的PDA培养基的配方如下马铃薯20 % ，葡萄糖2 % ，琼脂粉2% ， 水，p朋.0。 作为优选，上述的种子培养基的配方如下葡萄糖7%，谷氨酸钠0. 5%，酵母浸粉 0.3%，NaN03 0.2%，KH2P04 0. 1 %，MgS04 7H20 0.05%，KC1 0. 05%，FeS04 7H20 0.001%， p朋.0。 本发明由于采用了以上的技术方案，提供一种从自然环境不同场所筛选的高产色 素紫色红曲霉Mp-41菌株，该菌株可用于红曲色素的制备。Mp-41红曲霉菌株固体发酵制得 的红曲米产色价达4000-4900U/g，所生产的色素不存在安全上的隐患，能达到食品安全级。
图1为紫色红曲霉Mp-41菌株在MEA培养基上培养7d菌落图。
图2为紫色红曲霉Mp-41菌株的菌丝和闭囊壳图。 图3为紫色红曲霉Mp-41菌株制备的红曲米(左)、红曲粉(中)和红曲色素提取 液(右)。
具体实施例方式
实施例l从红曲米中筛选紫色红曲霉Mp-41菌株 本发明紫色红曲霉Mp-41菌株分离自自然发酵的红曲米。筛选获得的Mp-41保存 于4t:冰箱，备用。用PDA固体斜面培养基进行菌种活化传代，每4周转接一次；菌种使用 之前需活化。 上述紫色红曲霉Mp-41菌株在麦芽汁琼脂(MEA)培养基上25。C培养7d，菌落直径 22mm，平坦，气生菌丝稀疏短小，丝绒状，鹿皮褐色(附图1) ;25d直径达60mm，落叶棕色。
显微镜观察菌丝光滑，有隔膜，含油滴，有深浅不一的红褐色色素颗粒(附图2)。 分生孢子球形或倒梨形，单生或成链，直径6 8 ii m。闭囊壳球形，透明或红色，囊内孢子可
4见，子囊孢子椭球形6 7 X 4. 5 ii m，淡红色(附图2)。 实施例2紫色红曲霉Mp-41菌株用于制备红曲色素的方法( — )培养基 PDA培养基马铃薯20X，葡萄糖2X，琼脂粉2X，水，pH6.0。 种子培养基葡萄糖7%，谷氨酸钠0. 5%，酵母浸粉0. 3%， NaN03 0.2%，KH2P04
0.1%， MgS04 7H20 0. 05 % ， KC1 0. 05 % ， FeS04 7H20 0. 001 % ， p朋.0 。 固体培养基25g粳米浸泡8h装入250mL锥形瓶。 (二)红曲色素制备方法 取紫色红曲霉Mp-41菌株保存菌种，在无菌条件下(超净工作台)接种针挑少许 菌种，转接于PDA培养基上，3(TC活化培养7d。用打孔器打取PDA平板上的红曲霉菌落(直 径8mm，2块)转接到种子培养基上，摇床转速180r/min，温度为3(TC，发酵3d作为固体发 酵的种子液。将25g大米浸泡8h，沥干后装到250mL锥形瓶中，12rC蒸汽灭菌20min，无菌 水调节初始含水量为30% 40%，接入3X的种子培养液，3(TC下培养14d，烘干后制成红 曲米(附图3左)。
(三)红曲色素提取方法 将红曲米研磨成粉(附图3中)，准确称量O. 500g红曲米粉放入50mL带刻度试管， 加入75%乙醇至25mL，摇匀后调节pH为8. O，加塞放入6(TC水浴保温萃取2h，取出后冷却 得色素提取液(附图3右)，用普通定性滤纸过滤入具塞试管，吸取0. 5mL滤液放入25mL刻 度试管或容量瓶中，加入75X乙醇定容至25mL。用lcm比色皿以75%乙醇作空白对照，用 紫外分光光度计测定样品萃取稀释液505nm的吸光度，红曲米色价二吸光度X稀释倍数。
本发明所涉及的紫色红曲霉Mp-41在上述方法下制的红曲米色价可达 4000-4900U/g，色泽暗红，有红曲特有的曲香，色素光热稳定性较好(附图3左)。
权利要求
高产红曲色素紫色红曲霉Mp-41菌株，其特征在于该紫色红曲霉Mp-41菌株的保藏编号为CCTCC NOM209133。
2. 根据权利要求1所述的高产红曲色素紫色红曲霉Mp-41菌株，其特征在于该紫色红曲霉Mp-41菌株在麦芽汁琼脂培养基上25t:培养7d，菌落直径22mm，平坦，气生菌丝稀疏短小，丝绒状，鹿皮褐色；25d直径达60mm，落叶棕色；显微镜观察菌丝光滑，有隔膜，含油滴，有深浅不一的红褐色色素颗粒；分生孢子球形或倒梨形，单生或成链；闭囊壳球形，透明或红色，囊内孢子可见，子囊孢子椭球形6 7X4. 5iim。
3. 根据权利要求1所述的高产红曲色素紫色红曲霉Mp-41菌株应用于红曲色素的制备。
4. 根据权利要求l所述的高产红曲色素紫色红曲霉Mp-41菌株应用于红曲色素制备的方法，其特征在于该方法包括以下的步骤①取权利要求1所述的紫色红曲霉Mp-41菌株保藏菌种，在无菌条件下，挑取少许菌种转接到PDA培养基上，活化培养；②挑取活化好的菌种到种子液中，培养发酵种子；③在以大米为主要原料的固体培养基上接入上述发酵种子液，进行固体发酵；④发酵完毕，用乙醇萃取醇溶性红曲色素。
5. 根据权利要求4所述的高产红曲色素紫色红曲霉Mp-41菌株应用于红曲色素制备的方法，其特征在于该方法包括以下的步骤① 取权利要求1所述的紫色红曲霉Mp-41菌株保存菌种，在无菌条件下接种针挑少许菌种，转接于PDA培养基上，3(TC活化培养7d ;② 用打孔器打取PDA平板上的红曲霉菌落转接到种子培养基上，摇床转速180r/min，温度为3(TC，发酵3d作为固体发酵的种子液；③ 将大米浸泡，沥干后灭菌，无菌水调节初始含水量为30% 40%，接入1% 5%的种子培养液，3(TC下培养14d，烘干后制成红曲米；④ 红曲米研磨成粉，加入乙醇溶液，摇匀后调节pH为8. 0，加塞放入6(TC水浴保温萃取2h，取出后冷却得色素提取液。
6. 根据权利要求5所述的高产红曲色素紫色红曲霉Mp-41菌株应用于红曲色素制备的方法，其特征在于PDA培养基的配方如下马铃薯20% ，葡萄糖2% ，琼脂粉2% ，水，p朋.0。
7. 根据权利要求5所述的高产红曲色素紫色红曲霉Mp-41菌株应用于红曲色素制备的方法，其特征在于种子培养基的配方如下葡萄糖7 % ，谷氨酸钠0.5%，酵母浸粉0.3%，NaN03 0.2%，KH2P04 0. 1 % ， MgS04 7H20 0.05%，KC1 0. 05% ， FeS04 7H20 0. 001 % ， p朋.0。
全文摘要
本发明属于生物技术食品领域，涉及一株固体发酵高产色素紫色红曲霉(Monascuspurpureus)Mp-41菌株及其用途。高产红曲色素紫色红曲霉Mp-41菌株，该紫色红曲霉Mp-41菌株的保藏编号为CCTCC NOM209133。本发明提供一种从自然环境不同场所筛选的高产色素紫色红曲霉Mp-41菌株，该菌株可用于红曲色素的制备。Mp-41红曲霉菌株固体发酵制得的红曲米产色价达4000-4900U/g，所生产的色素不存在安全上的隐患，能达到食品安全级。
文档编号C12P1/02GK101724567SQ200910102278
公开日2010年6月9日 申请日期2009年9月10日 优先权日2009年9月10日
发明者叶砚, 嵇豪, 蒋冬花 申请人:浙江师范大学