专利名称：一种羊栖菜受精卵和胚胎保存方法
技术领域：
本发明涉及经济褐藻的培育，具体的说是一种羊栖菜受精卵和胚胎保存方法。
背景技术：
羊栖菜是雌雄异体的经济褐藻，受精率低，而且发育不同步，现阶段通常采用全人 工苗种培育方法，此方法使用发育性成熟的亲本种菜，或者是取自自然种群的个体，或者是 人工栽培的个体，或者是在人工培养系统中通过生物技术方法实现的雌雄亲本同步成熟， 采集受精卵，完成布苗过程。这些技术方法需要在采集了受精卵之后迅速完成布苗过程，以 便能够让受精卵在产生假根的时候已经附着在附着基上。因此，当需要完成跨地区异地育 苗和需要干露运输大量的种菜时，此方法会给实际生产带来很多的困难。
发明内容
本发明提供一种延缓发育过程、提高培育成功率的栖菜受精卵和胚胎保存方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为 保存方法将同步排放的卵子和精子在受精后的8-16小时内完成于低温0-8t:下 收集受精卵和胚胎，同时将收集的受精卵和胚胎在营养液中于低温0-8°C、0-500勒克斯下 保存即可；所述营养液中含NaN03 :l-10卯m， KH2P04 :0. 1-lppm，为海水配制。
所述同步排放的卵子和精子将羊栖菜雌雄亲本在光照强度1-5万勒克斯，光照 周期12-16小时，温度18-24度的条件下培养，并且24小时以内更换一次水，培养7_10天， 使得亲本实现同步排放卵子精子，待亲本同步排放卵子精子后12-24小时内将其收集。所
述羊栖菜雌雄亲本的雌雄比例为io : i。所述同步排放的卵子精子比例为i : io-ioo。所
述收集受精卵和胚胎时采用自然沉降或人工搅拌收集。 本发明所具有的优点 1.本发明在羊栖菜卵子受精后8-16小时内利用低温方法，将其在适宜的培养基 中培养继而保存受精卵和胚胎，这样可大幅度的延缓发育过程，使其在假根尚没有形成之 前完成异地跨地区运输从而进行苗种培育。 2.本发明实施对象羊栖菜是雌雄异体的经济褐藻，受精率低，而且发育不同步，本 发明利用同步受精技术获得自然脱落的受精卵和胚胎后，可以跨地区实现异地苗种培育， 提高成功率。同时本发明也适用于马尾藻属中其它的经济海藻具有相同的效果，如鼠尾藻 和铜藻。 3.采用本发明保存方法将极大的节省异地运输种菜所带来的麻烦，提高苗种培育 的成功率。
具体实施例方式
羊栖菜雌雄亲本的选取在人工栽培或者自然生长在潮间带的羊栖菜种群中选取 雌雄生殖托发育良好的雌雄亲本，选取亲本的季节应当是在自然成熟季节前的10-15天左右。 1)羊栖菜同步排放的卵子和精子的收集将羊栖菜雌雄亲本在光照强度1万勒克 斯，光照周期12小时，温度18度的条件下培养，并且24小时以内更换一次水，培养7天，使 得亲本实现同步排放卵子精子，待亲本同步排放卵子精子后12小时内将其收集；其中羊栖 菜雌雄亲本的雌雄比例为10 : 1。 2)保存将收集的同步排放的卵子精子进行受精，同步排放的卵子精子比例为
i : io。在受精后的8小时内，在低温ot:下受精卵和胚胎的收集，同时将收集的受精卵和
胚胎在过量的营养液中于低温(TC、500勒克斯下保存即可；所述收集受精卵和胚胎可采用 自然沉降和人工搅拌收集。所述营养液为Na冊3 :5卯m ;KH2P04 :0. 5ppm ;PH = 8. 0 ;消毒海水 配制。
应用例 2008年6月在我国浙江省洞头县采集了受精卵和胚胎，利用低温保存受精卵和胚 胎的技术方法，耗时16个小时，运输到青岛苗种培育基地，随后完成了布苗，取得了成功， 共培育了 4000万幼苗，幼苗成活率达到了 95%以上。
实施例2 1)羊栖菜同步排放的卵子和精子的收集将羊栖菜雌雄亲本在光照强度5万勒克 斯，光照周期16小时，温度24度的条件下培养，并且24小时以内更换一次水，培养8天，使 得亲本实现同步排放卵子精子，待亲本同步排放卵子精子后24小时内将其收集；其中羊栖 菜雌雄亲本的雌雄比例为10 : 1。 2)保存将收集的同步排放的卵子精子进行受精，同步排放的卵子精子比例为
i : ioo。在受精后的16小时内，在低温8t:下完成受精卵和胚胎的收集，同时将收集的受 精卵和胚胎在营养液中于低温8t:、0勒克斯下保存即可；所述收集受精卵和胚胎可采用自
然沉降和人工搅拌收集。所述营养液为NaN03 :lppm ;KH2P04 :0. lppm ;PH = 8. 0 ;消毒海水配 制。 实施例3 1)羊栖菜同步排放的卵子和精子的收集将羊栖菜雌雄亲本在光照强度3万勒克 斯，光照周期12小时，温度20度的条件下培养，并且24小时以内更换一次水，培养10天， 使得亲本实现同步排放卵子精子，待亲本同步排放卵子精子后20小时内将其收集；其中羊 栖菜雌雄亲本的雌雄比例为10 : 1。 2)保存将收集的同步排放的卵子精子进行受精，同步排放的卵子精子比例为
i : 50。在受精后的io小时内，于低温rc下完成受精卵和胚胎的收集，同时将收集的受精 卵和胚胎在营养液中于低温rc、2oo勒克斯下保存即可；所述收集受精卵和胚胎可采用自
然沉降和人工搅拌收集。所述营养液为NaN03 :3卯m ;KH2P04 :0. 8ppm ;PH = 8. 0 ;消毒海水配 制。 实施例4 1)羊栖菜同步排放的卵子和精子的收集将羊栖菜雌雄亲本在光照强度4万勒克 斯，光照周期14小时，温度22度的条件下培养，并且24小时以内更换一次水，培养6天，使 得亲本实现同步排放卵子精子，待亲本同步排放卵子精子后24小时内将其收集；其中羊栖 菜雌雄亲本的雌雄比例为10 : 1。
2)保存将收集的同步排放的卵子精子进行受精，同步排放的卵子精子比例为
i : io-ioo。在受精后的14小时内于低温5t:下完成受精卵和胚胎的收集，同时将收集的
受精卵和胚胎在营养液中于低温5°C、50勒克斯下保存即可；所述收集受精卵和胚胎可采用自然沉降和人工搅拌收集。所述营养液为NaN03 :8卯m ;KH2P04 :0. 9ppm ;PH = 8. 0 ;消毒海水配制。
权利要求
一种羊栖菜受精卵和胚胎保存方法，其特征在于将同步排放的卵子和精子在受精后的8-16小时内完成于低温0-8℃下收集受精卵和胚胎，同时将收集的受精卵和胚胎在营养液中于低温0-8℃、0-500勒克斯下保存即可；所述营养液中含NaNO31-10ppm，KH2PO40.1-1ppm，为海水配制。
2. 按权利要求1所述的羊栖菜受精卵和胚胎保存方法，其特征在于所述同步排放 的卵子和精子将羊栖菜雌雄亲本在光照强度1-5万勒克斯，光照周期12-16小时，温度 18-24度的条件下培养，并且24小时以内更换一次水，培养7-10天，使得亲本实现同步排放 卵子精子，待亲本同步排放卵子精子后12-24小时内将其收集。
3. 按权利要求2所述的羊栖菜受精卵和胚胎保存方法，其特征在于所述羊栖菜雌雄 亲本的雌雄比例为10 : 1。
4. 按权利要求1所述的羊栖菜受精卵和胚胎保存方法，其特征在于所述同步排放的 卵子精子比例为1 : 10-100。
5. 按权利要求1所述的羊栖菜受精卵和胚胎保存方法，其特征在于所述收集受精卵 和胚胎时采用自然沉降或人工搅拌收集。
全文摘要
本发明涉及经济褐藻的培育，具体的说是一种羊栖菜受精卵和胚胎保存方法。具体为将羊栖菜雌雄亲本在光照强度10000-50000勒克斯，光照周期12-16小时，温度18-24摄氏度的条件下培养，并且24小时以内更换一次水，培养7-10天，使得亲本实现同步排放卵子精子，待亲本同步排放卵子精子后12-24小时内收集受精卵，在受精后的8-16小时内，在0-8℃下完成受精卵和胚胎的收集，继而保存。本发明在羊栖菜卵子受精后8-16小时内利用低温方法，将其在适宜的培养基中培养，继而保存受精卵和胚胎，这样可大幅度的延缓发育过程，使其在假根尚没有形成之前完成异地跨地区运输从而进行苗种培育。
文档编号C12N5/04GK101760451SQ20081024954
公开日2010年6月30日 申请日期2008年12月23日 优先权日2008年12月23日
发明者张志怀, 张玉荣, 逄少军 申请人:中国科学院海洋研究所