专利名称：：一种新组分酵母菌培养基的研制方法
技术领域：
：本发明涉及一人工配制的微生物培养基，尤其是能够快速准确的测定各类食品、饮料中的酵母菌数，而研制一种良好的酵母菌培养基。
背景技术：
：配养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养物质，用以分离、培养、鉴定、保存各种微生物或积累其代谢产物。在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样，加之研究目的的不同，所以培养基的配制方法和原理也就不同。一般情况下，不同种类的培养基中，都会含有水分、碳源、能源、无机盐、生长因子等，只是相对含量会有差异。不同微生物对PH的要求和渗透压也不同。
发明内容本发明的目的是公开了一种能够快速准确的测定各类食品、饮料中的酵母菌数，而研制一种良好的酵母菌培养基。本发明的目的是这样实现的一种新组分酵母菌培养基的研制方法，其特征在于其重量配比为麦芽汁900--1100ml、酵母浸出粉5--8g、大豆蛋白胨11一13g、葡萄糖4—7g、可溶性淀粉7--12g、柠檬酸铁0.5—1.5g、乙酸锌0.3—0.8g、乙酸钠0.3—0.8g、琼脂粉18—22g。最佳重量配比为麦芽汁1000ml、酵母浸出粉7g、大豆蛋白胨12.5g、葡萄糖6g、可溶性淀粉10g、柠檬酸铁1g、乙酸锌0.5g、乙酸钠0.5g、琼脂粉20g。本发明的组分中麦芽汁本身就是酵母菌的天然培养基，含有较高的碳水化合物，其巿售替代产品有麦芽膏、麦芽粉、麦芽抽提物。酵母浸出粉是用酵母细胞水解制作的，它含有丰富的B族维生素，可想而知它最有利于酵母菌的生长繁殖，其巿售替代产品有酵母膏；大豆蛋白胨含有蛋白质、脂肪和促进酵母菌生长繁殖的大豆异黄酮；可溶性淀粉富含碳水化合物等。本发明的主要优点是各元素易得、价格低、营养丰富、易被酵母菌利用，所以酵母菌生长繁殖迅速。具体实施例方式一种新组分酵母菌培养基的研制方法，其特征在于其重量配比为麦芽汁900—1100ml、酵母浸出粉5—8g、大豆蛋白胨11一13g、葡萄糖4一7g、可溶性淀粉7—12g、柠檬酸铁0.5一1.5g、乙酸锌0.3--0.8g、乙酸钠0.3--0.8g、琼脂粉18—22g。最佳重量配比为麦芽汁1000ml、酵母浸出粉7g、大豆蛋白胨12.5g、葡萄糖6g、可溶性淀粉10g、柠檬酸铁1g、乙酸锌0.5g、乙酸钠0.5g、琼脂粉20g。实施例菌种i式验用啤酒酵母菌(SaccharmycesCerevisiae)和假丝酵母菌(CandidaSpp)由山东大学生命科学学院菌种室提供；白假丝酵母菌(Candidaalbicans)是实验室自己分离的。试剂和培养基麦芽汁由东营市信义集团公司啤酒厂提供；大豆蛋白胨(BR)、酵母浸出粉(BR)系北京双旋微生物培养基制品厂生产；葡萄糖(化学纯)是上海化学试剂采购供应站试剂厂生产；可溶性淀粉(化学纯)是四川化工地质队五七化工厂生产；柠檬酸铁(分析纯)是山东莱阳经济技术开发区精细化工厂生产；乙酸锌(分析纯)是北京化工厂生产；乙酸钠(分析纯)是温州市试剂化工厂生产，北京化学试剂公司经销的；琼脂粉由山东省疾病预防控制中心分装。孟加拉红培养基是山东省防疫站生产的；马铃薯葡萄糖培养基是实验室自制的。表1、酵母细胞养分含量Tab.1yeastcellnutrientcontent名称含量(％)均含量(％)水分253，5真蛋白424644核酸687矿物质787.5脂肪5.5碳水化合物303733.5合计100仪器控温控湿培养箱、L型涂布棒；方法正交试验设计利用正交表L9(34)设计正交试验，正交试验因素与水平见(表2)，据此设计出的正交试验见(表3)。表2正交试验因素与水平Tab.2factorandleveloftheorthogonalexperiment<table>complextableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>表3正交试验表<table>complextableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>培养基的制备按照正交试验表应制备9种培养基进行试验，这9种培养基暂命名为M1、M2……M9。M1培养基的配制如下量取去除啤酒花的麦芽汁1000ml,加入酵母浸出粉3g、大豆蛋白胨10g、葡萄糖6g、可溶性淀粉6g、柠檬酸铁1g、乙酸锌0.5g、乙酸钠0.5g、琼脂粉20g加热溶化，经1210G高压灭菌25分钟，待冷却至450C左右倾注成平板备用。M2至M9培养基的制作按正交试验表第310行里的组分(柠檬酸铁、乙酸锌、乙酸钠的量不变)依此制成。培养基各组分的确定将已知一定数量的酵母菌(啤酒酵母菌制成6X105菌悬液、假丝酵母菌制成6X105菌悬液)，各取菌悬液0.4ml，以灭菌的L型玻璃涂布棒依次接种到M1M9培养基上，放置于温度为280G，相对湿度为66%的控温控湿培养箱内，培养48h、72h，然后取出观察结果，看以上酵母菌在哪个配方的培养基上生长的最好。4MYSPA培养基的比较研究将已知一定数量酵母菌(同上)，以无菌操作取0.4ml接种到马铃薯葡萄糖培养基和孟加拉红培养基上，放置于温度为280C，相对湿度为66%的培养箱中，培养48h，取出观察结果并与MYSPA培养基的结果相比较。结果与分析通过比较发现，啤酒酵母菌和假丝酵母菌在M8培养基上生长旺盛，见(图1)、(图2)、(图3)，经查证M8培养基各组分为麦芽汁1000ml、酵母浸出粉7g、大豆蛋白胨12.5g、葡萄糖6g、可溶性淀粉10g、柠檬酸铁1g、乙酸锌0.5g、乙酸钠0.5g、琼脂粉20g，此培养基命名为MYSPA培养基。权利要求1.一种新组分酵母菌培养基的研制方法，其特征在于其重量配比为麦芽汁900--1100ml、酵母浸出粉5--8g、大豆蛋白胨11--13g、葡萄糖4--7g、可溶性淀粉7--12g、柠檬酸铁0.5—1.5g、乙酸锌0.3--0.8g、乙酸钠0.3--0.8g、琼脂粉18--22g。2、根据权利要求1所述的一种新组分酵母菌培养基的研制方法，其特征在于最佳重量配比为麦芽汁1000ml、酵母浸出粉7g、大豆蛋白胨12.5g、葡萄糖6g、可溶性淀粉10g、柠檬酸铁1g、乙酸锌0.5g、乙酸钠0.5g、琼脂粉20g。全文摘要本发明公开了一种新组分酵母菌培养基的研制方法，主要原料为麦芽汁1000ml、酵母浸出粉7g、大豆蛋白胨12.5g、葡萄糖6g、可溶性淀粉10g、柠檬酸铁1g、乙酸锌0.5g、乙酸钠0.5g、琼脂粉20g；各元素易得、价格低、营养丰富、易被酵母菌利用，酵母菌生长繁殖迅速的优点。文档编号C12R1/725GK101372675SQ20081013984公开日2009年2月25日申请日期2008年9月12日优先权日2008年9月12日发明者王向东申请人:王向东