专利名称：大型真菌试管种培养基及其制备方法
技术领域：
本发明涉及微生物，具体涉及微生物中大型真菌的培养基。
背景技术：
目前，大型真菌的试管种培养基主要分为固体物培养基，半固体形培养基， 这两种培养基各有长处，但两者都存在着难以克服的缺陷。
固体培养基主要有木屑培养基，木粒、竹粒培养基，谷粒、麦粒、稻谷培 养基，其中木屑或木粒、竹粒培养基存在着缺陷是营养成份低，制作费工费 时，转接原种萌发慢，发菌势弱，谷粒、麦粒、稻谷培养基易污染、易老化、 转接培养袋后易招致虫、鼠害。
半固形培养基主要是固体物浸出液及添加剂溶化后加入琼脂固化而得到， 这种培养基最大的缺陷是易老化，降低菌丝活力，生产优势衰退，在常温下， 往往需要多次转管，因此又容易导致失纯及再度退化。
随着液体菌种的推广，用上述试管种的菌胎转接液体种，都存在着浮力差、 萌发慢且弱，因而污染率高。 一般每支试管种只能转接原种4~6瓶或袋，规模 化栽培的大型菌菇场或菌种场， 一支基础菌种势必须反复扩转，极易退化衰变， 所以一支性状优良的菌种，往往在栽培中表现出退化变异现象，同时大量的罐 装试管增加成本、废工、废时。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种大型真菌试管种培养基，克服现有技 术存在的培养基营养成份低、菌种萌发慢、易老化、污染率高，需多次反复扩 转，生产成本高、生产效率低的缺陷。
本发明要解决的另一个技术问题是提供这种培养基的制备方法。 发明人所在单位是一个售菌种量、裁培量都较大的单位，历年在三伏天高 温季节，要大量生产试管种、原种、裁培种，天热流汗、蚊虫叮咬、深受其苦， 于是近些年来，发明人一直在探索、研究培养基的组成物质，终于获得突破性 进展。
本发明通过以下技术方案实现
大型真菌试管种培养基，由营养液润湿草籽制成，草籽与营养液重量比为1: 0.2~0.5。应使草籽表面全部湿润营养液、并附着营养液为佳。 所述草籽为看麦娘、狗尾草草籽一种或两种混合。
所述营养液为豆芽、麦皮、菇，经破碎、热水浸提、浓縮制得，重量百分 比为豆芽20—40%，麦皮10—30%，菇35—70%;三种物质与水重量比为1-1—2。
所述的菇为鲜菇，为鲜菇中的平菇、草菇、蘑菇、猴头菇的一种或几种混 合。可根据当地的情况，选用较经济的鲜菇。上述的鲜菇根、须、茎等均可作 营养液的原料。
所述豆芽为大豆芽、绿豆芽、碗豆芽、蚕豆芽一种或几种混合。从营养价 值的角度，以大豆芽为佳。
大型真菌试管种培养基的制备方法，包括下列步骤
(1) 采集看麦娘或狗尾草籽，去除杂质后放入水中浸泡48—60小时，然 后取出草籽，晾干表皮水份备用；
(2) 制备营养液按所述的重量百分比，以及总物质与水体积比，将豆芽、
麦皮、菇放入水中煮沸，保温30—50分钟，然后过滤取出液体，再将液体加热 浓縮，直至用玻璃棒插入浓縮液中，再提起玻璃棒，有挂棒现象为止；
(3) 向步骤(2)得到的营养液中加入磷酸二氢钾，调整PH至6.5—7.2;
(4) 用步骤(3)得到的营养液喷洒步骤(1)得到的草籽，并充分拌和均 匀，使草籽表面全部湿润营养液、并附着营养液，即得到所述的培养基；
(5) 装管、灭菌将步骤(4)得到的培养基装入试管中，塞棉塞、包扎， 装入高压锅中，保持1.5个大气压，灭菌60分钟，自然冷却至70度，开启高 于锅盖取出试管，当试管温度降到25。C左右，在无菌操作条件下，接入基础菌 种；
(6) 将步骤(5)得到的试管菌种在25。C左右培养10—13天就可用于生产。 看麦娘、狗尾草是一种野草，看麦娘成熟于春季、狗尾草成熟于秋季，其
籽粒饱满，粒小且壳硬，它的体积约为麦粒的百分之一，经破碎化验，所含碳、 氮比合理，营养成份优于麦粒、谷粒。由于草籽壳硬且光滑，因此，在制备过 程中，其壳不易破碎，受污染率极低，但由于草籽壳硬且光滑，单用草籽作培 养基，接种后不易发菌，经试验，将草籽壳表面湿润营养液，接种萌发后就吃 料，发菌势好、长速快。
本发明与现有技术相比具有以下明显优点
一、 质量好本发明的培养基碳氮比合理，营养充分，菌丝长速快，满 管时间比谷粒种早3天，比PDA种早2天，比木屑种早10天，比竹粒、木粒 种早7天，且菌丝洁白有力。
二、 耐老化本发明的培养基在常温下存放一年，活力如故，转接试管种
或原种，仍表现出萌发快、发菌有力、无污染的特点。
三、 生产效率高正常情况下，以PDA为培养基的试管种，满管需7—10 天，原种满瓶、满袋需30天，裁培种满袋需30—40天， 一个三级种周期约80 天，由于草籽粒小、表面积大、且分散性能优越， 一支试管种相当于以PDA为
培养基的试管种经三级扩转后的含种量，因此，本发明的试管种可直接转接产
菇袋(省掉扩转原种、裁培种工序)，可以縮短裁培周期70天左右。有利于抓 季节，抢早上市，提高效益。
如果用本发明的试管种转接原种或裁培种， 一支试管种可转接原种或裁培 种200瓶(袋)左右，是常规试管种的30—50倍。
四、 节约成本、减轻劳动强度用草籽试管种直接转接产菇袋，省去了原 种，裁培种两个生产环节，不仅节约了原种，裁培种的原材料，而且省去了两 级原料的预温配拌、装瓶、装袋、灭菌、接种的劳动量，既节本增效，又免除 了天热蚊虫叮咬之苦。
五、 污染率低由于草籽粒小壳硬，因此本发明萌发表面积大，萌发快， 发菌势好，污染率低。
综上，本发明具有生产环节少、生产周期短、生产效率高、生产成本低、 劳动强度低、经济效率高的优点。
具体实施例方式
实施例1:
(1) 取狗尾草草籽100斤，去除杂质后放入水中浸泡55小时，然后取出 草籽，晾干表皮水份备用；
(2) 制备营养液取大豆芽30%、麦皮15%、鲜燕中的平燕55%放入水 中煮沸(按三种物质与水重量比为1: 1.5)，保温40分钟，然后过滤取出液体，
再将液体加热浓縮，直至用玻璃棒插入浓縮液中，再提起玻璃棒，有挂棒现象
为止；
(3) 向步骤(2)得到的营养液中加入磷酸二氢钾，调整PH至7;
(4) 用步骤(3)得到的营养液喷洒步骤(1)得到的草籽(草籽与营养液
的重量比为l: 0.3)，并充分拌和均匀，使草籽表面全部湿润营养液、并附着营 养液，即得到所述的培养基；
(5) 装管、灭菌将步骤(4)得到的培养基装入试管中，塞棉塞、包扎，
装入高压锅中，保持1. 5个大气压灭菌60分钟，自然冷却至70度，开启高于 锅盖取出试管，当试管温度降到25'C左右，在无菌操作条件下，接入基础菌种;
(6) 将步骤(5)得到的试管菌种在25。C左右培养10—13天就可用于生产。 实施例2:
(1) 取狗尾草草籽100斤，去除杂质后放入水中浸泡50小时，然后取出 草籽，晾干表皮水份备用；
(2) 制备营养液取大豆芽20%、麦皮10%、鲜菇种的平菇35%放入水 中煮沸(按三种物质与水重量比为1: 1)，保温30分钟，然后过滤取出液体， 再将液体加热浓縮，直至用玻璃棒插入浓縮液中，再提起玻璃棒，有挂棒现象 为止；
(3) 向步骤(2)得到的营养液中加入磷酸二氢钾，调整PH至6.5;
(4) 用步骤(3)得到的营养液喷洒步骤(1)得到的草籽(草籽与营养液 的重量比为l: 0.2)，并充分拌和均匀，使草籽表面全部湿润营养液、并附着营 养液，即得到所述的培养基。
其余实施如实施例l。
实施例3:
(1) 取看麦娘草籽100斤，去除杂质后放入水中浸泡60小时，然后取出 草籽，晾干表皮水份备用；
(2) 制备营养液取大豆芽40%、麦皮30%、鲜燕中的平燕70%放入水 中煮沸(按三种物质与水重量比为1: 2),保温50分钟，然后过滤取出液体，再将液体加热浓縮，直至用玻璃棒插入浓縮液中，再提起玻璃棒，有挂棒现象
为止；
(3) 向步骤(2)得到的营养液中加入磷酸二氢钾，调整PH至7.2;
(4) 用步骤(3)得到的营养液喷洒步骤(1)得到的草籽(草籽与营养液 的重量比为l: 0.5)，并充分拌和均匀，使草籽表面全部湿润营养液、并附着营 养液，即得到所述的培养基。
其余实施如实施例l。
权利要求
1、大型真菌试管种培养基，其特征在于由营养液湿润草籽制成，草籽与营养液重量比为1∶0.2～0.5。
2、 如权利要求1所述的大型真菌试管种培养基，其特征在于所述草籽为 看麦娘、狗尾草籽一种或两种混合。
3、 如权利要求1所述的大型真菌试管种培养基，其特征在于所述营养液 为豆芽、麦皮、菇，经破碎、热水浸提、浓縮制得，重量百分比为豆芽20—40 %，麦皮10—30%，菇35—70%;三种物质与水重量比为l: l一2。
4、 如权利要求3所述的大型真菌试管种培养基，其特征在于所述的菇为鲜燕，为鲜菇中的平燕、草燕、蘑菇、猴头燕的一种或几种混合。
5、 如权利要求3所述的大型真菌试管种培养基，其特征在于所述豆芽为大豆芽、绿豆芽、碗豆芽、蚕豆芽一种或几种混合。
6、 大型真菌试管种培养基的制备方法，其特征在于包括下列步骤(1) 采集看麦娘或狗尾草籽，去除杂质后放入水中浸泡48—60小时，取 出晾干草籽表皮水份备用；(2) 制备营养液按权利要求3所述的重量百分比，以及总物质与水体积 比，将豆芽、麦皮、菇放入水中煮沸，保温30—50分钟，然后过滤取出液体， 再将液体加热浓縮；(3) 向步骤(2)得到的营养液中加入磷酸二氢钾，调整PH至6.5—7.2;(4) 用步骤(3)得到的营养液喷洒步骤(1)得到的草籽，并充分拌和均 匀，即得到所述的培养基；(5) 装管、灭菌将步骤(4)得到的培养基装入试管中，塞棉塞、包扎， 装入高压锅中，保持1.5个大气压，灭菌60分钟，自然冷却至70度，开启高 压锅盖取出试管，当试管温度降到25。C左右，在无菌操作条件下，接入基础菌种；(6)将步骤(5)得到的试管菌种在25"C左右培养10—13天就可用于生产。
全文摘要
本发明公开了大型真菌试管种培养基及其制备方法，由营养液润湿看麦娘或狗尾草籽制成，草籽与营养液重量比为1∶0.2～0.5。应使草籽表面全部湿润营养液、并附着营养液为佳。用本培养基制备试管种，菌丝长速快，满管时间比PDA种早2天，比木屑种早10天，比竹粒、木粒种早7天。由于草籽粒小壳硬，发菌势好，污染率低。同时由于草籽粒小、表面积大、且分散性能优越，一支试管种相当于以PDA为培养基的试管种经三级扩转后的含种量，因此，本发明的试管种可直接转接产菇袋，可以缩短裁培周期70天左右。本发明具有生产效率高、生产成本低、劳动强度低、经济效率高的优点。
文档编号C12N1/14GK101173219SQ20071013372
公开日2008年5月7日 申请日期2007年9月30日 优先权日2007年9月30日
发明者张嘉闻 申请人:张嘉闻