专利名称：蛋氨酸的制备方法
技术领域：
本发明涉及被作为医药品或者饲料添加剂使用的蛋氨酸结晶的制备方法。蛋氨酸特别在饲料添加物市场上被要求以固形(结晶)品的形式提供。
背景技术：
作为利用生物催化剂的腈水解活性制备2-氨基酸的方法，已知的有使用2-氨基腈或2-氨基酰胺作为原料的方法(特公昭58-15120号公报、特表昭63-500004号公报、特开平2-31694号公报、特表平3-500484号公报、特公平3-16118号公报、WO02/08439、特开2002-34593、US-6417395)和使用氰醇作为原料的方法(特开平9-140391)。但是，无论哪种方法都没有对将诸如蛋氨酸的水溶解度低的固形2-氨基酸与生物催化剂有效地分离精制这一实用的方法进行公开。
此外，在由甲醛、氢氰酸和氨反应所得到的甘氨腈制备甘氨酸的微生物学制造中，对反应液中生成的氨进行分离的方法是已知的(特开2001-258586、特开2001-299377、特开2001-340096、特开2001-340097)，在该方法中的氨分离，是为了对反应所导致的pH上升进行抑制而将通过腈的水解而生成的氨进行分离，而甘氨酸的水溶解度高(25℃时为25g/100g·H2O)，所以通过馏去氨并不能使甘氨酸结晶析出。
本发明的课题是提供实用的蛋氨酸的制备方法，其中，在以2-氨基-4-甲硫基丁腈、2-氨基-4-甲硫基丁酰胺等可通过水解生成蛋氨酸的物质作为原料，使用生物催化剂转换成蛋氨酸时，可以反复使用生物催化剂，在增加反应液中的蛋氨酸的溶解蓄积量的同时可以容易地从反应液中以固形品的形式分离出蛋氨酸。
本发明者们，已经发现了可以稳定地维持高腈酶活性的腈酶产生菌节杆菌(Arthrobacter sp.)NSSC104(FERM BP-5829)和节杆菌(Arthrobacter sp.)NSSC204(FERM BP-7662)。在对使用这些腈酶产生菌作为生物催化剂水解2-氨基-4-甲硫基丁腈从而得到蛋氨酸的制造技术进行研究的过程中，面临有如下的问题蛋氨酸相对于水的溶解度低(25℃时为3.38g/100g·H2O、50℃时为6.07g/100g·H2O)，所以，反应刚刚开始后反应液中就有蛋氨酸结晶析出，其与生物催化剂凝聚，难以有效地分离蛋氨酸析出晶体、生物催化剂和反应液的3成分，难以高回收率地回收生物催化剂。另一方面发现，反应中，保持不让蛋氨酸析出、使其溶解在反应液(水)中的状态，可以分离回收生物催化剂，但是，这种情况下，蛋氨酸相对于水的溶解度低，所以必须将蛋氨酸的蓄积浓度维持在不足5％的极低的浓度下，不能增加反应液中的蛋氨酸的溶解蓄积量，成为生产性极低的制造技术，缺乏实用性。
在使用酰胺酶产生菌作为生物催化剂对2-氨基-4-甲硫基丁酰胺进行水解而得到蛋氨酸的情况下，同样会发生上述问题。
因此，本发明者们为了同时解决上述本发明的课题而进行了认真反复的研究，结果认为，为了增加反应液中的蛋氨酸的溶解蓄积量，可以使反应液中存在氨，为此进行了预备试验，调制相对于蛋氨酸的氨的摩尔比分别为0、1、1.5、2、2.5的5种溶液，在5-50℃下测定蛋氨酸的溶解度。由图1所示的结果发现，以相对于蛋氨酸的摩尔比计，通过使氨过量存在于反应液中，蛋氨酸的溶解度得到增加，从而设计了使蛋氨酸以溶解状态在反应液中蓄积5-30重量％、100％回收菌体催化剂的体系。为了在水中溶解20重量％左右的蛋氨酸，也可以添加NaOH或KOH等无机碱，这种情况下，在得到蛋氨酸的作为固形游离体的制品时，有必要用酸中和，此时，产生大量的无机盐废弃物，出现了必须另外进行除去这些废弃物的操作的问题。
此外，从含有由水解反应罐中与生物催化剂分离后所排出的蛋氨酸的氨水溶液(含蛋氨酸的氨水溶液)中馏去氨，收集析出的蛋氨酸结晶，如此可以容易地进行蛋氨酸的固形游离体的分离回收。分离回收蛋氨酸结晶后的母液中含有少量的残存原料2-氨基-4-甲硫基丁腈或2-氨基-4-甲硫基丁酰胺、蛋氨酸、氨，所以优选将其回收到水解反应罐中，由此可以完成不出现废弃物的工艺。本发明是基于上述认知而完成的。
发明内容
也就是说，本发明涉及[1]蛋氨酸的制备方法，其特征在于，具有下述工序(1)第一工序在氨水溶液中，利用具有水解活性的生物催化剂使可以水解生成蛋氨酸的原料物质水解，转换成含蛋氨酸的氨水溶液；(2)第二工序将第一工序中得到的含蛋氨酸的氨水溶液与生物催化剂分离；(3)第三工序由第二工序中分离出来的含蛋氨酸的氨水溶液中馏去氨，使蛋氨酸结晶析出，并将其分离出来。
根据[1]的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，在氨水溶液中利用具有腈水解活性的生物催化剂对作为原料物质的2-氨基-4-甲硫基丁腈进行水解。
根据[1]的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，在氨水溶液中利用具有酰胺水解活性的生物催化剂对作为原料物质的2-氨基-4-甲硫基丁酰胺进行水解。
根据[1]-[3]中任一项的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，作为氨水溶液，使用所含氨的量为在第一工序中所得的含蛋氨酸的氨水溶液中的蛋氨酸量的1.5-10倍当量的水溶液。
根据[1]-[4]中任一项的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，第一工序中所得的含蛋氨酸的水溶液中，蛋氨酸浓度为5-30重量％。
根据[1]-[5]中任一项的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，对生物催化剂进行再利用。
根据[1]-[6]中任一项的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，使用固定化菌体作为生物催化剂。
根据[1]-[7]中任一项的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，将对蛋氨酸结晶进行分离回收后的母液以及馏去的氨再利用于水解反应中。
根据[1]-[8]中任一项的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，在加压下实施第一工序。
图1为表示在氨与蛋氨酸的摩尔比为0、1、1.5、2、2.5的5种溶液中的5-50℃时的蛋氨酸的溶解度的测定结果的图。
图2为表示本发明的蛋氨酸的制备方法中的不出现废弃物的工艺的概略图。
具体实施例方式
本发明的蛋氨酸的制备方法只要是具有如下工序的方法即可，没有特别的限制，即，(1)第一工序在氨水溶液中利用具有水解活性的生物催化剂对可以水解生成蛋氨酸的原料物质进行水解，优选在氨水溶液中利用具有腈水解活性的生物催化剂对原料物质2-氨基-4-甲硫基丁腈进行水解或者在氨水溶液中利用具有酰胺水解活性的生物催化剂对2-氨基-4-甲硫基丁酰胺进行水解，从而转换成含有蛋氨酸的氨水溶液；(2)第二工序将前述第一工序中得到的含蛋氨酸的氨水溶液与生物催化剂分离；(3)第三工序从在前述第二工序中被分离后的含蛋氨酸的氨水溶液中馏去氨，使蛋氨酸结晶析出，将其分离。例如，如图2所示，优选对生物催化剂进行再利用等的不出现废弃物的工艺。
作为可以通过水解生成蛋氨酸的原料物质，除了上述2-氨基-4-甲硫基丁腈或者2-氨基-4-甲硫基丁酰胺以外，还可举出2-氨基-4-甲硫基丁酸低级烷基酯、甲硫基乙基乙内酰脲、甲硫基乙基脲基乙酸、甲硫基乙基脲基乙酰胺等。
在利用具有腈水解活性的生物催化剂在氨水溶液中对2-氨基-4-甲硫基丁腈进行水解从而转换成含有蛋氨酸的氨水溶液的第一工序中，所使用的生物催化剂只要是在氨水溶液等水溶液中具有水解腈的活性的微生物等生物催化剂即可，没有特别的限制，作为所述的生物催化剂，例如可举出属于节杆菌(Arthrobacter)属、多噬菌(Variovorax)属等的微生物，其中，可以特别举出节杆菌种NSSC104、节杆菌种NSSC204以及争论多噬菌(Variovorax paradoxus)IAM 12374。
节杆菌NSSC104于1996年2月6日被保藏在独立行政法人产业技术综合研究所特许生物保藏中心(茨城县筑波市东1丁目1番地1中央第6)，保藏号为FERM BP-5829，其菌学性质被记载在WO97/32030中。此外，节杆菌NSSC204于2000年6月22日同样被保藏在独立行政法人产业技术综合研究所特许生物保藏中心(茨城县筑波市东1丁目1番地1中央第6)，保藏号为FERM BP-7662，其菌学性质被记载在WO02/08439中。此外，争论多噬菌IAM12374可以很容易地从东京大学分子细胞生物研究所获得，其菌学性质被记载在International Journal of SystematicBacteriology第41卷、445-450页(1991年)。
在利用具有酰胺水解活性的生物催化剂在氨水溶液中对2-氨基-4-甲硫基丁酰胺进行水解从而转换成含有蛋氨酸的氨水溶液的第一工序中，所使用的生物催化剂只要是在氨水溶液等水溶液中具有水解酰胺的活性的微生物等生物催化剂即可，没有特别的限制，作为所述的生物催化剂，例如可适宜地举出玫瑰红红球菌(Rhodococcus rhodochrous)IFO15564。
玫瑰红红球菌(Rhodococcus rhodochrous)IFO15564可以很容易地从独立行政法人制品评价技术基盘机构·生物遗传资源中心(NBRC)获得，其菌学性质被记载在Tetrahedron Letters第32卷、1343-1346页。
这些微生物的培养可以在含有酶诱导物、微生物可以资化(資化)的碳源、氮源、无机离子以及根据需要而含有的有机营养源的、通常的培养基中进行。作为酶诱导物，优选异丁腈、2-氨基苄腈等腈化合物，ε-己内酰胺等环状酰胺化合物等，特别优选2-氨基苄腈。作为碳源，适宜使用葡萄糖等碳水化物、乙醇等醇类、有机酸等。作为氮源，使用氨基酸、硝酸盐、铵盐等。作为无机离子，可以根据需要使用磷酸离子、钾离子、镁离子、硫酸离子、铁离子等。作为有机营养源可以适宜使用维生素、氨基酸等以及含有这些的玉米浸渍液、酵母提取物、聚蛋白胨、肉汤等。如果在好气条件下一边控制在pH6-9、温度25-37℃的适当范围一边进行培养的话比较好。
作为本发明中所用的生物体催化剂，可以举出上述培养的菌体或者由该菌体调制的固定化菌体、粗酶或者固定化酶等的菌体处理物。对菌体或者酶进行固定化时，可以使用载体结合法、包埋法等通常进行的固定化技术。对酶或者粗酶进行调制时，在利用超声波、高压均化器等粉碎菌体后可以使用硫酸铵盐析、色谱等通常进行的酶精制技术。此外，反应中所用的菌体等生物催化剂可以不降低其实质活性地反复使用于水解反应中，所以优选对其再利用。
所述的由生物催化剂引起的水解反应，可以通过在含有氨的水性溶剂中使上述生物催化剂作用于2-氨基-4-甲硫基丁腈、2-氨基-4-甲硫基丁酰胺等可水解生成蛋氨酸的原料物质而进行。生物催化剂换算成干燥重量通常可以0.1-10重量％、优选1-6重量％的浓度使用。此外，2-氨基-4-甲硫基丁腈、2-氨基-4-甲硫基丁酰胺等原料物质可以0.01-50重量％的浓度在反应中使用，根据需要可以在反应之间、逐次添加或者连续添加。此外，作为含有氨的水性溶剂，为以氨水为主要成分的、可含有有机溶剂的水性溶剂，其中也可含有胺等有机碱、有机酸或者无机碱。在氨浓度为0.5-30重量％、优选0.8-10重量％的水溶液中使用，此外可以使用含有蛋氨酸的蓄积浓度的1.5-10倍当量的氨的水溶液。再有，为了提高氨的溶解量，增加反应液中的蛋氨酸的溶解蓄积量，还可以在加压下实施水解反应。
在将上述第一工序中所得的含蛋氨酸的氨水溶液与生物催化剂分离的第二工序中，还可以将含蛋氨酸的氨水溶液与生物催化剂分离，排出到反应体系外，也可以将生物催化剂与含蛋氨酸的氨水溶液分离，排出到反应体系外。作为这样的将水解反应结束后的含蛋氨酸水溶液与生物催化剂分离的方法，只要是公知的固液分离方法即可，没有特别的限制，例如可以利用过滤、离心分离、超滤浓缩法等进行，经回收的生物催化剂如前所述可以反复使用于水解反应中。此外，就使用固定化菌体或者固定化酶的情况下的含蛋氨酸的氨水溶液与生物催化剂的分离而言，无需使用特别的固液分离装置，以在反应罐的排出口设置滤网等简单的粗目的过滤器，防止固定化生物催化剂从反应罐中流出为好。
在从经上述第二工序分离的含有蛋氨酸的氨水溶液中馏去氨，使蛋氨酸结晶析出并将其分离的第三工序中，通过加压脱气·减压脱气或者加热馏去而从含有蛋氨酸的氨水溶液中馏去氨，如果相对于蛋氨酸而馏去一定量的过量的氨，则可以析出蛋氨酸晶体。馏去的氨，扣除与蛋氨酸等摩尔的部分，可以再利用于水解反应。不能再利用的、被扣除在外的氨可以用于合成2-氨基-4-甲硫基丁腈、2-氨基-4-甲硫基丁酰胺等原料物质。如此，可使用过滤·离心分离器等固液分离机将结晶析出的蛋氨酸作为固形品回收，蛋氨酸结晶回收分离后的母液中含有少量的残存2-氨基-4-甲硫基丁腈、2-氨基-4-甲硫基丁酰胺等原料物质、蛋氨酸、氨等，所以可以再利用于水解反应中。
本发明中所制造的蛋氨酸，根据使用的生物催化剂的光学选择性可以得到D型、L型或者外消旋体的蛋氨酸。经生成分离的蛋氨酸结晶，还可根据需要进行精制或者粒度调整。
以下，利用实施例更详细地说明，不过本发明并不限于这些实施例。实施例1(由NSSC204株制备DL-蛋氨酸)(NSSC204株的培养)将含有酵母提取物0.5％、葡萄糖0.5％、磷酸氢二钾0.1％、磷酸二氢钾0.1％、食盐0.1％、硫酸镁7水盐0.02％、硫酸亚铁0.001％以及2-氨基苄腈0.03％的培养基2ml放置在试管中，在121℃灭菌20分钟。在该试管中植入1白金耳的节杆菌NSSC204株，在33℃振荡培养一晚，调制前培养物。接着，将含有玉米浸渍液(过滤灭菌)2.0％、蔗糖(121℃灭菌20分钟)1.0％、2-氨基苄腈(121℃灭菌20分钟)0.03％的、pH7.2(用2N苛性钠调整)的培养基20ml加入到容量为100ml的带缓冲板的锥形烧瓶，继续植入上述的前培养物0.2ml，再于33℃下振荡培养4天。
(DL-蛋氨酸的生成)对得到的节杆菌NSSC204株的培养液进行离心分离，用离子交换水洗涤后，将其悬浊在含有133mM的2-氨基-4-甲硫基丁腈和25mM的1，3-二氨基丙烷的水溶液(pH11.2)中，使得按干燥菌体浓度计为0.1％(W/W)，在35℃下一边缓缓振荡一边进行水解反应。添加4小时后离心分离，除去菌体，使用高速液体色谱(柱TSKgel ODS-80TM、载流乙醇/水/三氟乙酸＝5/95/0.04)测定残存的反应液中所含的蛋氨酸的浓度，结果表明有125mM的DL-蛋氨酸蓄积。
实施例2(由NSSC204株连续生产DL-蛋氨酸)对实施例1中所得的节杆菌NSSC204株的培养液进行离心分离，用离子交换水洗涤，然后，悬浊于含有10％(W/W)DL-蛋氨酸和2.28％(W/W)氨的水溶液(pH9.5)中，使得按干燥菌体计浓度为2％(W/W)。将该菌体悬浊液300g加入到温度保持在30℃的、容量为500ml的三口烧瓶中，将2-氨基-4-甲硫基丁腈以每小时5.5g的速度一边搅拌一边连续添加。另外，使用微滤膜(旭化成制microza PMP-003)连续地过滤菌体，以每小时约54g的速度回收反应滤液。此时，为了不减少反应容器内的液量，使用与液面传感器连动的泵，连续地补给与经回收的反应滤液相同容量的1.14％(W/W)的氨水。使用高速液体色谱(柱TSKgelODS-80TM、载流乙醇/水/三氟乙酸＝5/95/0.04)每隔1小时对回收反应滤液的DL-蛋氨酸浓度进行测定，控制反应滤液的回收速度，使其浓度维持10％(W/W)。反应滤液中所含的2-氨基-4-甲硫基丁腈的浓度缓缓增加，反应开始8小时后达到0.4％(W/W)，然后，维持该浓度8天，这期间的蛋氨酸生产速度为每小时5.36g。
实施例3(由固定化NSSC204株连续生产DL-蛋氨酸)(NSSC204株的固定化)对实施例1中所得的节杆菌NSSC204株的培养液进行离心分离，用离子交换水洗涤，然后，悬浊于1％(W/W)藻酸钠水溶液中，使得按干燥菌体计浓度为10％(W/W)。接着，将该悬浊液滴加到0.1M氯化钙水溶液中，制得固定化菌体球。将得到的固定化菌体球225g填充到内径30mm的柱中，使含有10％(W/W)DL-蛋氨酸、2.28％(W/W)氨、2.5mM 1，3-二氨基丙烷和10mM氯化钙的水溶液(pH9.5)以每小时0.2升的流速流过1升，进行平衡化。接着，将球转移到温度保持在30℃的、容量500ml的三口烧瓶中，加入平衡化水溶液，使总量为300g后，将2-氨基-4-甲硫基丁腈以每小时5.16g的速度一边搅拌一边连续地添加。另一方面，使反应液以不吸入固定化球的方式通过吸滤器，以每小时约50g的速度回收。此时，为了不减少反应容器内的液量，使用与液面感应器连动的泵连续地补给含有与经回收的反应滤液相同容量的1.14％(W/W)氨、20mM乙二胺和10mM氯化钙的水溶液。使用高速液体色谱(柱TSKgel ODS-80TM、载流乙醇/水/三氟乙酸＝5/95/0.04)每隔1小时对回收反应滤液的DL蛋氨酸浓度进行测定，控制反应滤液的回收速度，使浓度维持在10％(W/W)。反应滤液中所含的2-氨基-4-甲硫基丁腈的浓度缓缓增加，反应开始12小时后达到0.5％(W/W)，然后将该浓度维持20天，这期间的蛋氨酸生产速度为每小时5.03g。
实施例4(固形DL-蛋氨酸的回收)将分离了菌体的反应液250g(含有蛋氨酸25g、2-氨基-4-甲硫基丁腈1.25g、氨2.3％)装入带搅拌机的500ml烧瓶中，使用真空泵，不进行加热而是在减压下馏去氨。对由于氨的馏出而析出的蛋氨酸进行过滤，得到蛋氨酸11.3g。母液中含有蛋氨酸13.7g和1.25g的2-氨基-4-甲硫基丁腈，未生成分解物。使用该母液反复实施菌体反应-晶析，对所得的蛋氨酸的收率进行测定，为99％，纯度为99％以上，未发现着色。
实施例5(由固定化IFO15564菌株连续生产DL-蛋氨酸)(IFO15564菌株的培养和固定化)将含有胰胨1.0％、酵母提取物0.5％、食盐1.0％的培养基2ml放置在试管中，在121℃灭菌20分钟。在该试管中植入一白金耳的玫瑰红红球菌IFO15564菌株，30℃下振荡培养一夜，制得前培养物。接着将含有玉米浸渍液(过滤灭菌)2.0％、蔗糖(121℃灭菌20分钟)1.0％、∈-己内酰胺(121℃灭菌20分钟)0.5％的、pH7.2(用2N苛性钠调整)的培养基20ml加入到容量为100ml的带有缓冲板的锥形烧瓶中，继续植入上述前培养物0.2ml，再于30℃下振荡培养3天。将所得的玫瑰红红球菌IFO15564菌株的培养液离心分离，用离子交换水洗涤，然后悬浊于1％(W/W)藻酸钠水溶液中，使得以干燥菌体计浓度为10％(W/W)。接着，向0.1M氯化钙水溶液中滴加该悬浊液，制得固定化菌体球。
(DL-蛋氨酸的连续生产)将得到的固定化菌体球225g填充到内径30mm的柱中，以每小时0.2升的流速使含有10％(W/W)DL-蛋氨酸、2.28％(W/W)氨和10mM氯化钙的水溶液流过1升，进行平衡化。接着，将球转移到温度保持在35℃、容量为500ml的三口烧瓶中，加入平衡化水溶液，使总量为300g，然后一边搅拌一边以每小时11.54g的速度连续添加2-氨基-4-甲硫基丁酰胺。另一方面，使反应液以不吸入固定化球的方式通过吸滤器，以每小时约105g的速度回收。此时，为了不减少反应容器内的液量，使用与液面感应器连动的泵连续地补给含有与经回收的反应滤液相同容量的1.14％(W/W)氨和10mM氯化钙的水溶液。使用高速液体色谱(柱TSKgelODS-80TM、载流乙腈/水/三氟乙酸＝50/950/1)每隔1小时对回收反应滤液的DL蛋氨酸浓度进行测定，控制反应滤液的回收速度，使浓度维持在10％(W/W)，连续反应14天。这期间的蛋氨酸生产速度平均为每小时10.57g。
实施例6(固形DL-蛋氨酸的回收)收集实施例5中所得的反应滤液250g，加入到带有搅拌机的500ml烧瓶中，使用真空泵减压下馏去氨。对由于氨的馏出而析出的蛋氨酸进行过滤，得到蛋氨酸11.3g。母液中含有蛋氨酸13.7g和1.02g的2-氨基-4-甲硫基丁酰胺，未生成分解物。使用该母液反复实施菌体反应-晶析，对所得的蛋氨酸进行定量，结果为99％，纯度也为99％以上，未发现着色。
产业上的可利用性根据本发明，以2-氨基-4-甲硫基丁腈、2-氨基-4-甲硫基丁酰胺等作为原料，使用具有腈水解活性、酰胺水解活性等的生物催化剂，在氨水溶液中以溶解状态生成蛋氨酸，然后，馏去氨，可以高效且简便地制造被要求做成制品形态的固形蛋氨酸。而且，与以往的化学制造法相比，其能源成本和废弃物排出量格外低。
权利要求
1.蛋氨酸的制备方法，其特征在于，具有下述工序(1)第一工序在氨水溶液中，利用具有水解活性的生物催化剂使可水解生成蛋氨酸的原料物质水解，转换成含蛋氨酸的氨水溶液；(2)第二工序将前述第一工序中得到的含蛋氨酸的氨水溶液与生物催化剂分离；(3)第三工序由前述第二工序中分离出来的含蛋氨酸的氨水溶液中馏去氨，使蛋氨酸结晶析出，并将其分离出来。
2.根据权利要求1的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，在氨水溶液中利用具有腈水解活性的生物催化剂对作为原料物质的2-氨基-4-甲硫基丁腈进行水解。
3.根据权利要求1的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，在氨水溶液中利用具有酰胺水解活性的生物催化剂对作为原料物质的2-氨基-4-甲硫基丁酰胺进行水解。
4.根据权利要求1-3中任一项的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，作为氨水溶液，使用所含氨的量为在第一工序中所得的含蛋氨酸的氨水溶液中的蛋氨酸量的1.5-10倍当量的水溶液。
5.根据权利要求1-4中任一项的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，第一工序中所得的含蛋氨酸的氨水溶液中，蛋氨酸浓度为5-30重量％。
6.根据权利要求1-5中任一项的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，对生物催化剂进行再利用。
7.根据权利要求1-6中任一项的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，使用固定化菌体作为生物催化剂。
8.根据权利要求1-7中任一项的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，将对蛋氨酸进行分离回收后的母液以及馏去的氨再利用于水解反应中。
9.根据权利要求1-8中任一项的蛋氨酸的制备方法，其特征在于，在加压下实施第一工序。
全文摘要
本发明是实用的蛋氨酸的制备方法，其中，在使用可水解生成蛋氨酸的物质作为原料，使用生物催化剂转换成蛋氨酸时，可以反复使用生物催化剂，在增加反应液中的蛋氨酸的溶解蓄积量的同时，可以容易地从反应液中以固形品的形式得到蛋氨酸。更详细地说，是利用下列工序制造蛋氨酸的方法，即，第一工序在氨水溶液中利用生物催化剂对2－氨基－4－甲硫基丁腈、2－氨基－4－甲硫基丁酰胺等可水解生成蛋氨酸的原料物质进行水解，转换成含有蛋氨酸的氨水溶液；第二工序将第一工序中得到的含蛋氨酸的氨水溶液与生物催化剂分离；第三工序从在前述第二工序中经分离的含蛋氨酸的氨水溶液中馏去氨，析出蛋氨酸晶体并分离。
文档编号C12P13/12GK1671855SQ0381741
公开日2005年9月21日 申请日期2003年7月22日 优先权日2002年7月23日
发明者小林洋一, 小野逸平, 早川公一, 水井良典, 石川高广 申请人:日本曹达株式会社