专利名称：用于朝所需方向诱导新毛发毛囊形成和毛发生长的组合物和方法
背景技术：
毛发毛囊是哺乳动物皮肤所特有的。该毛发毛囊是原始表皮向下生长，延伸至皮肤更深层形成的。在毛发毛囊的底部存在一种被称为毛囊乳头或皮肤乳头的细胞栓(Stenn and Paus，2002，Physiol.Rev.，81449)。该乳头对正常的毛发毛囊循环是必需的(Oliver，1996，Embryol.Exp.Morph.15331；Oliver，Embryol.Exp.Morph.16231)，因而对毛干的生长是必需的。毛干是由紧密黏合的充满角蛋白丝和丝聚蛋白的上皮细胞构成的线形结构。
毛发脱落是由许多因素引起的。在男性型秃发中，头皮前部和顶部的头发毛囊易受雄性激素的影响，并由大毛囊转变成微型毛囊(在易受影响的人中)，临床上表现为脱发。据估计20％的女性在其一生中也会经历某些类型的脱发，其特征通常是头皮顶部的头发变稀。随着年龄增长头发脱落会不断扩散。此外，不同的疾病状态如形成瘢痕的病症(如与瘢痕性脱发相关的病症)、热烧伤或压迫性损伤会导致明显的脱发。不管什么原因，脱发的最终结果会导致显著的心理上、社交上和性别上的自尊和自信心丧失的后果。
长期以来治疗和解决头发脱落的方法有很大变化。假发、男子假发和驳发可以掩盖秃发区域但并不能产生新的头发生长。两种现有的药物(米诺地尔和非那雄胺)可以减缓进一步的脱发，但没有任何一种现有药物可以真正引起新头发毛囊的再生。当前且广泛使用的替换稀疏或缺失的头发毛囊的方法是头发移植手术。
在30多年的时间里，头发移植手术是唯一可新生头发的方法，该方法将活性头发毛囊替换到秃发区域。在这个过程中通过手术将头发毛囊从头皮上不秃发的区域(枕骨区域)移除并移植到秃发区域(额骨和头顶区域)。头发移植片密度在1-2个毛囊每片到10-15个毛囊每片范围内变化。这个过程存在很多缺陷。首先，这种移植手术非常缓慢而且劳动强度大。由于在一次移植期间移植750-1500个毛囊的情况并不少见，因此这一过程通常需要整整一个工作日。因为移植前每一个供体毛囊都需要从供体位置分离，所以这个过程很缓慢且强度大。其次，为了满足美容效果可能需要多个手术疗程。最后而且最重要地，从供体位置来源的毛囊必然是为受体位置做出了牺牲。供体位置随后可能会结疤但可以肯定的是留下的毛囊少了。这种现象使没有适合供体区域的秃发患者不能选择这种方法。为了将毛囊的损失最小化，需要其它诱导新毛囊形成的方法。还需要无须损失原始毛囊就可以产生新毛囊的系统，该系统可以迅速而且廉价地植入大量毛囊并取得最佳的美容结果。
为达此目的，由于当植入表皮层下时，真皮乳头细胞单独可以诱导新毛发毛囊的形成进而诱导毛干的形成，因此以诱导性乳头细胞植入为基础的新疗法成为最有前途的方法。乳头细胞单独可诱导表皮细胞形成新的活性毛发毛囊(Cohen，1961，Embryol.Exp.Morph.，9117，1961；Oliver，1967，Embryol.Exp.Morph.，1843；1970，Embryol.Exp.Morph.，23219；Oliver et al.，U.S.Patent 4，919，664；Jahoda，1992，Development，1151103；Reynolds et al.，1991，Ann.N.Y.Acad.Sci.，642226；Reynolds et al.，1999，Nature 40233)。研究显示乳头细胞具有免疫豁免权，因此不仅自体固有的乳头细胞在诱导新毛囊时有效，而且同种异体的移植也同样有效(Reynolds et al.，1999，Nature 40233)。最后，诱导性乳头细胞可通过细胞培养来保存和增殖(Cooley et al.，PCT/US98/13754；Kishimoto et al.，2000，Genes.Dev.141181)，因而可以满足移植所需的大量细胞的积累、减少对大量供体组织的需求、减少重复过程的次数以及使常用毛发移植手术中存在的来自供体位置的健康毛囊的解体和丧失最小化。
乳头移植手术的问题之一是新毛囊的形成效率低下，而且生成毛囊的方向不可预知。在解释几种在毛发毛囊循环和毛干定向中起作用的生长和转录因子的特性方面的最新进展启发研究者，这些因子的应用可以增强手术效率和美容效果。据观测TGFα及其受体(Nixon et al.，1996，J.Histochem.Cytochem，44377)、Krox-2、TGFβRII(Gambardella et al.，2000，Mech.Dev.96215)、刺猬基因(Chiang et al.，1999，Dev.Biol.2051)、同源异型框蛋白(Widelitz et al.，1997，Microsc.Res.Tech.，1538)和Notch蛋白(Lin et al.，2000，Development 1272421)在毛发毛囊中都表现出反常表达性，因此可以在新毛囊的诱导、成形、存活和定向中起作用。
以前描述不借助伴随结构在哺乳动物皮肤中引入乳头细胞的公开内容中没有描述定向毛囊朝向或其生长以及所产生的毛干的方法，因此可能产生朝不可预知的和美容上不可接受的方向生长的毛干。
以前描述将乳头细胞与硬质细杆结合植入以引导毛发毛囊的生长和朝向的公开内容中也没有实现乳头细胞植入的全部潜能。Cooley等人(PCT/US98/13754)描述了同时引入乳头细胞与含有可吸收缝合材料的硬质细杆，然后用封闭敷料覆盖伤口或保持伤口开放的方法。由可吸收材料构成的杆会以不可预知的速率溶解，可能在新生毛发毛囊形成以前就溶解了。此外，使用生物活性化合物(如可吸收缝合材料)可能在植入位置诱发炎症免疫反应。据观测对生物活性材料的任何炎症或异物反应会妨碍新毛囊的形成，因而任何在再生毛囊附近引起异物反应的生物可降解材料的后果轻则无效或反效，重则引起病理变化。
长久以来都需要开发更低破坏性且更廉价的生长替换毛发的方法，该方法以可预知的成功率和美容效果诱导形成新的毛发毛囊。本发明满足了这种需求。
发明的简要概述本发明包括诱导毛发朝所需方向生长的方法，其中该方法包括用包含硬质细杆和至少一种乳头细胞的载体接触哺乳动物皮肤的表皮层。该方法还包括将该载体朝所需方向固定在表皮层，经过一段时间后将载体从表皮层移除，从而诱导毛发朝所需方向生长。
本发明的另一方面，该哺乳动物是人。
本发明的另一方面，该硬质细杆是管状物、刚性索线或者棒状物。
本发明的一方面，该乳头细胞是自体固有的或者是同种异体的。
本发明的另一方面，该乳头细胞是从人体获得的。
本发明的另一方面，经过一段约2天到约10天的时间后将该载体移除。
本发明的一方面，该载体包含生长因子。
本发明的另一方面，该载体包含反常表达的生长/转录因子(eccentrically expressed growth/transcription factor)，其中该生长/转录因子可以是Wnt、刺猬基因蛋白、Krox-20、同源异型框、Notch、转化生长因子-α和胰岛素样生长因子家族成员。
本发明还包括在哺乳动物身上朝所需方向诱导毛发生长的方法，其中该方法包括用包含硬质细杆的载体接触皮肤的表皮层，其中该载体包含一种生长/转录因子。该方法还包括将该载体朝所需方向固定在表皮层上，经过一段时间后将载体从表皮层移除，从而诱导毛发朝所需方向生长。
本发明的另一方面，该哺乳动物是人。
本发明的另一方面，该硬质细杆是管状物、刚性索线或棒状物。
本发明的另一方面，经过一段约2天到约10天的时间后将该载体移除。
本发明的一方面，该载体包含生长因子。
本发明的另一方面，该载体包含反常表达的生长/转录因子，其中该生长/转录因子可以是Wnt、刺猬基因蛋白、Krox-20、同源异型框、Notch、转化生长因子α和胰岛素样生长因子家族的成员。
本发明还包括包装和放置乳头细胞的装置，其中通过将包含乳头细胞的管状物封装构成该管状物各独立部分，进而构成包装和放置乳头细胞的装置。
本发明的一方面，通过可变形的装置将一个或多个管状物相互连接起来。
本发明的另一方面，该管状物包含生物惰性塑性材料。
本发明的另一方面，通过热封装、化学封装或机械封装将该管状物封装成多个部分。
本发明的另一方面，将所述部分分离构成包含硬质细杆和至少一种乳头细胞的载体。
附图的简要概述为了说明本发明，将本发明的某些实施方案表示在附图中。然而，本发明并不局限于附图中所表示的实施方案的具体装置和工具。
图1，包括图1A到图1D，表示在哺乳动物的表皮层中植入载体和乳头细胞，以朝美容可接受的方向产生新的毛囊。
图2表示用于将载体和乳头细胞包装、插入和放置的装置。该装置包括通过可变形装置相互连接的多个长管状物，这些管状物均被分隔成多个部分，将这些部分从长管状物上分离下来构成植入用的载体。
图3表示在长管状物中包装乳头细胞的方法。
图4表示植入乳头细胞后早期毛囊的结构。
发明的详细说明本发明包括将诱导性乳头细胞或生长因子释放入人体表皮的新方法，该方法以高毛囊生长成功率和朝美容可接受方向形成新的毛囊。由于只需要少量供体组织，该方法克服了当前毛发移植手术的破坏性或损伤性方面的不足。
本发明部分基于以下发现，即可以将人体毛囊乳头细胞植入表皮组织内部或下方，从而导致毛囊形成及后续的毛发生长。依照本发明，将乳头细胞与可移除的、生物惰性载体结合引入到人体皮肤内部或与人体皮肤相接触的位置，该载体能将乳头细胞植入皮肤表皮层下方或与皮肤表皮层相接触的位置。该惰性载体将乳头细胞带入真皮中并刺激表皮细胞沿着载体、朝向植入的乳头细胞向下生长。众所周知，诱导性乳头细胞吸引表皮细胞朝向它们(Arase et al.，2001，J.Dermatol.17667；Fuji et al.，2001，J.Dermatol.Sci.25206)。将载体朝美容可接受的方向穿过上皮层植入到皮肤内部或与皮肤接触的位置。将乳头细胞和载体固定在皮肤上并保留在植入点内，以促进上皮细胞柱的形成，该上皮细胞柱朝下并围绕着植入点生长，最终形成毛囊。可以用生长因子或转录因子或者表达这些因子的构建处理或包被载体，以促进毛囊的形成以及毛发的生长。经过前述的一段时间之后将载体从表皮层移除。
本发明还部分涉及以下发现，即在缺乏所加乳头细胞的条件下，将某些生长因子与表皮组织接触会诱导毛囊的形成或再生。依照本发明，将能接触表皮层的、可移除的、生物惰性载体植入皮肤。将该载体朝着美容可接受的方向植入上皮层中，并将其固定在皮肤上及保留在植入点内，以促进最终会形成毛囊的上皮细胞柱的形成。可以用生长因子或转录因子或者表达这些因子的构建处理或包被载体，以促进毛囊的形成及毛发的生长。经过前述的一段时间之后将载体从表皮层移除。
本发明还包括用于将含或不含乳头细胞的载体包装、植入和放置在皮肤上皮层中的新装置。依照本发明，通过连接装置，将含或不含乳头细胞且含或不含生长或转录因子但确实包含这些组分中至少一种的载体连接到其它载体上。该载体可能比需要植入皮肤的载体长，因此可以将其分段，从一个或多个长载体中形成更短的独立载体。在植入前，通过简单地将分段的载体切断或折断可以将其分开。
因此本发明涉及在哺乳动物身上朝所需方向诱导毛发生长的方法。该方法用于脱发者(尤其是男性和女性型秃发)和那些由于疤痕(例如烧伤、外伤、辐射损伤、化疗、压迫性损伤等等)导致毛发脱落者的毛发再生。虽然该方法通常用于头部皮肤，但其可用于整个身体上任何皮肤表面(如眼睑、眉毛处、胡须处、腹股沟区域等等)的毛发生长。
在本发明的一个实施方案中，植入用的乳头细胞来自生长毛发的头皮活组织。在另一个实施方案中，植入用的乳头细胞来自含毛囊的皮肤移植片。从供体源获得乳头细胞的方法是本领域所属普通技术人员清楚了解的(Jahoda and Oliver，1981，Br.J.Dermatol.，105623；Messenger，1984，Br.J.Dermatol，110685；Williams et al.，1994，Br.J.Dermatol.，130290)。
在另一个实施方案中，植入用的乳头细胞来自原代的细胞培养。在优选的实施方案中，植入用的乳头细胞来自增殖的细胞培养。
在一个实施方案中，在饲养细胞和/或乳头细胞生长因子存在条件下维持该乳头细胞培养。诱导性乳头细胞培养的维持和增殖条件及要求是本领域普通技术人员公知的(Kishimoto et al.，2000，Genes.Dev.141181；Cooley et al.，PCT/US98/13754)。
在本发明中，植入一段时间后将所用载体从皮肤中移除。在本发明的一个实施方案中，所述载体由刚性材料制成。在另一个实施方案中，该载体由包括但不限于塑性材料、金属或硬质纤维索线的材料制成。该载体的核心材料是生理惰性和生物惰性的。在另一个实施方案中，该载体是管状物。在另一个实施方案中，该载体是棒状物。在优选的实施方案中，该载体是生物惰性的塑料管。在一个实施方案中，植入的管状物的外径为约0.01mm到约3.0mm而其长度为约1mm到约20cm。在一个实施方案中，该管状物的内径是约0.01mm到约3.0mm。在一个实施方案中，该塑料管包含但不限于聚丙烯、聚乙烯、聚苯乙烯、TEFLON和聚碳酸酯。在另一个实施方案中，该载体被成形为非常类似已存在的或所需的毛发毛囊的形状。这种成形包括但不限于将该载体的截面轮廓调整为所需的形状，在该载体中放置弯管、曲管或盘管或者改变该载体的直径。
在本发明的一个实施方案中，将管状物分段并分割形成短管以作为植入皮肤中的载体(图2)。在本发明优选的实施方案中，该载体是被分隔成密封隔间的包含乳头细胞的管状物的一部分。在本发明的一个实施方案中，使用包括但不限于热封装、化学封装(如环氧和胶合)及使用机械方式(如夹钳、卷边或线系)封装的方法对该管状物进行封装。
在本发明的一个实施方案中，所用管状物相互连接在一起。在本发明的另一个实施方案中，通过可变形的装置将该管状物相互连接，以方便朝所需方向操作和安排该管状物或载体。在本发明的一个实施方案中，该可变形的装置包括但不限于索线、细绳、纸、薄金属片、塑料片和胶带。在本发明的优选实施方案中，该可变形装置连接从约1个到约100个管状物。更优选地，该可变形装置连接从约2个到约100个管状物。特别优选地，该可变形装置连接从约3个到约50个管状物。尤其特别优选地，该可变形装置连接有从约3个到约5个管状物。
在本发明的一个实施方案中，通过可变形装置将所用管状物在多个位置连接起来。在本发明的优选实施方案中，将可变形装置在管状物上每5mm到约每20cm连接一次。
在优选的实施方案中，植入前将所用乳头细胞容纳在所用管状物内。在一个实施方案中，植入前将悬浮在液体培养基中的乳头细胞封装在该管状物的每一个部分中。在本发明的一个实施方案中，在该管状物的部分中封装有约1到约107个乳头细胞。在优选实施方案中，将该管状物的独立封装的部分分离形成植入用的载体。在本发明的一个实施方案中，植入前通过使用切割工具、机械装置或加热将每一个部分从管状物上分离形成载体。
在本发明的一个实施方案中，所用载体包含生长或转录因子的蛋白质或核酸构建，且该载体可同时包含乳头细胞也可不包含乳头细胞。本文描述了包含生长或转录因子的载体的制造方法。
由于表皮对惰性异物的反应是试图将其从周围组织中隔离(Clark etal.，1998，Mol.Cell.Biol.Of Wound Repair，Plenum Pub.，Co.New York)，因此在本发明的优选实施方案中，将所用载体与皮肤表皮细胞接触放置以通过相邻表皮的向下生长来促进毛囊的生长和载体的“隔离”。这些朝下生长的细胞中包含可对乳头的诱导性产生反应的细胞群体(Ferraris etal.，1997，Int J Dev Biol，41491)。在本发明的另一个优选方面，在新生毛发毛囊形成后将所用载体移除。
在本发明的一个实施例中，用可促进表皮细胞向载体周围吸引、运动及其后续生长的生长因子包被载体，或者在载体中包含该生长因子。可考虑的生长因子包括但不限于下列生长因子家族的成员碱性成纤维细胞生长因子、纤维连接蛋白、表皮生长因子、毛发生素、转化生长因子-α、三叶因子、血小板衍生生长因子、血管内皮生长因子、胰岛素样生长因子、肝细胞生长因子、纤维蛋白、胶原和层粘连蛋白(Sigma ChemicalCo.St.Louis，MO)。该考虑的生长因子可以在溶液中应用到载体上再干燥、或者以干燥固体形式应用到载体上、或者可以混合到载体材料中。其它将这些生长因子加入到载体中的方法是本领域所属普通技术人员公知的。加入到载体中的生长因子的浓度可以是约0.01ng到约100mg(以每个载体所含生长因子的最终干重计)。
在另一个实施方案中，将生长因子能以表达上述所列非限定性生长因子的DNA构建形式加入到载体中。在一个实施方案中，将生长因子以载体(vector)或表达载体的形式加入到载体中。在一个实施方案中，该载体包含用于细胞自由转录和翻译的成分。这类成分包括RNA聚合酶和真核生物或原核生物的细胞提取物。这类成分是本领域所属普通技术人员公知的，而且可以从很多渠道获得(Ambion，Austin TX)。
制备和使用载体及表达载体的方法是本领域所属普通技术人员公知的(Sambrook et al.1989，Molecular CloingA Laboratory Manual，ColdSpring Harbor Laboratory，New York)。
在另一个实施方案中，将上述非限定性列出的生长因子以病毒载体形式与载体一起或者加入到载体中输入。实现该操作的方法是本领域所属技术人员公知的(Sato et al.，1999，J.Clin.Invest.104855)。
在优选实施方案中，用在新形成毛囊的生长和定位中起作用的反常表达的生长/转录因子包被载体，或者在载体中包含该生长/转录因子。考虑使用的生长/转录因子包括但不限于Krox-20、TGF-βRII(Gambardella etal.，2000，Mech.Dev.，9621 5)、刺猬基因蛋白(Chiang et al.，1999，Dev.Biol.，2051)，同源异型框蛋白(Widelitz et al.，1997，Microsc.Res.Tech.，38452)，Wnt族蛋白(Kishimoto et al.，2000，Genes.Dev.141181)，转化生长因子-α、胰岛素样生长因子(Philpott et al.，1994，J.Invest.Derm.，102857)和Notch蛋白(Lin et al.，2000，Development，127241)。该考虑使用的生长/转录因子可以在溶液中应用到载体上再干燥、或者以干燥固体形式应用到载体上、或者可以混合到载体材料中。将这些生长/转录因子混合到载体中的其它方法是本领域所属普通技术人员公知的。混合到载体中的生长/转录因子的浓度可以是约0.01ng到约100mg(以每个载体所含生长/转录因子的最终干重计)。
在另一个实施方案中，将上述非限定性列出的生长/转录因子以能表达蛋白的DNA构建加入到载体中。在一个实施方案中，将生长/转录因子以载体形式加入到载体中。在一个实施方案中，该载体包含用于细胞自由转录和翻译的成分。这类成分包括RNA聚合酶和真核生物或原核生物的细胞提取物。这类成分是本领域所属普通技术人员公知的，而且可以从很多渠道获得(Ambion，Austin TX)。
在另一个实施方案中，将上述非限定性列出的生长/转录因子以病毒载体形式与载体一起输入或者加入到载体中输入。实现该操作的方法是本领域所属技术人员公知的(Sato et al.，1999，J.Clin.Invest.104855)。
在本发明的一个实施方案中，用物理的和药理的方法处理待植入载体和乳头细胞的皮肤区域以促进毛囊的形成及毛发的生长。上述处理方法包括但不限于超声、紫外辐射、按摩以及应用诸如米诺地尔(minoxidil)局部制剂(Sigma Chemical Co.St.Louis，MO)。促进毛囊形成的其它方法是本领域所属普通技术人员公知的。
在本发明的优选实施方案中，将载体和乳头细胞植入到皮肤内，其目的是使本地表皮细胞接触该乳头细胞，以实现美容可接受的毛囊布置。载体和乳头细胞的深度、位置和植入角度是本领域所属普通技术人员清楚了解的。植入后经过前述的一段时间(从约2天到约10天)将该载体移除。根据新生毛囊的形成速率，该载体可以提前移除也可以推后移除。植入和移除之间的时间间隔是本领域所属普通技术人员清楚了解的。
可以通过任何方式植入载体和乳头细胞以实现美容可接受的毛囊布置和毛囊方向。在本发明的优选实施方案中，在植入载体和乳头细胞的皮肤区域制造非自然存在的小口。在本发明的另一个实施方案中，在皮肤上每次制造一个非自然存在的小口，而载体和乳头细胞也单个植入。在本发明的另一个实施方案中，一次制造多个非自然存在的小口，而载体和乳头细胞也成批植入。在本发明的另一个实施方案中，将许多载体和乳头细胞放置在支撑物里并同时植入。可以使用任何用于多个载体植入的装置将载体植入到皮肤内。
在本发明的一个实施方案中，将载体和乳头细胞在一个步骤中一次植入。在本发明的另一个实施方案中，将载体和乳头细胞分多次在多个步骤中植入。
在本发明的优选实施方案中，将载体固定在皮肤内以使载体周围的表皮细胞迁移和生长。在一个实施方案中，通过载体的定位作用将其固定在皮肤内。在另一个实施方案中，通过药物(包括但不限于DERMABONDTM或LIQUIDERMTM(Closure Medical Corp.Raleigh，NC))的粘附作用将载体固定。在另一个实施方案中，用缝合线、小钉或粘附带将载体固定。在本发明中，将载体在植入位置保留前述的一段时间，然后将其从皮肤中移除。包含载体周围表皮细胞的新生毛囊形成所需的时间长度是本领域所属普通技术人员清楚了解的。
定义本文所用的冠词“a”和“an”指一个(种)或大于一个(种)该冠词所限定的对象。例如，“an元素”指的是一种或超过一种元素。
本文所用的术语“多个”指两个或两个以上。
本文所用的术语“乳头细胞”指一种细胞类型，此类细胞被称为真皮乳头细胞或者毛囊乳头细胞，或者其它任何试图描述一组衍生自毛囊底部具有毛囊诱导特性的细胞的名称。
本文所用的术语“美容可接受的”指乳头细胞植入物的布置，由其产生的毛囊会定向到可预知的方向，该方向是由该植入过程的执行者确定的。
本文所用的术语“所需方向”指乳头细胞植入物的布置，由其产生的毛囊会定向到可预知的方向，该方向是由该植入过程的执行者确定的。
本文所用的术语“自体固有的”指从一个体到同一个体的组织移植。
本文所用的术语“同种异体的”指从一个体到同种不同个体的组织移植。
本文所用的术语“生长因子”指包含肽或蛋白质的生物生长因子，当接触表皮细胞时，其可促进表皮细胞的增殖、生长、成形、定向或者运动。
本文所用的术语“生长/转录因子”指包含肽或蛋白质的生物生长因子，当接触表皮细胞时，其可促进表皮细胞的增殖、生长、成形、定向或者运动。
本文所用的术语“反常表达”指分子呈现空间或时间的不规律形式。
本文所用的术语“表皮层”指位于真皮上方，构成身体外部覆盖物的组织层。
“载体(vector)”是包含分离的核酸且可用于将分离的核酸输入细胞内部的物质的组合物。本领域公知的载体很多，其中包括但不限于线性多核苷酸、与离子或两亲化合物关联的多核苷酸、质粒和病毒。因此术语“载体”包括自主复制的质粒或病毒。该术语还应该解释为包括可促进核酸转移至细胞内的非-质粒和非-病毒化合物如多熔素、脂质体等等。病毒载体的例子包括但不限于腺病毒载体、腺病毒相关载体、逆转录病毒载体等等。
“表达载体”指包含重组多核苷酸的载体，该载体包括将表达控制序列可操作地与待表达核苷酸序列连接。表达载体包含用于表达的足够的顺式作用元件；用于表达的其它元件可由宿主细胞或者体外表达系统提供。表达载体包括所有本领域公知的表达载体，如结合重组多核苷酸的粘粒、质粒(如裸的或包含在脂质体内的)和病毒。
动物身上的“非自然存在”的小口指不正常存在于动物身上的小口(切口、刺痕、伤口等)，该动物未患疾病或病症。
本文所用的术语“生物惰性”指当其与生物实体接触时，不会在该实体内产生反应，而该实体也不会对该物质产生反应。
本文引用的每一份专利、专利公开和出版物的公开内容在此将其全部引入作为本文参考。
虽然本发明已通过特定实施方案的予以公开，但是很显然本领域所属技术人员在不脱离本发明基本精神和范围的情况下可以设计出本发明的其它实施方案和变化。所附的权利要求应该解释为包括所有此类实施方案和同等变化。
权利要求
1.一种诱导哺乳动物毛发朝所需方向生长的方法，所述方法包括用包括硬质细杆和至少一种乳头细胞的载体与哺乳动物皮肤的表皮层接触，在所需方向上将所述载体固定到表皮层，及在一段时间后将所述载体从表皮层移除，从而诱导毛发朝所需方向生长。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述的哺乳动物是人。
3.如权利要求1所述的方法，其中所述的硬质细杆是管状物。
4.如权利要求1所述的方法，其中所述的硬质细杆是刚性索线。
5.如权利要求1所述的方法，其中所述的硬质细杆是棒状物。
6.如权利要求1所述的方法，其中所述的乳头细胞是自体固有的。
7.如权利要求1所述的方法，其中所述的乳头细胞是同种异体的。
8.如权利要求1所述的方法，其中所述的乳头细胞是在细胞培养液中增殖的。
9.如权利要求1所述的方法，其中所述的乳头细胞是从人体获得的。
10.如权利要求1所述的方法，其中所述的载体还包含生长因子。
11.如权利要求1所述的方法，其中所述的一段时间在约2天到约10天之间。
12.如权利要求1所述的方法，其中所述的载体还包含反常表达生长/转录因子。
13.如权利要求12所述的方法，其中所述的反常表达生长/转录因子是Wnt生长/转录因子家族的成员。
14.如权利要求12所述的方法，其中所述的反常表达生长/转录因子是刺猬基因(sonic hedgehog)生长/转录因子家族的成员。
15.如权利要求12所述的方法，其中所述的反常表达生长/转录因子是Krox-20生长/转录因子家族的成员。
16.如权利要求12所述的方法，其中所述的反常表达生长/转录因子是同源异型框生长/转录因子家族的成员。
17.如权利要求12所述的方法，其中所述的反常表达生长/转录因子是Notch生长/转录因子家族的成员。
18.如权利要求12所述的方法，其中所述的反常表达生长/转录因子是转化生长因子-α生长/转录因子家族的成员。
19.如权利要求12所述的方法，其中所述的反常表达生长/转录因子是胰岛素样生长因子生长/转录因子家族的成员。
20.一种诱导哺乳动物毛发朝所需方向生长的方法，所述方法包括用包括硬质细杆的载体与哺乳动物皮肤的表皮层接触，其中所述载体含有生长因子或生长/转录因子，并将所述载体朝所需方向固定在表皮层，及一段时间后将所述载体从表皮层移除，从而诱导毛发朝所需方向生长。
21.如权利要求20所述的方法，其中所述的哺乳动物是人。
22.如权利要求20所述的方法，其中所述的硬质细杆是管状物。
23.如权利要求20所述的方法，其中所述的硬质细杆是刚性索线。
24.如权利要求20所述的方法，其中所述的硬质细杆是棒状物。
25.如权利要求20所述的方法，其中所述的载体还包含生长因子。
26.如权利要求20所述的方法，其中所述的一段时间在约2天到约10天之间。
27.如权利要求20所述的方法，其中所述的载体还包含反常表达生长/转录因子。
28.如权利要求27所述的方法，其中所述的反常表达生长/转录因子是Wnt生长/转录因子家族的成员。
29.如权利要求27所述的方法，其中所述的反常表达生长/转录因子是刺猬蛋白生长/转录因子家族的成员。
30.如权利要求27所述的方法，其中所述的反常表达生长/转录因子是Krox-20生长/转录因子家族的成员。
31.如权利要求27所述的方法，其中所述的反常表达生长/转录因子是同源异型框生长/转录因子家族的成员。
32.如权利要求27所述的方法，其中所述的反常表达生长/转录因子是Notch生长/转录因子家族的成员。
33.如权利要求27所述的方法，其中所述的反常表达生长/转录因子是转化生长因子-α生长/转录因子家族的成员。
34.如权利要求27所述的方法，其中所述的反常表达生长/转录因子是胰岛素样生长因子生长/转录因子家族的成员。
35.一种包装和放置乳头细胞的装置，所述装置包括至少一个管状物，其中所述管状物包含封装在其独立部分内的乳头细胞，从而构成包装和放置乳头细胞的装置。
36.如权利要求35所述的装置，其中通过至少一个柔性装置将一个或多个管状物相互连接在一起。
37.如权利要求35所述的装置，其中所述管状物的材料包含生物惰性塑性材料。
38.如权利要求35所述的装置，其中使用包含热封装、化学封装和机械封装的方法对所述管状物进行封装。
39.如权利要求35所述的装置，其中将所述的独立部分从所述的管状物上分离以形成包括硬质细杆和至少一种乳头细胞的载体。
全文摘要
本发明涉及用于在哺乳动物身上朝美容可接受的方向诱导毛发毛囊形成及后续毛发生长的组合物和方法。该方法进一步包括使用载体在表皮层下或者与表皮层接触的地方植入乳头细胞或生长因子以引导表皮的生长，并由此形成新生毛发毛囊。毛发毛囊开始形成之后将载体移除。本发明还包括包装和释放乳头细胞的装置。
文档编号C12M3/00GK1646080SQ03808242
公开日2005年7月27日 申请日期2003年4月16日 优先权日2002年4月17日
发明者库尔特S·斯滕 申请人:阿德兰斯研究院有限公司