鸭胚胎骨骼标本制作试剂盒的利记博彩app
【技术领域】
[0001]本实用新型属于生物学领域，利用阿利新蓝和茜素红可使骨骼快速染色，梯度和混合比例KOH溶液脱色技术，提供一种鸭胚胎骨骼标本制作试剂盒。
【背景技术】
[0002]家鸭是我国养殖数量第二的家禽，鸭存栏数从1990年的3.29亿只(占世界总量59.7%)增加到2010年的6.65亿只(占世界总量66.5 % )，养鸭业已成为我国畜牧业经济收入的重要支柱。
[0003]鸭子是水禽的重要模式生物，骨骼的生长发育是鸭子生长发育的重要组成部分。家禽的骨骼在生长发育过程中不形成骨骺的次级骨化中心，所以无骨骺和骨骺软骨，骨的加长主要依赖于骨端软骨的增生和骨化。家禽的骨骼与哺乳动物等差异较大，家禽的骨骼具有强度大而重量轻的特点，含有较多的无机钙盐，并且躯干部有些骨已经互相愈合。而鸭子的骨骼又与家鸡、鹅等存在差异，具有物种特异性。
[0004]传统的骨骼标本利记博彩app一般包括:剔肉、去骨髓、腐蚀、漂白、串装等步骤，制作过程繁琐，尤其是剔肉和最后的串装步骤工作量大且需要操作者具有较强的专业知识和操作技能，否则会造成骨骼的损坏和骨骼安装的错误，制作周期长。另外，传统的骨骼利记博彩app主要适用于体型相对较大的动物，并且骨骼发育基本完成，对于骨骼尚未钙化及硬化的胚胎则难以完成标本制作工作。
[0005]因此，需要一种简易的鸭胚胎骨骼标本利记博彩app及装置。
【实用新型内容】
[0006]本实用新型的目的是提供一种鸭胚骨骼标本制作试剂盒，该试剂盒用于鸭胚胎骨骼标本制作，操作简单，周期短，便于观察。
[0007]本实用新型的目的通过以下技术方案实现的，一种鸭胚骨骼标本制作试剂盒，包括盒体和盒体内的衬垫，所述衬垫的各孔腔内分别设有染色液A、染色液B、梯度KOH脱色液C、混合比例脱色液D ;
[0008]所述染色液A为由0.15g阿利新蓝、700ml无水乙醇、50ml冰醋酸，用蒸馏水定容至100ml得到；
[0009]所述染色液B为由0.05g茜素红、700ml无水乙醇，用蒸馏水定容至100ml得到；
[0010]梯度KOH脱色液C: 2%、1.5%、1%的KOH溶液三种，配制方法分别为:2%的KOH溶液:2g Κ0Η，用蒸馏水定容至100ml ；1.5%的KOH溶液:1.5g Κ0Η，用蒸馏水定容至10ml ；1%的KOH溶液:lg Κ0Η，用蒸馏水定容至10ml ；
[0011]混合比例脱色液D:质量浓度为1% KOH溶液与甘油(丙三醇)分别按照1:4、2:3、3:2,4:1的不同体积比例，配制成500ml的混合比例脱色溶液。
[0012]上述鸭胚胎骨骼标本制作试剂盒使用方法:
[0013]1、骨骼的染色
[0014]I)标本的前期准备
[0015]将孵化的鸭种蛋从孵化器取出，从种蛋中取出胚胎，剥去体表皮肤。从肛门前开一小口从中掏出内脏，体表和腹腔内的脂肪也要去除，处理完毕后要保持材料的形体完整。处理后的鸭胚，整理好姿势，浸泡在95%酒精中固定，I天以后更换新的固定液，继续浸泡2-3天，直至标本脱水硬化。固定后的标本浸泡在丙酮内脱脂2-3天，取出，自来水持续冲洗8-16小时，至漂浮的标本沉入水底为止。
[0016]2)标本的骨骼染色
[0017]将标本浸泡在染色液A中2-3天，取出，用70%酒精溶液洗去表面残留的染液，然后将标本置于染色液B中2-3天。
[0018]3)标本的骨骼脱色
[0019]将染色后的标本置于梯度KOH脱色液C中，浸泡顺序与时间分别为:2%的KOH溶液，12小时；1.5%的KOH溶液，24小时；1%的KOH溶液，3天。直至肌肉颜色变浅，成透明冻状，骨组织变为深蓝色，部分长骨中段显示红色，且骨骼系统充分显现出来。
[0020]将标本从KOH溶液中小心取出，置于混合比例KOH溶液D中，每次浸泡时间为2天，浸泡顺序为1:4、2:3、3:2、4:1，以标本沉入溶液底部为准。
[0021]将制好的鸭胚胎骨骼标本转入纯甘油中，用广口瓶密封保存。
[0022]与现有技术相比，本实用新型具有以下有益效果:
[0023]第一，本实用新型由染色液A、染色液B、梯度KOH脱色液C、混合比例KOH脱色液D组成。该试剂盒操作简单，成本低廉，周期较短，可以便利的观察鸭胚胎时期的骨骼发育情况，为研宄鸭胚生长发育提供便利；
[0024]第二，本实用新型通过反复摸索和验证，采用适宜的pH值，染色时间，适宜浓度与比例的KOH脱色液，可以在保持标本外形完整的情况下显示出体内骨骼部分，从而显示出鸭胚胎发育过程中的骨骼发育情况，便于观察，操作简单，周期较短，普通科技人员均可以制作，为研宄和教学等提供便利；
[0025]第三，本实用新型利用在pH范围为5-7时，阿利新蓝用于动物骨骼中软骨的染色，茜素红用于骨骼中硬骨的染色，梯度KOH溶液和混合比例KOH溶液用于脱色，制作的鸭胚胎标本骨骼显示清晰，无损伤变形等。本实用新型设计合理、使用简单方便，周期较短且便于观察，为研宄和教学提供便利。
【附图说明】
[0026]图1为本实用新型鸭胚胎骨骼标本制作试剂盒的结构示意图；
[0027]图中:I一盒体、2—衬垫、3—染色液A、4一染色液B、5—梯度KOH脱色液C、6—混合比例脱色液D。
【具体实施方式】
[0028]结合实施例和附图作进一步说明本实用新型。应理解，这些实施例仅用于说明目的，而不用于限制本实用新型范围。
[0029]如图1所示，一种鸭胚骨骼标本制作试剂盒，由盒体1、盒体内的衬垫2、染色液A3、染色液B 4、梯度KOH脱色液C 5和混合比例KOH脱色液D 6组成。
[0030]衬垫2的各孔腔内分别置入染色液A、染色液B、梯度KOH脱色液C、混合比例KOH
脱色液D。
[0031]其中各个组成部分的详细信息如下:
[0032]染色液A:0.15g阿利新蓝(Alcian Blue 8GX)，700ml无水乙醇，50ml冰醋酸，用蒸馏水定容至1000ml。
[0033]染色液B:0.05g茜素红(Alizarin Red S)，700ml无水乙醇，用蒸饱水定容至100ml0
[0034]梯度KOH脱色液C: 2%、1.5%、1%的KOH溶液三种，配制方法分别为:2%的KOH溶液:2g Κ0Η，用蒸馏水定容至100ml ；1.5%的KOH溶液:1.5g Κ0Η，用蒸馏水定容至10ml ；1%的KOH溶液:lg Κ0Η，用蒸馏水定容至100ml。
[0035]混合比例脱色液D: 1% KOH溶液与甘油(丙三醇)分别按照1:4、2:3、3:2、4:1的不同体积比例，配制成500ml的混合比例脱色溶液。
[0036]运用本试剂盒对孵化14、21天的鸭胚进行骨骼标本制作。
[0037]将孵化的鸭胚胎取出，剥去体表皮肤。从肛门前开一小口从中掏出内脏，体表和腹腔内的脂肪也要去除，处理完毕后要保持材料的形体完整。
[0038]处理后的鸭胚，整理好姿势，浸泡在95 %酒精中固定，I天以后更换新的固定液，孵化14天的鸭胚继续浸泡2天，21天鸭胚继续浸泡3天，直至标本脱水硬化。
[0039]固定后的14天鸭胚标本浸泡在丙酮内脱脂2天，21天鸭胚浸泡在丙酮内脱脂3天。取出脱脂后的鸭胚标本，自来水持续冲洗8-16小时，至漂浮的标本沉入水底为止。
[0040]将标本浸泡在染色液A中2天，取出，用70%酒精溶液洗去表面残留的染液，然后将标本置于染色液B中2天。
[0041]将染色后的标本置于梯度KOH脱色液C中，浸泡时间与次序为:2%的KOH溶液中浸泡8-12小时，更换1.5%的KOH溶液浸泡浸泡12-24小时，然后将标本置于1% KOH溶液中继续脱色2-3天，直至肌肉颜色变浅，成透明冻状，骨组织变为深蓝色，且骨骼系统充分显现出来。
[0042]将标本从KOH溶液中小心取出，依次将标本浸泡于1:4、2:3、3:2、4:1的1% KOH溶液与甘油(丙三醇)混合比例脱色液D中，每次浸泡时间为1-2天，以标本沉入溶液底部为准。
[0043]将制好的鸭胚胎骨骼标本转入纯甘油中，用广口瓶密封保存。制作完成后的鸭胚骨骼标本。
[0044]以上所述，仅是本实用新型的具体实施例，并非对本实用新型的任何限制，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本实用新型的保护范围。
【主权项】
1.一种鸭胚胎骨骼标本制作试剂盒，包括盒体(I)和盒体内的衬垫(2)，其特征是，所述衬垫的各孔腔内分别设有染色液A (3)、染色液B (4)、梯度KOH脱色液C (5)、混合比例脱色液D (6)； 所述染色液A (3)为由0.15g阿利新蓝、700 ml无水乙醇、50 ml冰醋酸，用蒸馏水定容至1000 ml得到； 所述染色液B (4)为由0.05g茜素红、700 ml无水乙醇，用蒸馏水定容至1000 ml得到； 所述梯度KOH脱色液C (5)由分别用2g，1.5g，Ig的KOH用蒸馏水定容至100 ml得到质量浓度分别为2%、1.5%、1%的KOH溶液组成； 所述混合比例脱色液D (6)用质量浓度1% KOH溶液与甘油分别按照1:4、2:3、3:2、4:1的体积比例配制得到，四种梯度溶液的体积均为500ml。
【专利摘要】本实用新型公开了一种鸭胚胎骨骼标本制作试剂盒，属于生物学领域。鸭胚胎骨骼标本制作试剂盒由盒体、盒体内的衬垫、衬垫的各孔腔内分别置入染色液A、染色液B、梯度KOH脱色液C、混合比例脱色液D。本实用新型根据在pH范围为5-7时，利用染料阿利新蓝用于动物骨骼中软骨的染色，茜素红用于骨骼中硬骨的染色，梯度和混合比例KOH脱色液脱色使骨骼不易离散，效果明显，骨骼与肌肉颜色区别较为清楚，方法简单，在保持标本外形完整的情况下显示出体内骨骼部分，便于观察，为研究和教学提供便利。
【IPC分类】A01N1-00
【公开号】CN204579652
【申请号】CN201420754132
【发明人】李慧芳, 宋迟, 姬改革, 徐文娟, 宋卫涛, 单艳菊, 朱文奇, 束婧婷, 朱春红, 刘宏祥, 陶志云
【申请人】江苏省家禽科学研究所
【公开日】2015年8月26日
【申请日】2014年12月5日