一种铁皮石斛组培苗生根壮苗的培养基的利记博彩app
【专利摘要】本发明涉及组培技术领域，具体涉及一种铁皮石斛组培苗生根壮苗的培养基，所述培养基由母液Ⅰ、母液II、母液III、母液Ⅳ、母液V和母液VI混合而成，且各个母液的体积比为5?8:1?2：1?2：1?2：5?8:0.01?0.02；所述母液VI由下列重量份的物质组成：恶霉灵10?15mg/L、复硝酚钠10?20mg/L、α?萘乙酸钠10?50mg/L、微囊藻素10?50mg/L、胺鲜酯20?50mg/L。本发明具有能够快速促进壮苗生根，生根率达到100％，且壮苗生根后的植株平均根数达到25?30条的优点，且制备工艺简单易操作，便于推广。
【专利说明】一种铁皮石斛组培苗生根壮苗的培养基 【技术领域】
[0001] 本发明涉及组培技术领域，具体涉及一种铁皮石斛组培苗生根壮苗的培养基。 【【背景技术】】
[0002] 铁皮石斛(Dendrobium officinale)为兰科石斛属多年生草本植物，在《道藏》中 被列为"中华九大仙草"之首，具有强阴益精、养胃生津、降三高、提高人体免疫力、抗衰老、 抗肿瘤等功效。因其具有独特的功效，铁皮石斛自古以来一直为广大养生之士所青睐。野生 铁皮石斛主要分布在浙江、安徽、贵州、江西、云南等地，铁皮石斛种子因其独特的构造，无 法独自萌发，只有在碰到合适的共生菌的情况下才有可能自然萌发，加之人们对野生资源 的疯狂采挖，现在野生铁皮石斛资源已经濒临灭绝。因药用需求的不断发展，野生石斛资源 濒于灭绝，建立一种高效的人工栽培生产技术是当前必需解决的重要课题。石斛组织培养 快繁育苗技术业已成熟，主要面临的问题是试管苗出瓶移栽成活率低和生长慢的两大难 题。目前，尽管对石斛试管苗移栽的苗龄、移栽时间、移栽条件有过研究，但试管苗出瓶移栽 成活率仍然较低且生长缓慢。传统的铁皮石斛组织培养中，壮苗生根一般是在基础培养基 的基础上通过添加激素如NAA、6-BA等促进铁皮石斛种苗的生长和增值，但是这些传统的方 法还是无法达到促进栽培苗速生优质。 【
【发明内容】
】
[0003] 本发明的发明目的在于：针对上述存在的问题，提供一种铁皮石斛组培苗生根壮 苗的培养基，能够快速促进壮苗生根，生根率达到100%，且壮苗生根后的植株平均根数达 到25-30条。
[0004] 为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
[0005] -种铁皮石斛组培苗生根壮苗的培养基，所述培养基由母液I、母液II、母液III、 母液IV、母液V和母液Vr混合而成，且各个母液的体积比为5-8:1-2 :1-2 :1-2: 5-8 :0.01-〇. 02;所述母液VI由下列重量份的物质组成：恶霉灵10-15mg/L、复硝酚钠10-20mg/L、a-萘 乙酸钠10-50mg/L、微囊藻素10-50mg/L、胺鲜酯20-50mg/L。
[0006] 进一步的说明，所述母液I由下列重量份的物质组成:硝酸铵800-900mg/L、磷酸二 氢钾 140-150mg/L、硫酸镁 170-190mg/L、硝酸钾 900-1000mg/L、二水合氯化钙 900-1000mg/ L；
[0007] 所述母液II由下列重量份的物质组成:五水合硫酸铜0.040-0.060mg/L、硼酸0.6-0 · 8mg/L、硫酸锰 15 · 5-17 · 5mg/L、硫酸锌 8-9mg/L、氯化钴 0· 04-0.06mg/L、碘化钾 0 · 3-0 · 5mg/L、钼酸钠 0 · 2-0 · 35mg/L;
[0008] 所述母液III由下列重量份的物质组成：七水合硫酸亚铁25-29mg/L、乙二胺四乙 酸钠 35-40mg/L;
[0009] 所述母液IV由下列重量份的物质组成:甘氨酸2-5mg/L、肌醇100-115mg/L、盐酸硫 胺素0 · 3-0 · 55mg/L、盐酸吡哆素0 · 3-0 · 5mg/L、烟酸0 · 3-0 · 55mg/L;
[0010] 所述母液V由下列重量份的物质组成：吲哚丁酸1.2-2mg/L、萘乙酸1.2-2.0g/L、碳 粉0 · 7-lg/L、琼脂5 · 6-6 · Og/L、香蕉110-125g/L、白砂糖 15-22g/L。
[0011] 进一步的说明，所述母液I由下列重量份的物质组成:硝酸铵820mg/L、磷酸二氢钾 146.5mg/L、硫酸镁 176mg/L、硝酸钾953mg/L、二水合氯化 钙965mg/L;
[0012] 所述母液II由下列重量份的物质组成：五水合硫酸铜0.048mg/L、硼酸0.65mg/L、 硫酸锰16 · 6mg/L、硫酸锌8 · 5mg/L、氯化钴(h 048mg/L、碘化钾(h 39mg/L、钼酸钠 (h 27mg/L;
[0013] 所述母液III由下列重量份的物质组成:七水合硫酸亚铁28.2mg/L、乙二胺四乙酸 钠36.7mg/L;
[0014] 所述母液IV由下列重量份的物质组成:甘氨酸2.3mg/L、肌醇112.5mg/L、盐酸硫胺 素0 · 47mg/L、盐酸吡咳素0 · 45mg/L、烟酸0 · 46mg/L;
[0015] 所述母液V由下列重量份的物质组成：吲哚丁酸1.95mg/L、萘乙酸1.39g/L、碳粉 0 · 95g/L、琼脂5 · 85g/L、香蕉121g/L、白砂糖19 · 5g/L。
[0016] 进一步的说明，所述母液VI由下列重量份的物质组成:恶霉灵12.5mg/L、复硝酚钠 18 · 8mg/L、a-萘乙酸钠 22 · 5mg/L、微囊藻素 20mg/L、胺鲜酯 31 · 8mg/L。
[0017]进一步的说明，所述培养基的ρΗ=5·0-6·0。
[0018] 进一步的说明，所述培养基的配置是将母液I、母液II、母液III、母液IV、母液V和 母液VI分别按照各自的重量份配置后，按照体积比为5-8:1-2:1-2:1-2:5-8:0.01-0.02混 合，再煮沸调节PH，最后进行高压灭菌后即可。
[0019]综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
[0020] 1.本发明在传统的培养基的配方上改进，且进一步的进行研究，添加一些能够在 铁皮石斛苗在生根壮苗期间所需的因子，能够提供生根的良好条件，促进苗健康茁壮，经过 研究发现采用本发明的基础培养液后添加本发明的母液母液VI配方，能够快速促进壮苗生 根，生根率达到100%，且壮苗生根后的植株平均根数达到25-30条;其中胺鲜酯能够高植物 过氧化物酶和硝酸还原酶的活性，促进根系的发育，调节体内养分的平衡;微囊藻素中富含 有活性氧，植物中低浓度的活性氧作为第二信使能在植物细胞信号转导途径中介导多种应 答反应，但是高浓度的活性氧则引起生物大分子的氧化损伤甚至细胞死亡，经过试验研究 在配方中添加微囊藻素20mg/L且占在整个培养基配方中的0.01-0.02，保证能够提供给植 物低浓度的活性氧，不会损伤细胞，起到第二信使的作用，促进生长素流向植物系统，使得 根向地性更好，促进直根系生长;复配上的a-萘乙酸钠，能诱导形成不定根，调节生长、促进 生根，但是其的渗透力较差，需要借助外力将其带动流向植物全身;复硝酚钠能够与植物接 触后能迅速渗透到植物体内，促进细胞的原生质流动，提高细胞活力，a-萘乙酸钠在复硝酚 钠的带动下也能迅速的渗透至植物体内；在组培过程中往往会出现黄化现象，一般两个原 因，细胞活性不足死亡和病菌感染死亡，恶霉灵的复配添加能够有效的抑制病原真菌菌丝 体的正常生长或直接杀死病菌，又能促进植物生长;并具有促进作物根系生长发育、生根壮 苗，提且其渗透率极高，两个小时就能移动到茎部，保证了铁皮石斛苗在第一时间上拥有健 康的培养环境，提高铁皮石斛苗的成活率。
[0021 ] 2.本发明的设计思路新颖，制备工艺简单，易操作，具有极大的推广意义。 【【具体实施方式】】
[0022] 实施例1:
[0023] -种铁皮石斛组培苗生根壮苗的培养基，由母液I、母液II、母液III、母液IV、母液 V和母液VI按照体积比为5:1:1:1:5:0.01混合，再煮沸调节pH = 5.0，最后进行高压灭菌后 即可；
[0024] 母液I由下列重量份的物质组成:硝酸铵800-900mg/L、磷酸二氢钾140-150mg/L、 硫酸镁 170-190mg/L、硝酸钾900-1000mg/L、二水合氯化钙900-1000mg/L;
[0025] 母液II由下列重量份的物质组成：五水合硫酸铜0.040-0.060mg/L、硼酸0.6-0 · 8mg/L、硫酸锰 15 · 5-17 · 5mg/L、硫酸锌 8-9mg/L、氯化钴 0· 04-0.06mg/L、碘化钾 0 · 3-0 · 5mg/L、钼酸钠 0 · 2-0 · 35mg/L;
[0026] 母液III由下列重量份的物质组成：七水合硫酸亚铁25-29mg/L、乙二胺四乙酸钠 35_40mg/L;
[0027] 母液IV由下列重量份的物质组成:甘氨酸2-5mg/L、肌醇100-115mg/L、盐酸硫胺素 0 · 3-0 · 55mg/L、盐酸吡哆素0 · 3-0 · 5mg/L、烟酸0 · 3-0 · 55mg/L;
[0028] 母液V由下列重量份的物质组成：吲哚丁酸1.2-2mg/L、萘乙酸1.2-2.0g/L、碳粉 0 · 7-lg/L、琼脂5 · 6-6 · Og/L、香蕉110-125g/L、白砂糖 15-22g/L。
[0029] 母液VI由下列重量份的物质组成:恶霉灵10_15mg/L、复硝酚钠10-20mg/L、a-萘乙 酸钠 10-50mg/L、微囊藻素 10-50mg/L、胺鲜酯 20-50mg/L。
[0030] 实施例2:
[0031 ] -种铁皮石斛组培苗生根壮苗的培养基，由母液I、母液II、母液III、母液IV、母液 V和母液VI按照体积比为8: 2:2:2:8:0.02混合，再煮沸调节pH = 6.0，最后进行高压灭菌后 即可；
[0032] 母液I由下列重量份的物质组成:硝酸铵800-900mg/L、磷酸二氢钾140-150mg/L、 硫酸镁 170-190mg/L、硝酸钾900-1000mg/L、二水合氯化钙900-1000mg/L;
[0033] 母液II由下列重量份的物质组成：五水合硫酸铜0.040-0.060mg/L、硼酸0.6-0 · 8mg/L、硫酸锰 15 · 5-17 · 5mg/L、硫酸锌 8-9mg/L、氯化钴 0· 04-0.06mg/L、碘化钾 0 · 3-0 · 5mg/L、钼酸钠 0 · 2-0 · 35mg/L;
[0034] 母液III由下列重量份的物质组成：七水合硫酸亚铁25-29mg/L、乙二胺四乙酸钠 35_40mg/L;
[0035] 母液IV由下列重量份的物质组成:甘氨酸2-5mg/L、肌醇100-115mg/L、盐酸硫胺素 0 · 3-0 · 55mg/L、盐酸吡哆素0 · 3-0 · 5mg/L、烟酸0 · 3-0 · 55mg/L;
[0036] 母液V由下列重量份的物质组成：吲哚丁酸1.2-2mg/L、萘乙酸1.2-2.0g/L、碳粉 0 · 7-lg/L、琼脂5 · 6-6 · Og/L、香蕉110-125g/L、白砂糖 15-22g/L。
[0037] 母液VI由下列重量份的物质组成:恶霉灵10_15mg/L、复硝酚钠10-20mg/L、a-萘乙 酸钠 10-50mg/L、微囊藻素 10-50mg/L、胺鲜酯 20-50mg/L。
[0038] 实施例3:
[0039] -种铁皮石斛组培苗生根壮苗的培养基，由母液I、母液II、母液III、母液IV、母液 V和母液VI按照体积比为7:1:2:2:6:0.015混合，再煮沸调节pH = 5.8,最后进行高压灭菌后 即可；
[0040] 母液I由下列重量份的物质组成:硝酸铵820mg/L、磷酸二氢钾146.5mg/L、硫酸镁 176mg/L、硝酸钾953mg/L、二水合氯化|丐96511^凡；
[0041 ] 母液II由下列重量份的物质组成：五水合硫酸铜0.048mg/L、硼酸0.65mg/L、硫酸 锰16 · 6mg/L、硫酸锌 8 · 5mg/L、氯化钴 0· 048mg/L、碘化钾 O · 39mg/L、钼酸钠 0· 27mg/L;
[0042] 母液III由下列重量份的物质组成：七水合硫酸亚铁28.2mg/L、乙二胺四乙酸钠 36.7mg/L；
[0043] 母液IV由下列重量份的物质组成：甘氨酸2.3mg/L、肌醇112.5mg/L、盐酸硫胺素 0 · 47mg/L、盐酸吡咳素 0 · 45mg/L、烟酸 0 · 46mg/L;
[0044] 母液V由下列重量份的物质组成：吲哚丁酸1.95mg/L、萘乙酸1.39g/L、碳粉0.95g/ L、琼脂5.85g/L、香蕉 121g/L、白砂糖 19.5g/L。
[0045] 母液VI由下列重量份的物质组成:恶霉灵12.5mg/L、复硝酚钠18.8mg/L、α-萘乙酸 钠 22 · 5mg/L，微囊藻素 20mg/L，胺鲜酯31 · 8mg/L。
[0046] 实施例4:
[0047] 不含母液VI成分，其余与实施例1相同。
[0048] 实施例5:
[0049]母液VI由下列重量份的物质组成：恶霉灵20mg/L、复硝酚钠30mg/L、a-萘乙酸钠 100mg/L，微囊藻素60mg/L，胺鲜酯60mg/L;其余与实施例1相同。
[0050] 实施例6:
[00511 培养基由母液I、母液II、母液III、母液IV、母液V和母液vr混合而成，且各个母液 的体积比为5:1:1:1:5:0.05;其余与实施例5相同。
[0052]试验例:选择苗高为3-5cm、叶片数3-5片的无根铁皮石斛种苗，弃去黄化和发育不 良的种苗，无菌条件下接入实施例1-6制备得到的培养基，每个处理接种10瓶，每瓶10颗，培 养温度(25±1)°C，光照强度2000-25001X，光照时间12h/cL60d后观察统计铁皮石斛苗生根 和生长情况，并记录生根条数、根粗、生根率，结果见表1;
[0053]表1各个实施例铁皮石斛苗的生长情况
均根数和根粗也优于其他实施例，且实施例3为最佳效果配方。实施例4中没有添加母液VI， 其他条件均与本发明技术方案相同，其生根率也达到100%，但是根数和根粗均比实施例1-3要低;实施例5,增加了母液VI中各个成分的含量，但是占整个培养基体积的量与实施例1 相同，生根率降低了五个百分点，根数和根粗均急速下降；实施例6,不仅与实施例5相同增 加了母液VI中各个成分的含量，且提高占据整个培养基体积的份数，不仅没有起到生根壮 苗的效果，反而严重的影响了铁皮石斛苗的生长，使得细胞死亡，铁皮石斛苗黄化发育不 良，影响生根率，根数与根粗与实施例1-3降低了50%以上。
[0056]上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明，但实施例并非用以限定本发 明的专利申请范围，凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更，均应属 于本发明所涵盖专利范围。
【主权项】
1. 一种铁皮石斛组培苗生根壮苗的培养基，其特征在于:所述培养基由母液I、母液II、 母液III、母液IV、母液V和母液Vr混合而成，且各个母液的体积比为5-8:1-2:1-2:1-2:5-8: 0.01-0.02;所述母液￥1由下列重量份的物质组成:恶霉灵10-1511^/1、复硝酚钠10-201^/1、 α-萘乙酸钠10-50mg/L、微囊藻素10-50mg/L、胺鲜酯20-50mg/L。2. 根据权利要求1所述的一种铁皮石斛组培苗生根壮苗的培养基，其特征在于:所述母 液I由下列重量份的物质组成:硝酸铵800-900mg/L、磷酸二氢钾140-150mg/L、硫酸镁170-190mg/L、硝酸钾900-1000mg/L、二水合氯化钙900-1000mg/L; 所述母液Π 由下列重量份的物质组成：五水合硫酸铜0.040-0.060mg/L、硼酸0.6-0 · 8mg/L、硫酸锰 15 · 5-17 · 5mg/L、硫酸锌 8-9mg/L、氯化钴 0· 04-0.06mg/L、碘化钾 0 · 3-0 · 5mg/L、钼酸钠 0 · 2-0 · 35mg/L; 所述母液III由下列重量份的物质组成：七水合硫酸亚铁25-29mg/L、乙二胺四乙酸钠 35_40mg/L; 所述母液IV由下列重量份的物质组成:甘氨酸2_5mg/L、肌醇100-115mg/L、盐酸硫胺素 0 · 3-0 · 55mg/L、盐酸吡哆素0 · 3-0 · 5mg/L、烟酸0 · 3-0 · 55mg/L; 所述母液V由下列重量份的物质组成：吲哚丁酸1.2-2mg/L、萘乙酸1.2-2 . Og/L、碳粉 0 · 7-lg/L、琼脂5 · 6-6 · Og/L、香蕉110-125g/L、白砂糖 15-22g/L。3. 根据权利要求1所述的一种铁皮石斛组培苗生根壮苗的培养基，其特征在于:所述母 液I由下列重量份的物质组成：硝酸铵820mg/L、磷酸二氢钾146.5mg/L、硫酸镁176mg/L、硝 酸钾953mg/L、二水合氯化钙965mg/L; 所述母液Π 由下列重量份的物质组成：五水合硫酸铜0.048mg/L、硼酸0.65mg/L、硫酸 锰16 · 6mg/L、硫酸锌 8 · 5mg/L、氯化钴 0· 048mg/L、碘化钾 0 · 39mg/L、钼酸钠 0· 27mg/L; 所述母液III由下列重量份的物质组成：七水合硫酸亚铁28.2mg/L、乙二胺四乙酸钠 36.7mg/L； 所述母液IV由下列重量份的物质组成：甘氨酸2.3mg/L、肌醇112.5mg/L、盐酸硫胺素 0 · 47mg/L、盐酸吡咳素 0 · 45mg/L、烟酸 0 · 46mg/L; 所述母液V由下列重量份的物质组成：吲哚丁酸1.95mg/L、萘乙酸1.39g/L、碳粉0.95g/ L、琼脂5.85g/L、香蕉 121g/L、白砂糖 19.5g/L。4. 根据权利要求1或2或3所述的一种铁皮石斛组培苗生根壮苗的培养基，其特征在于： 所述母液VI由下列重量份的物质组成：恶霉灵12.5mg/L、复硝酚钠18.8mg/L、a-萘乙酸钠 22.5mg/、微囊藻素 20mg/L、胺鲜酯 31.8mg/L。5. 根据权利要求2或3所述的一种铁皮石斛组培苗生根壮苗的培养基，其特征在于:所 述培养基的PH=5.0-6.0。6. 根据权利要求5所述的一种铁皮石斛组培苗生根壮苗的培养基，其特征在于:所述培 养基的配置是将母液I、母液II、母液III、母液IV、母液V和母液VI分别按照各自的重量份配 置后，按照体积比为5-8:1-2:1-2:1-2:5-8:0.01-0.02混合，再煮沸调节pH，最后进行高压 灭菌后即可。
【文档编号】A01H4/00GK105941144SQ201610271756
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年4月27日
【发明人】张小英, 吴长城
【申请人】凌云县长生仙草生物科技开发有限公司