一种何首乌促进生根培养基及其配制方法
【技术领域】
[0001 ]本发明属于何首乌组织培养技术领域，特别涉及一种何首乌促进生根培养基，还 涉及一种何首乌促进生根培养基的配制方法。
【背景技术】
[0002] 何首乌，是寥科何首乌属多年生缠绕藤本植物，块根肥厚，长椭圆形，黑褐色，其块 根入药，可安神、养血、活络、消痈，是常见的中药材。
[0003] 目前组织培养是何首乌人工快速繁殖的常用手段之一，然而现有的组织培养技术 中何首乌出根培养的发根率不高，影响何首乌的组培快繁效率，同时因不能发根而造成大 量何首乌芽苗褐化死亡，浪费生产资源。
【发明内容】
[0004] 基于现有技术存在上述问题，本发明提供一种何首乌促进生根培养基，其以1/2 MS培养基为基础培养基，并添加有NAA(萘乙酸）、KT(激动素）、含铈可溶性化合物、琼脂粉和 白砂糖，其具有发根率高、节约生产资源的优点。
[0005] -种何首乌促进生根培养基，以1/2 MS培养基为基础培养基，并添加有NAA(萘乙 酸）、ΚΤ(激动素）、含铈可溶性化合物、琼脂粉和白砂糖。
[0006] 1/2 MS培养基为常规MS培养基大量元素浓度减少一半而制成，MS培养基为高盐培 养基，采用1/2MS培养基可以降低无机盐的浓度，更有利于促进何首乌芽发根。
[0007] 4(萘乙酸）的浓度为0.2-0.811^/1，1〇'(激动素）的浓度为0.1-0.6 11^/1，含铈可 溶性化合物的浓度为〇.1-〇.211^，琼脂粉的浓度为8~118/1，蔗糖的浓度为25~358/1。
[0008] NAA(萘乙酸）的浓度为0 · 3-0 · 7mg/L，KT(激动素）的浓度为0 · 2-0 · 4 mg/L，含铈可 溶性化合物的浓度为0.14-0.1811^，琼脂粉的浓度为9~1(^/1，鹿糖的浓度为28~338/1。
[0009] 所述的何首乌叶片诱导培养基的pH值为6.3~6.6。
[0010] 所述的何首乌叶片诱导培养基的pH值为6.4。
[0011] 所述的含铈可溶性化合物是硝酸铈，还可以是氧化铈和氯化铈，稀土元素铈能促 调节细胞内酶的活性，促进细胞合成生物碱，调节细胞生长和分化，何首乌芽苗生根。
[0012] -种何首乌促进生根培养基的配制方法，其包括以下步骤： 步骤SlO溶解配制培养基：用蒸馏水溶解1/2 MS基础培养基各成分，并添加 NAA(萘乙 酸）、KT(激动素）、含铈可溶性化合物、琼脂粉和白砂糖； 步骤S20高温灭菌:将步骤SlO配制好的培养基放于高压灭菌锅中，于120~121°C高温灭 菌20~21分钟，冷却凝固。
[0013] 步骤SlO还包括步骤SI 1调节pH值:使用HCL和KOH滴定调节培养基pH值至6.4。
【具体实施方式】
[0014] 实施例一:配制何首乌促进生根培养基。
[0015] 根据表1所示的1/2 MS培养基配方以及表2所示的何首乌促进生根培养基配方，配 制本发明所述的何首乌促进生根培养基。
[0016] 用天平称取1/2 MS培养基中的各成分以及NAA(萘乙酸）、KT(激动素）、含铈可溶性 化合物、琼脂粉和白砂糖，置于三角瓶中，加入适量蒸馏水，搅拌溶解，并调节PH值至6.4,定 容至1000mL。将三角瓶封口，置于高压灭菌锅中，于121°C灭菌20min，然后置于超净工作台 中自然冷却，备用。
[00Π ]将冷却到50-60°C时将培养基分装至组织培养瓶中，晾凉，待其凝固后将组织培养 瓶封口，备用。
[0018] 表1 1/2 MS培养基的成分及其用量。
[0019] 表2何首乌促进生根培养基的成分及其用量。
[0020]实施例二:本发明所述的何首乌促进生根培养基的测试 根据表1所示的1/2 MS培养基配方以及表3所示的何首乌促进生根培养基配方，参照实 施例一所述的培养基制备方法，分别配制各试验组、对照组的何首乌促进生根培养基。
[0021 ]表3何首乌促进生根培养基。
[0022] 在超净工作台中选取生长正常、无褐化的何首乌丛生芽，将丛生芽取出，用无菌手 术刀将丛生芽分割成单芽，并将生长良好、无褐化、强壮的单芽接种于表3所示各试验组、对 照组的培养基中，然后于光暗周期为12h光照/12h黑暗、光照强度为20001UX、温度为25±2 °C的条件下进行培养。培养20天后统计何首乌芽发根率和平均单株发根数。
[0023] 表4何首乌促进生根养基测试结果。
[0024]由表4所示的结果得知，稀土元素铈对何首乌生根起这巨大的促进作用，可以将发 根率提高到90%以上，同时单株发根数也提高到5条以上，可以大大提高何首乌移栽成活率。 另外从试验组2、6、7与其他实验组的结果得知，稀土元素铈的使用量对何首乌生根促进作 用有影响，使用浓度太高不会取得更好的促进效果，反而会起抑制作用。
【主权项】
1. 一种何首乌促进生根培养基，其特征在于，以1/2 MS培养基为基础培养基，并添加有 NAA(萘乙酸）、KT(激动素）、含铈可溶性化合物、琼脂粉和白砂糖。2. 根据权利要求1所述的一种何首乌促进生根培养基，其特征在于，所述的1/2 MS培养 基为常规MS培养基大量元素浓度减少一半而制成。3. 根据权利要求1所述的一种何首乌促进生根培养基，其特征在于，NAA(萘乙酸）的浓 度为0.2-0.8mg/L，KT(激动素）的浓度为0.1-0.6 mg/L，含铈可溶性化合物的浓度为0.1-〇.2mM，琼脂粉的浓度为8~llg/L，蔗糖的浓度为25~35g/L。4. 根据权利要求2所述的一种何首乌促进生根培养基，其特征在于，NAA(萘乙酸）的浓 度为0.3-0.7mg/L，KT(激动素）的浓度为0.2-0.4mg/L，含铈可溶性化合物的浓度为0.14- 0.18mM，琼脂粉的浓度为9~10g/L，蔗糖的浓度为28~33g/L。5. 根据权利要求1至3的其中之一所述的一种何首乌促进生根培养基，其特征在于，所 述的何首乌叶片诱导培养基的pH值为6.3~6.6。6. 根据权利要求4的所述的一种何首乌促进生根培养基，其特征在于，所述的何首乌叶 片诱导培养基的pH值为6.4。7. 根据权利要求1至3的其中之一所述的一种何首乌促进生根培养基，其特征在于，所 述的含铈可溶性化合物是硝酸铈，还可以是氧化铈和氯化铈。8. -种何首乌促进生根培养基的配制方法，其特征在于，其包括以下步骤： 步骤S10溶解配制培养基：用蒸馏水溶解1/2 MS基础培养基各成分，并添加 NAA(萘乙 酸）、KT(激动素）、含铈可溶性化合物、琼脂粉和白砂糖； 步骤S20高温灭菌:将步骤S10配制好的培养基放于高压灭菌锅中，于120~121°C高温灭 菌20~21分钟，冷却凝固。9. 根据权利要求7所述的一种何首乌促进生根培养基的配制方法，其特征在于，所述的 步骤S10还包括步骤SI 1调节pH值:使用HCL和K0H滴定调节培养基pH值至6.4。
【专利摘要】本发明提供一种何首乌促进生根培养基，属于何首乌组织培养技术领域，该培养基以1/2？MS培养基为基础培养基，并添加有NAA（萘乙酸）、KT（激动素）、含铈可溶性化合物、琼脂粉和白砂糖，其具有发根率高、节约生产资源的优点。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105519438
【申请号】CN201610011325
【发明人】何志铿
【申请人】佛山市金蓝领教育科技有限公司
【公开日】2016年4月27日
【申请日】2016年1月9日