化合物23-反式-对-香豆酰委陵菜酸的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及植物源杀菌剂，具体的说是一种委陵菜酸衍生物的应用。
【背景技术】
[0002] 黄瓜作为我国主要栽培蔬菜之一，具有较高的经济价值，但每年因为植物病害造 成的经济损失都难以估量。黄瓜灰霉病是黄瓜生产中较难防治的植物病害之一，虽然使用 化学农药能够起到较好的防治作用，但是经常使用易产生抗药性，并存在对人畜的毒副作 用与残留问题。而植物源杀菌剂具有生物活性好、对非靶标生物安全、环境相容性好等优 点，已经成为研究开发新农药的热点。
[0003] DeTommasi等人自源于意大利的枇杷叶的氯仿提取物部分分离得到4个 新的乌苏烧型的三砲酸类化合物：23-trans-p-coumaroyltormenticacid(l)、 23-cis-p-coumaroyltormenticacid(2)、3-〇-trans-p_cafTeoyltormenticacid(3)、 3-〇-trans-p-coumaroylrotundicacid(4)，此外还有3个一般的乌苏烧型的三砲酸类 化合物（5-7)。进一步研究它们的抗病毒活性证明：仅3-〇-trans-p-caffeoyltormentic acid具有明显降低鼻病毒的感染率的活性，但是它对于人类的HIV1和Sindbis病毒 的复制无明显抑制作用（deTommasiN,deSimoneF,PizzaC,etal.Constituene ofEriobotryajaponica,astudyoftheirantixiralproperties.J.Nat. Prod.，1992, 55 (8) : 1067-1073)。在上述文献中，式（一）所示的23-反式-对-香豆酰委 陵菜酸（23-trans-p-coumaroyltormenticacid)不具有抗病毒活性。目前也没有对该化 合物生物活性进一步研究的报道。
[0004]
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供化合物23-反式-对-香豆酰委陵菜酸的应用。该化合物对 黄瓜灰霉病具有较好的抑制活性，可用于制备农用杀菌剂。
[0006] 本发明的技术方案是：化合物23-反式-对-香豆酰委陵菜酸的应用，其特征是， 所述式（一）所示的化合物23-反式-对-香豆酰委陵菜酸对黄瓜灰霉病具有较好抑制活 性，可用于制备农用杀菌剂。
[0007]
[0008] 所述的农用杀菌剂为：以式（一）所示的化合物23-反式-对-香豆酰委陵菜酸 为活性成分，加入农业上常用的助剂制备成可湿性粉剂、颗粒剂或缓释剂等。
[0009] 本发明所具有的优点：式（一）所示化合物23-反式-对-香豆酰委陵菜酸由枇杷 叶经提取分离而获得，其对黄瓜灰霉病菌具有较好抑制活性，最小抑制浓度（MIC)为4yg/ mL，可以作为具有杀菌作用的新农药成分或先导化合物。式（一）所示化合物作为植物源 天然产物，具有低毒、农药残留低、环境兼容性好等优点。
【具体实施方式】
[0010] 为阐明对本发明特征的理解，下面结合一些非限定性的实施例对本发明做进一步 阐述。
[0011] 实施例1 :
[0012] 式（一）所示的23-反式-对-香豆酰委陵菜酸（23-trans-p-coumaroyl tormenticacid)为乌苏烧型已知化合物。
[0013] 式（一）所示的23-反式-对-香豆酰委陵菜酸的制备过程可参见文献deTommasi N,deSimoneF,PizzaC,etal.ConstitueneofEriobotryajaponica,astudyoftheir antixiralproperties.J.Nat.Prod.，1992, 55 (8) : 1067-1073 中的记载进行。
[0014] 实施例2 :抑菌活性试验
[0015] 采用微量稀释法，测定式（一）所示化合物对黄瓜灰霉病菌的抑菌活性（《从天然 产物到新农药创制-原理方法》，吴文君，2006,化学工业出版社）。
[0016] 1)菌悬液的制备
[0017] 将供试真菌接种于PDA培养基表面于28°C培养72h后，吸取2mL无菌0. 85%NaCl 溶液（含〇. 25 %吐温-20)洗涤培养物，并用玻璃刮刀将菌落轻轻刮下。吸取适量菌悬液于 无菌试管中，调至0. 5麦氏比浊（相当于1.5X10sCFU/mL)，备用；
[0018] 2)样品的配制
[0019] 分别取lmg待测样品（式（一）化合物）和阳性对照（两性霉素B)，溶解于100yL DMS0中，充分混匀后，吸取50yL样品溶液到另一只离心管中，接着加入50yLDMS0,得到 浓度减半的样品溶液。按照此方法，得到12组浓度依次减半的样品溶液。
[0020] 3)MIC测定方法
[0021] (1)采用无菌操作，将倍比稀释后不同浓度的样品溶液分别加到无菌的96孔聚苯 乙烯板中，第1至第12孔各加5yL的样品溶液，并以不加样品孔作为空白对照，加5yL DMS0溶液孔为溶剂对照；
[0022] (2)将相当于0. 5麦氏比浊度的指示菌悬液，经沙氏培养基稀释1000倍后，取 95yL依次加入到96孔板中，使得第1至第12孔的样品浓度依次为512、256、128、64、32、 16、8、4、2、1、0. 5和0. 25yg/mL。以上所有样品均重复三次。轻轻震荡混匀后，将96孔板 密封置于28°C生化培养箱中培养72h;
[0023] (3)在600nm波长下使用酶标仪测定每孔的吸光值，以在小孔内完全抑制指示菌 生长的最低样品浓度为该化合物的MIC。（注意：当阴性对照孔内指示菌明显生长实验才有 意义；当实验出现单一的跳孔时，应记录抑制菌株生长的最高药物浓度；如出现多处跳孔， 则不应报告结果，需重复实验。）
[0024] 试验结果为式（一）所不化合物对黄瓜灰霉病菌的MIC值为4yg/mL，具有较好抑 菌活性。
[0025] 上述实验结果证明本发明所涉及的化合物具有较好抑菌活性，可用于制备农用杀 菌剂。
[0026] 实施例3 :可湿性粉剂
[0027] 配方（重量比）：23_反式-对-香豆酰委陵菜酸粉末20%，白炭黑20%，十二烷 基硫酸钠5%，CMC1. 0%和拉开粉3. 0%，凹凸棒土余量。
[0028] 制备方法：将上述原料混合均匀，控制加工温度0-50°C，在气流粉碎机或其它高 目粉碎机中，粉碎到150目以上，水分控制在6-8% (质量百分含量），pH控制在7-7. 5。
[0029] 使用方法：600倍液喷施，将植株叶片上下喷洒均匀。
【主权项】
1. 式（一）所示的化合物23-反式-对-香豆酰委陵菜酸在制备防治黄瓜灰霉病的农 用杀菌剂中的应用，2. 如权利要求1所述的应用，其特征是，所述农用杀菌剂为可湿性粉剂、颗粒剂或缓释 剂。
【专利摘要】本发明公开了化合物23-反式-对-香豆酰委陵菜酸的应用。该化合物的结构如式(一)所示，它对黄瓜灰霉病菌具有较好抑制活性，最小抑制浓度为4μg/mL，可以作为具有杀菌作用的新农药成分或先导化合物。式(一)所示化合物作为植物源天然产物，具有低毒、农药残留低、环境兼容性好等优点。
【IPC分类】A01P3/00, A01N45/00
【公开号】CN105104394
【申请号】CN201510613833
【发明人】牛赡光, 杜丰玉, 张淑静, 李清和
【申请人】山东兴禾作物科学技术有限公司
【公开日】2015年12月2日
【申请日】2015年9月24日