专利名称:杜鹃红山茶组培快繁方法
技术领域：
本发明涉及一种山茶组培快繁方法。具体涉及一种杜鹃红山茶组培快繁方法。属植物繁殖技术领域：
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背景技术：
杜鹃红山茶原产中国，1986年在中国广东省阳春县鹅凰嶂省级自然保护区被发现，国家一级保护植物，栽培名为“四季杜鹃茶”或“杜鹃茶”，为山茶科山茶属红山茶组光果红山茶亚组植物。
杜鹃红山茶是一种十分珍稀的木本花卉，四季开花，叶片比普通的山茶更为光滑，没有锯齿，即使在气温38℃的条件下，依然满树红花，具有很高的观赏价值和作为种质资源利用价值。由于其对生存的生态条件要求极高，自然存量较少，在原产地仅生长在一狭小区域，发现时有2000余株。目前不少企业和科研单位正在进行杜鹃红山茶的引种繁育试验。《广东林业科技》2003年03期报道了张燕等“杜鹃红山茶扦插繁育试验”，《广东林业科技》2004年03期报道了黎运枢等“杜鹃红山茶嫁接繁育试验”，温州市云峰山茶研究所、金华市花之海园艺有限公司等也进行了杜鹃红山茶嫁接繁育研究。通过20年来的科研单位攻关，目前嫁接成活率可达90％以上，但扦插成活率仅40％左右。所以目前人工繁殖杜鹃红山茶时，嫁接成了杜鹃红山茶繁殖的主要途径，而嫁接繁殖受接穗、操作水平和嫁接季节等诸多影响，繁殖的杜鹃红山茶数量有限，又由于野生资源十分有限，还很难进行商业开发。只有解决了人工快繁，扩大杜鹃红山茶的种植数量，建立商业开发种植基地，才能使这一宝贵资源得到最有效的保护和开发，实现其资源的真正价值。专利公开号85102805，2003124233.2公开了金花茶组培快繁培养基。而杜鹃红山茶组培快繁方法还未见报道。
发明内容
本发明的目的在于克服上述不足，提供一种杜鹃红山茶组培快繁方法，以克服上述繁殖方法存在不足，既保护原产地资源，又源源不断地生产杜鹃红山茶种苗。
本发明的目的是这样实现的一种杜鹃红山茶组培快繁方法，其特征在于它包括以下工艺步骤步骤一、外植体的选取4月至5月，从母株上剪取杜鹃红山茶刚抽出嫩梢不久的茎段；步骤二、外植体处理用70～75％的酒精溶液浸泡30～40秒，无菌水冲洗多次沥干水，再放入0.1％～0.15％HgCl2溶液中消毒8～10分钟，无菌水多次冲洗，再切取茎尖，备用；步骤三、初代培养将步骤二得的茎尖，接种在初代培养基上，进行初代培养，初代培养光照强度1000～15001x，培养温度23±2℃，培养时间40±5天，这样茎尖基部周围逐渐形成丛生芽，当芽丛长至2～3cm时，将其切成单芽苗，备用；步骤四、继代培养将步骤三切下的单芽苗移入装有继代培养基的密封容器中，进行继代培养，扩繁试管苗，培养温度21±2℃，光照时间14±1小时/天，培养基pH值5.8～6.0，培养40～45天，形成5～6cm长具有4～5个茎节的芽条，为增殖无性系，将其切成带茎节的切段，每个芽条分割成2-3段，以后每40～45天如此继代一次，扩繁试管苗。
步骤五、生根培养将步骤四扩繁的试管苗取出，移入装有生根培养基的密闭容器中，进行生根培养，试管苗在生根培养基中光照强度1500～2000lx，培养温度23±2℃至25～35天，试管苗在培养基中根长至0.3～0.5cm的新根时，出瓶移栽。
本发明杜鹃红山茶的组培快繁方法，步骤三所述的初代培养基成分为MS+ZT0.2～0.8+BA1-2+NAA0.5～1+PVP2～3g/l+2～3％蔗糖；步骤四所述的继代培养基成分为MS+ZT0.2～0.8+BA1-2+2ip1～2+IBA0.05～0.1+PVP2～3g/l+2～3％蔗糖；步骤五所述的生根培养基成分为1/2MS+NAA0.7+IBA05+BA0.01+15％蔗糖+AC0.8g/l。
本发明的杜鹃红山茶的组培快繁育苗方法解决了原来繁殖系数低，嫁接速度慢，且受嫁接季节影响的难题，使试管苗月增长系数达到2～3左右，一年从一个外植体增殖可达2～3株左右的试管苗。这样既保护了母株，又可满足杜鹃红山茶的规模化生产需求。
具体实施方式
本发明涉及一种杜鹃红山茶组培快繁育苗方法，它包括外植体取材及处理、初代培养、继代培养、生根培养工艺步骤，其具体步骤如下步骤一、外植体的选取4月至5月连续晴天，从母株上剪取杜鹃红山茶刚抽出嫩梢不久的茎段。
步骤二、外植体处理把步骤一中的选取的茎段先在1％的洗衣粉水中震荡洗涤6～8分钟，再在自来水龙头下流水冲洗30分钟，用洁净的纱布吸干水，然后再在无菌超净工作台中放在70％的酒精溶液中浸泡消毒30秒，无菌水冲洗2～3次沥干水，再转入0.1％HgCl2溶液中消毒8～10分钟，无菌水冲洗5～6次，每次3～5分钟，用无菌纱布吸干表面的水分，再切取茎尖，备用。
步骤三、初代培养将步骤二得的茎尖，接种在MS+ZT0.5+BA2+NAA0.8+PVP3g/l+2％蔗糖的初代培养基上，进行初代培养，初代培养光照强度1000～1500lx，培养温度23℃，培养时间40～45天，这样茎尖基部周围逐渐形成丛生芽，当芽丛长2～3cm时，将其切成单芽苗，备用。
步骤四、继代培养将步骤三切下的单芽苗移入装有继代培养基的密封容器中，进行继代培养，扩繁试管苗，扩繁试管苗继代培养基是MS+ZT0.5+BA1+2ip2+IBA0.1+PVP3g/l+3％蔗糖，培养温度21±2℃，光照时间14±1小时/天，培养基pH值5.8～6.0，培养40～45天，可形成5～6cm长具有4～5个左右茎节的芽条，为增殖无性系，可将其切成带茎节的切段，每个芽条可分割成2-3段。以后每40～45天如此继代一次，扩繁试管苗。
步骤五、生根培养待步骤四扩繁的试管苗增殖到一定数量后，选取1.5～2cm高的试管苗，移入装有生根培养基的密闭容器中，进行生根培养。生根培养基成分是1/2MS+NAA0.7+IBA0.5+BA0.01+15％蔗糖+AC0.8g/l。试管苗在生根培养基中光照强度1500～2000lx，培养温度23℃，20天后小苗根部出现根原基突起，至35天左右，试管苗在培养基中根长至0.3-0.5cm的白色新根时，进行试管苗移栽。试管苗移栽管理技术与常规木本组培苗相同。
注ZT——玉米素BA——6-苄基腺嘌呤NAA——α-萘乙酸IBA——吲哚丁酸2ip——6-γ，γ-二甲基烯丙基腺嘌呤PVP——聚乙烯吡咯烷酮AC——活性炭ZT0.2～0.8表示ZT0.2~0.8mg/l。其余计量单位相同。
权利要求
1.一种杜鹃红山茶组培快繁方法，其特征在于它包括以下工艺步骤步骤一、外植体的选取4月至5月，从母株上剪取杜鹃红山茶刚抽出嫩梢不久的茎段；步骤二、外植体处理用70～75％的酒精溶液浸泡30～40秒，无菌水冲洗多次沥干水，再放入0.1％～0.15％HgCl2溶液中消毒8～10分钟，无菌水多次冲洗，再切取茎尖，备用；步骤三、初代培养将步骤二得的茎尖，接种在初代培养基上，进行初代培养，初代培养光照强度1000～1500lx，培养温度23±2℃，培养时间40±5天，这样茎尖基部周围逐渐形成丛生芽，当芽丛长至2～3cm时，将其切成单芽苗，备用；步骤四、继代培养将步骤三切下的单芽苗移入装有继代培养基的密封容器中，进行继代培养，扩繁试管苗，培养温度21±2℃，光照时间14±1小时/天，培养基pH值5.8～6.0，培养40～45天，形成5～6cm长具有4～5个茎节的芽条，为增殖无性系，将其切成带茎节的切段，每个芽条分割成2-3段，以后每40～45天如此继代一次，扩繁试管苗；步骤五、生根培养将步骤四扩繁的试管苗取出，移入装有生根培养基的密闭容器中，进行生根培养，试管苗在生根培养基中光照强度1500～2000lx，培养温度23±2℃至25～35天，试管苗在培养基中根长至0.3～0.5cm的新根时，出瓶移栽。
2.根据权利要求
1所述的一种杜鹃红山茶组培快繁方法，其特征在于步骤三所述的初代培养基成分为MS+ZT0.2～0.8+BA1-2+NAA0.5～1+PVP2～3g/1+2～3％蔗糖；步骤四所述的继代培养基成分为MS+ZT0.2～0.8+BA1-2+2ip1～2+IBA0.05～0.1+PVP2～3g/1+2～3％蔗糖；步骤五所述的生根培养基成分为1/2MS+NAA0.7+IBA0.5+BA0.01+15％蔗糖+AC0.8g/l。
专利摘要
本发明涉及一种杜鹃红山茶组培快繁方法，包括以下工艺步骤4月至5月，从母株上剪取杜鹃红山茶刚抽出嫩梢不久的茎段；用酒精溶液浸泡，再放入HgCl
文档编号A01G7/00GKCN1985580SQ200610161466
公开日2007年6月27日 申请日期2006年12月18日
发明者吴有光, 刘唤英, 方建民 申请人:江苏阳光生态农林开发股份有限公司导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan