一种冬葵多倍体诱变的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种冬葵多倍体诱变的快速繁殖方法，包括冬葵多倍体的诱导、无菌外植体的获得、腋芽的诱导、生根诱导等步骤。本发明方法可获得冬葵多倍体新品种，并结合组培方法，操作简单可控，为冬葵的充分利用提供条件。
【专利说明】
一种冬葵多倍体诱变的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及冬葵组织培养的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002]冬幾，Malva crispa Linn.,冬觅菜、冬寒菜、葵菜、锦葵科,一年生草本,高I米,不分枝，茎被柔毛，叶圆形，常5-7裂或角裂，径约5-8厘米，基部心形，裂片三角状圆形，边缘具细锯齿，并极皱缩扭曲，两面无毛至疏被糙伏毛或星状毛，在脉上尤为明显，叶柄瘦弱，长
4-7厘米，疏被柔毛，花小，白色，直径约6毫米，单生或几个簇生于叶腋，近无花梗至具极短梗，小苞片3，披针形，长4-5毫米，宽I毫米，疏被糙伏毛，萼浅杯状，5裂，长8-10毫米，裂片三角形，疏被星状柔毛，花瓣5，较萼片略长，果扁球形，径约8毫米，种子肾形，径约I毫米，暗黑色，花期6-9月，产湖南、四川、贵州、云南、江西、甘肃等省。全株:甘，凉。利尿，止血，补气止汗；种子:用于水肿，淋浊；叶:外用于刀伤出血；根:用于气虚自汗。种子能利水，滑肠，下乳；根能清热解毒，利窍，通淋；嫩苗或叶能清热，行水，滑肠。嫩梢、嫩叶可作蔬菜，茎叶皆入药。冬葵在温暖地方春、秋两季均可栽培，寒冷地方春季栽培，直接播种或育苗移栽，组培方法尚无人研究。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种冬葵的组培方法，本发明本发明方法可获得冬葵多倍体新品种，并结合组培方法，操作简单可控，为冬葵的充分利用提供条件。
[0004]所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
截取野外生长良好的冬葵细嫩侧枝，进行室内水培，配制600-800mg/L的秋水仙素溶液对冬葵进行喷施，每6个小时喷施一次，连续喷施4天，处理过的冬葵侧枝，切取3cm —段，每段保留I腋芽，无菌水冲洗干净，放入NLN+TDZ0.5mg/L+IAA0.lmg/L+2,4-D0.2mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.85，光照25001x，温度25°C，诱导出来的冬葵腋芽放入MS培养基中进行复壮，将复壮后的冬葵芽苗从培养瓶中取出，无菌水冲洗底部，在0.1%的升汞溶液中浸泡3min，无菌水冲洗干净，放入已灭菌好的珍珠岩基质中，在光照培养箱中进行诱导，温度25°C，光照ΙΟΟΟΟΙχ，光期14h/d。
[0005]采用本发明制备的冬葵诱变率高，周期短，污染小，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
截取野外生长良好的冬葵细嫩侧枝，进行室内水培，配制600mg/L的秋水仙素溶液对冬葵进行喷施，每6个小时喷施一次，连续喷施4天，处理过的冬葵侧枝，切取3cm —段，每段保留I腋芽，无菌水冲洗干净，放入NLN+TDZ0.5mg/L+IAA0.lmg/L+2,4-D0.2mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.85，光照25001x，温度25°C，诱导出来的冬葵腋芽放入MS培养基中进行复壮，将复壮后的冬葵芽苗从培养瓶中取出，无菌水冲洗底部，在0.1%的升汞溶液中浸泡3min，无菌水冲洗干净，放入已灭菌好的珍珠岩基质中，在光照培养箱中进行诱导，温度25°C，光照ΙΟΟΟΟΙχ，光期14h/d，成活率85%。
[0008]实施例2
截取野外生长良好的冬葵细嫩侧枝，进行室内水培，配制700mg/L的秋水仙素溶液对冬葵进行喷施，每6个小时喷施一次，连续喷施4天，处理过的冬葵侧枝，切取3cm —段，每段保留I腋芽，无菌水冲洗干净，放入NLN+TDZ0.5mg/L+IAA0.lmg/L+2,4-D0.2mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.85，光照25001x，温度25°C，诱导出来的冬葵腋芽放入MS培养基中进行复壮，将复壮后的冬葵芽苗从培养瓶中取出，无菌水冲洗底部，在0.1%的升汞溶液中浸泡3min，无菌水冲洗干净，放入已灭菌好的珍珠岩基质中，在光照培养箱中进行诱导，温度25°C，光照ΙΟΟΟΟΙχ，光期14h/d，成活率87%。
[0009]实施例3
截取野外生长良好的冬葵细嫩侧枝，进行室内水培，配制800mg/L的秋水仙素溶液对冬葵进行喷施，每6个小时喷施一次，连续喷施4天，处理过的冬葵侧枝，切取3cm —段，每段保留I腋芽，无菌水冲洗干净，放入NLN+TDZ0.5mg/L+IAA0.lmg/L+2,4-D0.2mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.85，光照25001x，温度25°C，诱导出来的冬葵腋芽放入MS培养基中进行复壮，将复壮后的冬葵芽苗从培养瓶中取出，无菌水冲洗底部，在0.1%的升汞溶液中浸泡3min，无菌水冲洗干净，放入已灭菌好的珍珠岩基质中，在光照培养箱中进行诱导，温度25°C，光照ΙΟΟΟΟΙχ，光期14h/d，成活率86%。
【权利要求】
1.一种冬葵多倍体诱变的快速繁殖方法，包括冬葵多倍体的诱导、无菌外植体的获得、腋芽的诱导、生根诱导，其主要步骤如下: (1)截取野外生长良好的冬葵细嫩侧枝，进行室内水培，配制600-800mg/L的秋水仙素溶液对冬葵进行喷施，每6个小时喷施一次，连续喷施4天； (2)取步骤(I)处理过的冬葵侧枝，切取3cm—段，每段保留I腋芽，无菌水冲洗干净，放入NLN+TDZ0.5mg/L+IAA0.lmg/L+2,4-D0.2mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂 6.5g/L，ρΗ5.85，光照 25001χ，温度 25 °C ； (3)取步骤(2)诱导出来的冬葵腋芽放入MS培养基中进行复壮，待获得健壮的冬葵芽苗进行野外生根诱导的丛生芽进行生根诱导。
2.按照权利要求1所述的一种冬葵多倍体诱变的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(3)中所述冬葵芽苗的生根诱导方法为将冬葵芽苗从培养瓶中取出，无菌水冲洗底部，在.0.1%的升汞溶液中浸泡3min，无菌水冲洗干净，放入已灭菌好的珍珠岩基质中，在光照培养箱中进行诱导，温度25°C，光照ΙΟΟΟΟΙχ，光期14h/d。
【文档编号】A01H4/00GK104221875SQ201410540469
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年10月14日 优先权日:2014年10月14日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司