草乌粗提物及有效成分的制备和应用的利记博彩app
【专利摘要】本发明涉及一种草乌粗提物及从中分离得到的化合物neoechinulinA在抗植物病毒中的应用，本发明所述的草乌粗提物是以干燥草乌(AconitumcarmichaeliDebx.)为原料，粉碎过筛后以浓度为70~95%的乙醇浸泡，浸泡液经减压浓缩得到乙醇浸膏，加少量水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，余下水层，所得的各种萃取液减压浓缩得到的相应浸膏，化合物neoechinulinA是通过活性跟踪从草乌乙酸乙酯层中分离得到，草乌粗提物和化合物neoechinulinA对黄瓜花叶病毒病、烟草花叶病毒病、南方水稻黑条矮缩病毒病和水稻条纹叶枯病毒等植物病毒有较好的防治作用。
【专利说明】草乌粗提物及有效成分的制备和应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种草乌粗提物及从中分离得到的化合物neoechinulin A在抗植物病毒中的应用，属于植物保护中植物源农药领域。
【背景技术】
[0002]近年来，植物病毒病的危害日益严重，给农业生产带造成了巨大的经济损失，据报道，每年仅因黄瓜花叶病毒病、烟草花叶病毒病、水稻条纹叶枯病毒和南方水稻黑条矮缩病毒病等烟草花叶病毒病造成的损失就高达I亿多美元。目前对于病毒病的防治还没有非常有效的方法，已有的防治农作物病毒病的商品药品种少，防治效果也不够理想。研究发现，很多天然植物中含有的化学成分具有高效、低毒的特点，从植物中寻找具有较高活性的先导化合物已成为开发植物病毒抑制剂的重要途径之一。
[0003]草乌为毛茛科植物乌头的干燥块根，别名:五毒根、断肠草、鸭头、药羊蒿、鸡头草、百步草。草乌的植物基源较多，包括北乌头(Aconitum kusnezoffii Reichb)、乌头{Aeoniturn Carmichaeli Debx.)、华乌头{Aconiturn Chinense Paxt)、黄草乌{AconiturnVilmorinianum Kowar)、紫草乌{Aconitum Delavyl Franch)等的块根，主要为野生品种。乌头属植物约有350种，主要分布于亚洲、欧洲和北美洲，我国大约有167种，大部分分布在云南北部、四川西部、西藏东部的高山地带。根据文献报道，草乌主要含有的化学成分为生物碱、黄酮、留醇、挥发油等，其中以二萜生物碱居多。
[0004]2Ol3年，黄烈军等报道了从岩乌头(Aconitum recemulosum Franch)中分离得到的13个二職生物碱的抗烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus, TMV)活性,在浓度为30 //g/mL 时，化合物 racemulosine A、sachaconitine、circinasine A、talatisamine、8-decetylyunaconitine和14_acetytalatisamine的抗TMV活性均优于阳性对照药剂宁南霉素，化合物 racemulosine A、sachaconitine、circinasine A 和 14-acetytalatisamine的抗TMV侵染活性尤其显著,抑制率在60%以上；化合物racemulosine A和talatisamine对TMV增殖的抑制活性明显比阳性对照药好。(黄烈军，葛永辉，刘开兴，张建新，郝晓江，岩乌头的化学成分及对烟草花叶病毒病的活性，农药，2013，52(4)，295-297.)这说明乌头属植物在抗植物病毒方面具有很大的研究发展空间。
【发明内容】
[0005]本发明的 目的是提供草乌粗提物和化合物neoechinulin A的制备和应用。本发明的发明人在研究中发现草乌粗提物对植物病毒病如黄瓜花叶病毒病、水稻条纹叶枯病毒和南方水稻黑条矮缩病毒病等具有较好抑制作用，通过活性跟踪对草乌粗提物进行分离，从乙酸乙酯层分离得到对植物病毒病具有较好抑制作用的化合物neoechinulin A。
[0006]本发明所述的草乌粗提物包括草乌总浸膏、草乌石油醚层提取物、草乌乙酸乙酯层提取物、草乌正丁醇层提取物和草乌水层提取物，其特征在于以干燥草乌(Aconitumcarmichaeli Debx.)为原料，粉碎过筛后以浓度为70-95%的乙醇浸泡，浸泡液经减压浓缩，回收乙醇后得到的乙醇浸膏，称为草乌总浸膏，再将乙醇浸膏加少量水分散，依次用石
油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，余下水层，所得各种萃取液减压浓缩得到相应浸膏，分别称
为草乌石油醚层提取物，草乌乙酸乙酯层提取物，草乌正丁醇层提取物，草乌水层提取物，
加上草乌总浸膏，统称草乌粗提物。取乙酸乙酯层浸膏用乙酸乙酯溶解，100-200目硅胶拌
样，200-300目硅胶装柱，用中压柱层析分离，以石油醚:乙酸乙酯=1:(T0:1(V:V)的洗脱
液梯度洗脱，TLC点板跟踪，收集相同极性的洗脱液，得Fr 2-1至Fr 2-6 6个组分。其中
Fr 2-4用100-200目硅胶拌样，200-300目硅胶装柱，常压柱层析分离，以二氯甲烷:甲醇
=l:(Tl:1 (V:V)的洗脱液梯度洗脱,得到化合物neoechinulin A,结构式如下:
【权利要求】
1.一种抗植物病毒的草乌粗提物及有效成分，其特征是以干燥草乌iAconitumcarmichaeli Debx.)为原料，以浓度为70~95%的乙醇浸泡，浸泡液经减压浓缩，回收乙醇后得到的乙醇浸膏，称为草乌总浸膏，再将乙醇浸膏加少量水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，余下水层，所得各种萃取液减压浓缩得到的浸膏加上乙醇浸膏，统称草乌粗提物；取乙酸乙酯层浸膏用乙酸乙酯溶解，100~200目硅胶拌样，200~300目硅胶装柱，用中压柱层析分离，以石油醚:乙酸乙酯=1:0~0:1(V:V)的洗脱液梯度洗脱，TLC点板跟踪，收集相同极性的洗脱液，得Fr 2-1至Fr 2-6 6个组分； 其中Fr 2-4用100~200目硅胶拌样，200~300目硅胶装柱，常压柱层析分离，以二氯甲烧:甲醇=1:0~1:1 (V:V)的洗脱液梯度洗脱,得到化合物neoechinulin A,结构式如下:
2.按照权利要求1所述的草乌粗提物及有效成分的应用，其特征在于防治农作物病害中的药物或药剂。
3.根据权利要求2所述草乌粗提物及有效成分的应用，其特征在于草乌粗提物和化合物neoechinulin A用作药物时,可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
4.根据权利要求2所述草乌粗提物及有效成分的应用，其特征在于农作物为蔬菜和禾谷类作物。
5.根据权利要求2所述草乌粗提物及有效成分的应用，其特征在于所述的农作物病害为黄瓜花叶病毒病、玉米条纹叶枯病毒、马铃薯X病毒、马铃薯Y病毒、水稻矮缩病毒病和南方水稻黑条矮缩病毒病。
6.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于所述的农作物病害包括烟草花叶病毒病、黄瓜花叶病毒病、玉米条纹叶枯病毒、马铃薯X病毒、马铃薯Y病毒、水稻矮缩病毒病和南方水稻黑条矮缩病毒病。
【文档编号】A01P1/00GK103788074SQ201410031796
【公开日】2014年5月14日 申请日期:2014年1月23日 优先权日:2014年1月23日
【发明者】胡德禹, 朱芸莹, 宋宝安, 薛伟, 陈卓, 王贞超 申请人:贵州大学