利用生活垃圾制备的饲料及其制备方法
【专利摘要】本发明提供了一种用于喂养猪的饲料，其原料包括可生物降解的生活垃圾、微生物降解菌、中药饲料添加剂、维生素E、维生素A、维生素C、氯化钙，磷酸氢钙，食盐、赖氨酸铜、蛋氨酸锌。本发明提供的饲料用于喂养仔猪，通过对生活垃圾的有效降解，并在该过程中完成了杀灭大肠杆菌等有害杂菌和干燥的过程，将生成物制备成饲料，从而实现了生活垃圾的循环利用，且解决了现有对生活垃圾处理方法所带来的占地大及污染严重的问题，通过在饲料中添加中草药能够提高仔猪的免疫力，调整仔猪的胃肠道微生态平衡，保证猪健康成长，提高动物抗应激能力和增强机体抵御外来微生物侵袭的能力，提高其增重速度和饲料转化率。
【专利说明】利用生活垃圾制备的饲料及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及环境保护【技术领域】，尤其涉及一种利用生活垃圾制备饲料的方法。
【背景技术】
[0002]随着人们物质生活质量的提高，生活垃圾已成为现代社会必须面对的严重问题。据有关统计数据显示，我国垃圾年平均增长率达到10%以上，成为世界上垃圾围城最严重的国家之一，因此我国迫切需要对生活垃圾进行有效的处理，以控制生活垃圾对环境的污染问题。
[0003]现有对生活垃圾的处理方法一般有填埋法、焚烧法和堆肥法。这些方法客观上存在着占用土地、污染环境、浪费资源的问题。
[0004]如何能够对生活垃圾进行有效的处理，充分利用生活垃圾，使其重新进入生活生产循环，已经成为一个非常重要的话题。而将生活垃圾进行微生物降解，并将降解所得到的产物作为肥料或饲料。因此，人们对于利用微生物对生活垃圾降解后循环利用，制备饲料，越来越受到重视，具有非常大的前景。
[0005]本申请就是在此基础上提出的一种新型的利用生活垃圾制备成饲料，喂养动物的方法，通过利用微生物即生活垃圾降解菌剂在常温至高温的全过程中，对生活垃圾进行发酵降解处理，并通过搅拌的方式，实现了对生活垃圾的有效降解，并在该过程中完成了杀灭大肠杆菌等有害杂菌和干燥的过程，将生成物制备成饲料，从而实现了生活垃圾的循环利用，且解决了现有对生活垃圾处理方法所带来的占地大及污染严重的问题。
[0006]本申请中提供的用于生活垃圾降解的固体菌剂所含的效降解菌能加速垃圾生物降解，垃圾渗滤液降解菌可有效降解垃圾渗滤液中难降解的有机物，从而有效加速垃圾的稳定化进程，使得降解的时间大大缩短了。
[0007]另外，中草药一般均含有蛋白质、糖、脂肪、淀粉、维生素、矿物质、微量元素等营养成分，具有丰富的营养作用；中草药中的多糖类、有机酸类、生物碱类、挥发油类均具有免疫的功效，可避免西药免疫预防及对动物机体组织有交叉反应副作用等弊端，起到增强机体的免疫作用；中草药可起到激素相似的作用，并能减轻或防止、消除外激素样作用物，被认为是胜似激素的激素样作用物；中草药具有提高机体防御抵抗力和调节缓和应激的作用，提高动物细胞的吞噬能力，促进抗体的形成，并能预防病毒、真菌、原虫和螺旋体的感染；中草药还具有双向调节作用和复合功能，抗饲料氧化和霉变。
[0008]通过在饲料中添加中草药能够提高动物的免疫力，调整动物的胃肠道微生态平衡，保证动物健康成长，提高动物抗应激能力和增强机体抵御外来微生物侵袭的能力，提高其增重速度和饲料转化率。
【发明内容】
[0009]本发明所要解决的技术问题是提供一种新型的利用生活垃圾和中药组合物制备成饲料的方法，并且将该制备的饲料用于喂养仔猪，通过对生活垃圾的有效降解，并在该过程中完成了杀灭大肠杆菌等有害杂菌和干燥的过程，将生成物制备成饲料，从而实现了生活垃圾的循环利用，且解决了现有对生活垃圾处理方法所带来的占地大及污染严重的问题，通过在饲料中添加中草药能够提高仔猪的免疫力，调整动物的胃肠道微生态平衡，保证猪健康成长，提高仔猪抗应激能力和增强机体抵御外来微生物侵袭的能力，提高其增重速度和饲料转化率。
[0010]为解决上述技术问题，本发明提供了用于喂养猪的饲料，其原料包括:可生物降解的生活垃圾、微生物降解菌、中药饲料添加剂、维生素E、维生素A、维生素C、氯化钙，磷酸氢钙，食盐、赖氨酸铜、蛋氨酸锌。
[0011]其中，所述各种原料的重量份分别为可生物降解的生活垃圾120重量份~130重量份、微生物降解菌1重量份~3重量份、中药饲料添加剂10重量份~20重量份，0.5重量份~1.5重量份维生素E、0.5重量份~1.5重量份维生素A、0.5重量份~1.5重量份维生素C、氯化韩3重量份~5重量份,磷酸氢韩3重量份~5重量份,食盐4重量份~6重量份、赖氨酸铜0.5重量份~1.5重量份、蛋氨酸锌0.5重量份~1.5重量份。
[0012]其中，所述中药饲料添加剂的原料包括白术、石斛、刺五加、党参、白扁豆、白￡、牛蒡子、夏枯草、虎杖、牡丹皮、地肤子、佛手、麦芽、莱菔子、丹参、益母草、黄精、白芍、山麦冬和枸杞子。
[0013]其中，所述原料药混合物中各原料的重量份分别为白术50重量份~60重量份、石斛25重量份~35重量份、刺五加30重量份~40重量份、党参70重量份~80重量份、白扁? 30重量份~40重量份、白芷20重量份~30重量份、牛蒡子20重量份~30重量份、夏枯草10重量份~20重量份、虎杖20重量份~30重量份、牡丹皮20重量份~30重量份、地肤子10重量份~20重量份、佛手10重量份~20重量份、麦芽20重量份~30重量份、莱菔子20重量份~30重量份、丹参20重量份~30重量份、益母草15重量份~25重量份、黄精40重量份~50重量份、白苟20重量份~30重量份、山麦冬30重量份~40重量份和枸杞子25重量份~35重量份。
[0014]其中，所述中草药饲料添加剂具体制备为:
[0015]将所述中药饲料添加剂中各组分按比例混合，随后加入相对于混合物质量3~5倍的水，煎煮2~4小时，过滤，获得第一提取液，滤渣再次加入相对于其质量1~3倍的水，煎煮1~2小时，过滤，获得第二提取液，将提取液合并，减压浓缩除去水，获得干膏体，采用超微粉磨机粉碎，粉碎粒度200目~300目，获得粉末状中药饲料添加剂。
[0016]其中，所述微生物降解菌由植物乳杆菌剂和地衣芽孢杆菌剂，所述植物乳杆菌剂和地衣芽孢杆菌剂质量比为1:1。
[0017]其中，所述植物乳杆菌剂的制备具体为:
[0018]第一步，将植物乳杆菌于32~36°C下活化24h后，接种于富集培养液中，在温度32~36 °C，转速220~250rpm条件下培养24h ；
[0019]第二步，然后将富集后的菌种按体积分数2~5%接种于好氧发酵培养液中进行好氧发酵培养，培养条件为:温度32~36°C，转速170~200rpm，通气速率0.8~1.0L / L.min,通入的空气过0.45 μ m滤膜进行过滤除菌,好氧发酵培养时间为20h~24h,最后自然风干或30°C烘干，获得固体菌剂，固体菌剂中的含菌量为l0.Ucfu/g，所述富集培养液成分为氯化钠5.0~6.0g，蛋白胨5.0~6.0g,牛肉粉2.5~3.0g,蒸馏水1000mL,pH7.0?7.2,所述发酵培养液成分为葡萄糖45g?50g、硫酸镁IOg?20g、磷酸二氢钾IOg?30g、磷酸氢二钾IOg?50g，蒸馏水IOOOmL,调节pH值为7.0?7.2。
[0020]其中，所述地衣芽孢杆菌剂的制备具体为:
[0021 ] 第一步，将地衣芽孢杆菌于20?30°C下活化24h后，接种于富集培养液中，在温度20?30°C，转速250?280rpm条件下培养24h ；
[0022]第二步，然后将富集后的菌种按体积分数2?5%接种于好氧发酵培养液中进行好氧发酵培养，培养条件为:温度20?30°C，转速170?200rpm，通气速率1.0?1.2L / L.η?η,通入的空气过0.45 μ m滤膜进行过滤除菌,好氧发酵培养时间为20h?24h,最后自然风干或30°C烘干，获得固体菌剂，固体菌剂中的含菌量为l0.Ucfu/g，所述富集培养液成分为马铃薯180.0g?220.0g，葡萄糖18.0?22.0g，蒸馏水1000ml，pH6.0-6.2,所述发酵培养液成分为玉米粉5.0g?5.5g,豆饼粉5.0g?5.5g,花生粉5.0g?5.5g,ΚΗ2Ρ042.5g ?3.0g, MgSO40.25g ?0.3g，CaCl20.25g ?0.3g，尿素 0.24g ?0.3g，红糖5.0g ?5.3g, pH5.5 ?6.0,蒸懼水 1000ml。
[0023]其中，本发明还提供了上述饲料的制备方法，其包括:
[0024]第一步，生活垃圾的分拣分类，收集可降解的生活垃圾；
[0025]第二步，将可降解的生活垃圾与微生物降解菌、食盐、赖氨酸铜、蛋氨酸锌按比例混合混合，进行生物降解发酵，获得发酵饲料；
[0026]第三步，在发酵后的饲料中按比例添加中药饲料添加剂、维生素Ε、维生素Α、维生素C、氯化钙，磷酸氢钙，搅拌混合均匀，获得产品饲料。
[0027]所述第二步中发酵过程为分段式过程，先进行好氧发酵，再进行厌氧发酵，更进一步，将可降解生活垃圾与食盐、赖氨酸铜、蛋氨酸锌按比例混合完全，随后加入微生物降解菌，保持在温度为33?35°C，相对湿度为60%?70%的条件下通风培养12?16小时，在转入密闭塑料袋中于40?45°C的条件下继续厌氧发酵10?12天，获得发酵饲料。
[0028]本发明的有益效果:
[0029]本发明提供的饲料用于喂养仔猪，通过对生活垃圾的有效降解，并在该过程中完成了杀灭大肠杆菌等有害杂菌和干燥的过程，将生成物制备成饲料，从而实现了生活垃圾的循环利用，且解决了现有对生活垃圾处理方法所带来的占地大及污染严重的问题，通过在饲料中添加中草药能够提高仔猪的免疫力，调整仔猪的胃肠道微生态平衡，保证猪健康成长，提高动物抗应激能力和增强机体抵御外来微生物侵袭的能力，提高其增重速度和饲料转化率。
【具体实施方式】
[0030]本发明提供了用于喂养猪的饲料，其原料包括:可生物降解的生活垃圾、微生物降解菌、中药饲料添加剂、维生素E、维生素A、维生素C、氯化钙，磷酸氢钙，食盐、赖氨酸铜、蛋氨酸锌。
[0031]进一步,所述饲料仅由上述原料构成。
[0032]所述各种原料的重量份分别为可生物降解的生活垃圾120重量份?130重量份、微生物降解菌I重量份?3重量份、中药饲料添加剂10重量份?20重量份，0.5重量份?
1.5重量份维生素E、0.5重量份?1.5重量份维生素A、0.5重量份?1.5重量份维生素C、氯化韩3重量份~5重量份,磷酸氢韩3重量份~5重量份,食盐4重量份~6重量份、赖氨酸铜0.5重量份~1.5重量份、蛋氨酸锌0.5重量份~1.5重量份。
[0033]所述各种原料的重量份分别为可生物降解的生活垃圾125重量份、微生物降解菌2重量份、中药饲料添加剂15重量份，I重量份维生素E、I重量份维生素A、I重量份维生素C、氯化钙4重量份，磷酸氢钙4重量份，食盐5重量份、赖氨酸铜I重量份、蛋氨酸锌I重量份。
[0034]所述中药饲料添加剂的原料包括白术、石斛、刺五加、党参、白扁豆、白芷、牛蒡子、夏枯草、虎杖、牡丹皮、地肤子、佛手、麦芽、莱菔子、丹参、益母草、黄精、白芍、山麦冬和枸杞子。
[0035]进一步,所述中药饲料添加剂仅由上述原料构成。
[0036]所述原料药混合物中各原料的重量份分别为白术50重量份~60重量份、石斛25重量份~35重量份、刺五加30重量份~40重量份、党参70重量份~80重量份、白扁丑30重量份~40重量份、白]1￡ 20重量份~30重量份、牛蒡子20重量份~30重量份、夏枯草10重量份~20重量份、虎杖20重量份~30重量份、牡丹皮20重量份~30重量份、地肤子10重量份~20重量份、佛手10重量份~20重量份、麦芽20重量份~30重量份、莱菔子20重量份~30重量份、丹参20重量份~30重量份、益母草15重量份~25重量份、黄精40重量份~50重量份、白苟20重量份~30重量份、山麦冬30重量份~40重量份和枸杞子25重量份~35重量份。
[0037]进一步，所述原料药混合物中各原料的重量份分别为白术55重量份、石斛30重量份、刺五加35重量份、党参75重量份、白扁丑35重量份、白]1￡ 25重量份、牛蒡子25重量份、夏枯草15重量份、虎杖25重量份、牡丹皮25重量份、地肤子15重量份、佛手15重量份、麦芽25重量份、莱菔子25重量份、丹参25重量份、益母草20重量份、黄精45重量份、白芍25重量份、山麦冬35重量份和枸杞子30重量份。
[0038]所述中草药饲料添加剂具体制备为:
[0039]将所述中药饲料添加剂中各组分按比例混合，随后加入相对于混合物质量3~5倍的水，煎煮2~4小时，过滤，获得第一提取液，滤渣再次加入相对于其质量I~3倍的水，煎煮I~2小时，过滤，获得第二提取液，将提取液合并，减压浓缩除去水，获得干膏体，采用超微粉磨机粉碎，粉碎粒度200目~300目，获得粉末状中药饲料添加剂。
[0040]本发明还提供了上述饲料的制备方法，其包括:
[0041]第一步，生活垃圾的分拣分类，收集可降解的生活垃圾；
[0042]第二步，将可降解的生活垃圾与微生物降解菌、食盐、赖氨酸铜、蛋氨酸锌按比例混合混合，进行生物降解发酵，获得发酵饲料；
[0043]第三步，在发酵后的饲料中按比例添加中药饲料添加剂、维生素E、维生素A、维生素C、氯化钙，磷酸氢钙，搅拌混合均匀，获得产品饲料。
[0044]所述第二步中发酵过程为分段式过程，先进行好氧发酵，再进行厌氧发酵，更进一步，将可降解生活垃圾与食盐、赖氨酸铜、蛋氨酸锌按比例混合完全，随后加入微生物降解菌，保持在温度为33~35°C，相对湿度为60%~70%的条件下通风培养12~16小时，在转入密闭塑料袋中于40~45°C的条件下继续厌氧发酵10~12天，获得发酵饲料。
[0045]所述微生物降解菌由植物乳杆菌剂和地衣芽孢杆菌剂，所述植物乳杆菌剂和地衣芽孢杆菌剂质量比为1:1。
[0046]所述植物乳杆菌剂的制备具体为:
[0047]第一步，将植物乳杆菌于32~36°C下活化24h后，接种于富集培养液中，在温度32~36°C，转速220~250rpm条件下培养24h ；
[0048]第二步，然后将富集后的菌种按体积分数2~5%接种于好氧发酵培养液中进行好氧发酵培养，培养条件为:温度32~36°C，转速170~200rpm，通气速率0.8~
1.0L / L.η?η,通入的空气过0.45 μ m滤膜进行过滤除菌,好氧发酵培养时间为20h~24h,最后自然风干或30°C烘干，获得固体菌剂，固体菌剂中的含菌量为l0.Ucfu/g，所述富集培养液成分为氯化钠5.0~6.0g，蛋白胨5.0~6.0g,牛肉粉2.5~3.0g,蒸馏水1000mL,pH7.0~7.2,所述发酵培养液成分为葡萄糖45g~50g、硫酸镁IOg~20g、磷酸二氢钾IOg~30g、磷酸氢二钾IOg~50g，蒸馏水1000mL,调节pH值为7.0~7.2。
[0049]所述地衣芽孢杆菌剂的制备具体为:
[0050]第一步，将地衣芽孢杆菌于20~30°C下活化24h后，接种于富集培养液中，在温度20~30°C，转速250~280rpm条件下培养24h ；
[0051]第二步，然后将富集后的菌种按体积分数2~5%接种于好氧发酵培养液中进行好氧发酵培养，培养条件为:温度20~30°C，转速170~200rpm，通气速率1.0~
1.2L / L.η?η,通入的空气过0.45 μ m滤膜进行过滤除菌,好氧发酵培养时间为20h~24h,最后自然风干或30°C烘干，获得固体菌剂，固体菌剂中的含菌量为l0.Ucfu/g，所述富集培养液成分为马铃薯180 .0g~220.0g，葡萄糖18.0~22.0g，蒸馏水1000ml，pH6.0-6.2,所述发酵培养液成分为玉米粉5.0g~5.5g,豆饼粉5.0g~5.5g,花生粉5.0g~5.5g,ΚΗ2Ρ042.5g ~3.0g, MgSO40.25g ~0.3g，CaCl20.25g ~0.3g，尿素 0.24g ~0.3g，红糖
5.0g ~5.3g, pH5.5 ~6.0,蒸懼水 1000ml。
[0052]以下采用实施例来详细说明本发明的实施方式，借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题，并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。
[0053]实施例1植物乳杆菌固体菌剂的制备
[0054]将植物乳杆菌(上海酶联生物耗材有限公司提供)于33°C下活化24h后，接种于富集培养液中，所述富集培养液成分为氯化钠5.0g，蛋白胨5.0g，牛肉粉2.5g，蒸馏水lOOOmL, pH7.0，在温度33°C，转速250rpm条件下培养24h，然后将富集后的菌种按体积分数3%接种于好氧发酵培养液中进行好氧发酵培养，所述发酵培养液成分为:葡萄糖50g、硫酸镁20g、磷酸二氢钾20g、磷酸氢二钾30g，蒸馏水1000mL,调节pH值为7.0,培养条件为:温度33°C，转速200rpm，通气速率1.0L / L.min，通入的空气过0.45 μ m滤膜进行过滤除菌，好氧发酵培养时间为24h，最后在30°C烘干，获得固体菌剂，固体菌剂中的含菌量为 IO10 ncfu/g0
[0055]实施例2地衣芽孢杆菌固体菌剂的制备
[0056]将地衣芽孢杆菌(北海群林生物公司提供)于25°C下活化24h后，接种于富集培养液中，在温度25°C，转速260rpm条件下培养24h，然后将富集后的菌种按体积分数5%接种于好氧发酵培养液中进行好氧发酵培养，培养条件为--温度25°C，转速ISOrpm，通气速率
1.2L / L.min,通入的空气过0.45 μ m滤膜进行过滤除菌,好氧发酵培养时间为24h,最后自然风干，获得固体菌剂，固体菌剂中的含菌量为lO^cfu/g，所述富集培养液成分为马铃薯200.0g，葡萄糖20.0g，蒸馏水1000ml，pH6.0，所述发酵培养液成分为玉米粉5.2g，豆饼粉 5.2g，花生粉 5.2g，ΚΗ2Ρ042.5g，MgSO40.25g，CaCl20.25g，尿素 0.28g，红糖 5.0g, ρΗ5.5，蒸懼水1000ml。
[0057]实施例3中药饲料添加剂的制备
[0058]将白术55g、石斛30g、刺五加35g、党参75g、白扁豆35g、白]E 25g、牛蒡子25g、夏枯草15g、虎杖25g、牡丹皮25g、地肤子15g、佛手15g、麦芽25g、莱菔子25g、丹参25g、益母草20g、黄精45g、白芍25g、山麦冬35g和枸杞子30g，混合，随后加入2.4kg的水，煎煮4小时，过滤，获得第一提取液，滤渣再次加入相对于其质量3倍的水，煎煮2小时，过滤，获得第二提取液，将提取液合并，减压浓缩除去水，获得干膏体，采用超微粉磨机粉碎，粉碎粒度200目，获得粉末状中药饲料添加剂。
[0059]实施例4饲料I的制备
[0060]将生活垃圾的分拣分类，收集可降解的生活垃圾，污泥通过人工或机械分拣，将可降解的生活垃圾12.5kg与0.5kg的食盐、赖氨酸铜0.1kg、蛋氨酸锌0.1kg混合完全，随后加入实施例1制备的植物乳杆菌固体菌剂0.1kg，实施例2制备的地衣芽孢杆菌固体菌剂
0.1kg，保持在温度为35°C，相对湿度为70%的条件下通风培养16小时，在转入密闭塑料袋中于45°C的条件下继续厌氧发酵12天，获得发酵饲料，在发酵后的饲料中加入实施例3制备的中药饲料添加剂1.5kg,0.1kg维生素E、0.1kg维生素A、0.1kg维生素C、0.4kg氯化钙，
0.4kg磷酸氢钙，搅拌混合均匀，获得产品饲料I。
[0061]比较例I饲料2的制备
[0062]将生活垃圾的分拣分类，收集可降解的生活垃圾，污泥通过人工或机械分拣，将可降解的生活垃圾12.5kg与0.5kg的食盐、赖氨酸铜0.1kg、蛋氨酸锌0.1kg混合完全，随后加入实施例1制备的植物乳杆菌固体菌剂0.1kg，实施例2制备的地衣芽孢杆菌固体菌剂
0.1kg，保持在温度为35°C，相对湿度为70%的条件下通风培养16小时，在转入密闭塑料袋中于45°C的条件下继续厌氧发酵12天，获得发酵饲料，在发酵后的饲料中加入0.1kg维生素E、0.1kg维生素A、0.1kg维生素C、0.4kg氯化钙，0.4kg磷酸氢钙，搅拌混合均匀，获得产品词料2。
[0063]饲料效果
[0064]选取临床检查健康的30?35日龄杜长大三元杂交仔猪150头，按照性别和体重随机分为2组，每组75头，仔猪24日断奶，断奶后转至保育舍，单栏饲养在半封闭式猪舍内，自由采食、饮水。
[0065]实验饲料
[0066]实验组采用实施例4制备的饲料I喂养，对照组采用比较例I制备的饲料2喂养，添加常规抗生素和化学药物。
[0067]主要试剂
[0068]血清免疫球蛋白试剂为德灵公司进口原装试剂，批号:(2010)第3402801号；肝素钠、RMP1-1640培养液、96孔平底细胞培养板、Hank’ s液、PHA、MTT、DMSO溶液；猪瘟活疫苗(诸稳康)，福州大北农生物技术有限公司生产，批号101324。
[0069]动物实验设计
[0070]试验安排在上海海康种畜有限公司牧场进行，时间从2010年8月?2011年10月(其中预试验I周)。试验动物为同一保育舍的杜长大三元断奶仔猪，初始体重相近，组间差异不显著。在同一保育舍内随机分成2组，对照组75头，饲喂基础日粮(加常规抗生素和化学药物)，试验组75头，饲喂实施例4制备的饲料I。疫苗注射时间:试验后第2天注射伪狂犬活疫苗，试验I周后猪瘟疫苗首免，5周后猪瘟疫苗二免，两组注射疫苗条件完全一致。
[0071]饲养管理
[0072]猪舍、饲养条件、卫生环境、饲料品质及其他饲养管理等均相同，自由采食和饮水。
[0073]血样采集 [0074]血样采集采取三次采血的方式，即试验前、试验一个阶段后、试验两个阶段后。清晨空腹，分别从两组活体采血，每组随机10头，静脉采血，每头猪无菌采集IOmL血液。分装在3个离心试管中，其中2管静置Ih后，3000r/min离心，取上层血清分装于印pendorf管中，保存备用，I管(加1%肝素钠抗凝)立即送实验室测定。
[0075]检测项目和方法
[0076]血清免疫球蛋白的测定
[0077]血清免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)的水平，均使用德灵全自动特定蛋白分析仪(BNP)，采用终点散射比浊法测定。
[0078]淋巴细胞转化率的测定
[0079]采用比色法(MTT法)检测淋巴细胞转化功能。MTT法是一种较新的检验淋巴细胞功能的方法。取抗凝血3!111^等量!^1^’8液稀释,加于3mL淋巴细胞分离液上层，2000r/min离心IOmin,吸取淋巴细胞层,移入无菌离心管,适量Hank’s液洗漆2次，2000r/min离心lOmin，然后将细胞悬浮于RMP1-1640完全培养液中(含100ml/L小牛血清)，6g/L台盼蓝拒染，活细胞计数(>95%)，调整细胞浓度为5 X IO6个/mL。稀释的细胞悬液在96孔细胞培养板上培养，每孔加50 μ L，对照组加50 μ LRMP1-1640完全培养液，每孔并加入浓度为20 μ g/mLConA,每组设5个重复，置5%C02、37°C培养，培养72h。培养结束前3h，加入10g/LMTT10 μ L，继续培养。培养结束后，室温下2000r/min离心lOmin，倾去上清液，加入ISOyLDMSO溶液，使紫色结晶完全溶解后，用酶标仪在570nm波长下检测各孔OD值。按下列公式计算淋巴细胞转化率:淋巴细胞转化率(%)=(试验组OD值-对照组OD值)/对照组OD 值 X 100%ο
[0080]数据处理
[0081]采用统计学软件SPASS17.0基础统计，数据以平均值土标准差(XD)表示，差异显著性检验采用单因素方差分析。
[0082]结果与分析
[0083]本发明饲料对断奶仔猪血清免疫球蛋白的影响，结果见表1。
[0084]表1实验组和对照组对断奶仔猪血清免疫球蛋白的影响(单位:g/L)
[0085]
[SI11个阶段 |2个阶段
IgG对照组3.673 + 0.469 3.781 + 0.553
【权利要求】
1.一种用于喂养猪的饲料，其特征在于:所述饲料的原料包括可生物降解的生活垃圾、微生物降解菌、中药饲料添加剂、维生素E、维生素A、维生素C、氯化钙，磷酸氢钙，食盐、赖氨酸铜、蛋氨酸锌。
2.如权利要求1所述的饲料，其特征在于:所述各种原料的重量份分别为可生物降解的生活垃圾120重量份~130重量份、微生物降解菌I重量份~3重量份、中药饲料添加剂10重量份~20重量份,0.5重量份~1.5重量份维生素E、0.5重量份~1.5重量份维生素A、0.5重量份~1.5重量份维生素C、氯化韩3重量份~5重量份,磷酸氢韩3重量份~5重量份，食盐4重量份~6重量份、赖氨酸铜0.5重量份~1.5重量份、蛋氨酸锌0.5重量份~1.5重量份。
3.如权利要求1或2所述的饲料，其特征在于:所述中药饲料添加剂的原料包括白术、石斛、刺五加、党参、白扁豆、白芷、牛蒡子、夏枯草、虎杖、牡丹皮、地肤子、佛手、麦芽、莱菔子、丹参、益母草、黄精、白芍、山麦冬和枸杞子。
4.如权利要求1至3所述的饲料，其特征在于:所述原料药混合物中各原料的重量份分别为白术50重量份~60重量份、石斛25重量份~35重量份、刺五加30重量份~40重量份、党参70重量份~80重量份、白扁? 30重量份~40重量份、白]*￡ 20重量份~30重量份、牛蒡子20重量份~30重量份、夏枯草10重量份~20重量份、虎杖20重量份~30重量份、牡丹皮20重量份~30重量份、地肤子10重量份~20重量份、佛手10重量份~20重量份、麦芽20重量份~30重量份、莱菔子20重量份~30重量份、丹参20重量份~30重量份、益母草15重量份~25重量份、黄精40重量份~50重量份、白芍20重量份~30重量份、山麦冬30重量份~40重量份和枸杞子25重量份~35重量份。
5.如权利要求1至4所述的饲料，其特征在于:所述中草药饲料添加剂具体制备为: 将所述中药饲料添加剂中各组分按比例混合，随后加入相对于混合物质量3~5倍的水，煎煮2~4小时，过滤，获得第一提取液，滤渣再次加入相对于其质量I~3倍的水，煎煮I~2小时，过滤，获得第二提取液，将提取液合并，减压浓缩除去水，获得干膏体，采用超微粉磨机粉碎，粉碎粒度200目~300目，获得粉末状中药饲料添加剂。
6.如权利要求1至5所述的饲料，其特征在于:所述微生物降解菌由植物乳杆菌剂和地衣芽孢杆菌剂，所述植物乳杆菌剂和地衣芽孢杆菌剂质量比为1:1。
7.如权利要求1至6所述的饲料，其特征在于:所述植物乳杆菌剂的制备具体为， 第一步，将植物乳杆菌于32~36°C下活化24h后，接种于富集培养液中，在温度32~36°C，转速220~250rpm条件下培养24h ； 第二步，然后将富集后的菌种按体积分数2~5%接种于好氧发酵培养液中进行好氧发酵培养，培养条件为:温度32~361:，转速170~200印111，通气速率0.8~1.(^ / L *min,通入的空气过0.45 μ m滤膜进行过滤除菌，好氧发酵培养时间为20h~24h，最后自然风干或30°C烘干，获得固体菌剂，固体菌剂中的含菌量为l0.Ucfu/g，所述富集培养液成分为氯化钠5.0~6.0g，蛋白胨5.0~6.0g,牛肉粉2.5~3.0g,蒸馏水1000mL, ρΗ7.0~7.2，所述发酵培养液成分为葡萄糖45g~50g、硫酸镁IOg~20g、磷酸二氢钾IOg~30g、磷酸氢二钾IOg~50g，蒸馏水1000mL,调节pH值为7.0~7.2。
8.如权利要求1至7所述的饲料，其特征在于:所述地衣芽孢杆菌剂的制备具体为， 第一步，将地衣芽孢杆菌于20~30°C下活化24h后，接种于富集培养液中，在温度.20~30°C，转速250~280rpm条件下培养24h ； 第二步，然后将富集后的菌种按体积分数2~5%接种于好氧发酵培养液中进行好氧发酵培养，培养条件为--温度20~30°C，转速170~200rpm，通气速率1.0~1.2L / L *min,通入的空气过0.45 μ m滤膜进行过滤除菌，好氧发酵培养时间为20h~24h，最后自然风干或30°C烘干，获得固体菌剂，固体菌剂中的含菌量为l0.Ucfu/g，所述富集培养液成分为马铃薯180.0g~220.0g,葡萄糖18.0~22.0g,蒸馏水1000ml，ρΗ6.0~6.2，所述发酵培养液成分为玉米粉5.0g~5.5g,豆饼粉5.0g~5.5g,花生粉5.0g~5.5g,KH2P042.5g~3.0g,MgSO40.25g ~0.3g, CaCl20.25g ~0.3g,尿素 0.24g ~0.3g,红糖 5.0g ~5.3g, ρΗ5.5 ~.6.0,蒸懼水 1000ml ο
9.权利要求1至8所述饲料的制备方法，其特征在于，包括: 第一步，生活垃圾的分拣分类，收集可降解的生活垃圾； 第二步，将可降解的生活垃圾与微生物降解菌、食盐、赖氨酸铜、蛋氨酸锌按比例混合混合，进行生物降解发酵，获得发酵饲料； 第三步，在发酵后的饲料中按比例添加中药饲料添加剂、维生素Ε、维生素Α、维生素C、氯化钙，磷酸氢钙，搅拌混合均匀，获得产品饲料。 所述第二步中发酵过程为分段式过程，先进行好氧发酵，再进行厌氧发酵，更进一步，将可降解生活垃圾与食盐、赖氨酸铜、蛋氨酸锌按比例混合完全，随后加入微生物降解菌，保持在温度为33~35°C，相对湿度为60%~70%的条件下通风培养12~16小时，在转入密闭塑料袋中于40~45°C的条件下继续厌氧发酵10~12天，获得发酵饲料。
【文档编号】A23K1/175GK103621798SQ201310413950
【公开日】2014年3月12日 申请日期:2013年9月12日 优先权日:2013年9月12日
【发明者】查文炜, 倪文龙, 曹卫, 葛友华, 刘必荣, 咸斌 申请人:盐城工学院