专利名称：食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，具体涉及到一种食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法。
背景技术：
我国食用菌生产仍存在“重产量、轻质量”的倾向，致使一些食用菌产品在市场上缺乏竞争力。同时，在菌种繁育方面的科研力量较为薄弱，使菌种继代繁殖太多导致菌种活力退化，菌种的优劣，直接影响到食用菌产品的产量和质量。注重优质、高产、抗病、抗虫等优良菌株的繁育，是保证食用菌提高产品产量、质量的必由之路，也是提高食用菌生产水平的重要环节。任何一个好的食用菌品种，如果连续栽培或长期的保藏及转代过程中都会存在生产性能变劣、种性衰退的现象。所以对食用菌菌种进行分离与筛选、脱毒提纯复壮，可有效防止品种的退化和变异，也是食用菌栽培过程中的重中之重。因此要定期引种或提纯复壮，才能保证菌种质量及种性稳定，从而为最终产量稳定打下基础。当前，各食用菌生产者为了保证种性稳定，大多采用定期组织分离、严格筛选，获得菌种，通过这样的工艺来进行组织分离、提纯，必须经过三次以上转管才能实现保证菌种质量及种性稳定。专利申请号为98126599.5的“一种食用菌试管菌种生产转接方法”，本发明操作方便，快速，省时，省力，随时可转接，平均每人I小时转接不少于100支试管，成活率99%以上，污染率0.5%以下，但该工艺不能有效的进行脱毒，菌种质量不稳定。专利申请号为200910259431.9的“利用原生质体再生技术进行食用菌菌种复壮和脱毒的方法”，本发明而达到使食用菌复壮和脱毒的目的，恢复食用菌的优良特性。但该工艺十分复杂，一般人掌握不了。
发明内容
本发明的目的在于提供一种食用菌菌种的试管生产新工艺，它克服了传统技术工艺生产的菌种质量不稳定、工艺十分复杂等缺点。所提供一种食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法工艺。本发明是通过以下技术方案来实现的:食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法，其工艺步骤如下:1、组织分离:选择优良健壮的食用菌子实体，在无菌环境下将子实体菌盖与菌柄交界处切0.5 I厘米长的肉块组织。2、试管培菌:将肉块组织放置于空白PDA斜面试管的离斜面培养基有2 5毫米侧上方的无基与有基临界点。3、菌丝培养: 将接好种的试管放置在温度20 25°C、相对湿度75 80%环境下培养菌丝。4、转管提纯:菌丝生长至接触斜面培养基后，在无菌环境下挑取生长迅猛、旺盛的菌丝转接至空白PDA斜面试管，进行菌种提纯。与现有的技术相比，本发明具有以下优点:(I)本发明工艺简单、效果明显。(2)本发明的创新点主要体现于菌丝先是在无培养基环境下萌发，当菌丝生长至接触培养基后，菌丝生长迅速、旺盛，将这种状态的菌丝通过提纯，能有效脱毒，保持菌株稳定的优良品性。(3)本发明培育的菌种成功率能达到99%。(4)本方明适用于大多食用菌菌株的组织分离，并能有效的提纯、脱毒。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明的方法进一步说明。食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法，其工艺步骤如下:1、组织分离:选择优良健壮的食用菌子实体，在无菌环境下将子实体菌盖与菌柄交界处切0.5 I厘米长的肉块组织。2、试管培菌:将肉块组织放置于空白PDA斜面试管的离斜面培养基有2 5毫米侧上方的无基与有基临界点。3、菌丝培养:将接好种的试管放置在温度20 25°C、相对湿度75 80%环境下培养菌丝。4、转管提纯:菌丝生长至接触斜面培养基后，在无菌环境下挑取生长迅猛、旺盛的菌丝转接至空白PDA斜面试管， 进行菌种提纯。
权利要求
1.一种食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法，其特征是工艺步骤如下: (1)组织分离:选择优良健壮的食用菌子实体，在无菌环境下将子实体菌盖与菌柄交界处切0.5 I厘米长的肉块组织。
(2)试管培菌:将肉块组织放置于空白PDA斜面试管的离斜面培养基有2 5毫米侧上方的无基与有基临界点。
(3)菌丝培养:将接好种的试管放置在温度20 25°C、相对湿度75 80%环境下培养菌丝。
(4)转管提纯:菌丝生长至接触斜面培养基后，在无菌环境下挑取生长迅猛、旺盛的菌丝转接至空白PDA斜面 试管，进行菌种提纯。
全文摘要
本发明涉及生物技术领域，具体的说是一种食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法。其步骤是将经分离的食用菌子实体肉块组织放置于空白试管离斜面培养基有2～5毫米侧上方的无基与有基临界点，菌丝先是在无培养基环境下萌发，当菌丝生长至接触培养基后，菌丝生长迅速、旺盛，将这种状态的菌丝通过提纯，能有效脱毒，保持菌株稳定的优良品性。本发明的菌种制作过程工艺简单，适用性强，适用于大多食用菌菌株的组织分离育种，成功率能达到99％。
文档编号A01G1/04GK103070007SQ20111032614
公开日2013年5月1日 申请日期2011年10月25日 优先权日2011年10月25日
发明者何寒 申请人:何寒