专利名称：一种马铃薯试管苗集群式切段繁殖方法
技术领域：
本发明涉及一种马铃薯的繁殖方法，特别是一种马铃薯试管苗的繁殖方法。
背景技术：
马铃薯是重要的粮食作物之一，我省马铃薯的种植面积在常年100万亩以
上，是第三大种植作物。在过去，马铃薯生产长期以来一直受"马铃薯退化" 的影响，新品种的优良种性不断丧失，导致马铃薯产量长期低下，品质也得不 到保证。随着马铃薯脱毒技术的推广应用，这个问题才根本上逐渐得以解决。 但是脱了毒的马铃薯在大田生产中很容易再次感染病毒，表现出"退化"现象， 三代以后即不能再作为种子使用。这就要求必须持续提供脱过毒的马铃薯试管 苗，为整个马铃薯生产源源不断地提供优质的马铃薯脱毒种薯。马铃薯脱毒苗 繁殖技术是马铃薯脱毒种薯生产技术基础，无论是在隔离网棚还是在隔离温室， 生产马铃薯脱毒原原种都需要提供大量的脱毒试管苗。传统的马铃薯试管苗生 产采用单株试管苗单节切段繁殖技术， 一般每次取一株试管苗，放培养皿内，
依节间切成小段，再放入培养瓶(皿)中，每个培养瓶内放约30个切段； 一般
每个培养瓶中，需要切6株试管苗、切30次才能完成一瓶。每切一株试管苗， 就必须对剪切工具进行一次灭菌处理。切成小段的试管苗在培养皿内的培养基 上，再进行扩大培养，从而完成马铃薯试管苗的繁殖。这种方法操作烦琐，效 率低，成本高；严重制约试管苗繁殖效率，影响脱毒马铃薯在马铃薯生产中的 大面积推广应用。发明的内容
本发明的目的是要提供一种生产效率高、操作次数少、成本低、种苗受污 染的几率也低的马铃薯试管种苗繁殖方法。
本发明的技术方案是a.基础苗培养马铃薯试管苗在20-22°C， 16小时 光照/8小时暗培养的条件下培养22-25天，每个试管苗长到5-6片叶子；
b.配制培养基配制简化MS培养基，即只含大量元素和微量元素成分的 MS培养基，加琼脂粉6克/升，蔗糖30克/升，调节pH值为5.8;分装到培养
瓶中，放入高压灭菌锅在12rC下灭菌20分钟；取出平置，冷却凝固，待用； C.集群切段在无菌工作台上， 一次性用消过毒的镊子取出培养瓶中的全
部基础苗，用消过毒的剪刀，将取出的基础苗基本按其节间位置同时切断，切
入准备好的培养瓶；每瓶基础苗切入4个新的培养瓶中；每个培养瓶放置的茎 段为基础苗数的1.3-1.5倍；
d. 茎段摆放切完一瓶基础苗后，用消过毒的镊子将切入新的培养瓶中的 茎段进行摆放，使每个茎段均匀分散平摆在培养基上，封口；
e. 培养将封口的培养瓶置于培养室进行培养；培养条件为20-22°C， 16 小时光照/8小时黑暗，培养22-25天；
f. 再次切段繁殖重复步骤b-e，直至所需要的量。
本发明具有如下的优点和效果1、由于是将全部试管苗一次全部拿出进行 切段，而不是一根一根地切段，所以效率大幅度提高。如果， 一次处理30根试 管苗，则效率可提高30倍。2、由于是将试管苗一次切入培养瓶中，茎段的摆 放也仅仅是个别调整而已。而不是将茎段一个一个地放入瓶中，也大大提高了 效率。3、由于一次成批处理多根试管苗，所以大大减少了对操作工具的灭菌次
数。如果一次处理30根试管苗，则切30根试管苗才对操作工具进行一次灭菌 处理，而现有技术，每处理1根试管苗，就要对操作工具灭菌一次。同时，相 比于现有技术还大大减少了试管苗染菌的几率。最后，由于效率的提高使得人 力资源得到节省，也就降低了成本。灭菌次数的减少，也降低了成本。
具体实施例方式
实施例1、马铃薯青薯9号脱毒试管苗繁殖
a. 基础苗培养马铃薯试管苗在20-22°C， 16小时光照/8小时暗培养的条 件下培养22-25天，每个试管苗长到5-6片叶子；每瓶约30根苗；
b. 配制培养基配制简化MS培养基，即只含大量元素和微量元素成分的 MS培养基，加琼脂粉6克/升、蔗糖30克/升，调节pH值为5.8;分装到培养 瓶中，放入高压灭菌锅在12rC下灭菌20分钟；取出平置，冷却凝固，待用；
C.集群切段在无菌工作台上， 一次性用消过毒的镊子取出培养瓶中的全
部基础苗，用消过毒的剪刀，将取出的基础苗基本按其节间位i同时切断，切
入准备好的培养瓶；每瓶基础苗切入4个新的培养瓶中；每个培养瓶放置的茎 段为基础苗数的1. 5倍；
d. 茎段摆放切完一瓶基础苗后，用消过毒的镊子将切入新的培养瓶中的 茎段进行摆放，使每个茎段均匀分散平摆在培养基上，封口；
e. 培养将封口的培养瓶置于培养室进行培养；培养条件为20-22°C， 16 小时光照/8小时黑暗，培养22-25天；
f. 再次切段繁殖重复步骤b-e，直至所需要的量。
结果显示，培养25天后每瓶培养基上的苗子平均为30根，生长正常，茎' 粗，株高、叶片数、根长等生长指标与同期用传统方法繁殖培养的苗子没有显
著差异。 -
实施例2、马铃薯青薯2号脱毒试管苗繁殖
a. 基础苗培养马铃薯试管苗在20-22°C， 16小时光照/8小时暗培养的条 件下培养22-25天，每个试管苗长到5-6片叶子；每瓶约30根苗；
b. 配制培养基酉己制简化MS培养基，即只含大量元素和微量元素成分的 MS培养基，加琼脂粉6克/升、蔗糖30克/升，调节pH值为5.8;分装到培养 瓶中，放入高压灭菌锅在12rC下灭菌20分钟；取出平置，冷却凝固，待用；
C.集群切段在无菌工作台上， 一次性用消过毒的镊子取出培养瓶中的全
部基础苗，用消过毒的剪刀，将取出的基础苗基本按其节间位置同时切断，切
入准备好的培养瓶；每瓶基础苗切入4个新的培养瓶中；每个培养瓶放置的茎 段为基础苗数的1. 3倍；
d. 茎段摆放切完一瓶基础苗后，用消过毒的镊子将切入新的培养瓶中的 茎段进行摆放，使每个茎段均匀分散平摆在培养基上，封口；
e. 培养将封口的培养瓶置于培养室进行培养；培养条件为20-22°C， 16 小时光照/8小时黑暗，培养22-25天；
f. 再次切段繁殖重复步骤b-e，直至所需要的量。
结果显示，培养25天后每瓶培养基上的苗子平均为30根，生长正常，茎粗， 株高、叶片数、根长等生长指标与同期用传统方法繁殖培养的苗子没有显著差 异。
实施例3、炸片型马铃薯大西洋品种脱毒试管苗繁殖
a.基础苗培养马铃薯试管苗在20-22。C， 16小时光照/8小时暗培养的条 件下培养22-25天，每个试管苗长到5-6片叶子；每瓶约30根苗；
b.配制培养基配制简化MS培养基，即只含大量元素和微量元素成分的
MS培养基，加琼脂粉6克/升、蔗糖30克/升，调节pH值为5.8;分装到培养
瓶中，放入高压灭菌锅在12rC下灭菌20分钟；取出平置，冷却凝固，待用；
C.集群切段在无菌工作台上， 一次性用消过毒的镊子取出培养瓶中的全 部基础苗，用消过毒的剪刀，将取出的基础苗基本按其节间位置同时切断，切 入准备好的培养瓶；每瓶基础苗切入4个新的培养瓶中；每个培养瓶放置的茎 段为基础苗数的1.5倍；
d. 茎段摆放切完一瓶基础苗后，用消过毒的镊子将切入新的培养瓶中的 茎段进行摆放，使每个茎段均匀分散平摆在培养基上，封口；
e. 培养将封口的培养瓶置于培养室进行培养；培养条件为20-22°C， 16 小时光照/8小时黑暗，培养22-25天；
f. 再次切段繁殖重复步骤b-e，直至所需要的量。
结果显示，集群式切段繁殖的马铃薯试管苗生长指标与传统方法繁殖的试 管苗的生长指标间没有显著差异，单人切断繁殖效率是传统方法的6倍。
权利要求
1.一种马铃薯试管苗集群式切段繁殖方法，其特征在于a.基础苗培养马铃薯试管苗在20-22℃，16小时光照/8小时暗培养的条件下培养22-25天，每个试管苗长到5-6片叶子；b.配制培养基配制简化MS培养基，即只含大量元素和微量元素成分的MS培养基，加琼脂粉6克/升，蔗糖30克/升，调节pH值为5.8；分装到培养瓶中，放入高压灭菌锅在121℃下灭菌20分钟；取出平置，冷却凝固，待用；c.集群切段在无菌工作台上，一次性用消过毒的镊子取出培养瓶中的全部基础苗，用消过毒的剪刀，将取出的基础苗基本按其节间位置同时切断，切入准备好的培养瓶；每瓶基础苗切入4个新的培养瓶中；每个培养瓶放置的茎段为基础苗数的1.3-1.5倍；d.茎段摆放切完一瓶基础苗后，用消过毒的镊子将切入新的培养瓶中的茎段进行摆放，使每个茎段均匀分散平摆在培养基上，封口；e.培养将封口的培养瓶置于培养室进行培养；培养条件为20-22℃，16小时光照/8小时黑暗，培养22-25天；f.再次切断繁殖重复步骤b-e；直至所需要的量。
全文摘要
一种马铃薯试管苗集群式切段繁殖方法，其特点是配制简化MS培养基，再加琼脂粉6克/升，蔗糖30克/升，调节pH值为5.8；分装到培养瓶中，放入高压灭菌锅在121℃下灭菌20分钟；在无菌工作台上，一次取出培养瓶中的全部基础苗，用消过毒的剪刀，将取出的基础苗基本按其节间位置同时切断，切入准备好的培养瓶；每瓶基础苗切入4个新的培养瓶中；每个培养瓶放置的茎段为基础苗数的1.3-1.5倍；将切入新的培养瓶中的茎段进行摆放；将封口的培养瓶置于培养室进行培养；培养条件为20-22℃，16小时光照/8小时黑暗，培养22-25天；重复上述步骤直至所需要的量。
文档编号A01H4/00GK101336612SQ200710018339
公开日2009年1月7日 申请日期2007年7月4日 优先权日2007年7月4日
发明者云 周, 杨永智, 舰 王 申请人:青海省农林科学院